THUY T MINH TẾ ĐỀ ÀI: CHƯƠNG TRÌNH VƯỜN ƯƠM SÁNG TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ NGHIÊN CỨU TỔNG HP MỘT SỐ DẪN CHẤT CÓ TÁC DỤNG SINH HỌC TỪ CÂY HOA HÒE TRỒNG TẠI VIỆT NAM Chủ nhiệm đề tài: Th.S. HOÀNG THỊ KIM DUNG Cơ quan chủ trì: TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU Các hợp chất có hoạt tính sinh học nguồn gốc từ thiên nhiên Các hợp chất có hoạt tính sinh học nguồn gốc từ thiên nhiên Khả năng gây độc thấp, an toàn trong sử dụng Sử dụng trong: - Thực phẩm - Mỹ phẩm - Dược phẩm Sử dụng trong: - Thực phẩm - Mỹ phẩm - Dược phẩm Nhu cầu của xã hội Các flavonoid: - Không độc dù ở liều cao - Nhiều tác dụng sinh học - Có thể phối hợp với nhiều loại thuốc Các flavonoid tự nhiên, flavonoid tổng hợp và các dẫn xuất có tác dụng mạnh hơn, ít độc hơn ? MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU TỔNG QUAN TỔNG QUAN Flavonoid: khoảng 4.000 chất đã được xác định trong tự nhiên Hoa: anthocyanine, avonol, avanone, avone, chalcone, aurone Vỏ quả: naringin, hesperidin (họ Cam) Hạt Lá Gỗ, rễ và vỏ cây Rượu vang đỏ, trà, cà phê,… TỔNG QUAN TỔNG QUAN Dự đoán con người tiêu thụ khoảng vài trăm mg flavonoid trong thực phẩm/ngày Flavonoid quan trọng đối với con người TỔNG QUAN TỔNG QUAN Tính chất dược lý của flavonoid: Flavonoid (flavone, isoflavone, flavanone, flavonol) Kháng oxy hóa Tác nhân chống ung thư Kháng viêm Phòng ngừa và điều trị bệnh tim Ức chế enzyme Kháng khuẩn, kháng nấm Chống dị ứng Bảo vệ gan ứ c c h ế t ạ o c h ấ t t r u n g g i a n B ắ t c á c g ố c t ự d o Flavonoid thực phẩm: đậu nành-ung thư vú, trà xanh- ung thư bao tử, hành- ung thư phổi Flavonoid tổng hợp: flavopiridol, phenoxodiol, silybin TỔNG QUAN TỔNG QUAN Cơ chế kháng ung thư của flavonoid: • Flavonoid là tác nhân ngăn ngừa về mặt hóa học • Flavonoid ức chế sự phát triển hoặc sự tăng sinh của tế bào ung thư: Một số flavonoid có thể gây độc tế bào ung thư và gây chết tế bào theo chương trình bằng cách biến đổi DNA. • Flavonoid là tác nhân chống lại sự xâm nhập, sự bám dính và sự phát triển mạch • Các dẫn xuất flavonoid có tác dụng ngăn ngừa tác dụng phụ của các loại thuốc trị ung thư khác (doxorubicin – bệnh tim). TỔNG QUAN TỔNG QUAN Những nghiên cứu về tổng hợp dẫn xuất flavonoid trên thế giới: Vai trò flavonoid trong thực phẩm Nghiên cứu tổng hợp dẫn xuất flavonoid (flavone, flavonol, flavanone, isoflavone) bằng con đường tổng hợp, bán tổng hợp, sinh học Kháng viêm Bền thành mạch máu Giảm nguy cơ bệnh tim Dưỡng da, chống tia UV Chống ung thư Thử lâm sàng: flavopiridol, aminoflavone, phenoxodiol, silybin Năm 2007, để tăng khả năng di chuyển của quercetin qua màng tế bào, Lucia Biasutto đã tổng hợp một số dẫn xuất ester của quercetin. TỔNG QUAN TỔNG QUAN Ở Việt Nam: flavonoid → kháng oxy hóa, kháng viêm, và một vài nghiên cứu rải rác về gây độc tế bào, … (ĐH Y dược TP.HCM, Đại học Khoa học Tự nhiên TP.HCM) TỔNG QUAN TỔNG QUAN XÁC ĐỊNH ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU: Việt Nam (thảm thực vật đa dạng, nguồn flavonoid trong cây dồi dào) Việt Nam (thảm thực vật đa dạng, nguồn flavonoid trong cây dồi dào) Cây hòe: vùng nguyên liệu lớn → flavonol Cây hòe: vùng nguyên liệu lớn → flavonol Thuốc nhuộm, bài thuốc dân gian, chiết rutin Thuốc nhuộm, bài thuốc dân gian, chiết rutin Chọn đối tượng nghiên cứu: RUTIN, QUERCETIN Chọn đối tượng nghiên cứu: RUTIN, QUERCETIN Tổng hợp các dẫn chất Tổng hợp các dẫn chất Xác định cấu trúc, độ sạch: IR, LC-MS, 1H- NMR, 13C-NMR, HMBC, HSQC Xác định cấu trúc, độ sạch: IR, LC-MS, 1H- NMR, 13C-NMR, HMBC, HSQC Xác định hoạt tính sinh học: kháng nấm, kháng khuẩn, kháng oxy hóa, gây độc tế bào Xác định hoạt tính sinh học: kháng nấm, kháng khuẩn, kháng oxy hóa, gây độc tế bào [...]... trúc của các chất ban đầu nhằm thay đổi tính chất lý hóa, từ đó sẽ làm thay đổi tác dụng sinh học của chất, tạo ra các sản phẩm có thể phù hợp hơn cho dược phẩm → các hợp chất có các hoạt tính sinh học tốt hơn Khi dựa vào một hợp chất tự nhiên làm cơ sở để thay đổi cấu trúc, ta có thể sử dụng các phương pháp:  Đơn giản hóa công thức so với chất ban đầu  Mở vòng hợp chất tự nhiên  Thêm một số nhóm thế... CỦA ĐỀ TÀI  Tổng hợp các dẫn xuất của rutin, quercetin và xác định các hoạt tính kháng oxy hóa, kháng nấm, kháng khuẩn và khả năng gây độc tế bào ung thư của các hợp chất này để từ đó làm cơ sở khoa học cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm nâng cao ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của các flavonoid này PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Tổng hợp các dẫn xuất của các flavonoid: Mục đích tổng hợp các dẫn xuất để... thêm một hoặc nhiều nhóm vào mạch… PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU giữ nguyên khung cấu trúc flavonoid  Thêm một số nhóm thế vào nhân  Gài thêm một hoặc nhiều nhóm vào mạch… - ester hóa: acetic anhydride, acyl chloride, n-butyl isocyanate - ether hóa: dimethyl sulfate, alkyl bromide Các nhóm này khi thay thế hoặc đưa vào có thể làm tăng, giảm hoặc thay đổi tác dụng sinh học do sự thay đổi cấu trúc hóa học. .. kiến (đề cương) - Công việc đã thực hiện Tổng hợp ≥ 6 dẫn xuất của rutin và - Tổng hợp được 10 dẫn xuất quercetin - Đã xác định cấu trúc các chất bằng IR, LC- tổng hợp MS, 1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC Xác định hoạt tính gây độc tế bào của - Đã xác định hoạt tính gây độc tế bào trên 3 các dẫn xuất trên 3 dòng HeLa, dòng HeLa, MCF-7, NCI-H460 cùng với MCF-7, NCI-H460 có so sánh với hoạt tính kháng oxy hóa... 25; 50; 50; 50; 50; 50 µg/ml, Q kháng được 2 dòng với MIC là 25; 25 µg/ml, các hợp chất R, Q-2, Q-5 kháng được 1 dòng vi sinh vật với các giá trị MIC lần lượt là 12,5; 50; 50 µg/ml, còn lại các hợp chất khác không có khả năng kháng nấm, kháng khuẩn KẾT LuẬn VÀ kiẾN NGHỊ 3 Nghiên cứu về khả năng kháng oxy hóa của các hợp chất này cho thấy: • Vị trí 3-OH và liên kết đôi 2,3 ở vòng C đóng vai trò cơ bản... màng tế bào, ngăn chặn sự tạo thành MDA PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3- Xác định khả năng kháng nấm, kháng khuẩn: phương pháp của Vanden Bergher và Vlietlinck Bước 1: Sàng lọc sơ bộ tìm chất có hoạt tính, Bước 2: Tìm nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của chất có hoạt tính 4- Thử nghiệm khả năng gây độc tế bào theo phương pháp SRB (Sulforhodamine B) SRB là một thuốc nhuộm tích điện âm sẽ liên kết tĩnh điện được... Khi thay nhóm –OH bằng các nhóm ester sẽ có khuynh hướng làm tăng hoạt tính gây độc tế bào, và ngược lại các nhóm ether –OR- làm giảm hoạt tính gây độc tế bào KẾT LuẬn VÀ kiẾN NGHỊ KIẾN NGHỊ • Cần tiếp tục nghiên cứu tổng hợp thêm các dẫn xuất mới trên cơ sở những kết luận đã rút ra, đặc biệt cần chú ý đến việc thay thế nhóm 3-OH trong họ flavonoid bằng các nhóm có khả năng làm tăng hoạt tính gây độc... 5,83 209 6 R-2 98,58 ± 5,53 275 •Các dẫn xuất ester (Q-1, Q-5) làm tăng hoạt tính gây độc tế bào còn các dẫn xuất ether (R-2, Q-9) lại giảm hoạt tính so với quercetin • So sánh kết quả Q, R-2, Q-9 có thể thấy vị trí 3-OH làm giảm hoạt tính, cần nghiên cứu thay thế vị trí này bằng các nhóm làm tăng hoạt tính KẾT QuẢ VÀ BÀN LuẬN Mối tương quan giữa cấu trúc hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư... với các phần tích điện dương của protein Lượng thuốc nhuộm liên kết sẽ phản ánh lượng protein tổng của tế bào Mật độ quang đo được của dung dịch tương quan với lượng protein tổng hay số lượng tế bào Sự thay đổi lượng tế bào so với mẫu đối chứng phản ánh độc tính tế bào của chất thử KẾT QuẢ VÀ BÀN LuẬN 1 Các dẫn xuất ester của quercetin (6): S¶n phÈm R1 R2 R3 R4 R5 HiÖu suÊt (%) Q -H -H -H -H -H 71 Q-1... cấu trúc hóa học PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Phương pháp xác định hoạt tính sinh học: 1- Xác định khả năng bắt gốc tự do DPPH: 2- Xác định khả năng kháng oxy hóa theo phương pháp MDA (malonyl dialdehyde): – MDA tạo thành do sự peroxy hóa lipid màng tế bào O 2 O HN S + N H OH acid thiobarbituric H C C O H H H C O MDA t0 -2H2O HN S N H O C CH CH H OH O NH N H S trimethin Các chất chống oxy hóa sẽ ức chế quá . ÀI: CHƯƠNG TRÌNH VƯỜN ƯƠM SÁNG TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ NGHIÊN CỨU TỔNG HP MỘT SỐ DẪN CHẤT CÓ TÁC DỤNG SINH HỌC TỪ CÂY HOA HÒE TRỒNG TẠI VIỆT NAM Chủ nhiệm đề tài: Th.S. HOÀNG THỊ KIM. dược TP.HCM, Đại học Khoa học Tự nhiên TP.HCM) TỔNG QUAN TỔNG QUAN XÁC ĐỊNH ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU: Việt Nam (thảm thực vật đa dạng, nguồn flavonoid trong cây dồi dào) Việt Nam (thảm thực vật. tính chất lý hóa, từ đó sẽ làm thay đổi tác dụng sinh học của chất, tạo ra các sản phẩm có thể phù hợp hơn cho dược phẩm → các hợp chất có các hoạt tính sinh học tốt hơn. Tổng hợp các dẫn xuất