Đang tải... (xem toàn văn)
Rau má ngọ (thồm lồm gai) có tên khoa học là Polygonum perfoliatum L., thuộc họ rau răm (Polygonaceae). Theo Đông y thồm lồm gai có vị đắng, chua, tính bình vào các kinh can, thận. Có tác dụng thanh nhiệt giải độc, hoạt huyết trừ phong; thường dùng chữa ho gà, trĩ, vàng da, sốt rét, kiết lỵ, tiểu tiện buốt, khí hư. ...
Phân lập một số thành phần hóa học từ cây rau má ngọ (Polygonum perfoliatum L.) Nguyễn Văn Đậu, Đỗ Thị Mai, Đinh Như Chiến Khoa Hóa học, Trường ĐHKHTN-ĐHQGHN Email: ngvandau2003@yahoo.com Keywords: Polygonum perfoliatum L., β-sitosterol, daucosterol, quercetin 3,4-dihydro-5-hydroxy-7- me-thoxy-4-(4'-methoxyphenyl)coumarin. Summary Stearic acid (1), β-sitosterol (2), daucosterol (3), 3,4-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-4-(4'- methoxyphenyl)coumarin (4) and quercetin (5) were isolated from the aerial parts of Polygonum perfoliatum L. by combination of various chromatography techniques. Their structures were identified by NMR spectroscopy method. 3,4-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-4-(4'- methoxyphenyl)coumarin(4) was the first time found in the polygonym genus. I. ĐẶT VẤN ĐỀ Rau má ngọ (thồm lồm gai) có tên khoa học là Polygonum perfoliatum L., thuộc họ rau răm (Polygonaceae). Theo Đông y thồm lồm gai có vị đắng, chua, tính bình vào các kinh can, thận. Có tác dụng thanh nhiệt giải độc, hoạt huyết trừ phong; thường dùng chữa ho gà, trĩ, vàng da, sốt rét, kiết lỵ, tiểu tiện buốt, khí hư, [1] Theo tra cứu của chúng tôi, cho đến nay ở Việt Nam chưa có công trình nghiên cứu về thành phần hóa học của cây thuốc này. Bài báo này thông báo kết quả phân lập một số thành phần từ cây rau má ngọ và nhận dạng chúng là axit stearic (1), β-sitosterol (2), daucosterol (3), 3,4-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-4- (4'methoxyphenyl)-coumarin (4) và quercetin (5). II. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. Nguyên liệu Cây rau má ngọ (Polygonum perfoliatum L.) được thu hái tại Yên Sơn, Ba Vì, Hà Nội vào tháng 10/2012 và được PGS. Trần Văn Ơn, Trường Đại học Dược Hà Nội giám định tên khoa học. Hóa chất thiết bị Bản mỏng silica gel tráng sẵn DC-Alufolien 64 F 254 (Merck, Darmstadt, CHLB Đức); silica gel cho cột sắc kí cỡ hạt 63-100 μm. Các dung môi (Trung Quốc) được tinh chế trước khi tiến hành sắc kí. Phổ 1 H-NMR, 13 C-NMR được đo trên máy Bruker DRX500 của Viện Hóa học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam. Chiết nguyên liệu. Bột khô phần trên mặt đất của cây rau má ngọ (3kg) được ngâm kiệt trong methanol 5 lần, sau đó lọc lấy dịch chiết và cất loại bỏ dung môi thu được cặn chiết methanol. Hòa tan cặn methanol trong nước cất và chiết lần lượt với các dung môi n-hexane, dichlomethane, ethyl acetate, n- buthanol. Sau khi loại dung môi dưới áp suất giảm thu được các cặn chiết n-hexane (94.8g, hs. 3.16%), dichlomethan (8.13g, hs. 0.27%), ethyl acetate (19.31g, hs. 0.64%) và n-buthanol (9.52g, hs. 0.31%). Phân lập các chất Các cặn chiết n-hexane, dichlomethane và ethyl acetate được phân tách trên cột sắc kí silica gel với hỗn hợp dung môi-gradient, tăng dần độ phân cực. Các chất phân lập được tinh chế tiếp bằng phương pháp kết tinh lại. III. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết quả phân lập. Bằng phương pháp sắc ký cột, từ cặn chiết n-hexane (rửa giải với hỗn hợp n-hexane/ethyl acetate) thu được chất (1) và (2); từ cặn chiết dichlomethane (rửa giải với hỗn hợp n- hexane/acetone) nhận được chất (3); và từ cặn chiết ethyl acetate (rửa giải với hỗn hợp dichlomethane/acetone) thu được chất (4) và (5). Xác định cấu trúc của các chất phân lập. Axit stearic (1). Hợp chất 1 thu được dưới dạng tinh thể màu trắng. Trong phổ 1 H-NMR (500MHz, CDCl 3 ) xuất hiện tín hiệu của nhóm methyl ở δ H 0.88 ppm (3H, t, J=6.75Hz), tín hiệu của 14 nhóm methylene (δ H 1.294-1.25 ppm), tín hiệu hai nhóm methylene ở δ H 2.26 ppm (2H, t, J = 7.75Hz) và ở δ H 1.59 (2H, sextet, J=7.38Hz). Phổ 13 C-NMR (125MHz, CDCl 3 ) chỉ ra tín hiệu của 18 carbon, trong đó có một carbon của nhóm carboxylic ở δ C = 194.562 ppm, một carbon của nhóm methylene vị trí α đối với nhóm carboxylic tại δ C = 99.042 ppm, và 16 carbon tại δ C 14.11 (C-18), 22.70 (C-17), 23.43 (C-16), 25.76 (C- 15), 29.06 (C-14), 29.26 (C-13), 29.36 (C-12), 29.48 (C-11), 29.48 (C-10), 29.62 (C-9), 29.66 (C-8), 29.68 (C-7), 29.93(C-6), 38.43(C-5), 43.82 (C-4), 57.23 (C-3). Như vậy phổ NMR của chất (1) phù hợp với phổ của một axit no, mạch dài, phân tử có 18 cacbon là axit stearic. OH O β-sitosterol (2). Tinh thể hình kim màu trắng. Nhiệt độ nóng chảy 135-138 o C. Chất (2) có R f trùng với của β-sitosterol chuẩn trong cùng một điều kiện sắc kí lớp mỏng. Phổ 1 H-NMR (500 MHz, CDCl 3 ) của chất (2) cũng khẳng định cấu trúc này thông qua các pic đặc trưng của proton-carbinol ở δ H 3.68 (1H, m, H-3), proton methin trong vòng ở δ H 5.33 (1H, d, J=5.2 Hz, H-6), sáu nhóm methyl ở δ H 0.96 (3H, d, J=7.0 Hz, H-21), 0.84 (3H, t, J=7.0 Hz, H-26), 0.86 (3H, d, J=8.0 Hz, H-27), 0.88 ( 3H, d, J=7.5 Hz, H-29), 0.76 (3H, s, H-18), 1.03 (3H, s, H-19). Daucosterol (3): Chất rắn màu trắng. Nhiệt độ nóng chảy 283-286 o C. Phân tích phổ 1 H-NMR và 13 C-NMR cho thấy đây là một hợp chất glycoside mà phần aglycone là β-sitosterol (so sánh với chất 2) và phần đường là D-glucose với tín hiệu của proton -anome ở δ H 4.43 (1H, d, J=8.0 Hz) và δ C ở 102.24 ppm; các proton khác của D-glucose nằm trong khoảng δ H 2.04- 2.40 ppm. Phổ của chất (3) cũng tương đồng với phổ chuẩn của β-sitosterol 3-O-β-D- glucopyranoside (daucosterol). Cấu trúc này cũng được khẳng định khi so sánh với daucosterol chuẩn trong cùng một điều kiện sắc kí lớp mỏng. 3,4-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-4-(4'- methoxyphenyl)coumarin (4). Chất (4) là tinh thể màu trắng, kết tinh trong hỗn hợp n- hexane/acetone. Phổ 1 H-NMR (500 MHz, acetone-d 6 ) cho tín hiệu của 4 proton dạng AA’XX’đối xứng của vòng thơm hai lần thế- para, ở δ H 6.8 (2H, dd, J=9.0 và 2.5 Hz, H-3’& H-5’) và 7.07 (2H, dd, J=8.5 và 2.5 Hz, H-2’ & H-6’); 2 proton thơm khác ở vị trí thế metha với nhau ở δ H 6.32 (1H, d, J=2.5 Hz, H-6) và 6.24 (1H, d, J= 2.5 Hz, H-8). Ngoài ra còn có các tín hiệu của một nhóm hydroxyl ở δ H = 8.9 ppm (C 5 ) và 2 nhóm methoxy ở δ H 3.71 và 3.73 ppm (C 4’ & C 7 ), của nhóm metylen ở 2.93 (1H, dd, J=16 & 2.0 Hz, H-3a ) và 3.10 ppm (1H, dd, J=16 &7.0 Hz, H-3b) và của methin gắn với vòng thơm ở 4.57 ppm (1H, t, J=7.0 Hz, H-4). Phổ 13 C-NMR (125 MHz, acetone-d 6 ) cho tín hiệu của 17C, δ C 34.49 (C-4), 37.99 (C-3), 94.42 (C-8), 98.62 (C-6), 106.35 (C-4a), 114.78 (C-3',5'), 128.68 (C-2',6'), 135.12 (C-1'), 154.57 (C-8a), 156.16 (C-5), 159.54 (C-4'), 161.33 (C- 7), 167.96 (C-2). Dựa vào sự phân tích phổ nêu trên, chất (4) phù hợp với cấu tạo 3,4-dihydro-5-hydroxy-7- methoxy-4-(4'-methoxyphenyl)coumarin. O O O OH O 2 3 4 5 6 7 8 1' 4' 3' 2' 5' 4a 8a 6' Chất (4) lần đầu tiên được tìm thấy trong chi Polygonum. Quercetin (5) thu được ở dạng tinh thể màu vàng, nhiệt độ nóng chảy 314-316 0 C. Phổ 1 H- NMR (500 MHz, acetone-d 6 ) cho các tín hiệu của 2 proton vòng thơm ở δ H 6.26 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6) và δ H 6.52 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8) ở vị trí meta với nhau thuộc vòng A. Các proton ở vòng B, tín hiệu ở δ H 7.82 (1H, d, J=2.0 Hz, H- 2’) và ở δ H 7.69 (1H, dd, J=2.0, 8.5 Hz, H-6’) là của 2 proton ở vị trí meta với nhau; proton H- 5’ nằm cạnh H-6’ nên tín hiệu của nó xuất hiện ở δ H 6.99 (1H, d, J=8.5 Hz, H-5’). Phổ 13 C- NMR cho tín hiệu của 15 carbon. Phổ 1 H-NMR và 13 C-NMR của chất (5) tương đồng với các phổ tương ứng của quercetin. Điều này được khẳng định thêm khi so sánh chất (5) cùng với quercetin chuẩn trong cùng một điều kiện sắc kí lớp mỏng. O OH HO OH OH OH O 8 7 6 5 4 3 2 1' 2' 3' 4' 5' 8a 4a Tài liệu tham khảo 1. Đỗ Tất Lợi, Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất bản Y học, (2004), tr 111- 112. 2. Zhang RL , Sun XC, Li WX , WU LJ, Huang J, Sun BH; Isolation and idebtification of chemical constituents of Polygonum perfoliatum; Shenyang Pharm Univ, 2008, 105- 107. 3. Xingzhong Sun, and Albert Sneden; Department of Chemistry, Virginia Commonwealth University, Richmond, Virginia, USA ; Neoflavonoids from Polygonum perfoliatum; Planta Medica, January 12, 1999. 4. WANG Qiong, CHEN Li, TIAN Ying, LI Bin, SUN Qi-Hong, DONG Jun-Xing; Chemical constituents of Polygonum perfoliatum L; Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences l; 2009-03. 5. WANG Ding-yong, LU Jiang-Hong; Chemical constituents in roots of Polygonum perfoliatum L.; Subtropical Plant Science; 2004-02. . phân tử có 18 cacbon là axit stearic. OH O β-sitosterol (2). Tinh thể hình kim màu trắng. Nhiệt độ nóng chảy 135-138 o C. Chất (2) có R f trùng với của β-sitosterol chuẩn trong cùng một. lập một số thành phần từ cây rau má ngọ và nhận dạng chúng là axit stearic (1), β-sitosterol (2), daucosterol (3), 3,4-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-4- (4'methoxyphenyl)-coumarin (4) và. cột, từ cặn chiết n-hexane (rửa giải với hỗn hợp n-hexane/ethyl acetate) thu được chất (1) và (2); từ cặn chiết dichlomethane (rửa giải với hỗn hợp n- hexane/acetone) nhận được chất (3); và