ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1. Tính cấp thiết của đề tài Cây cỏ ngọt (Stevia rebaudiana Bertoni) là cây dược liệu có nguồn gốc xuất xứ ở Paraguay, Brazil, Argentina, được phát hiện từ năm 1908 nhưng chính thức đưa vào trồng năm 1931. Sau đó được trồng ở Canada, Liên Bang Nga, Trung Quốc, Nhật Bản và một số các nước khác, trong đó có Việt Nam. Sản phẩm của cây cỏ ngọt được sự dụng trong y học và trong thực phẩm. Trong y học, nó được dùng như một loại trà cho những người bị bệnh đái tháo đường, người bị bệnh béo phì, cao huyết áp. Trong thực phẩm, cỏ ngọt dùng để pha chế làm tăng độ ngọt của các loại thực phẩm khác nhau, và chế thành các viên đường làm giảm độ nóng khi dùng đường saccarôza. Ngoài ra, người ta còn dùng để chế biến rượu màu, nước hoa quả, các loại bánh kẹo, món tráng miệng đông lạnh, ướp các loại hải sản sấy khô, chế biến dấm…Hiện nay giá cỏ ngọt trên thị trường dao động khoảng 180.000đ/1kg khô mà cỏ ngọt có thể cho thu hoạch quanh năm nhưng tốt nhất vào mùa hè và thời gian thu hoạch ngắn khoảng hai tháng một lần. Do đó, cỏ ngọt có giá trị cao về kinh tế được nhiều người quan tâm đầu tư nghiên cứu và diện tích trồng loại cây này dần tăng lên. Để phục vụ mục đích sản xuất, trước tiên cây giống cần đảm bảo chất lượng tốt đưa năng suất và chất lượng sản phẩm lên cao. Hiện nay, nhân giống vô tính cây cỏ ngọt bằng phương pháp giâm cành đang sử dụng phổ biến, ưu điểm của phương pháp này là cây con giữ nguyên tính trạng của cây mẹ, cây đồng đều thuận tiện quá trình chăm sóc, thu hoạch, thời gian nhân giống tương đối nhanh, hệ số nhân giống cao chu kỳ khai thác ngắn và hiệu quả kinh tế. Tuy nhiên, để cung cấp kịp thời nhanh chóng cây giống có chất lượng tốt cho quá trình sản xuất, đòi hỏi người trồng dược liệu thường xuyên đổi mới và áp dụng các biện pháp kỹ thuật tiên tiến vào trong sản xuất nói chung, cây cỏ ngọt nói riêng. Xuất phát từ thực tế trên, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống và kỹ thuật trồng giống cỏ ngọt Stevia rebaudiana Bertoni tại thành phố Việt Trì – tỉnh Phú Thọ”. 1 1.2. Mục đích của đề tài - Hoàn thành được quy trình nhân giống cây cỏ ngọt bằng kỹ thuật giâm cành. - Trồng thử nghiệm giống cỏ ngọt Stevia rebaudiana Bertoni tại Thành phố Việt Trì – Tỉnh Phú Thọ. 1.3. Yêu cầu của đề tài Đánh giá ảnh hưởng của nồng độ chất kích thích sinh trưởng (NAA) tới nhân giống vô tính cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ. Đánh giá ảnh hưởng của một số chế phẩm phân bón vi sinh tới nhân giống vô tính cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ. Đánh giá ảnh hưởng của một số công thức bón phân tới một số chỉ tiêu sinh trưởng của cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ. 1.4. Ý nghĩa của đề tài - Ý nghĩa khoa học: kết quả nghiên cứu đề tài là cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo về nhân giống các loại cây trồng khác nói chung và cây cỏ ngọt nói riêng, góp phần tạo ra cây giống có chất lượng tốt. - Ý nghĩa thực tiễn: kết quả nghiên cứu đề tài góp phần hình thành quá trình nhân giống cây cỏ ngọt, làm tăng hiệu quả sản xuất cây dược liệu và là tài liệu bổ sung các biện pháp kỹ thuật trong nhân giống vô tính cây cỏ ngọt, phục vụ công tác học tập của sinh viên. 2 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1. Nguồn gốc của cây cỏ ngọt Cây cỏ ngọt thuộc họ Cúc: Asteraceae và thuộc chi: Stevia Cỏ ngọt có nguồn gốc tự nhiên ở vùng Amambay và Iquacu thuộc biên giới Braxin và Paraguay. Theo nhiều tài liệu thì cỏ ngọt có nguồn gốc từ các vùng Nam Mỹ (Brazil, Paraguay, Argentina). Tiếng địa phương gọi là “Cỏ paraguay” hoặc “kahe-e” hoặc “cỏ mật – honey grass”. Gosling (1901), Bertoni (1905), Hemsley (1906) đều cho biết cây cỏ ngọt phân bố nhiều ở Tây Nam nước Mỹ, miền Bắc Argentina, Mexico, Trung Mỹ, Nam Mỹ và Cao nguyên Brazil. Cỏ ngọt không thấy trồng ở Tây Ấn Độ và vùng Amazon. Vào thế kỉ 16, các thủy thủ người Tây Ban Nha đã từng đề cập đến loại thảo mộc này rồi nhưng đến năm 1888 các nhà thực vật học người Paraguay là Mises Santiago Bertoni mới phân loại và chính thức đặt tên gọi nó là Stevia rebaudiana Bertoni [5][7]. 2.2. Đặc điểm thực vật của cây cỏ ngọt 2.2.1. Bộ rễ Cây thực sinh (nhân giống hữu tính), cây có rễ cọc có thể ăn sâu tới 30 cm. Các rễ phụ lan rộng, ít phân nhánh và có bán kính tới 20 cm. Bởi vậy để cây phát triển tốt khi trồng phải lên luống, đảm bảo cho rễ ăn sâu trên tầng đất mặt. Nếu là cây nhân giống vô tính, cây không có rễ cọc, chỉ có rễ chùm nhưng các rễ phát triển khá tốt và cũng có thể ăn sâu như cây thực sinh [2]. 2.2.2. Thân, cành - Thân: Là loại cây thân gỗ nhỏ, trên thân có nhiều lông mềm, chiều cao cây từ 50 - 80 cm. Chiều cao tối đa của thân đạt tới 1,2 m. Đường kính thân biến động từ 0,5 - 0,8 cm. Trên thân có nhiều đốt, vị trí phân đốt đầu tiên cách gốc khoảng 10 cm. Các mắt đốt phía gốc thân có khả năng ra rễ bất định. Trong sản xuất tiến hành thu hoạch khi cây cao 50 - 60 cm. - Cành: Trên cây có 3 cấp cành. Cành cấp 1 phát sinh trước khi cây ra hoa, các cành cấp 2, 3 chỉ phát sinh sau khi cây có nụ và nở hoa [2]. 3 2.2.3. Lá Lá mọc đối theo từng cặp chéo nhau, là loại lá đơn nguyên, có răng cưa, Dạng lá thuôn dài 5 - 7 cm, rộng 1,5 - 2 cm, có 3 gân chính. Mép lá có từ 4 - 6 đôi răng cưa tù, hai mặt lá có lông láng mịn [2]. 2.2.4. Hoa, quả - Hoa: Là loại hoa phức, tập hợp thành cụm hoa đầu màu trắng, là loại hoa lưỡng tính nhưng chủ yếu là giao phấn, tự thụ tỉ lệ thấp. Thời gian nở hoa vào tháng 5 và tháng 9. - Quả: Quả bế, màu nâu đậm, hạt không có nội nhũ, kích thước, trọng lượng hạt rất nhỏ P 1000 hạt = 0,3 - 0,4g. Việc gieo trồng hạt khá khó khăn nên thường được nhân giống vô tính hay nuôi cấy mô [2]. 2.3. Yêu cầu ngoại cảnh của cây cỏ ngọt Là cây trồng của vùng nhiệt đới nên cỏ ngọt thích hợp với khí hậu ôn hoà ít biến động, đồng thời chịu sự chi phối rất lớn của yếu tố ngoại cảnh. 2.3.1. Nhiệt độ Cây cỏ ngọt có thể sinh trưởng, phát triển trong khoảng nhiệt độ từ 10 - 35 0 C. Khi nhiệt độ nhỏ hơn 10 0 C cây sẽ sinh trưởng chậm và nhiệt độ dưới 5 0 C cây sẽ chết. Nhiệt độ trên 35 0 C cây sinh trưởng kém và dễ bị một số loại sâu bệnh xâm nhiễm, khoảng nhiệt độ thích hợp nhất để cây cỏ ngọt sinh trưởng phát triển và thu hái quanh năm là 20 – 25 0 C[2]. 2.3.2. Nước Là cây ưa ẩm nên các vùng có lượng mưa từ 1500 - 2000 mm thuận lợi cho cỏ ngọt sinh trưởng, phát triển. Cây cỏ ngọt là loại ưa ẩm trong suốt quá trình sinh trưởng, phát triển. Tuy là cây ưa ẩm nhưng bộ rễ rất sợ úng vì vậy việc làm đất lên luống đảm bảo tưới và thoát nước tốt. Nếu đảm bảo đủ độ ẩm thì cây sinh trưởng khoẻ cây cho nhiều cành và dài tuổi thọ thân, cành, laù nâng cao năng su ất và số lần thu hoạch lá trong năm. Trong điều kiện khô hạn kéo dài (5 - 7 ngày) cần phải cung cấp đủ nước tưới cho cỏ ngọt. Thường người ta tưới rãnh 2 – 3 giờ thì nước rút hết. Ẩm độ đất thích hợp cho cỏ ngọt vào khoảng 70 – 75 %[2]. 4 2.3.3. Ánh sáng Cỏ ngọt là cây sinh trưởng phát triển tốt nơi có cường độ ámh sáng tương đối mạnh. Khi trồng trọt ở điều kiện Việt Nam cây cho thu hoạch tốt nhất vào các tháng 5, 9,10. Sau tháng 10 do phản ứng với điều kiện ánh sáng ngày ngắn, cây nhanh ra hoa và làm tăng số lần thu hoạch. Trong các tháng mùa đông nếu chăm sóc tốt cây vẫn tiếp tục cho thuhoạch nhưng năng suất thấp. Ở cường độ ánh sáng mạnh hàm lượng Steviozit tăng [2]. 2.3.4. Đất đai và dinh dưỡng Cây cỏ ngọt có thể sinh trưởng trên hầu hết các loại đất, tuy nhiên để trồng đạt năng suất cao, mang lại hiệu quả kinh tế cao thì các loại đất có thành phần cơ giới nhẹ, giàu mùn, có mực nước ngầm thấp, có độ pH từ 6 - 7. Đối tượng thu hoạch của cỏ ngọt là lá và thu hoạch nhiều lứa trong năm nên yêu cầu lượng phân bón khá lớn cả về hữu cơ và vô cơ [2]. 2.4. Tác dụng của cây cỏ ngọt Trong chi Stevia có tới 100 loài nhưng chỉ có cây cỏ ngọt là có hàm lượng glucozit cao nhất và có thể sử dụng trontg y học và công nghệ thực phẩm. Chất chứa trong cỏ ngọt được đặc biệt quan tâm là Steviozit (C 38 H 60 O 18 ) đã tạo nên vị ngọt mà ít có cây trồng nào có được, độ ngọt của Steviozit gấp 300 lần đường Saccarozo và không có tính độc nên có thể dùng Steviozit thay thế đường hoá học trong công nghệ thực phẩm. Theo dược sỹ Lê Trần Đức, cỏ ngọt có tính bình, có tác dụng làm hạ hàm lượng Cholesteron trong máu. Steviozit không làm hại gan, thận, làm mát máu nên chữa được bệnh tiểu đường, bệnh béo phì của phụ nữ, người già và trẻ em. Cỏ ngọt được sử dụng rất đa dạng, lá khô được chế biến thành trà uống, hoặc có thể phối hợp với chè xanh, trà hay nghiền nhỏ thành bột, chế biến thành Xiro[2]. Tinh thể Steviozit được sử dụng trong công nghệ thực phẩm, dược phẩm làm chất bọc các vị thuốc để bảo quản và dễ sử dụng. Năm 1908 Resenack, 1909 Dietrik, 1931 Budel, Lavtille tìm ra hợp chất trong cây cỏ ngọt là Sterviozit, khi bị thuỷ phân nó cho ra 3 phân tử Steviol, Izosteviol. Bằng phương pháp sắc ký bản mỏng người ta đã tìm ra 11 chất khác nhau trong lá cây cỏ ngọt như: 5 Steviozit (C 38 H 60 O 18 ), Steviol biozit, Rebaudiozit (A, B, C, D ). Steviozit có cấu tạo tinh thể hình kim, điểm nóng chảy 202 – 204 0 C, 1g tan trong 800ml nước, chứa trong cây với tỷ lệ cao từ 6 – 7% khối lượng chất khô. Các chất khác trong cây biến động 0,03 - 0,2%. Các chất trong cỏ ngọt không gây hại trên gan, thận của người nên chúng được sử dụng trong công nghệ thực phẩm, trong y học. Nhật Bản đã sử dụng 45 - 55 tấn/năm steviozit trong y học, công nghiệp bánh, kẹo và trong các món ăn đông lạnh. Đặc tính quan trọng của các glucozit này là có thể làm ngọt các thức ăn và đồ uống mà không gây độc hại cho người, gia súc, không đòi hỏi kỹ thuật sản xuất phức tạp, năng suất cao, công nghệ thu hái, chế biến đơn giản. Từ những năm đầu của thế kỷ thứ 20, người dân Paraguay đã biết sử dụng lá cỏ ngọt như một loại nước giải khát [5]. 2.5. Tình hình sản xuất cây cỏ ngọt trên thế giới và ở Việt Nam 2.5.1. Trên thế giới Trên thế giới có rất nhiều nước đã và đang phát triển và sử dụng cây cỏ ngọt bắt đầu được sử dụng rộng rãi ở Nhật Bản. Hàng năm ở Nhật Bản sử dụng từ 45-50 tấn steviozit (tương đương 450 - 500 tấn lá khô). Ở Hàn Quốc dùng 6 - 8 tấn Steviozit/tháng (tương đương 60 - 80 tấn là cỏ ngọt khô). Sản phẩm đường cỏ ngọt ngày càng có uy tín trên thị trường thế giới đặc biệt là Nhật Bản và các nước Đông Nam Á. Các chất cỏ ngọt (glucozit) chiết suất từ lá cỏ ngọt khô được công ty RSIT ở Canađa gọi là “chất ngọt Hoàng gia” bởi tuyệt vời của nó như mô tả của các nhà nghiên cứu, các nhà sản xuất và kinh doanh Nhật Bản, Brazil, Pháp, Mỹ, Inđonêxia và Trung Quốc…. Một số nghiên cứu gần đây, từ cơ sở dữ liệu Medicina đã nêu lên tác dụng của cỏ ngọt trong việc duy trì hàm lượng đường trong máu, cỏ ngọt còn tỏ ra có hiệu quả đối với việc cải thiện chế độ tiêu hoá, điều hoà hoạt động của hệ động mạch và sự chuyển hoá nói chung, tạo ra một sự minh mẫn về trí óc, làm cho giấc ngủ sâu hơn, êm đềm hơn. Hiện nay trên thế giới, trong kết quả nghiên cứu về tính an toàn của các chất phụ gia thực phẩm, người ta đã kiến nghị cấm dùng một số chất ngọt có hại cho người đang có lẫn trong các loại rượu và nước ngọt [8] 6 Bảng 2.1. Tình hình sản xuất và sử dụng cỏ ngọt ở một số nước trên thế giới. Năm Sản lượng (tấn) Nguồn lá cỏ ngọt (tấn) Nhật Bản Hàn Quốc Đài Loan Trung Quốc Các nước khác 2006 1000 300 50 300 300 50 1907 1200 400 50 230 450 70 1908 1800 300 70 330 1000 100 1909 1900 300 70 250 1200 80 1910 2000 300 100 550 1100 50 1911 2200 300 100 250 1300 50 Các nước khác gồm: Paraguay, Brazil, Thái Lan, Malaixia Một số nghiên cứu gần đây, từ cơ sở dữ liệu Medicina đã nêu lên tác dụng của cỏ ngọt trong việc duy trì hàm lượng đường trong máu, cỏ ngọt còn tỏ ra có hiệu quả đối với việc cải thiện chế độ tiêu hoá, điều hoà hoạt động của hệ động mạch và sự chuyển hoá nói chung, tạo ra một sự minh mẫn về trí óc, làm cho giấc ngủ sâu hơn, êm đềm hơn. Hiện nay trên thế giới, trong kết quả nghiên cứu về tính an toàn của các chất phụ gia thực phẩm, người ta đã kiến nghị cấm dùng một số chất ngọt có hại cho người đang có lẫn trong các loại rượu và nước ngọt [5]. 2.5.2. Ở Việt Nam Ở Việt Nam cỏ ngọt được trồng đầu tiên ở trung tâm quỹ gen cây trồng Việt Nam (Văn Điển – Hà Nội). Sau đó được trồng ở viện nghiên cứu cây dược liệu Trung ương, Viện dinh dưỡng quốc gia, Trung tâm giống cây trồng Đà Lạt, Trường đại học nông nghiệp Hà Nội. Sau nhiều năm khảo nghiệm đã xác định cỏ phù hợp với nhiều vùng sinh thái của nước ta. Đến năm 1988 đã được phổ biến trồng tại các tỉnh Hà Nội, Hà Tây, Vĩnh Phú, Thái Bình, Yên Bái, Đắc Lắc, Lâm Đồng, Sông Bé. Năng suất lá khô từ 2 – 2,5 tấn/ha/năm, đạt giá trị 35 – 40 triệu đồng [2]. Hiện nay, cỏ ngọt được trồng rất nhiều và diện tích ngày càng được người dân mở rộng ở huyện Khoái Châu của tỉnh Hưng yên. Điển hình là ở xã An Vĩ thuộc hiện này, là địa phương trồng nhiều cỏ ngọt nhất ở huyện này, diện tích trồng cỏ ngọt đã lên đến gần 25 ha. Gần đây trên địa bàn tỉnh Bắc Giang Công ty Cổ phần Stevia Ventures và Trung tâm Nghiên cứu Giống và Phát triển cây 7 trồng Hà Nội (Viện Dược liệu) phối hợp với Sở Khoa học và Công nghệ Bắc Giang, UBND xã Nội Hoàng (huyện Yên Dũng) đã tổ chức hội nghị triển khai dự án cây cỏ ngọt với kế hoạch là mở rộng diện tích vùng nguyên liệu cỏ ngọt để đáp ứng thị trường xuất khẩu[8]. Ở Nghệ An, Cây cỏ ngọt mới phát triển khoảng 2 năm, được trồng đầu tiên ở xã Nghi Đồng (huyện Nghi Lộc). Nhận thấy đây là loại cây có thể phát triển được ở địa phương, huyện Hưng Nguyên đã chủ động liên hệ với Công ty Á Châu để trồng thí điểm ở xã Hưng Yên Bắc, hiệu quả của cây cỏ ngọt đã được khẳng định, từ chỗ chỉ có vài hộ tham gia trồng sau đã được nhân rộng 25 hộ với khoảng gần 3 ha. Dù trồng trong điều kiện thời tiết không thuận lợi nhưng bình quân mỗi lần thu hoạch khoảng 6 tạ/sào, thậm chí có hộ đạt 9 – 10 tạ/sào, giá trị thu nhập đạt khoảng 3,5 - 4,7 triệu đồng/sào/lứa. Nếu chăm sóc tốt, áp dụng đúng kỹ thuật trồng một lần cỏ ngọt có thể cho thu hoạch 2 năm. Mỗi năm thu hoạch 5 - 6 lứa. Năng suất bình quân từ 10 - 12 tấn lá tươi/ha/năm, lợi nhuận ó thể đạt từ 70 - 90 triệu đồng/ha/năm[9]. 2.5. Cơ sở khoa học của đề tài 2.5.1. Tính toàn năng của tế bào Haberlandt (1902) lần đầu tiên đã quan niệm rằng mỗi tế bà bất kỳ của một cơ thể sinh vật đa bào đều có khả năng tiềm tàng để phát triển thành một cở thể hoàn chỉnh. Theo quan niệm của sinh học hiện đại thì mỗi tế bào riêng rẽ đã phân hóa đều mang toàn bộ lượng thông tin di truyền (bộ AND) tương đương với lượng thông tin di truyền của một cơ thể trưởng thành. Vì vậy, trong điều kiện nhất định mỗi tế bào bất kỳ đều có thể phát triển thành một cá thể hoàn chỉnh. Đặc tính đó của tế bào gọi là tính toàn năng của tế bào. Bất kỳ một tế bào nào cũng có thể hình thành một cây hoàn chỉnh. Đó cũng là cơ sở khoa học của kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào nói chung và kỹ thuật nhân giống vô tính nói riêng. Cho đến nay con người đã hoàn toàn chứng minh được khả năng tái sinh một cơ thể thực vật hoàn chỉnh từ một tế bào riêng rẽ. Tính phân hóa của tế bào là sự biến đổi của các tế bào phôi sinh thành các tế bào của các mô chuyên hóa đảm nhiệm các chức năng khác nhau. Tính phản 8 phân hóa của tế bào là các tế bào khi đã được phân hóa thành các mô riêng biệt với các chức năng khác nhau nhưng trong điều kiện nhất định chúng vẫn có thể quay trở về trạng thái phôi sinh để phân chia tế bào. Trong kỹ thuật nuôi cấy các cơ quan dinh dưỡng của cây như lá, thân…, thì giai đoạn tạo mô sẹo chính là những tế bào đã quay trở về trạng thái phôi sinh có khả năng phân chia liên tục mà mất hẳn chức năng của các cơ quan dinh dưỡng như lá, thân… trước đó[6]. 2.5.2. Sự cân bằng hoocmon trong cây - Cân bằng hoocmon chung: là sự cân bằng của hai tác nhân đối kháng nhau đó là chất kích thích sinh trưởng và chất ức chế sinh trưởng. Ý nghĩa của cân bằng hoocmon chung: + Sự cân bằng chung sẽ điều chỉnh toàn bộ quá trình phát triển cá thể của cây từ giai đoạn nảy mầm cho tới khi kết thúc chu kỳ sống của mình. Tại bất cứ thời điểm nào trong đời sống của cây, ta cũng có thể chỉ ra một tỷ lệ nhất định giữa ảnh hưởng kích thích và ảnh hưởng ức chế. + Việc điều khiển thời gian ra hoa của cây cũng có ý nghĩa là điều khiển cân bằng hoocmon chung trong cây. Người ta có thể cho cây trồng ra hoa sớm hơn (sớm đạt cân bằng giữa các tác nhân kích thích và ức chế) hoặc ngược lại, làm cho cây đạt cân bằng hoocmon này muộn hơn để cây ra hoa quả muộn. Có thể sử dụng các điều kiện ngoại cảnh hoặc các biện pháp kỹ thuật để điều khiển cân bằng hoocmon chung đó của cây theo hướng có lợi cho con người - Cân bằng hoocmon riêng: là sự cân bằng của hai hay vài hoocmon quyết định đến một biểu hiện sinh trưởng nào đó của cây. Sự cân bằng hoocmon riêng có thể được thiết lập giữa các chất kích thích sinh trưởng như sự hình thành rễ hoặc chồi, hiện tượng ưu thế ngọn, sự ngủ nghỉ và nảy mầm, sự chín, sự rụng, sự hình thành củ. Sự hình thành rễ hoặc chồi là do tỷ lệ cân bằng auxin/xytokinin quyết định. Auxin là hoocmon ra rễ, còn xytokinin là hoocmon hình thành chồi. Tỷ lệ cân bằng này sẽ quy định mức độ hình thành rễ và chồi khác nhau trong cây. Hiện tượng ưu thế ngọn được điều chỉnh bởi cân bằng auxin/xytokinin. Auxin được tổng hợp trong đỉnh sinh trưởng và lằm tăng ưu thế ngọn; còn 9 xytokinin thì được tổng hợp trong rễ và làm yếu ưu thế ngọn. Đi từ ngọn xuống rễ, tỷ lệ cân bằng này giảm dần và hiện tượng ưu thế ngọn cũng giảm dần. Sự rụng của cơ quan được điểu chỉnh bởi cân bằng của auxin/ABA + etylen tức do ba hoocmon quyết định. Trong cơ quan sắp rụng thì hàm lượng auxin rất thấp còn hàm lượng ABA và cả etylen rất cao, nên sự hình thành tầng rời được hoạt hóa. Người ta xử lý auxin đề kìm hẵm sự rụng, xử lý ethrel (chất sản sinh etylen) kích thích sự rụng. Ý nghĩa của cân bằng hoocmon riêng: tất cả quá trình sinh trưởng và phát triển của cây được biểu hiện bằng các quá trình phát sinh hình thái riêng biệt trong cây đều được điều chỉnh bằng các cân bằng hoocmon nhất định. Hiểu biết quy luật điều chỉnh hoocmon của các cân bằng riêng này rất có ý nghĩa trong việc điều chỉnh cây trồng theo hướng có lợi cho con người. Hầu hết các ứng dụng của chất điều hòa sinh trưởng đối với cây trồng đều dựa trên các cân bằng hoocmon này[6]. 2.5.3. Cơ sở của việc giâm cành Khi có tác động cắt cành thì auxin sẽ được hình thành một cách nhanh chóng tại đỉnh sinh trưởng và các cơ quan non, sau đó qua hệ thống mạch libe auxin được vận chuyển về phần vết cắt cành chiết, cành giâm để kích thích tạo rễ bất định. Người ta chia sự hình thành rễ bất định làm ba giai đoạn : - Giai đoạn phản phân hoá của tế bào tượng tầng trở lại chức năng phân chia của mô phân sinh tạo khối tế bào bất định (callus). Lượng auxin lớn phản phân hoá tế bào (10 -4 - 10 -5 g/cm 3 ). - Giai đoạn tái phân hoá : các tế bào bất định tái phân hoá hình thành mầm rễ bất định cần lượng auxin thấp hơn (10 -7 g/cm 3 ). - Giai đoạn sinh trưởng của mầm rễ để hình thành rễ bất định. Lượng auxin cần rất thấp (10 -11 - 10 -12 g/cm 3 ) hoặc không cần auxin trong giai đoạn này. Thường sử dụng các chất thuộc nhóm auxin ngoại sinh để kích thích tạo rễ bất định nhanh và hiệu quả trong kỹ thuật giâm chiết cành: IBA, NAA, 2,4D Tùy theo chất sử dụng và loại cây trồng, cũng như tùy vào phương pháp xử lý mà nồng độ sử dụng là khác nhau [6]. 10 [...]... tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu là cây cỏ ngọt (Stevia rebaudiana Bertoni) 3.2 Phạm vi nghiên cứu 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu Tại Trung tâm thực nghiệm khoa Nông - Lâm – Ngư - Trường Đại học Hùng Vương – Việt Trì – Phú Thọ Thời gian thực hiện: từ tháng 1/2013 đến tháng 13/2013 3.2.2 Vật liệu nghiên cứu - Chất kích thích sinh trưởng: NAA, các chế phẩm phân hữu cơ và phân hóa học 3.3 Nội dung nghiên cứu. .. cứu - Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ chất kích thích sinh trưởng (NAA) đến khả năng ra rễ của cây cỏ ngọt - Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chế phẩm phân hữu cơ vi sinh đến sự sinh trưởng của hom cỏ ngọt - Áp dụng quy trình trồng cây cỏ ngọt và nghiên cứu ảnh hưởng của một số công thức bón phân tới các chỉ tiêu sinh trưởng của cây cỏ ngọt trồng tại Việt Trì – Phú Thọ 3.4 Phương pháp nghiên cứu 3.4.1.Phương... nghiên cứu chúng tôi thực hiện trên 4 thí nghiệm về các biện pháp kỹ thuật tác động đến nhân giống cây cỏ ngọt bằng phương pháp giâm cành Các thí nghiệm được bố trí độc lập Hom cỏ ngọt có chiều dài 6cm giâm trên tầng đất B vớii chế độ tưới nước 2 lần/ngày và che sáng bằng lưới đen Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng chất kích thích sinh trưởng (NAA) tới nhân giống vô tính cây cỏ ngọt tại. .. nhân giống vô tính cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ Thí nghiệm được bố trí một khối gồm bốn công thức và ba lần nhắc lại: 13 - Công thức 1 (ĐC): Nhúng hom cỏ ngọt trong nước lã - Công thức 2: Nhúng hom cỏ ngọt trong thuốc kích thích NAA với liều lượng 5mg/l - Công thức 3: Nhúng hom cỏ ngọt trong thuốc kích thích NAA với liều lượng 10mg/ - Công thức 4: Nhúng hom cỏ ngọt trong thuốc kích thích NAA với... ppm và trong môi trường mái che tìm thấy có ý nghĩa như một minh chứng tỷ lệ tối đa của rễ (94,67%) Các nghiên cứu cho thấy hom cây cỏ ngọt có thể được nhân giống thành công cao với nồng độ IBA 500 ppm Trong số các điều kiện môi trường khác nhau, rễ của cành giâm cỏ ngọt thực hiện bằng IBA 500 ppm dưới mái che đã cho kết quả tốt [7] 12 Chương 2 ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU... liệu được xử lý bằng chương trình Excel và phần mềm IRRI STAT 5 Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng (NAA) tới giâm hom cây cỏ ngọt 15 4.1.1 Ảnh hưởng của nồng độ chất kích sinh trưởng (NAA) đến tỷ lệ ra mô sẹo của cành giâm cây cỏ ngọt Chất kích thích sinh trưởng NAA có vai trò quan trọng trong quá trình hình thành rễ, nếu sử dụng NAA đúng... Trắng vàng Vàng sáng Trắng vàng Sau 10 ngày Vàng nâu Vàng Vàng Vàng Qua bảng 4.1 chúng tôi thấy ở CT3 cho tỷ lệ ra mô sẹo cao nhất ở cả hai ngưỡng thời gian: 5 ngày đạt 58,2% và 10 ngày đạt 82.5% và màu sắc của sau 5 ngày là màu trắng vàng và sau 10 ngày có màu vàng tươi Tuy nhiên khi nồng độ NAA tăng lên thì tỉ lệ ra mô sẹo có xu hướng giảm xuống do khi sử dụng với liều lượng quá ngưỡng sẽ ức chế quá trình... sẹo và ảnh hưởng đến quá trình ra rễ của cây cỏ ngọt Thấp nhất là CT1 (ĐC) ở 5 ngày đạt 47.4% và 10 ngày đạt 51.1% 16 4.1.2 Ảnh hưởng của nồng độ chất kích sinh trưởng (NAA) đến tỷ lệ sống, chiều dài rễ trung bình và tổng số rễ trung bình của cành giâm cỏ ngọt Sau khi mô sẹo xuất hiện thì hom cỏ ngọt bắt đầu chuyển sang giai đoạn hình thành rễ Chất kích thích sinh trưởng NAA có vai trò quan trọng và. .. lần 1 Cây cỏ ngọt sau khi trồng khoảng năm ngày bắt đầu có động thái tăng trưởng về chiều cao cây và lúc này cây cần bổ sung một lượng phân bón phù hợp sự phát triển của cây nhằm tăng năng suất cà chất lượng của giống khi thu hoạch bởi sản phẩm thu hoạch của cỏ ngọt là lá và thân cây Chính vì vậy mà chúng tôi tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của một số công thức bón phân tới chiều cao của cây cỏ ngọt ở... của cỏ ngọt chúng tôi đánh giá theo các giai đoạn sinh trưởng như: Trồng ra chồi cấp 1, trồng ra chồi cấp 2 và trồng đến thu hoạch Theo dõi ảnh hưởng của một số công thức bón phân tới thời gian sinh trưởng ở các giai đoạn của cây cỏ ngọt thu được kết quả thể hiện ở bảng 4.7 Bảng 4.7 Ảnh hưởng của một số công thức bón phân tới thời gian sinh trưởng ở các giai đoạn của cây cỏ ngọt Chỉ tiêu Ngày trồng . hành nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống và kỹ thuật trồng giống cỏ ngọt Stevia rebaudiana Bertoni tại thành phố Việt Trì – tỉnh Phú Thọ”. 1 1.2. Mục đích của đề tài - Hoàn thành. tiêu sinh trưởng của cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ. 1.4. Ý nghĩa của đề tài - Ý nghĩa khoa học: kết quả nghiên cứu đề tài là cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo về nhân giống các loại cây trồng. ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1. Tính cấp thiết của đề tài Cây cỏ ngọt (Stevia rebaudiana Bertoni) là cây dược liệu có nguồn gốc xuất xứ