Đang tải... (xem toàn văn)
Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm
Trường Đại Học Công Nghiệp Thực Phẩm TPHCM Khoa Công Nghệ Thực Phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm GVHD: Nguyễn Thị Mỹ Lệ Nhóm: 8 1. Nguyễn Thị Cẩm Hằng 2. Bùi Thị Diệu Hiền 3. Tống Thị Thùy Vinh 4. La Thị Trung Minh 5. Mai Thị Thúy 6. Nguyễn Vũ Khánh Trang 7. Nguyễn Thị Ngọc Anh Danh sách nhóm I. Giới thiệu về clostridium perfrigens II.Quy trình phân tích III. Ví dụ Mục Lục I. Giới thiệu về clostridium perfrigens Đặc điểm sinh nha bào vi khuẩn Gram dương họ Bacillacae sinh bào tử, phần lớn di động tạo các khuẩn lạc màu đen trong môi trường phân lập quy định hình que phân giải Sodium sulfil hoặc phân giải protein tạo H2S. kị khí không bắt buộc Hình thái vi khu n Clostridium perfrigens.ẩ Hình thái vi khuẩn Clostridium perfrigens. Nơi sống Phân động vật n c c ng ướ ố rãnh Phân người Trong th c ph m ự ẩ nh t là ấ th c ph m ự ẩ đ h p).ồ ộ bùn đ t,ấ 3. Đặc điểm nuôi cấy: Trên môi trường Fluid Thioglycolate: sau 24 – 28 giờ nuôi cấy vi khuẩn phát triển tốt làm đục môi trường. Trên môi trường thạch máu: sau 24 – 28 giờ nuôi cấy ở 37, vi khuẩn phát triển tạo khuẩn lạc tròn ướt có hai vòng dung huyết xung quanh Trên môi trường SPS, TSC agar vi khuẩn phát triển cho khuẩn lạc tròn màu đen, do vi khuẩn sinh H2S tác dụng với Fe (trong môi trường) tạo thành FeS có màu đen. Trên môi trường nước thịt gan yếm khí vi khuẩn mọc rất tốt, nhanh chóng làm đục môi trường. II.Quy trình phân tích: [...]... đệm 10-1 Tiếp tục pha loãng mẫu đến 10-2 10-3 10-4… Lấy 1ml mẫu vào trong ống nghiệm vô trùng, đỗ 1015 ml môi trường ISA ở 450C lắc đều Đỗ lớp ISA thứ hai cao 1-2 cm sau khi phần dưới đông đăc, ủ 370C , 24-48 giờ Đếm tất cả các khuẩn lạc màu đen xuất hiện trong ống Tính kết quả số clostridium trong 1ml/1g mẫu phân tích 1 Các bước thực hiện Bước 1: Chuẩn bị dịch đồng nhất hoặc pha loãng mẫu để ở các... ụ : Nghiên cứu và phát hiện vi khuẩn Clostridium perfrigens trên thịt gà tươi tại một số chợ ở TP.nha Trang Áp dụng quy trình phân lập vi khuẩn C perfringens theo quy trình phân lập của Bộ môn nghiên cứu Vi trùng Phân viện Thú y miền Trung: Sơ đồ phân lập: 1 Các bước thực hiện a Chuẩn bị mẫu: Cân chính xác 25 gam mẫu thịt gà, cắt nhỏ hoặc nghiền nát trong điều kiện vô trùng cho tới khi được... lạc đã phân lập vào môi trường Nuôi dưỡng trong điều kiện yếm khí 37oC ± 1oC, 18-24 giờ Kiểm tra ống môi trường để xem dạng sinh trưởng dọc theo đường cấy sâu. Sự sinh trưởng khuyếch tán vào môi trường từ vết cấy thể hiện rõ tính di động của vi sinh vật nuôi cấy 3.2 Thử nghiệm sự có mặt của nitric: thêm 0,2-0,5ml thuốc thử phát hiện nitrit vào mỗi ống môi trường nitrat di động (tiến hành trong. .. xác nhận phản ứng khử nitrat thành nitrit Nếu trong 15 phút mà màu đỏ không hình thành thì thêm thì thêm một lượng nhỏ bột kẽm Để yên 10 phút, nếu màu đỏ được hình thành sau khi thêm bột kẽm thì không có phản ứng nitrat thành nitrit 3.3 Xác định sự hóa lỏng gelatin: Cấy các khuẩn lạc đã phân lập vào ống nghiệm chứa môi trường gelatin-lactose Nuôi dưỡng trong điều kiện yếm khí ủ 37oC ± 1oC, 18-24... nồng độ 02 đĩa Bước 3: rót 1520ml môi trường TSC vào đĩa petri và trộn đều Bước 4: Khi môi trường đã đong chặt, rót thêm một lớp 10ml môi trường TSC phủ lên trên Bước 5: để đông và xếp các hộp Petri nắp ở phía trên vào bình kị khí Bước 6: đếm và ghi lại số lượng khuẩn lạc điển hình ở các đĩa Khuẩn lạc Clostridium perfrigens co màu đen 2. Xác nh ậ n: Chon tổng số 10 khuẩn lạc điển hình từ... nhỏ hoặc nghiền nát trong điều kiện vô trùng cho tới khi được thể đồng nhất Sau đó bổ sung 225 ml nước muối sinh lý lắc đều từ 2 - 3 phút thu được dung dịch mẫu thử có nồng độ 10-1 Hút chính xác 1ml dung dịch mẫu thử 101 cho sang ống nghiệm chứa sẵn 9ml nước muối sinh lý Lắc đều trong 2-3 phút thu được dung dịch nồng độ 10-2 Làm tương tự ta thu được các dung dịch mẫu thử nồng độ 10-3, 10-4,… b.Cấy... đó dùng pipet dàn đều mẫu trên bề mặt thạch, mỗi nồng độ cấy trên 2 đĩa tương ứng Đợi bề mặt thạch khô, đổ tiếp 15ml môi trường TSC rồi láng đều để môi trường phủ kín bề mặt đĩa Khi môi trường đông lại, lật ngược đĩa, cho đĩa vào túi yếm khí, đặt vào tủ ấm 370, 10% Sau 18 – 24 giờ nuôi cấy, tiến hành đọc kết quả sơ bộ Đếm toàn bộ những khuẩn lạc có các đặc tính tròn, lồi, bờ đều nhẵn, màu đen... vật kính dầu cho thấy, tất cả 17 chủng kiểm tra đều có dạng hình que ngắn, không di động Vi khuẩn C. perfringens khi soi tươi e thử nghiệm đặc tính của vi khuẩn trên một số môi trường Trên môi trường Fluid Thyoglycolate: vi khuẩn mọc rất tốt 37, 10% sau 24 giờ nuôi cấy vi khuẩn làm đục đều môi trường Trên môi trường TSC agar: sau 24 giờ nuôi cấy trong túi yếm khí, ở 37, 10% vi khuẩn phát triển... nhẵn, màu đen Số lượng vi khuẩn có trong 1 gam thịt gà được tính bằng trung bình cộng giữa các đĩa nuôi cấy cùng nồng độ pha loãng nhân với hệ số pha loãng tương ứng c. Kết quả kiểm tra hình thái vi khuẩn Các chủng vi khuẩn được làm tiêu bản nhuộm Gram để kiểm tra hình thái và tính chất bắt màu trên kính hiển vi Kết quả cho thấy tất cả các chủng vi khuẩn C perfringens đều là dạng trực khuẩn bắt màu . mẫu + 90ml dd đệm 1 0-1 Tiếp tục pha loãng mẫu đến 1 0-2 1 0-3 1 0-4 … Lấy 1ml mẫu vào trong ống nghiệm vô trùng, đỗ 1 0- 15 ml môi trường ISA ở 450C lắc đều Đỗ lớp ISA thứ hai cao 1-2 cm sau khi phần. loãng 1 0-1 , 1 0-2 , 1 0-3 … Bước 2: Dùng pipet lấy ở mỗi nồng độ pha loãng 1ml dung dịch huyền phù ban đầu hoặc 1ml mẫu thử cho vào giữa đĩa pipet, mỗi nồng độ 02 đĩa. B c 3: rót 1 5-2 0ml mô. các khuẩn lạc đã phân lập vào ống nghiệm chứa môi trường gelatin-lactose. Nuôi dưỡng trong điều kiện yếm khí ủ 37oC ± 1oC, 1 8-2 4 giờ. Kiểm tra ống môi trường xem có sự sinh khí và có chuyển