Đang tải... (xem toàn văn)
Trong tất cả các lớp vi sinh vật, côn trùng có số lượng loài nhiều nhất. Côn trùng ảnh hưởng xấu đến con người theo nhiều cách khác nhau : phá hoại mùa màng và là vector truyền bệnh cho người và động vật. Vào những năm 1940, nhiều loại thuốc trừ sâu hóa học được phát triển nhằm kiểm soát sự tăng sinh của quần thể côn trùng có hại. Nhưng sau đó, các nhà khoa học đã nhận thấy những tác động tiêu cực của thuốc trừ sâu hóa học như : ảnh hưởng lâu dài đến động vật, hệ sinh thái và con người. Thuốc trừ sâu hóa học như DDT bền vững trong môi trường hơn 20 năm và tích tụ với hàm lượng ngày càng tăng qua chuỗi thức ăn gây hậu quả lâu dài và nặng nề cho con người và động thực vật. Thêm vào đó, quần thể sâu hại ngày càng kháng nhiều thuốc trừ sâu hóa học
ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC ĐỒ ÁN CHUYÊN NGÀNH KHOA CNSH NGÔ CHUYỂN GEN KHÁNG SÂU TỪ BACILLUS THURINGIENSIS GVHD : CÔ LÊ THỊ THỦY TIÊN SVTH : VŨ NHƢ HƢỜNG MSSV : 60701044 Tp. HCM, tháng 6 năm 2011. i LỜI CẢM ƠN Trong quá trình làm đồ án, em đã gặp rất nhiều khó khăn và bỡ ngỡ. Nếu không có sự giúp đỡ và động viên của thầy cô bạn bè thì em khó có thể hoàn thành tốt đồ án này. Đặc biệt em xin cảm ơn cô Lê Thị Thủy Tiên, người trực tiếp hướng dẫn em thực hiện đồ án này. Qua khoảng thời gian được cô hướng dẫn, em đã học hỏi được rất nhiều từ cô. Cô dạy cho em tính cẩn thận và sự khoan dung. Cám ơn cô rất nhiều và mong em còn được tiếp tục làm luận văn dưới sự hướng dẫn của cô. Em cũng xin cảm ơn các thầy cô của trường Đại học Bách Khoa Tp. Hồ Chí Minh đã cho em một nền tảng kiến thức vững chắc, giúp em có thể bước tiếp trên con đường học vấn đầy cam go và thử thách này. Và sau cùng, con xin cảm ơn cha mẹ, những người đã sinh thành và nuôi dưỡng con nên người. Suốt đời này con luôn nhớ ơn cha mẹ. TpHCM, tháng 6 năm 2011. ii MỤC LỤC Chƣơng 1 :TỔNG QUAN VỀ BACILLUS THURINGIENSIS 2 I. Giới thiệu chung về Bacillus thuringiensis : 2 1.Tóm tắt về lịch sử nghiên cứu và ứng dụng của Bacillus thuringiensis. 2 2. Sự phân bố của B.thuringiensis. 2 3. Đặc điểm sinh thái của B.thuringiensis. 3 4. Đặc điểm sinh hoá của B.thuringiensis. 3 5. Phân loại B.thuringiensis. 4 II. Sinh trưởng và phát triển của Bacillus thuringiensis. 8 III. Các loại độc tố của Bacillus thuringiensis. 11 1.Bản chất hóa học của tinh thể : 11 2. Phân loại tinh thể độc: 11 3.Cấu trúc của tinh thể protein. 12 4.Cơ chế tác động của tinh thể độc. 13 IV. Hoạt lực diệt sâu của Bacillus thuringiensis. 14 V. Phân lập chủng Bacillus thuringiensis kurstaki. 15 1. Thu thập mẫu để phân lập các chủng B. thuringiensis. 15 2. Phân lập các chủng B. thuringiensis. 15 3. Thử sinh học hoạt tính diệt sâu. 15 4. Xác định tính chất 10 chủng B. thuringiensis kurstaki phân lập. 16 5. Phát hiện gen cry1Ab, cry1C bằng kỹ thuật PCR. 16 Chƣơng 2 : CÔNG NGHỆ CHUYỂN GEN VÀO THỰC VẬT 17 I. Khái niệm về thực vật chuyển gen 17 II. Tóm tắt lịch sử phát triển của công nghệ chuyển gen thực vật. 17 III. Một số nguyên tắc cơ bản của việc chuyển gen 18 1. Một số nguyên tắc sinh học 18 2. Phản ứng của tế bào với quá trình chuyển gen 19 3. Các bước cơ bản của chuyển gen 19 IV. Các hướng nghiên cứu và một số thành tựu trong lĩnh vực tạo thực vật chuyển gen 21 1. Cây trồng chuyển gen kháng các nấm gây bệnh 21 2. Cây trồng chuyển gen kháng các vi khuẩn gây bệnh 22 3. Cây trồng chuyển gen kháng virus gây bệnh 22 4. Cây trồng chuyển gen kháng côn trùng phá hoại 22 5. Cây trồng chuyển gen cải tiến các protein hạt 23 iii 6. Cây trồng chuyển gen sản xuất những loại protein mới 23 7. Cây trồng chuyển gen mang tính bất dục đực 24 8. Thực vật biến đổi gen để sản xuất các acid béo thiết yếu 24 9. Phát triển hệ thống marker chọn lọc 24 10. Làm sạch đất ô nhiễm 25 11. Làm thức ăn chăn nuôi 26 Chƣơng 3 : VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHA ́ P SỬ DỤNG TRONG CÔNG TÁC CHUYỂN GEN. 27 I. Vector sử dụng trong công nghệ chuyển gen ở thực vật. 27 1. Vector là gì: 27 2. Các đặc tính của vector: 27 3. Các bước trong tạo dòng phân tử: 27 II. Các vector sử dụng để chuyển gen vào thực vật. 28 1. Các vector biến nạp vào tế bào thực vật sử dụng Agrobacterium tumefaciens. 28 2. Ti – plasmid. 30 2.1. Cấu tạo Ti-plasmid. 30 2.2. Cơ chế chuyển gen của Ti-plasmid. 31 3. Vector Ti-plasmid cải tiến. 34 3.1. Hệ thống vector đồng liên hợp 34 3.2.Hệ thống vector kép 35 III. Các phương pháp chuyển gen thường sử dụng ở thực vật. 35 1. Chuyển gen trực tiếp bằng súng bắn gen. 35 2. Phương pháp chuyển gen gián tiếp nhờ Agrobacterium. 38 3. Kỹ thuật biến nạp qua protoplast. 40 4. Chuyển gen trực tiếp bằng phương pháp điện di. 41 5. Kỹ thuật chuyển gen qua ống phấn (polen tuber). 42 IV. Các phương pháp xác định sự hiện diện và biểu hiện của gen ngoại lai. 43 1. Southern blot 43 2. Northern blot 44 3. Western blot 45 4. ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) 46 5. Phương pháp PCR 47 5.1. Thành phần : 47 5.2. Mồi: 48 5.3. Qui trình : 48 iv 6. Hệ thống gen chỉ thị và chọn lọc : 50 V. Phương pháp tái sinh cây . 52 Chƣơng 4 : NGÔ CHUYỂN GEN KHÁNG SÂU ĐỤC THÂN TỪ B. THURINGIENSIS KURSTAKI. 55 I. Giới thiệu về ngô. 55 1. Đặc điểm chung. 55 2. Phân loại. 55 II. Giới thiệu về ngô chuyển gen. 56 1. Ngô chuyển gen là gì? 56 2. Tại sao phải chuyển gen kháng sâu vào ngô? 56 3. Các bước tạo giống ngô chuyển gen trong phòng thí nghiệm. 57 3.1. Xác định, phân lập và xử lý gen cần chuyển. 57 3.2. Thiết kế plasmid mang gen Bt 60 3.3. Gắn gen cần chuyển vào vector tạo DNA tái tổ hợp. 61 3.4. Nhân dòng DNA tái tổ hợp. 62 3.5. Biến nạp vào tế bào thực vật. 62 3.6. Chọn lọc và tái sinh cây chuyển gen. 63 3.7. Phân tích xác nhận cây chuyển gen và đánh giá mức độ biểu hiện của gen. 68 3.8. Mô hình trồng trọt, khảo nghiệm và đảm bảo tính an toàn sinh học. 70 4. Thực trạng sử dụng ngô chuyển gen kháng sâu trên thế giới và trong nước. 71 5. Tính hữu hiệu của cây trồng chuyển gen Bt 72 KẾT LUẬN ……………………………………………………………………….74 TÀI LIỆU THAM KHẢO……………………………………………………… 75 v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1. Phân loại Bt theo gen mã hóa protein tinh thể độc 6 Bảng 1.2. Phân loại Bt theo độc tố diệt sâu 6 Bảng 2.1. Tóm tắt những phát triển quan trọng trong công nghệ chuyển gen thực vật. 17 Bảng 2.2. Một số loại cây trồng chuyển gen quan trọng hiện nay 26 Bảng 4.1. Sự biểu hiện một số gen độc tố diệt sâu B. thuringiensis ở cây chuyển gen. 60 Bảng 4.2. Ảnh hưởng của nồng độ AgNO 3 đến khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây của ngô dòng HR8 64 Bảng 4.3. Ảnh hưởng của thành phần môi trường và AgNO 3 lên khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây. 66 Bảng 4.4. Ảnh hưởng của tuổi phôi ( kích thước phôi) lên sự tạo mô sẹo và tái sinh cây dòng HR8. 67 Bảng 4.5. Trình tự của mồi sử dụng trong phản ứng PCR 69 Bảng 4.6. Các quốc gia đã đưa bông và/hoặc ngô Bt vào canh tác đại trà, từ 1996 đến 2004. 71 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1. Một số chế phẩm trừ sâu có mặt trên thị trường từ Trung Quốc, Mỹ, Việt Nam. 2 Hình 1.2. Hình thái của B.thuringiensis 3 Hình 1.3.Hình dạng và kích thước Bt. 3 Hình 1.4. Chu trình sống của B. thuringiensis . 8 Hình 1.5 : Các giai đoạn của quá trình tạo bào tử. 9 Hình 1.6. Các giai đoạn của quá trình tạo bào tử và tinh thể của Bacillus thuringiensis. 10 Hình 1.7. Động học quá trình phát triển, tạo bào tử và tinh thể độc. 11 Hình 1.8: Cấu trúc không gian của tinh thể Cry3. 12 Hình 1.9. Minh họa biểu hiện của sâu bệnh dưới tác dụng của tinh thể độc Bacillus thuringiensis. 13 Hình 1.10. Cơ chế thẩm thấu ion K + trên màng biểu mô ruột. 14 Hình 3.1. Bệnh khối u hình chóp ở cây mâm xôi do A.tumefaciens gây ra ………….28 Hình 3.2. Khối u hình chóp ở cành táo 28 Hình 3.3. Vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. 28 Hình 3.4. Phản ứng tạo nopalin và octopine. 29 Hình 3.5. Sơ đồ cấu trúc tế bào vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens 30 Hình 3.6. Cấu tạo của Ti-plasmid. 31 Hình 3.7. Quá trình tạo phức hợp T-DNA- protein. 32 Hình 3.8. Minh họa cơ chế hoạt động của Ti-plasmid. 33 Hình 3.10. Minh họa phương pháp dùng súng bắn gen. 36 Hình 3.11. Sơ đồ chuyển gen bằng súng bằng gen. 37 Hình 3.12. Sơ đồ chuyển gen bằng Agrobacterium tumefaciens. 39 Hình 3.13. Quy trình chuyển gen vào thực vật bằng kỹ thuật đĩa lá nhờ vi khuẩn A.tumefaciens . 40 Hình 3.14. Cách tiến hành phương pháp Southern blot. 43 Hình 3.15. Phóng xạ tự ghi kết quả lai Southern Blot. 44 Hình 3.16. Cách tiến hành phương pháp Northern Blot. 45 Hình 3.17. Lai và phát hiện. 46 Hình 3.18. Phương pháp PCR 48 Hình 3.19. Xác nhận thay đổi gen ở ngô biến đổi gen. 49 Hình 3.20. Công thức cấu tạo của Kanamycin 50 Hình 3.21. Xác nhận sự biểu hiện gen chỉ thị. 52 Hình 3.22. Bước tái sinh cây hoàn chỉnh 53 vii Hình 4.1. Vector nhân dòng đồng cài nhập mang gen độc tố diệt sâu B. thuringiensis. 61 Hình 4.2. Đồ thị biểu diễn sự ảnh hưởng của nồng độ AgNO 3 đến khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây của ngô dòng HR8. 65 Hình 4.3. Hình dạng của phôi và mô sẹo của ngô trong quá trình nuôi cấy. 68 Hình 4.4 : Xác nhận thay đổi gen ở ngô biến đổi gen. 69 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis. GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên. 1 MỞ ĐẦU Trong tất cả các lớp vi sinh vật, côn trùng có số lượng loài nhiều nhất. Côn trùng ảnh hưởng xấu đến con người theo nhiều cách khác nhau : phá hoại mùa màng và là vector truyền bệnh cho người và động vật. Vào những năm 1940, nhiều loại thuốc trừ sâu hóa học được phát triển nhằm kiểm soát sự tăng sinh của quần thể côn trùng có hại. Nhưng sau đó, các nhà khoa học đã nhận thấy những tác động tiêu cực của thuốc trừ sâu hóa học như : ảnh hưởng lâu dài đến động vật, hệ sinh thái và con người. Thuốc trừ sâu hóa học như DDT bền vững trong môi trường hơn 20 năm và tích tụ với hàm lượng ngày càng tăng qua chuỗi thức ăn gây hậu quả lâu dài và nặng nề cho con người và động thực vật. Thêm vào đó, quần thể sâu hại ngày càng kháng nhiều thuốc trừ sâu hóa học. Thuốc trừ sâu hóa học thiếu tính đặc hiệu và tiêu diệt cả thiên địch của các loài sâu hại dẫn đến kết quả là xử lý sâu bệnh càng làm số lượng côn trùng tăng lên. Sau khi xem xét mọi ảnh hưởng tiêu cực của thuốc trừ sâu hóa học, thuốc trừ sâu vi sinh có hoạt tính trừ sâu của vi khuẩn Bacillus thuringiensis được chọn là phương án thay thế vì nó không tồn tại bền vững trong môi trường và an toàn đối với vật nuôi và con người. Nhưng nhược điểm của thuốc trừ sâu vi sinh là công hiệu thấp, giá thành cao làm hạn chế việc sử dụng. Vả lại, một số sâu gây hại lại ăn các mô ở trong cây do đó tránh được ảnh hưởng của chế phẩm B. thuringiensis phun bên ngoài cây. Để khắc phục vấn đề này, các gen độc tố Bacillus thuringiensis có thể được biểu hiện trong cây bằng phương pháp chuyển gen độc tố từ B. thuringiensis vào thực vật thông qua plasmid Ti của vi khuẩn A. tumefaciens hoặc dùng súng bắn gen . Với các cây chuyển gen này, không cần phun độc tố diệt sâu. Điều này hạn chế sự phát tán độc tố vào môi trường, giảm chi phí sử dụng thuốc trừ sâu… Ngô hay bắp ( Zea mays.) là một trong những cây trồng quan trọng trên thế giới và cả Việt Nam, được dùng làm lương thực hay ứng dụng rất nhiều trong công nghiệp để làm bánh kẹo, syrup đường nghịch đảo, tinh bột biến hình… Chính vì điều đó cho nên năng suất thu hoạch ngô là điều cần cải thiện. Một trong những biện pháp đó là tăng khả năng chống chịu sâu bệnh của cây ngô nhằm tăng năng suất thu hoạch. Điều đó không những giúp tiết kiệm được chi phí sử dụng thuốc trừ sâu mà còn góp phần hạn chế những tác động xấu đến môi trường xung quanh. Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis. GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên. 2 Chƣơng 1 :TỔNG QUAN VỀ BACILLUS THURINGIENSIS I. Giới thiệu chung về Bacillus thuringiensis : 1.Tóm tắt về lịch sử nghiên cứu và ứng dụng của Bacillus thuringiensis. Lần đầu tiên vào năm 1870, nhà bác học Pasteur người Pháp đã phát hiện một loài vi khuẩn gây bệnh cho con tằm và đặt tên là Bacillus bombycis. Sau đó vào năm 1911, nhà côn trùng học người Đức là Berline đã phát hiện loài vi khuẩn này trên loài sâu xám ở Thuringia vùng Địa Trung Hải và đặt tên là Bacillus thuringiensis (viết tắt là Bt.). Sau đó đến khoảng giữa thế kỷ 20, người ta đã phát hiện nhiều chủng Bt. ký sinh trên nhiều loài sâu khác nhau như sâu xanh, sâu keo, sâu róm thông. Từ đó vi khuẩn Bt. đã được chế tạo thành thuốc trừ sâu sử dụng trong nông nghiệp ở nhiều nước, mở đầu cho công nghệ thuốc trừ sâu sinh học. Chế phẩm Bt. đã được nghiên cứu từ năm 1971 và hiện đang được ứng dụng rộng rãi ở nhiều nước thay thế một phần thuốc trừ sâu hóa học để diệt côn trùng. Với những thành tựu của di truyền học và công nghệ sinh học, người ta đã phát hiện nhiều chủng Bt. có khả năng ký sinh mạnh, sản xuất ra những chế phẩm có hàm lượng độc tố và tính ổn định cao để tăng hiệu lực diệt sâu và mở rộng phổ tác dụng trên nhiều loài sâu hại thuộc nhiều bộ côn trùng ở nhiều vùng khí hậu khác nhau. Đã xác định có tới trên 150 loài sâu hại bị nhiễm các chủng Bt., trong đó bao gồm hầu như toàn bộ các loài sâu hại có ở Việt Nam. Hiện nay thuốc trừ sâu từ vi khuẩn Bt. đã chiếm phần lớn thị trường thuốc trừ sâu sinh học trên thế giới cũng như ở nước ta. Ngoài việc dùng làm thuốc trừ sâu, hiện nay người ta đã tách một số gen từ vi khuẩn Bt. ghép vào hệ thống gen của cây để tạo ra các giống cây kháng sâu như giống bông kháng sâu xanh, giống lúa kháng sâu đục thân, sâu cuốn lá, giống ngô kháng sâu… Gần đây, một nhóm các nhà khoa học tại Viện Pasteur TPHCM vừa nghiên cứu thành công chế phẩm vi sinh từ chủng vi khuẩn Bacillus thuringiensis subsp. israelensis serotype H14 diệt lăng quăng. Hình 1.1. Một số chế phẩm trừ sâu có mặt trên thị trường từ Trung Quốc, Mỹ, Việt Nam. 2. Sự phân bố của B.thuringiensis. [...]... này trở nên một kỹ thuật đầy triển vọng đối với cây chuyển gen ở thực vật Quá trình chuyển gen được thực hiện qua các bước sau : - Xác định gen liên quan đến tính trạng cần quan tâm GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 19 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis - Phân lập gen (PCR hoặc sàng lọc từ thư viện cDNA hoặc từ thư viện genomic DNA) - Gắn gen vào vector biểu hiện (expression vector) để biến... của gen - Các DNA (trừ virus) khi xâm nhập vào genome của tế bào vật chủ chưa đảm bảo là đã liên kết ổn định với genome GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 18 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis - Các DNA (trừ virus) không chuyển từ tế bào này sang tế bào kia, nó chỉ ở nơi mà nó được đưa vào - Trong khi đó, DNA của virus khi xâm nhập vào genom cây chủ lại không liên kết với genome mà chuyển từ. .. biến nạp gen vào tế bào trần 1985 Nghiên cứu chuyển gen thành công vào thực vật gen kháng thuốc trừ cỏ 1986 Nghiên cứu chuyển gen thành công vào thực vật gen kháng virus Lần đầu tiên đưa cây biến đổi gen ra đồng ruộng Nghiên cứu chuyển gen thành công vào thực vật gen kháng côn trùng Thành công trong quá trình biến nạp phi sinh học như súng bắn gen Điều khiển sự chín ở cà chua bằng cách chuyển gen chín... chú ý Khi chuyển gen chitinase vào cây thuốc lá đã tăng hoạt tính kháng nấm gây hại Sự biểu hiện đồng thời của cả GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 21 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis hai gen chitinase và glucanase trong thuốc lá làm cho cây có tính kháng nấm gây hại cao hơn cây có một gen độc lập Tương tự, cà chua cho tính kháng nấm Fusarium cao hơn hẳn sau khi được chuyển cả hai gen nói.. .Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis Phổ biến trong tự nhiên, cư trú trong đất, trên bề mặt cây và trên xác sâu. Tần suất B thuringiensis phân bố cao nhất từ nguồn đất là 35%, trên mùn thóc là 30% và thấp nhất ở trên lá cây là 16% 3 Đặc điểm sinh thái của B .thuringiensis Từ Bacillus nhằm miêu tả hình dáng của một nhóm vi khuẩn khi được quan sát dưới kính hiển vi Nó xuất phát từ tiếng... CTC-3’) theo thứ tự, để nhân bản đoạn ADN đặc hiệu nằm trong gen cry1Ab và cry1C Các sản phẩm PCR được phân tích bằng điện di trên gel agaroza 1% GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 16 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis Chƣơng 2 : CÔNG NGHỆ CHUYỂN GEN VÀO THỰC VẬT I Khái niệm về thực vật chuyển gen Quá trình đưa một DNA ngoại lai vào genome (hệ gen) của một sinh vật được gọi là quá trình biến nạp (transformation)... cho vào mỗi đĩa 10 con sâu; mỗi mẫu thử với 30 con sâu Đối với sâu bông GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 15 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis (Helicoverpa armigera) cũng được tiến hành tương tự trên lá bông Hoạt tính diệt sâu ngài gạo (Corrcyra cephalonia) được đánh giá như sau: bỏ 30 con sâu ngài gạo vào bình thuỷ tinh 400g gạo đã được nhiễm bào tử và tinh thể của B thuringiensis với liều... loại thuốc lá chuyển gen, mỗi loại có khả năng sản xuất một trong hai mạch immunoglobin nhẹ và nặng Thế hệ con sinh ra từ sự lai hai loại cây trên biểu hiện được một kháng thể hoạt động gồm hai loại mạch với hàm lượng cao (1,3% tổng GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 23 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis protein của lá) và có tất cả các đặc tính của một kháng thể đơn dòng sản sinh từ hybridoma... tương Chống chịu chất diệt cỏ, hàm lượng oleic acid cao Bí Kháng virus Cà chua Chín chậm Lúa Chống chịu chất diệt cỏ, sản xuất vitamin A Đu đủ Kháng virus GVHD : Cô Lê Thị Thủy Tiên 26 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis ́ Chƣơng 3 : VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHAP SỬ DỤNG TRONG CÔNG TÁC CHUYỂN GEN I Vector sử dụng trong công nghệ chuyển gen ở thực vật 1 Vector là gì: Trong sinh học, vector là... 20 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis Ở động-thực vật chuyển gen, sản phẩm cuối cùng thường không phải là tế bào biến nạp, mà là một cơ thể biến nạp hoàn toàn Phần lớn thực vật được tái sinh dễ dàng bằng nuôi cấy mô tế bào Tuy nhiên, tái sinh cây một lá mầm như ngũ cốc và các loại cỏ khác cũng gặp một vài khó khăn Từ một tế bào biến nạp duy nhất người ta có thể tạo ra một cây chuyển gen, . Phân loại. 55 II. Giới thiệu về ngô chuyển gen. 56 1. Ngô chuyển gen là gì? 56 2. Tại sao phải chuyển gen kháng sâu vào ngô? 56 3. Các bước tạo giống ngô chuyển gen trong phòng thí nghiệm. 57. một số gen từ vi khuẩn Bt. ghép vào hệ thống gen của cây để tạo ra các giống cây kháng sâu như giống bông kháng sâu xanh, giống lúa kháng sâu đục thân, sâu cuốn lá, giống ngô kháng sâu Gần. Hình dạng của phôi và mô sẹo của ngô trong quá trình nuôi cấy. 68 Hình 4.4 : Xác nhận thay đổi gen ở ngô biến đổi gen. 69 Ngô chuyển gen kháng sâu từ Bacillus thuringiensis. GVHD : Cô Lê Thị