Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên - Tách bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng điều chế: chất hấp phụ thường dùng trong SKLM là polyamid, silicagel, cellulose. Một số hệ dung môi triển khai là : Benzen-ethylacetat (3 :1) CHCl 3 -MeOH (9 :1) Toluen-Aceton (19 :1) CHCl 3 -CH 3 COOH (9 :1) Benzen-ethylacetat-acid acetic (5 :4 :1) Ethyl acetat-buthanol-acid acetic-H 2 O (5:3:1:1) - Tách bằng nhựa trao đổi ion: Nhựa trao đổi ion thường dùng là Amberlit IRC-50 (H + ), Amberlit 45 và Amberlit IR-4B hoặc Duolit cation selector CS-100, DowexI-XI. Các hợp chất flavonoid sẽ được hấp phụ bởi nhựa, ngoại trừ aglycon của Chalcon, muối khoáng, đường khử, acid hữu cơ, được loại đi do sự rửa nước. Hợp chất glycoside sẽ được rửa giải sau đó với dung dịch cồn isopropyl 20% và cuối cùng aglycon với dung dịch cồn EtOH 95%. - Tách bằng phương pháp kết tinh lại: một số quy trình chiết xuất hợp chất flavonoid như sau: 141 Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết flavonoid từ Hepa passifloreae 142 100g bột lá khô Dịch MeOH Sirô Dịch nước Đun với nước nóng, mỗi lần 30ml đến dung dịch không màu Để lạnh tiếp 24h Lọc, cô dịch chiết Để ở 5 o C/3 ngày Lọc Cô giảm áp Chiết bằng Soxhlet với metanol Dịch lọc Flavonoid tinh khiết Tinh chế qua polyamid Cắn chứa flavonoid thô Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết flavonoid từ Etoplasten avenasativa 143 Lá tươi Dịch lọc Sirô Dịch MeOH Hoà MeOH Lọc Để ở 18 o C/12h Lọc Cô giảm áp/45 o + nước, xay ở máy Ultralurax Thêm nước để ở 4 o C/12h, lọc Dịch lọc 1 Tủa tạp Cắn Dịch lọc 2 Tủa tạp Dịch đậm đặc Flavonoid Cô giảm áp + nước, để ở 4 o C/12h Cô giảm áp Cột polyamid Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết flavonoid từ Silybum marianum L. 144 Bột quả khô DL đã loại mỡ Dịch chiết Dịch MeOH Hoà trong MeOH Để ở nhiệt độ phòng 24h, lọc Chiết bằng AcOEt Loại mỡ bằng ete dầu Dịch lọc 1 Tủa silymarin Dịch lọc 2 Flavonoid khác Cô giảm áp Cô giảm áp còn 1/3V Để ở t o phòng 24h, lọc Cắn Tủa silymarin Cột Sephadex Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết citroflavonoid từ vỏ Cam, Quýt 145 Bột dược liệu Dịch chiết Cồn 70 O Hồi lưu 70-80 O C Dịch đậm đặc Tủa thô Dịch lọc Thu hồi dung môi Acid hoá (pH=4-5) Để kết tinh Lọc Citroflavonoid Bột dược liệu Dịch ngâm Sữa vôi pH=10 Ngâm lạnh Tủa hoạt chất thô Hoà cồn 70 O Than hoạt Lọc nóng Dịch lọc Cồn Than hoạt, hồi lưu 1h30 Lọc nóng Để kết tinh Lọc Điều chỉnh pH=5-6 Để kết tinh Lọc Bột vỏ thân Dịch EtOH Ngấm kiệt trong EtOH 90 O Tủa (vàng nâu) Bột flavonoid thô (màu vàng) Cô thu hồi đế dạng đậm đặc Để qua đêm Dịch lọc Kết tinh trong EtOH-H 2 O Hoà trong cồn nóng Than hoạt 5% . tinh lại: một số quy trình chiết xuất hợp chất flavonoid như sau: 141 Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết flavonoid từ Hepa passifloreae 142 100g bột lá khô Dịch MeOH Sirô Dịch. tạp Dịch đậm đặc Flavonoid Cô giảm áp + nước, để ở 4 o C/12h Cô giảm áp Cột polyamid Giáo trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết flavonoid từ Silybum marianum L. 144 Bột quả khô DL đã. trình Hóa học các Hợp chất Tự nhiên Sơ đồ chiết citroflavonoid từ vỏ Cam, Quýt 145 Bột dược liệu Dịch chiết Cồn 70 O Hồi lưu 70-80 O C Dịch đậm đặc Tủa thô Dịch lọc Thu hồi dung môi Acid hoá (pH =4- 5) Để