Thông tin tài liệu
B GIÁO DC VÀ ÀO TO TRNG I HC M TP. H CHÍ MINH BÁO CÁO KHÓA LUN TT NGHIP Tên đ tài: SÀNG LC Bacillus VÀ Trichoderma CÓ HOT TÍNH KÍCH THÍCH TNG TRNG VÀ KIM SOÁT SINH HC NM Pythium sp. VÀ Fusarium sp. GÂY BNH TRÊN CÂY H TIÊU KHOA CÔNG NGH SINH HC CHUYÊN NGHÀNH: VI SINH – SINH HC PHÂN T GVHD: Ths. NGUYN THANH THUN Ths. NGUYN VN MINH SVTH: PHM TH THIÊN MSSV: 1053010718 KHÓA: 2010 – 2014 Tp. H Chí Minh, tháng 5 nm 2014 LI CM N tài này đc thc hin ti phòng thí nghim Công Ngh Vi Sinh, khoa Công Ngh Sinh Hc, Trng i hc M Tp. HCM, di s hng dn ca Ths. Nguyn Thanh Thun và Ths. Nguyn Vn Minh. Kính gi đn hai Thy li tri ân sâu sc nht v s quan tâm, to mi điu kin cng nh s hng dn tn tình đ em có th hoàn thành đ tài tt nghip mt cách tt nh t. Con xin gi li cm n đn gia đình đã thng yêu, quan tâm, chm sóc, đng viên con giúp con có đc nh ngày hôm nay. Xin cm n tt c các bn trong phòng thí nghim Công Ngh Vi Sinh trng i hc M Tp. HCM đã nhit tình và tn tâm giúp đ tôi v mi mt, đng viên và chia s bun vui trong công vic. c bit, em mun bày t lòng cm n đn ch Võ Ngc Yn Nhi và ch Nguyn Th M Linh đã dành thi gian đ quan tâm, đóng góp nhiu ý kin quý báu giúp em hoàn thành đ tài này tt hn. Em cng xin gi li cm n sâu sc đn Quý Thy Cô khoa Công Ngh Sinh Hc trng i hc M Tp. HCM đã truyn đt cho em kin thc quý báu làm nn tng đ thc hin đ tài tt nghip này. Cui cùng, tôi xin cm n tt c bn bè, nhng ngi đã luôn bên cnh, ng h và chia s vi tôi trong công vic cng nh trong cuc sng và em chúc tt c quý Thy Cô, các bn, và tt c mi ngi xung quanh luôn luôn vui v, hnh phúc trong cuc sng và thành công trong công vic. Xin chân thành cm n! Sinh viên: Phm Th Thiên. KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊN i DANH MC HÌNH NH Hình 1.1 Các dng bào t nm Pythium sp 11 Hình 1.2 Bào t nm Fusarium sp 14 Hình 1.3 Khun lc và hình nhum Gram Bacillus 26 Hình 3.1 Khun lc Pythium mt trc và mt sau 45 Hình 3.2 Nm Pythium nhum lactophenel 45 Hình 3.3 Khun lc Fusarium mt trc và mt sau 46 Hình 3.4 Nm Fusarium nhum lactophenol 47 Hình 3.5 Khun lc vi khun mc trên môi trng Ashby 48 Hình 3.6 Khun lc vi khun mc trên môi trng Pikovskaya 49 Hình 3.7 K t kh th kh nng sinh IAA ca các chng vi khun 49 Hình 3.8 Kt qu đnh tính kháng nm Pythium ca mt s chng Bacillus 50 Hình 3.9 Kt qu đnh tính kháng nm Fusarium ca mt s chng Bacillus 51 Hình 3.10 Kt qu đnh tính kháng Pythium ca Trichoderma mt trc và mt sau 52 Hình 3.11 Kt qu kháng nm Fusarium ca Trichoderma mt trc và mt sau 52 Hình 3.12 Kt qu th nghim kt hp Bacillus và Trichoderma 58 Hình 3.13 Kt qu th đi kháng hai chng F 33 và BD 33 mt trc và mt sau 59 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊN ii DANH MC BIU Biu đ 3.1 Phn trm c ch nm Pythium ca các chng Bacillus 55 Biu đ 3.2 Phn trm c ch nm Fusarium ca các chng Bacillus 57 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNiii DANH MC BNG Bng 3.1 Phn trm c ch ca các chng Bacillus đi vi Pythium sp. 53 Bng 3.2 Phn trm c ch ca các chng Bacillus đi vi Fusarium sp. 55 Bng 3.3 Kh nng kháng nm Trichoderma viride ca các chng Bacillus chn lc 57 Bng 3.4 Kt qu đnh danh sinh hóa chng Bacillus sp. F 33 59 Bng 3.5 Kt qu đnh danh sinh hóa chng Bacillus sp. BD 33 60 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNiv DANH MC T VIT ANOVA One-way analysis of variance CFU Colony forming u IAA Indole Acetic Acid NA Nutren Agar NB Nutren Broth PDA Potato Dextrose Agar nti PTN Phòng Thí nghim SDA Sabouraud Dextrose Agar TSB Trypticase Soy Broth TSB Trypticase Soy Broth MS Minimal Salt KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNv MC LC DANH MC HÌNH NH I DANH MC BIU II DANH MC BNG III DANH MC T VIT IV MC LC v T VN 1 CHNG 1: TNG QUAN TÀI LIU 4 1.1. Tng quan v cây h tiêu. 5 1.1.1. Ngun gc và lch s phát trin 5 1.1.2. c tính thc vt hc 5 1.1.3. Tình hình sn xut và tiêu th ht tiêu trên th gii và Vit Nam 6 1.1.4 Mt s bnh thng gp trên tiêu 7 1.2. Tng quan v Pythium sp. và Fusarium sp. 10 1.2.1.Tng quan v Pythium sp. 10 1.2.2. Tng quan v Fusarium sp. 14 1.3. Nm đi kháng Trichoderma viride 15 1.3.1. V trí, phân loi 15 1.3.2. c đim hình thái 16 1.3.3. c đim sinh lý, sinh hóa 17 1.3.4. C ch và kh nng đi kháng ca nm Trichoderma viride 18 1.3.5. Mt s nghiên cu ng dng vi nm Trichoderma viride 20 1.4. Vi khun Bacillus 23 1.4.1. Hình dng và kích thc 24 1.4.2. Dinh dng và tng trng 24 1.4.3. Sinh sn 25 1.4.4. Cht kháng nm do Bacillus tit ra 25 CHNG 2: VT LIU VÀ PHNG PHÁP 27 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNvi 2.1. Thi gian và đa đim nghiên cu 28 2.2. Vt liu 28 2.3. Dng c và thit b 28 2.4. Hóa cht, thuc nhum 29 2.5. Môi trng 29 2.6. Phng pháp nghiên cu 29 2.6.1. Phân lp nm bnh 29 2.6.2. Xác đnh mt s hot tính kích thích tng trng cây trng ca các chng Bacillus 30 2.6.3. Kho sát kh nng đi kháng nm bnh Pythium và Fusarium ca các chng Bacillus 31 2.6.4. nh tính kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca nm đi kháng Trichoderma viride 33 2.6.5. Kho sát kh nng kt hp ca Trichoderma viride và các chng Bacillus34 2.6.6. Th kh nng tng thích các chng Bacillus có hot tính kháng nm cao nht bng phng pháp cy vch vuông góc 35 2.6.7. nh danh 35 2.6.8. Phng pháp thng kê s liu 42 CHNG 3: KT QU VÀ THO LUN 43 3.1. Kt qu phân lp nm bnh. 44 3.1.1. Kt qu phân lp nm Pythium 44 3.1.2. Kt qu phân lp nm Fusarium 45 3.2. Kt qu xác đnh hot tính kích thích tng trng cây trng ca các chng Bacillus 46 3.3. Kt qu đnh tính kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca các chng Bacillus. 50 3.3.1. Kt qu đnh tính kh nng kháng nm Pythium ca các chng Bacillus50 3.3.2. Kt qu đnh tính kh nng kháng nm Fusarium ca các chng Bacillus50 3.4. Kt qu xác đnh kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca nm đi kháng Trichodermav viride 51 KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC SVTH: PHM TH THIÊNvii 3.4.1. Kt qu xác đnh kh nng kháng nm Pythium ca nm đi kháng Trichoderma viride 51 3.4.2. Kt qu xác đnh kh nng kháng nm Fusarium ca nm đi kháng Trichoderma viride 51 3.5. Kt qu đnh lng kh nng kháng nm Pythium và Fusarium ca các chng Bacillus 52 3.6. Kt qu thc nghim kt hp Trichoderma viride và Bacillus 56 3.7. Kt qu th nghim kh nng tng thích gia các chng Bacillus đc la chn. 57 3.8. Kt qu đnh danh sinh hóa 58 CHNG 4. KT LUN VÀ NGH 61 4.1. Kt lun 61 4.2. Kin ngh 61 TÀI LIU THAM KHO. 63 PH LC: 67 KHÓA LUN TT NGHIP T VN SVTH: PHM TH THIÊN1 T VN [...]... tr ng [22, 30] Xu t phát t nh ng lý do trên chúng tôi th c hi n Trichoderma có ho t tính kích thích t ng tr tài: Sàng l c Bacillus và ng và ki m soát sinh h c n m Pythium sp và Fusarium sp gây b nh trên h tiêu , nh m sàng l c Bacillus và Trichoderma có kh n ng Fusarium sp Trong i kháng sinh h c v i ch ng n m Pythium sp và ng th i có kh n ng kích thích t ng tr ng cây tr ng tài này, chúng tôi th c hi... ó, nhi u ch ng Bacillus ã c báo cáo có kh n ng ki m soát sinh h c m t s lo i b nh cây tr ng [22, 29, 30], do có th s n xu t các h p ch t kháng n m, kháng khu n a d ng [26], h at tính kích thích t ng tr ng th i có ng cây tr ng (PGR) [12] Trên th gi i ã có m t s nghiên c u cho th y Trichoderma và Bacillus có kh n ng ki m soát sinh h c m t s ch ng n m c ng nh kh n ng kích thích t ng tr ng cây tr ng [22,... nh Pythium sp và n m b nh Fusarium sp - nh tính các ho t tính kích thích t ng tr ng cây tr ng (c tan lân và sinh IAA) c a b s u t p các ch ng Bacillus ngh vi sinh, khoa Công ngh sinh h c, tr - Xác ng nh m, hòa c cung c p t PTN Công i H c M , tp H Chí Minh nh kh n ng kháng n m Pythium sp và Fusarium sp c a các ch ng Bacillus th nghi m - Xác nh kh n ng kháng n m Pythium sp và n m Fusarium sp c a n m Trichoderma. .. Piperraceae có ngu n g c t Tây nam vùng Ghats và Assam, m c hoang trong r ng, s d ng u tiên và cho r ng vi c phát hi n là r t quý giá cây tiêu m i tiêu ã tr ng c ng i n n phát hi n, u th k th XIII, c tr ng r ng rãi và s d ng trong b a n hàng ngày Lúc này, cây c tr ng c Indonesia và Malaysia n th k th XVIII, cây tiêu Sri và Campuchia Vào th k th XX thì cây tiêu Phi và Châu M n c ta, cây tiêu xâm chi... Collectotrichun sp gây ra B nh làm cây ng ng phát tri n, các lá trên cùng úa vàng, trên lá và trái non xu t hi n nh ng ch m ch m và m en làm cho lá và trái r ng s m Cây b m t s c suy y u.[3] 1.1.4.3 B nh ch t ch m trên cây h tiêu Tác nhân gây b nh - Do n m Fusarium sp., nh ng trong nhi u tr ng h p là s k t h p v i các n m khác nh Pythium sp., Lasiodiplodia, Rhizoctonia các lo i n m này t n công vào các r non,... trùng gây nên, c bi t là do tuy t trùng làm th i r , g c cây gây hi n t ng ch t ch m trên cây tiêu. [36] - N m t n t i hàng n m h uc , t chua, t có trong t, phát sinh, phát tri n trong t bón ít phân PH th p.[35] Tri u ch ng gây h i - Cây tiêu có bi u hi n sinh tr r ng d n t d ng ch m, lá úa vàng Lá, hoa, các i g c lên ng n, ch không r ng và héo t t và trái t xu ng nh b nh ch t nhanh G c, thân cây b nh có. .. hay bào t vách d y r t b n và t n t i c l p trong th i gian dài M t vài loài Fusarium gây b nh héo lá trên các cây ch F udum gây b nh trên u s n Cajanus cajan F.oxysporum bv licopersici gây b nh trên cà chua Lycospersicon esculentum F.lini gây b nh trên cây lanh Linum usitatissimum F.solani gây b nh trên khoai tây Solanum tuberosum F orthaceras gây b nh trên B nh th i r trên B nh ch t ch m 1.3 N m... m Trichoderma c s n xu t và s d ng nh là ch t ki m soát sinh h c m t cách có hi u qu ; có th s d ng riêng bi t ho c ph i tr n v i phân h u c bón cho cây tr ng, v a cung c p dinh d ng cho cây, v a t ng kh n ng kháng b nh c a cây [33] Ngu n gen s d ng trong chuy n gen Nhi u vi sinh v t ki m soát sinh h c u có ch a m t s l ng l n gen mã hóa các s n ph m có ho t tính c n thi t s d ng trong ki m soát sinh. .. sinh ho c ký sinh trên nhi u cây tr ng, cây n trái và rau Nó là nguyên nhân chính làm héo r cây ch H s i n m lan to kh p mô m ch và l p kín m ch g S l p m ch g s c n tr quá trình chuy n v n n vách ng n, s i n m th sinh c làm héo cây, Fusarium có h s i n m phân nhánh, có ng không màu, chuy n màu nâu khi già H s i n m s n c t ti t vào h m ch d n cây ch gây héo r , nhi u loài th c v t b Fusarium t n... (2007), Bai (2008) và Savazzini (2009) Trichoderma tr ng t ng tr ã cho r ng: c xem là tác nhân ki m soát sinh h c ti m n ng và thúc y cây ng C nh tranh v i các tác nhân gây b nh, ký sinh trùng và s n xu t các h p ch t kháng n m là c ch quan tr ng nh t trong vi c ki m soát sinh h c [23] Theo Harman (1996), n m Trichoderma có nhi u c ch i kháng: c ch ký sinh lên n m b nh, c ch ti t kháng sinh, c ch c nh . sp. và Fusarium sp. gây bnh trên h tiêu , nhm sàng lc Bacillus và Trichoderma có kh nng đi kháng sinh hc vi chng nm Pythium sp. và Fusarium sp. đng th i có kh nng kích thích tng. trng cây trng [22, 30] Xut phát t nhng lý do trên chúng tôi thc hin đ tài: Sàng lc Bacillus và Trichoderma có hot tính kích thích tng trng và kim soát sinh hc nm Pythium sp. và. trng tiêu có th thu lãi 200- 250 triu/ ha/ nm.[35] Bnh cht chm (do Pythium spp, Fusarium ssp….) trên cây h tiêu là mt trong nhng bnh rt nguy him gây hi cho cây h tiêu, gây mt
Ngày đăng: 24/11/2014, 01:40
Xem thêm: Sàng lọc Bacillus và Trichoderma có hoạt tính kích thích tăng trưởng và kiểm soát sinh học nấm Pythium sp. và Fusarium sp. gây bệnh trên cây hồ tiêu, Sàng lọc Bacillus và Trichoderma có hoạt tính kích thích tăng trưởng và kiểm soát sinh học nấm Pythium sp. và Fusarium sp. gây bệnh trên cây hồ tiêu