Đang tải... (xem toàn văn)
ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN )ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÍNH SỐ SÁC XUẤT LỚN NHẤT (MPN)
Đ NH LƯ NG T NG COLIFORMS B NG PHƯƠNG PHÁP TÍNH Ị Ợ Ổ Ằ S SÁC XU T L N NH T (MPN)Ố Ấ Ớ Ấ GVHD:NGUY N TH M LỄ Ị Ỹ Ệ SVTH: H TH THU TH OỒ Ị Ả HOÀNG TH THÙY NHIỊ NGUY N TH M DUYÊNỄ Ị Ỹ NGUY N TH PHƯƠNG UYÊNỄ Ị NGUY N LƯƠNG ANH THO IỄ Ạ N IỘ DUNG I. Đ I TƯ NG PHÂN TÍCH: COLIFORMSỐ Ợ II. PHƯƠNG PHÁP Đ NH LƯ NG : MPNỊ Ợ III. QUY TRÌNH PHÂN TÍCH IV. VÍ D PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VSV Ụ TRONG NƯ CỚ I. COLIFORMS Coliforms là nh ng tr c khu n gram (-)ữ ự ẩ Không sinh bào tử Hi u khí ho c k khí tùy ýế ặ ị Có kh năng lên men lactose sinh acid và ả sinh hơi 37 0c trong 24- 48h ở Coliforms đư c xem là nhóm vsv ch thợ ỉ ị coliforms echerichia citrobacter klebsiella enterobacter Coliforms g m 4 nhóm :ồ Echerichia Coli Citrobacter Freundii Bacteria Klebsiella Pneumoniae Carbapenemase Enterobacter aerobacter Coliforms phân + IMViC Là coliforms ch u ị nhi t có kh năng ệ ả sinh indole khi ủ ở 44.5 0c /24h trong tryptone II. PHƯƠNG PHÁP MPN (MOST PROBABLE NUMBER Phương pháp MPN d a trên nguyên t c xác su t ự ắ ấ th ng kê s phân b vsv trong các đ pha loãng ố ự ố ộ khác nhau c a m u.ủ ẫ M i đ pha loãng đư c nuôi c y l p l i nhi u l n ỗ ộ ợ ấ ặ ạ ề ầ ( 3- 10 l n).ầ Các đ pha loãng đư c ch n l a sao cho trong các ộ ợ ọ ự l n l p l i có m t s l n dương tính và có m t s ầ ặ ạ ộ ố ầ ộ ố l n âm tính.ầ S l n dương tính đư c ghi nh n và so sánh v i ố ầ ợ ậ ớ b ng th ng kê => giá tr ư c đoán s lư ng vsv ả ố ị ớ ố ợ trong m u.ẫ Hai h th ng MPN:ệ ố H th ng 9 ng ệ ố ố H th ng 15 ngệ ố ố Đ c đi m:ặ ể Vi sinh v t m c tiêu ph i có nh ng bi u ậ ụ ả ữ ể hi n đ c trưng trên môi trư ng nuôi c y như :ệ ặ ờ ấ S t o hơi : Coliformsự ạ S đ i màu : S. auriusự ổ Cho phép đ nh lư ng đư c m t đ vsv th p ị ợ ợ ậ ộ ấ trong th tích m u l nể ẫ ớ H TH NG MPN /g (ml)Ệ Ố [...]... ống dương tính Các ống dương tính là các ống sinh hơi và canh trường bị đục • Tính toán số lượng có thể xảy ra nhất của vi khuẩn/ ml mẫu bằng cách sử dụng bảng MPN Kết quả trong BGLB Kết quả tăng trưởng điển hình quan sát cho canh EC Ghi lại số lượng tích cực (tăng trưởng và khí) như trong giai đoạn trước Ghi kết quả trên bảng dữ liệu Đối với các ống canh BGLB, tính toán xác nhận, số lượng có thể... trường thích hợp cho sự tăng trưởng của đối tượng VSV cần định lượng một thể tích chính xác ở dung dịch mẫu ở 3 nồng độ bậc 10 liên tiếp, mỗi mức 3 hoặc 5 ống nghiệm ; ủ ở nhiệt độ và thời gian thích hợp - Kết quả nhìn thấy chứng minh sự tăng trưởng của vi sinh vật cần kiểm định ( sinh hơi, đổi màu, đục, …) - Ghi nhận số lượng ống nghiệm dương tính ở từng độ pha loãng Tra bảng Mac Crady rồi suy ra mật... cao nhất Không thể có nhiều hơn một mẫu dương tính (> 1 coliform/100 ml) trong 40 mẫu được kiểm tra trong một tháng và nồng độ coliform phân phải bằng không TH Ủ T ỤC PHÂN TÍCH NƯ ỚC Giai đo ạn 1: Chuẩn bị: • 1 mẫu nước • 8 đĩa petri vô trùng • 2 chai thạch Agar tan chảy (PCA, 100 ml / chai) trong nước tắm 50 ° C • 15 ống Lactose Lauryl Tryptose Broth(LLTB, với ống Durham) • Pipett vô trùng Tổng số. .. kết quả : 43 coliform tổng / 100 ml mẫu IV.Phân tích coliforms trong mẫu nước gi ới thi ệu v ề vsv trong m ẫu nư ớc Nước, dung môi phổ biến, là điều cần thiết cho cuộc sống: nước sạch để tắm, uống và nấu ăn Thật không may, nhiều tác nhân gây bệnh lây truyền qua nguồn nước Một số các loài gây bệnh như bại liệt, thương hàn, tả, viêm gan, Bệnh vi khuẩn Shigella, Salmonella Coliforms có đầy đủ các... tích cực (tăng trưởng và khí) như trong giai đoạn trước Ghi kết quả trên bảng dữ liệu Đối với các ống canh BGLB, tính toán xác nhận, số lượng có thể xảy ra nhất của vi khuẩn / ml mẫu Đối với các ống canh EC, tính toán xác nhận, số lượng có thể xảy ra nhất của vi khuẩn phân / ml mẫu Ghi lại các giá trị trên bảng dữ liệu Từ một ống canh BGLB pha loãng cho thấy sự tăng trưởng và sinh khí, các đường sọc... MPN/100 ml hay MPN/1g m ẫu Độ chính xác của trị số MPN phụ thuộc vào số ống nghiệm lặp lại trong mỗi độ pha loãng MÔI TRƯ ỜNG HÓA CH ẤT CỒN 90 ĐỘ VÀ 70 ĐỘ HCL 10% NAOH 10% QUY TRÌNH TH ỰC HI ỆN - Bư ớc 1 : Chuẩn bị mẫu Cân 10g mẫu cho vào túi dập mẫu ( nếu là mẫu rắn) hoặc 10ml mẫu ( mẫu lỏng ) cho vào bình tam giác chứa 90ml dd SPW đã vô trùng , và đồng nhất mẫu trong 1 phút Bư ớc 2 : Chuyển 1ml dung... các ống LSB sinh hơi và canh trường đục + Kết luận các ống LSB dương tính (+) Bư ớc 4 : Chuyển 1ml từ các ống nghiệm LSB ( + ) ở mỗi nồng độ vào các ống nghiệm có chứa 10ml canh BGLB rồi cũng ủ 37 O C , 48 giờ 10 ML BGLB Bư ớc 5 : + Ghi nhận số ống sinh hơi và canh trường đục ở mỗi độ pha loãng + Kết luận các ống BGLB ( + ) Bư ớc 6 : Tính kết quả - Từ kết quả thí nghiệm ta có: • Nồng độ 10-1: có 3 ống . PHÂN TÍCH: COLIFORMS Ợ II. PHƯƠNG PHÁP Đ NH LƯ NG : MPN Ợ III. QUY TRÌNH PHÂN TÍCH IV. VÍ D PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VSV Ụ TRONG NƯ CỚ I. COLIFORMS Coliforms là nh ng tr c khu n gram (-) ữ ự ẩ Không. lactose sinh acid và ả sinh hơi 37 0c trong 2 4- 48h ở Coliforms đư c xem là nhóm vsv ch thợ ỉ ị coliforms echerichia citrobacter klebsiella enterobacter Coliforms g m 4 nhóm :ồ Echerichia Coli Citrobacter. aerobacter Coliforms phân + IMViC Là coliforms ch u ị nhi t có kh năng ệ ả sinh indole khi ủ ở 44.5 0c /24 h trong tryptone II. PHƯƠNG PHÁP MPN (MOST PROBABLE NUMBER Phương pháp MPN d a trên