Sàng lọc Bacillus và Trichoderma có hoạt tính kích thích tăng trưởng và kiểm soát sinh học nấm Pythium sp. và Fusarium sp. gây bệnh trên cây hồ tiêu

92 598 0
Sàng lọc Bacillus và Trichoderma có hoạt tính kích thích tăng trưởng và kiểm soát sinh học nấm Pythium sp. và Fusarium sp. gây bệnh trên cây hồ tiêu

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

B GIÁO DC VÀ ÀO TO TRNG I HC M TP. H CHÍ MINH  BÁO CÁO KHÓA LUN TT NGHIP Tên đ tài: SÀNG LC Bacillus VÀ Trichoderma CÓ HOT TÍNH KÍCH THÍCH TNG TRNG VÀ KIM SOÁT SINH HC NM Pythium sp. VÀ Fusarium sp. GÂY BNH TRÊN CÂY H TIÊU KHOA CÔNG NGH SINH HC CHUYÊN NGHÀNH: VI SINH – SINH HC PHÂN T GVHD: Ths. NGUYN THANH THUN Ths. NGUYN VN MINH SVTH: PHM TH THIÊN MSSV: 1053010718 KHÓA: 2010 – 2014 Tp. H Chí Minh, tháng 5 nm 2014 LI CM N   tài này đc thc hin ti phòng thí nghim Công Ngh Vi Sinh, khoa Công Ngh Sinh Hc, Trng i hc M Tp. HCM, di s hng dn ca Ths. Nguyn Thanh Thun và Ths. Nguyn Vn Minh. Kính gi đn hai Thy li tri ân sâu sc nht v s quan tâm, to mi điu kin cng nh s hng dn tn tình đ em có th hoàn thành đ tài tt nghip mt cách tt nh t. Con xin gi li cm n đn gia đình đã thng yêu, quan tâm, chm sóc, đng viên con giúp con có đc nh ngày hôm nay. Xin cm n tt c các bn trong phòng thí nghim Công Ngh Vi Sinh trng i hc M Tp. HCM đã nhit tình và tn tâm giúp đ tôi v mi mt, đng viên và chia s bun vui trong công vic. c bit, em mun bày t lòng cm n đn ch Võ Ngc Yn Nhi và ch Nguyn Th M Linh đã dành thi gian đ quan tâm, đóng góp nhiu ý kin quý báu giúp em hoàn thành đ tài này tt hn. Em cng xin gi li cm n sâu sc đn Quý Thy Cô khoa Công Ngh Sinh Hc trng i hc M Tp. HCM đã truyn đt cho em kin thc quý báu làm nn tng đ thc hin đ tài tt nghip này. Cui cùng, tôi xin cm n tt c bn bè, nhng ngi đã luôn bên cnh, ng h  và chia s vi tôi trong công vic cng nh trong cuc sng và em chúc tt c quý Thy Cô, các bn, và tt c mi ngi xung quanh luôn luôn vui v, hnh phúc trong cuc sng và thành công trong công vic. Xin chân thành cm n! Sinh viên: Phm Th Thiên. KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊN i DANH MC HÌNH NH Hình 1.1 Các dng bào t nm Pythium sp 11 Hình 1.2 Bào t nm Fusarium sp 14 Hình 1.3 Khun lc và hình nhum Gram Bacillus 26 Hình 3.1 Khun lc Pythium mt trc và mt sau 45 Hình 3.2 Nm Pythium nhum lactophenel 45 Hình 3.3 Khun lc Fusarium mt trc và mt sau 46 Hình 3.4 Nm Fusarium nhum lactophenol 47 Hình 3.5 Khun lc vi khun mc trên môi trng Ashby 48 Hình 3.6 Khun lc vi khun mc trên môi trng Pikovskaya 49 Hình 3.7 K t kh th kh nng sinh IAA ca các chng vi khun 49 Hình 3.8 Kt qu đnh tính kháng nm Pythium ca mt s chng Bacillus 50 Hình 3.9 Kt qu đnh tính kháng nm Fusarium ca mt s chng Bacillus 51 Hình 3.10 Kt qu đnh tính kháng Pythium ca Trichoderma mt trc và mt sau 52 Hình 3.11 Kt qu kháng nm Fusarium ca Trichoderma mt trc và mt sau 52 Hình 3.12 Kt qu th nghim kt hp Bacillus và Trichoderma 58 Hình 3.13 Kt qu th đi kháng hai chng F 33 và BD 33 mt trc và mt sau 59 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊN ii DANH MC BIU  Biu đ 3.1 Phn trm c ch nm Pythium ca các chng Bacillus 55 Biu đ 3.2 Phn trm c ch nm Fusarium ca các chng Bacillus 57 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNiii  DANH MC BNG Bng 3.1 Phn trm c ch ca các chng Bacillus đi vi Pythium sp. 53 Bng 3.2 Phn trm c ch ca các chng Bacillus đi vi Fusarium sp. 55 Bng 3.3 Kh nng kháng nm Trichoderma viride ca các chng Bacillus chn lc 57 Bng 3.4 Kt qu đnh danh sinh hóa chng Bacillus sp. F 33 59 Bng 3.5 Kt qu đnh danh sinh hóa chng Bacillus sp. BD 33 60 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNiv  DANH MC T VIT ANOVA One-way analysis of variance CFU Colony forming u IAA Indole Acetic Acid NA Nutren Agar NB Nutren Broth PDA Potato Dextrose Agar nti PTN Phòng Thí nghim SDA Sabouraud Dextrose Agar TSB Trypticase Soy Broth TSB Trypticase Soy Broth MS Minimal Salt KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNv  MC LC DANH MC HÌNH NH I DANH MC BIU  II DANH MC BNG III DANH MC T VIT IV MC LC v T VN  1 CHNG 1: TNG QUAN TÀI LIU 4 1.1. Tng quan v cây h tiêu. 5 1.1.1. Ngun gc và lch s phát trin 5 1.1.2. c tính thc vt hc 5 1.1.3. Tình hình sn xut và tiêu th ht tiêu trên th gii và Vit Nam 6 1.1.4 Mt s bnh thng gp trên tiêu 7 1.2. Tng quan v Pythium sp. và Fusarium sp. 10 1.2.1.Tng quan v Pythium sp. 10 1.2.2. Tng quan v Fusarium sp. 14 1.3. Nm đi kháng Trichoderma viride 15 1.3.1. V trí, phân loi 15 1.3.2. c đim hình thái 16 1.3.3.  c đim sinh lý, sinh hóa 17 1.3.4. C ch và kh nng đi kháng ca nm Trichoderma viride 18 1.3.5. Mt s nghiên cu ng dng vi nm Trichoderma viride 20 1.4. Vi khun Bacillus 23 1.4.1. Hình dng và kích thc 24 1.4.2. Dinh dng và tng trng 24 1.4.3. Sinh sn 25 1.4.4. Cht kháng nm do Bacillus tit ra 25 CHNG 2: VT LIU VÀ PHNG PHÁP 27 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNvi  2.1. Thi gian và đa đim nghiên cu 28 2.2. Vt liu 28 2.3. Dng c và thit b 28 2.4. Hóa cht, thuc nhum 29 2.5. Môi trng 29 2.6. Phng pháp nghiên cu 29 2.6.1. Phân lp nm bnh 29 2.6.2. Xác đnh mt s hot tính kích thích tng trng cây trng ca các chng Bacillus 30 2.6.3. Kho sát kh nng đi kháng nm bnh Pythium và Fusarium ca các chng Bacillus 31 2.6.4. nh tính kh  nng kháng nm Pythium và Fusarium ca nm đi kháng Trichoderma viride 33 2.6.5. Kho sát kh nng kt hp ca Trichoderma viride và các chng Bacillus34 2.6.6. Th kh nng tng thích các chng Bacillus có hot tính kháng nm cao nht bng phng pháp cy vch vuông góc 35 2.6.7. nh danh 35 2.6.8. Phng pháp thng kê s liu 42 CHNG 3: KT QU VÀ THO LUN 43 3.1. Kt qu phân lp nm bnh. 44 3.1.1. Kt qu phân lp nm Pythium 44 3.1.2. Kt qu phân lp nm Fusarium 45 3.2. Kt qu xác đnh hot tính kích thích tng trng cây trng ca các chng Bacillus 46 3.3. Kt qu đnh tính kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca các chng Bacillus. 50 3.3.1. Kt qu đnh tính kh nng kháng nm Pythium ca các chng Bacillus50 3.3.2. Kt qu đnh tính kh nng kháng nm Fusarium ca các chng Bacillus50 3.4. Kt qu xác đnh kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca nm đi kháng Trichodermav viride 51 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNvii  3.4.1. Kt qu xác đnh kh nng kháng nm Pythium ca nm đi kháng Trichoderma viride 51 3.4.2. Kt qu xác đnh kh nng kháng nm Fusarium ca nm đi kháng Trichoderma viride 51 3.5. Kt qu đnh lng kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca các chng Bacillus 52 3.6. Kt qu thc nghim kt hp Trichoderma viride và Bacillus 56 3.7. Kt qu th nghim kh  nng tng thích gia các chng Bacillus đc la chn. 57 3.8. Kt qu đnh danh sinh hóa 58 CHNG 4. KT LUN VÀ  NGH 61 4.1. Kt lun 61 4.2. Kin ngh 61 TÀI LIU THAM KHO. 63 PH LC: 67 KHÓA LUN TT NGHIP T VN  SVTH: PHM TH THIÊN1 T VN  [...]... tr ng [22, 30] Xu t phát t nh ng lý do trên chúng tôi th c hi n Trichoderma có ho t tính kích thích t ng tr tài: Sàng l c Bacillus và ng và ki m soát sinh h c n m Pythium sp và Fusarium sp gây b nh trên h tiêu , nh m sàng l c Bacillus và Trichoderma có kh n ng Fusarium sp Trong i kháng sinh h c v i ch ng n m Pythium sp và ng th i có kh n ng kích thích t ng tr ng cây tr ng tài này, chúng tôi th c hi... ó, nhi u ch ng Bacillus ã c báo cáo có kh n ng ki m soát sinh h c m t s lo i b nh cây tr ng [22, 29, 30], do có th s n xu t các h p ch t kháng n m, kháng khu n a d ng [26], h at tính kích thích t ng tr ng th i có ng cây tr ng (PGR) [12] Trên th gi i ã có m t s nghiên c u cho th y Trichoderma và Bacillus có kh n ng ki m soát sinh h c m t s ch ng n m c ng nh kh n ng kích thích t ng tr ng cây tr ng [22,... nh Pythium sp và n m b nh Fusarium sp - nh tính các ho t tính kích thích t ng tr ng cây tr ng (c tan lân và sinh IAA) c a b s u t p các ch ng Bacillus ngh vi sinh, khoa Công ngh sinh h c, tr - Xác ng nh m, hòa c cung c p t PTN Công i H c M , tp H Chí Minh nh kh n ng kháng n m Pythium sp và Fusarium sp c a các ch ng Bacillus th nghi m - Xác nh kh n ng kháng n m Pythium sp và n m Fusarium sp c a n m Trichoderma. .. Piperraceae có ngu n g c t Tây nam vùng Ghats và Assam, m c hoang trong r ng, s d ng u tiên và cho r ng vi c phát hi n là r t quý giá cây tiêu m i tiêu ã tr ng c ng i n n phát hi n, u th k th XIII, c tr ng r ng rãi và s d ng trong b a n hàng ngày Lúc này, cây c tr ng c Indonesia và Malaysia n th k th XVIII, cây tiêu Sri và Campuchia Vào th k th XX thì cây tiêu Phi và Châu M n c ta, cây tiêu xâm chi... Collectotrichun sp gây ra B nh làm cây ng ng phát tri n, các lá trên cùng úa vàng, trên lá và trái non xu t hi n nh ng ch m ch m và m en làm cho lá và trái r ng s m Cây b m t s c suy y u.[3] 1.1.4.3 B nh ch t ch m trên cây h tiêu Tác nhân gây b nh - Do n m Fusarium sp., nh ng trong nhi u tr ng h p là s k t h p v i các n m khác nh Pythium sp., Lasiodiplodia, Rhizoctonia các lo i n m này t n công vào các r non,... trùng gây nên, c bi t là do tuy t trùng làm th i r , g c cây gây hi n t ng ch t ch m trên cây tiêu. [36] - N m t n t i hàng n m h uc , t chua, t có trong t, phát sinh, phát tri n trong t bón ít phân PH th p.[35] Tri u ch ng gây h i - Cây tiêu có bi u hi n sinh tr r ng d n t d ng ch m, lá úa vàng Lá, hoa, các i g c lên ng n, ch không r ng và héo t t và trái t xu ng nh b nh ch t nhanh G c, thân cây b nh có. .. hay bào t vách d y r t b n và t n t i c l p trong th i gian dài M t vài loài Fusarium gây b nh héo lá trên các cây ch F udum gây b nh trên u s n Cajanus cajan F.oxysporum bv licopersici gây b nh trên cà chua Lycospersicon esculentum F.lini gây b nh trên cây lanh Linum usitatissimum F.solani gây b nh trên khoai tây Solanum tuberosum F orthaceras gây b nh trên B nh th i r trên B nh ch t ch m 1.3 N m... m Trichoderma c s n xu t và s d ng nh là ch t ki m soát sinh h c m t cách có hi u qu ; có th s d ng riêng bi t ho c ph i tr n v i phân h u c bón cho cây tr ng, v a cung c p dinh d ng cho cây, v a t ng kh n ng kháng b nh c a cây [33] Ngu n gen s d ng trong chuy n gen Nhi u vi sinh v t ki m soát sinh h c u có ch a m t s l ng l n gen mã hóa các s n ph m có ho t tính c n thi t s d ng trong ki m soát sinh. .. sinh ho c ký sinh trên nhi u cây tr ng, cây n trái và rau Nó là nguyên nhân chính làm héo r cây ch H s i n m lan to kh p mô m ch và l p kín m ch g S l p m ch g s c n tr quá trình chuy n v n n vách ng n, s i n m th sinh c làm héo cây, Fusarium có h s i n m phân nhánh, có ng không màu, chuy n màu nâu khi già H s i n m s n c t ti t vào h m ch d n cây ch gây héo r , nhi u loài th c v t b Fusarium t n... (2007), Bai (2008) và Savazzini (2009) Trichoderma tr ng t ng tr ã cho r ng: c xem là tác nhân ki m soát sinh h c ti m n ng và thúc y cây ng C nh tranh v i các tác nhân gây b nh, ký sinh trùng và s n xu t các h p ch t kháng n m là c ch quan tr ng nh t trong vi c ki m soát sinh h c [23] Theo Harman (1996), n m Trichoderma có nhi u c ch i kháng: c ch ký sinh lên n m b nh, c ch ti t kháng sinh, c ch c nh . sp. và Fusarium sp. gây bnh trên h tiêu , nhm sàng lc Bacillus và Trichoderma có kh nng đi kháng sinh hc vi chng nm Pythium sp. và Fusarium sp. đng th i có kh nng kích thích tng. trng cây trng [22, 30] Xut phát t nhng lý do trên chúng tôi thc hin đ tài: Sàng lc Bacillus và Trichoderma có hot tính kích thích tng trng và kim soát sinh hc nm Pythium sp. và. trng tiêu có th thu lãi 200- 250 triu/ ha/ nm.[35] Bnh cht chm (do Pythium spp, Fusarium ssp….) trên cây h tiêu là mt trong nhng bnh rt nguy him gây hi cho cây h tiêu, gây mt

Ngày đăng: 24/11/2014, 01:40

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan