BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM o0o VÕ THỊ THU THẢO NGHIÊN CỨU Q TRÌNH TRÍCH LY, KHẢO SÁT KHẢ NĂNG CHỐNG OXY HĨA, TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT POLYPHENOL TỪ PHỤ PHẨM CÂY SÚP LƠ XANH (Brassica oleracea) ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Nha Trang, tháng năm 2014 BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM o0o VÕ THỊ THU THẢO NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH TRÍCH LY, KHẢO SÁT KHẢ NĂNG CHỐNG OXY HĨA, TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT POLYPHENOL TỪ PHỤ PHẨM CÂY SÚP LƠ XANH (Brassica oleracea) ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM GVHD : ThS BÙI TRẦN NỮ THANH VIỆT Nha Trang, tháng năm 2014 i LỜI CAM KẾT Sinh viên: Võ Thị Thu Thảo Nơi đào tạo: Trường Đại học Nha Trang Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Người hướng dẫn: Th.S Bùi Trần Nữ Thanh Việt Tên đồ án tốt nghiệp: “ Nghiên cứu q trình trích ly, khảo sát khả chống oxy hóa, tính kháng khuẩn dịch chiết polyphenol từ phụ phẩm súp lơ xanh ( Brassica oleracea) Nội dung cam đoan: Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu tơi bảo cô hướng dẫn giúp đỡ tập thể cán Trung tâm TNTH Trường Đại học Nha Trang Các số liệu kết nêu luận văn trung thực chưa công bố Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm với lời cam đoan Nha Trang, ngày 08 tháng 06 năm 2014 Sinh viên Võ Thị Thu Thảo ii LỜI CẢM ƠN Đề tài tốt nghiệp thực phịng thí nghiệm Trường Đại học Nha Trang hướng dẫn ThS Bùi Trần Nữ Thanh Việt, Khoa Công nghệ Thực phẩm Trường Đại học Nha Trang Để hoàn thành đề tài bên cạnh cố gắng nổ lực thân em nhận nhiều động viên lớn từ nhiều cá nhân tập thể Em xin trân trọng cảm ơn Bộ môn Công nghệ Thực phẩm cho phép em thực đề tài Em xin trân trọng cảm ơn Nhà trường thầy Khoa Cơng nghệ Thực phẩm nói chung thầy Bộ mơn Cơng nghệ Thực phẩm nói riêng trang bị cho em kiến thức bổ ích chuyên ngành năm học qua giúp em có tảng để thực tốt đề tài Em xin trân trọng cảm ơn thầy cô quản lý PTN Cơng Nghệ Thực Phẩm, PTN Hóa- phân tích, Viện Cơng nghệ sinh học, PTN hóa- Vi sinh, bạn, anh chị làm đề tài tạo điều kiện giúp đỡ em trình thực nghiên cứu Em xin đặc biệt cảm ơn cô Bùi Trần Nữ Thanh Việt giành nhiều thời gian, công sức tận tình hướng dẫn em suốt trình nghiên cứu thực đề tài Cuối em muốn giành lời cảm ơn sâu sắc tới người thân gia đình em ln giành cảm thơng chia tạo điều kiện giúp đở em có đủ nghị lực để hoàn thành tốt đề tài Em xin chân thành cảm ơn! Sinh Viên Võ Thị Thu Thảo iii MỤC LỤC LỜI CAM KẾT i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH ix LỜI MỞ ĐẦU xii CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan súp lơ xanh 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Đặc điểm sinh thái 1.1.3 Nguồn gốc phân bố súp lơ xanh 1.1.4 Thành phần hóa học súp lơ xanh 1.1.4.1 Nước 1.1.4.2 Gluxit 1.1.4.3 Các axit hữu 1.1.4.4 Các hợp chất Nitơ 1.1.4.5 Các chất màu 1.1.4.6 Các vitamin 1.1.4.7 Các chất khoáng 1.1.4.8 Các enzym 1.1.4.9 Các hợp chất có giá trị sinh học 1.1.5 Giá trị súp lơ 1.1.5.1 Giá trị dinh dưỡng 1.1.5.2 Giá trị kinh tế iv 1.1.5.3 Giá trị y học 1.1.6 Tình hình sản xuất tiêu thụ súp lơ nước giới 1.1.6.1 Trên giới 1.1.6.2 Ở Việt Nam 11 1.2 Tổng quan polyphenol 12 1.2.1 Giới thiệu polyphenol 12 1.2.1.1 Giới thiệu hợp chất polyphenol thực vật 12 1.2.1.2 Đặc tính polyphenol 16 1.2.2 Tình hình nghiên cứu hợp chất có hoạt tính sinh học súp lơ xanh 17 1.2.2.1 Trên giới 17 1.2.2.2 Ở Việt Nam 20 1.2.3 Tình hình tận dụng, nghiên cứu phụ phẩm súp lơ xanh 21 1.2.4 Polyphenol súp lơ xanh tiềm ứng dụng 23 1.3 Giới thiệu chủng vi khuẩn 25 1.3.1 Bacillus cereus 25 1.3.2 E.Coli 26 1.3.3 Staphylococcus aureus 27 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Đối tượng địa điểm nghiên cứu 29 2.1.1 Địa điểm 29 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu 29 2.2 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 29 2.2.1 Dụng cụ 29 2.2.2 Hóa chất 30 2.2.3 Thiết bị 30 2.3 Nội dung nghiên cứu 31 2.4 Phương pháp nghiên cứu 31 v 2.4.1 Phương pháp lấy mẫu xử lý mẫu 31 2.4.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 31 2.4.2.1 Qui trình dự kiến tiến hành chiết polyphenol từ phụ phẩm súp lơ31 2.4.2.2 Thí nghiệm khảo sát 1: Khảo sát hàm lượng polyphenol số nguyên liệu họ cải Việt Nam 35 2.4.2.3 Thí nghiệm khảo sát 2: Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến hiệu trích lypolyphenol từ phụ phẩm súp lơ 36 2.4.2.4 Thí nghiệm khảo sát 3: Ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu/ dung môi (w/v) đến hiệu trích lypolyphenol từ phụ phẩm súp lơ 36 2.4.2.5 Thí nghiệm khảo sát 4: ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu trích ly polyphenol từ phụ phẩm súp lơ 37 2.4.2.6 Thí nghiệm khảo sát 5: ảnh hưởng thời gian chiết đến hiệu trích lypolyphenol từ phụ phẩm súp lơ 38 2.4.2.7 Thí nghiệm khảo sát 6: ảnh hưởng nồng độ dung mơi đến hiệu trích lypolyphenol từ phụ phẩm súp lơ 38 2.4.2.8 Thí nghiệm mơ hình hóa q trình trích ly polyphenol từ phụ phẩm súp lơ 39 2.4.2.9 Bố trí thí nghiệm xác định hoạt tính chống oxi hóa dịch chiết polyphenol 40 2.4.2.10 Bố trí thí nghiệm xác định hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết polyphenol 41 2.4.3 Các phương pháp phân tích 42 2.4.3.1 Phương pháp xác định hàm lượng polyphenol tổng số 42 2.4.3.2 Xác định hoạt tính kháng oxi hóa dịch chiết polyphenol 44 2.4.3.3 Xác định hoạt tính kháng khuẩn polyphenol 46 2.5 Xử lý số liệu 47 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1Kết khảo sát hàm lượng polyphenol số loại nguyên liệu họ cải Việt Nam 48 3.2 Kết khảo sát hàm lượng polyphenol phụ phẩm súp lơ 49 vi 3.2.1 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi đến hiệu trích ly dịch chiết 49 3.2.2 Ảnh hưởng tỉ lệ dung môi đến hiệu trích ly polyphenol 52 3.2.3 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu trích ly polyphenol 53 3.2.4 Ảnh hưởng thời gian đến hiệu trích ly polyphenol 56 3.2.5 Hiệu suất q trình trích ly polyphenol 59 3.3 Mơ hình hóa q trình chiết polyphenol từ phụ phẩm súp lơ 60 3.4 Khả kháng oxi hóa dịch chiết polyphenol từ phụ phẩm súp lơ số loại cải Việt Nam 65 3.5 Khả kháng khuẩn dịch chiết polyphenol 69 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 72 4.1 Kết luận 72 4.2 Đề xuất ý kiến 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 74 PHỤ LỤC 83 vii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ROS: Chất hoạt động chứa oxi RNS: Chất hoạt động chứa nitơ GLS: Glucosinolates FW: Fresh weight Aas: Amino acids In vitro: Nghiên cứu ống nghiệm In vivo: Nghiên cứu thể sống TXA2: Thromboxane A2 COX: Cyclooxygenase LPOs: Lipid peroxides LDL: Low density lipoprotein ETEC: enterotoxigenic E.coli EPEC: enteropathogenic E.coli EAEC: enteroadherent E.coli EIEC: enteroinvasive E.coli EHEC: enterohaemorrhagic E.coli Nrf2: nuclear factor-erythroid-2-related factor GAE: Gallic Acid Equivalent ABS: Absorbance PCA: Plate count agar viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Nội dung Trang 1.1 Thành phần dinh dưỡng có súp lơ xanh 1.2 Tổng sản lượng súp lơ, số lượng xuất khẩu, giá trị xuất số nước giới 9-10 1.3 Sản lượng súp lơ xanh số nước 11 3.1 Các biến số ma trận 60 3.2 Ma trận thực nghiệm 61 3.3 Ma trận kết 62 3.4 3.5 3.6 Các hệ số mơ hình ảnh hưởng yếu tố khảo sát đến hàm lượng polyphenol Các hệ số mơ hình ảnh hưởng yếu tố khảo sát đến hoạt tính chống oxy hóa Khả kháng khuẩn dịch chiết poyphenol từ phụ phẩm súp lơ 63-64 64 69 77 31 Denker Joel (2003), “ The world on a plate: A Tour Through the History of America's Ethnic Cuisine”, p.8 32 Donglin Zhang, Yasunori Hamauzu ( 2004),” Phenolics, ascorbic acid, carotenoids and antioxidant activityof broccoli and their changes during conventional and microwave cooking”, Food Chemistry, 88,p 503–509 33 E Arnáiz cộng (2012), “Supercritical fluid extraction of free amino acids from broccoli leaves”, Journal of Chromatography A, 1250, p.49– 53 34 E Koh, cộng sự.(2009),” Content of ascorbic acid, quercetin, kaempferol and total phenolics in commercial broccoli”,Journal of Food Composition and Analysis, 22,p.637-643 35 Fahey, J.W., Zalcmann, A.T., Talalay, P (2001), “ The chemical diversity and distribution of glucosinolates and isothiocyanates among plants”, Phytochemistry, 56, p 5–51 36 Faik Ahmet Ayaz a, cộng (2008),” Phenolic acid contents of kale (Brassica oleraceae L var acephala DC.) extracts and their antioxidant and antibacterial activities”, Food Chemistry, 107, p 19–25 37 Food and Agricultural Organization of United Nations 11/06/2008 38 Gliszczyn´ ska-S´ wigło cộng (2006), “ Changes in the content of health-promoting compounds and antioxidant activity of broccoli after domestic processing”, Food Addit Contam, A 23, p.1088–1098 39 G Murillo RG Mehta (2001), “Cruciferous vegetables and cancer prevention”, Nutr Cancer., 41(1-2), p.17-28 40 Herbert Baxter, J.B Harborne, Gerald P Moss (1998), “A Handbook of Bioactive Compounds from Plants”, Phytochemical Dictionary,2, p.110115 78 41 Jed Fahey (2009), “Broccoli Sprouts May Prevent Stomach Cancer By Defeating Helicobacter Pylor”,Johns Hopkins Medical Institutions, 2(4), p 353 42 Karabegovi´c, I.T cộng (2014), “ The effect of different extraction techniques on the composition andantioxidant activity of cherry laurel (Prunus laurocerasus) leaf and fruit extracts”, Ind Crops Prod, 54, p.142–148 43 Khanbabaee, cộng (2001), “ Tannins: classification and definition”, Nat Prod Rep,18, p.641-649 44 Koleckar V cộng (2008), “ Condensed and hydrolysable tannins as antioxidants influencing the health”, Mini Rev Med Chem, 8, p.436-447 45 Kundu JK, cộng (2006), “ Resveratrol inhibits phorbol ester- induced expression of COX-2 and activation of NF-kappaB in mouse skin by blocking IkappaB kinase activity”, Carcinogenesis, 27, p.1465–1474 46 Li H, Xia N, Förstermann U (2012), “ Cardiovascular effects and molecular targets of resveratrol”, Nitric Oxide, 26, p.102–110 47 Maggioni cộng (2010), “ Origin and Domestication of Cole Crops (Brassica oleracea L), Economic Botany, 64 (2), p.109–123 48 Maja Dent, cộng ( 2013), “The Effect of Extraction Solvents, Temperature and Time on the Composition and Mass Fraction of Polyphenols in Dalmatian Wild Sage (Salvia officinalis L.) Extracts”, Food Technol Biotechnol, 51 (1), p.84–91 49 Manach, C cộng (2004), “ Polyphenols: food sources and bioavailability”, Am J Clin Nutr, 79, p.727-747 50 and Marian Naczk, Fereidoon Shahidi (2006), “ Phenolics in cereals, fruits vegetables: Occurrence, extraction and analysis”, Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 41, p 1523–1542] Journal of 79 51 Mattila, P cộng (2000), “ Determination of flavonoids in plant material by HPLC with diodearray and electroarray detections”, J Agric Food Chem, 48, p.5834-5841 52 Mukhtar H, Ahmad N (2000), “ Tea polyphenols: prevention of cancer and optimizing health”, Am J Clin Nutr ,71(6 Suppl),1698S_702S 53 Nepote V, Grosso NR, Guzman CA (2005), “ Optimization of extraction of phenolic antioxidants from peanut skins”, Journal of the Science of Food and Agriculture, 85, p.33–38 54 Nonnecke, Ib (1989), “ Vegetable Production”, Springer-Verlag New York, LLC, p.394 55 Perron, N.R cộng (2009), “ A review of the antioxidant mechanisms of polyphenol compounds related to iron binding”, Cell Biochem Biophys, 53, p.75-100 56 Pinelo M, Rubilar M, Sineiro J, Nunez MJ (2004), “ Extraction of antioxidant phenolics from almond hulls (Prunus amygdalus) and pine sawdust (Pinus pinaster)”, Food Chem, 2(85), p.267-273 57 Quan V Vuong cộng (2013), “Antioxidant activities of Carica papaya leaf aqueous extracts”, Journal of Herbal Medicine, 3, p.104-111 58 Ramdane Dris, Raine Niskanen, Shri Mohan Jain Crop Management & Postharvest Hanlding Horticultal products Volume II-Fruits and vegetables 59 Ramdane Dris, Raine Niskanen, Shri Mohan Jain, “ Crop Management & Postharvest Hanlding Horticultal products”, Volume IV- Diseases & Disorder of Fruits and vegetables 60 Rasmussen, S.E.; cộng (2005), “ Dietary proanthocyanidins: occurrence, dietary intake, bioavailability, and protection cardiovascular disease”, Mol Nutr Food Res, 49, p.159-174 against 80 61 Rice-Evans, C.A cộng (1995), “ The relative antioxidant activities of plant-derived polyphenolic flavonoids”, Free Radic Res, 22, p.375-383 62 Rice-Evans, C.A cộng (1996), “ Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids”, Free Radic Biol Med, 20, p 933-956 63 Rosana Chirinos, Herv Rogez, David Camposa, Romina Pedreschi, Yvan Larondelle (2007), “ Optimization of extraction conditions of antioxidant phenolic compounds from mashua (Tropaeolum tuberosum Ru´ız & Pav´on) tubers”, Separation and Purification Technology, 55, p 217–225 64 Ruenroengklin N., J Zhong, X Duan, B Yang, J Li and Y Jiang (2008), “ Effects of Various Temperatures and pH Values on the Extraction Yield of Phenolics from Litchi Fruit Pericarp Tissue and the Antioxidant Activity of the Extracted Anthocyanins”, Int J Mol Sci., 9, p 1333-1341 65 Shi, cộng (2003), “ Optimization of the extraction of polyphenols from grape seed meal by aqueous ethanol solution”, Food, Agricultural and Environment, 1(2), p.42 – 47 66 Shu-Hui Hu, Jinn-Chyi Wang, Hsien-Feng Kung, Jih-Terng Wang, Wei-Lun Lee, and Yi-Hsin Yang ( 2004), “ Antimicrobial effect of extracts of Cruciferous vegetables”, The Kaohsiung Journal of Medical Science,20, 12, p.591-599 67 Simona Oancea cộng (2013), “Conventional and Ultrasound- Assisted Extraction of Anthocyanins from Blackberry and Sweet Cherry Cultivars”, Acta Chim Slov, 60, (2), p.383–389 68 Singleton, V.L., Rossi, J.A., 1965 Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic and phosphotungtic acid reagents American Journal of Enology and Viticulture 16, 144–158 81 69 Spigno G, Tramelli L, De Faveri DM (2008), “ Effects of extraction time, temperature and solvent on concentration and antioxidant activity of grape marc phenolics”, J Food Eng, 81(1), p.200-208 70 SS Hecht (2000), “Inhibition of carcinogenesis by isothiocyanates”, Drug Metab Rev 32 (3-4), p.395-411 71 Survay, N.S cộng (2010),” Characterization of a cinnamoyl derivative from broccoli (Brassica oleracea L var italica) florets”, Fitoterapia, 81, p.1062–1066 72 Tan, M C,Tan, C P and Ho, C W (2013), “Effects of extraction solvent system, time and temperature on total phenolic content of henna (Lawsonia inermis) stems”, International Food Research Journal, 20(6), p 3117-3123 73 L Vallejo cộng (2003), “ Changes in broccoli (Brassica oleracea var italica) health-promoting compounds with inflorescence development”, Food Chemistry, 51, p.3776–3782 74 Winny Routray, Valerie Orsat (2014), “ MAE of phenolic compounds from blueberry leaves and comparisonwith other extraction methods”, Industrial Crops and Products, 58, p.36–45 75 Wu, cộng (2004), “ Lipophilic and hydrophilic antioxidant capacities of common foods in the United States”, Journal of the Agricultural and Food Chemistry, 52, p.4026–4037 76 Yin Yin Thoo, Swee Kheng Ho, Jia Yun Liang, Chun Wai Ho, Chin Ping Tan ( 2010), “ Effects of binary solvent extraction system, extraction time and extraction temperature on phenolic antioxidants and antioxidant capacity from mengkudu (Morinda citrifolia), Food Chemistry, 120, p.290– 295 82 77 Yoshino, M cộng (1998), “ Interaction of iron with polyphenolic compounds: application to antioxidant characterization”, Anal Biochem, 257, p.40-44 78 Zhang, D., Hamauzu, Y (2004), Phenolics, ascorbic acid, carote-noids and antioxidant activity of broccoli and their changes during conventional and microwave cooking Food Chemistry, 88 ,503–509 79 Zheng, X cộng sự.(2013), “ Extraction characteristics andoptimal parameters of anthocyanin from blueberry powder under microwave-assisted extraction conditions”, Sep Purif Technol, 104, p.17–25 80 http://www.tintuccaonien.com/docs/docs_4/4_2_54.htm 81 http://thegioiraumam.com/product/rau-mam-bong-cai-xanh/ 82 http://hanoimoi.com.vn/Tin-tuc/Doi-song/164600/tim-th7845%3By- ch7845%3Bt-ch7889%3Bng-ung-th432%3B-trong-sup-l417%3B-xanh 83 http://www.vaas.org.vn/nghien-cuu-tai-anh-quoc-ve-giong-bong-cai- xanh-giau-glucoraphanin-a8216.html 84 http://nutritiondata.self.com/facts/vegetables-and-vegetable- products/2356/ 85 http://www.uga.edu/vegetable/broccoli.html 86 http://www.faostat.fao.org/site/291/default.aspx 83 PHỤ LỤC Phụ lục y = 28.43x + 0.029 R² = 0.998 ABS 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.01 0.02 0.03 Nồng độ acid gallic (mg/ml) 0.04 Hình 1: Đồ thị đường chuẩn acid gallic Phụ lục 2: Tỉ lệ thành phần súp lơ xanh  Tiến hành: Cân phận tính tỉ lệ mà chiếm tổng khối lượng súp lơ  Kết Bảng 1: Tỉ lệ khối lượng phận súp lơ xanh Các phận Khối lượng (g) Tỉ lệ (%) Phụ phẩm súp lơ 464.5 47.49 Bông súp lơ 364 36.3 Thân súp lơ 149.5 16.21 84 Phụ lục 3: Phương pháp xác định hàm lượng nước phụ phẩm súp lơ xanh  Nguyên tắc Thực chất phương pháp nghiền nhỏ mẫu sấy tủ sấy đến khối lượng không đổi Tức mẫu sấy khô tủ sấy đạt nhiệt độ tiêu chuẩn.Khối lượng cuối xác định sau lần cân lần sấy liên tiếp, sai số lần không 0,001g  Dụng cụ Chén cân có nút mài Cân phân tích với độ xác 0,001g Bình hút ẩm Tủ sấy  Cách tiến hành Cân xác 5g mẫu cho vào chén cân, cho vào tủ sấy.Sấy nhiệt độ 1050 Sau lấy cốc để nguội bình hút ẩm silicagel cân khối lượng không thay đổi kết thúc q trình sấy  Cách tính kết Độ ẩm (W %) mẫu tính tốn dựa theo khối lượng trình sấy:  m1  m  612 * 100  * 100  87 76 % m1 Trong đó: m1- khối lượng mẫu trước sấy (g) m2 – khối lượng mẫu sau sấy (g) 85 Phụ lục 4: Xác định hàm lượng chất khơ dịch trích ly Sử dụng khúc xạ kế đo độ đường % 0Brix 200C  Nguyên tắc: Khi từ mơi trường khơng khí vào mơi trường chất lỏng, tia sáng bị khúc xạ Nếu chất lỏng dung dịch chất hòa tan, dựa độ lệch tia sáng ta xác định hàm lượng chất khơ hịa tan dung dịch  Tiến hành: Cần lọc dịch đo Dùng nước cất bình tia rửa mặt kính, dùng giấy thấm khô Dùng ống nhỏ giọt lấy vài giọt dung dịch nhỏ lên mạt kính khúc xạ kế đậy nắp nhựa lại Đưa khúc xạ kế hướng có ánh sáng nhìn vào ống kính ta thấy hai vùng xanh trắng Vạch ngăn cách vùng vào giá trị giá trị nồng độ chất khơ dịch  Kết quả: Hàm lượng chất khơ hịa tan phụ phẩm súp lơ giá trị trung bình lần đo 3.930Brix Phụ lục 5:Xác định pH dịch trích ly Dùng máy đo pH để đo pH dịch trích ly 200C  Tiến hành Mở máy nút On/Off Rửa điện cực nước cất, dùng giấy mềm thấm khô đầu điện cực Lắc mẫu dịch đặt điện cực vào ( lưu ý đầu điện cực phải nhúng ngập dịch) Chờ cho hình lên dấu hiệu báo số pH đến không thay đổi ghi nhận kết Lấy điện cực khỏi mẫu rửa nước cất  Kết quả: pH= 5.60 86 Phụ lục Bảng Ảnh hưởng nồng độ dung mơi tới hiệu trích ly polyphenol từ dịch chiết phụ phẩm súp lơ xanh Nồng độ dung môi ( ∑P (mg GAE/100g FW) ethanol) 50% 45.028 60% 60.395 70% 66.690 80% 80.651 90% 64.674 99.5% 54.894 Phụ lục Bảng Ảnh hưởng tỉ lệ dung mơi đến hiệu trích ly polyphenol Tỉ lệ ∑P (mg GAE/100g FW) 1:2 44.038 1:4 54.244 1:6 71.709 1:8 77.430 87 Phụ lục Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu trích ly polyphenol Nhiệt độ ∑P (mg GAE/100g FW) 300 71.286 400 73.701 500 90.726 600 90.843 700 81.581 800 54.168 Phụ lục Bảng Ảnh hưởng thời gian đến hiệu trích ly polyphenol Thời gian ( phút) ∑P (mg GAE/100g FW) 30 58.707 45 63.153 60 77.261 75 86.068 90 99.906 105 104.227 120 106.123 88 Phụ lục 10 Bảng 10:Ảnh hưởng số lần trích ly đến hiệu trích ly polyphenol Số lần ∑P (mg GAE/100g FW) Lần 100.34 Lần 47.823 Lần 19.012 Phụ lục 11 Bảng 11: Hàm lượng polyphenol số loại cải Việt Nam Loại cải ∑P (mg GAE/100g FW) Bắp sú 62.380 Cải thảo 78.579 Cải xanh 84.864 Bông súp lơ 92.004 Phụ phẩm súp lơ 103.417 89 Phụ lục 12 Bảng 12: Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ dung mơi đến hiệu trích ly TPC Subset for alpha = 0.05 Nongdo a Duncan N 50 99.5 5.48943E1 60 6.03953E1 6.03953E1 90 6.04527E1 6.04527E1 70 80 Sig 4.50283E1 6.66903E1 8.06510E1 1.000 104 069 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed Phụ lục 13 Bảng 13: Bảng ANOVA ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu/ dung môi đến hiệu trích ly polyphenol 90 Phụ lục 14 Bảng 14: Bảng ANOVA ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu trích ly polyphenol TPC Subset for alpha = 0.05 Nhietdo a Duncan N 80 30 7.12860E1 40 7.37013E1 70 50 9.07257E1 60 9.08433E1 5.50475E1 7.37013E1 8.15807E1 Sig 1.000 524 055 975 Means for groups in homogeneous subsets are displayed Phụ lục 15 Bảng 15: Bảng ANOVA ảnh hưởng thời gian đến hiệu trích ly polyphenol TPC Subset for alpha = 0.05 Thoigian a Duncan N 30 5.87070E1 45 6.31530E1 60 7.72610E1 75 8.60680E1 90 9.99060E1 105 1.04270E2 120 1.06123E2 Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed .299 051 174 91 Phụ lục 16 Bảng 16: Bảng ANOVA ảnh hưởng số lần trích ly đến hiệu trích ly polyphenol TPC Subset for alpha = 0.05 Solantrichly a Duncan N 3 3 2.69960E1 Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed 6.39227E1 1.00340E2 1.000 1.000 1.000 ... NGHỆ THỰC PHẨM o0o VÕ THỊ THU THẢO NGHIÊN CỨU Q TRÌNH TRÍCH LY, KHẢO SÁT KHẢ NĂNG CHỐNG OXY HĨA, TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT POLYPHENOL TỪ PHỤ PHẨM CÂY SÚP LƠ XANH (Brassica oleracea). .. “ Nghiên cứu q trình trích ly, khảo sát khả chống oxy hóa, tính kháng khuẩn dịch chiết polyphenol từ phụ phẩm súp lơ xanh ( Brassica oleracea) Nội dung cam đoan: Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên. .. nghiệm khảo sát 4: ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu trích ly polyphenol từ phụ phẩm súp lơ 37 2.4.2.6 Thí nghiệm khảo sát 5: ảnh hưởng thời gian chiết đến hiệu trích lypolyphenol từ phụ phẩm súp