B GIÁO DC VÀ ÀO TO TRNG I HC M TP.HCM BÁOăCÁOăKHÓAăLUN TTăNGHIP  TÀI: Tp. H Chí Minh, tháng 5 nm 2014 KHOA:ăCÔNGăNGHăSINHăHC CHUYÊN NGÀNH: VI SINH-SINHăHCăPHỂNăT CBHD: TS.BSăVăBOăCHỂU SVTH:ăTRNăTHăPHNG MSSV: 1053012602 KHÓA: 2010-2014 KHO SÁT KH NNG GÂY NHIM KHUN VÀ  KHÁNG KHÁNG SINH CA STAPHYLOCOCCUS AUREUS TRÊN BNH NHÂN NGOI KHOA TI BNH VIN 175 T THÁNG 07/2013 N THÁNG 04/2014 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng LI CMăN Xin chân thành cmănăthyăVăBo Châu ậ Trng khoa Vi sinh vt, Bnh vin 175 cùng toàn th các cô chú, các anh ch cán b công nhân viên bnh vin 175ăđưătnătìnhăhng dn,ăgiúpăđ, cung cp nhng kin thc quý báu cho em trong quá trình thc tp. Em xin chân thành cmănăquỦăthy cô trong Khoa Công ngh Sinh hc, trng đi hc M TP. H ChíăMinhăđưănhit tình ging dy, truynăđt nhng kin thcăquỦăbáuăđ em có th thc hin hoàn thành bài báo cáo này. Con xin cmănăchaăm luôn bên cnh c v,ăđng viên, ng h , dìu dt conăđ con có th t tinăbcăvƠoăđi. Cmănănhngăngi bn tt caătôiăđưăluônăđngăhƠnh,ăgiúpăđ, s chia cùng tôi trong quá trình sng và hc tp. Xin chân thành cmăn! Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng DANH MC VIT TT S. aureus Staphylococcus aureus MRSA Methycillin-Resistant Staphylococcus aureus SSI Surgical site infection NNIS National Nosocomial Infection Surveilance FAME Fatty acid modifying enzyme AMR Antimicrobial Resistance NCCLS National Committee for Clinical Laboratory Standards R Resistantă( kháng) I Intermediate (Trung gian) S Susceptible (Nhy cm) Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng DANH MC HÌNH NH Hình 1. 1. T l các chng MRSA phân lp đc ti các bnh vin  M Latinh và vùng bin Caribe nm 2007. 8 Hình 1. 2. T l đ kháng mt s kháng sinh tiêu biu không phi beta-lactams ca MRSA so vi MSSA 10 Hình 1. 3. Hình thái Staphylococcus aureus trên kính hin vi đin t 12 Hình 2. 1 Máy đo nng đ Mc Farland 23 Hình 2. 2. T m 24 Hình 2. 3. M, dch trên  abcess. 26 Hình 2. 4. Hình thái khun lc S. aureus. 28 Hình 2. 5. Staphylococcus aureus trên kính hin vi vt kính du x100. 28 Hình 2. 6. Kh nng tan huyt ca S. aureus trên môi trng BA 29 Hình 2. 7. S. aureus trên môi trng Chapman. 29 Hình 2. 8. Phn ng coagulase 30 Hình 2. 9. Phn ng catalase 30 Hình 2. 10. Kháng sinh đ S. aureus 33 Hình 3. 1. M dch trên vt thng hoi t. 34 Hình 3. 2. Hình thái khun lc S. aureus trên môi trng Uri Select 4 34 Hình 3. 3. Kh nng tiêu huyt ca S. aureus trên môi trng BA 35 Hình 3. 4. Hình thái vi khun S. aureus di kính hin vi, vt kính x100 35 Hình 3. 5. Phn ng coagulase 36 Hình 3. 6. S. aureus trên môi trng Chapman. 36 Hình 3. 7. Kháng sinh đ S. aureus 37 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng DANH MCăSă S đ 2. 1. Quy trình nuôi cy, phân lp và đnh danh S. aureus 27 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng DANH MC BNG Bng 2. 1. Chun mc bin lun đng kính vòng vô khun ca S. aureus 33 Bng 3. 2. T l các loài vi khun phân lp đc trên vt thng, vt m 38 Bng 3. 3. T l nhim khun S. aureus theo loi bnh lý 39 Bng 3. 4. T l nhim khun S. aureus theo tui và gii tính 40 Bng 3. 5. Mi liên quan gia thi gian nm vin và t l nhim khun S. aureus trên vt thng, vt m. 41 Bng 3. 6. Mi liên quan gia tin s sc khe đi vi t l nhim khun S. aureus trên bnh nhân ngoi khoa 42 Bng 3. 7. T l đ kháng kháng sinh ca S. aureus 44 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng DANH MC BIUă Biu đ 1. 1. T l các loài vi khun phân lp đc trên vt m, vt thng. 38 Biu đ 1. 2. T l nhim khun S. aureus theo bnh lý 39 Biu đ 1. 3. T l nhim khun S. aureus theo đ tui và gii tính 40 Biu đ 1. 4. Mi liên quan gia thi gian nm vin và t l nhim khun S.aureus trên vt thng, vt m. 41 Biu đ 1. 5. Mi liên quan gia tin s sc khe đi vi t l nhim khun S.aureus trên bnh nhân ngoi khoa. 43 Biu đ 1. 6. T l đ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus. 44 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng MC LC T VN  1 CHNG I: TNG QUAN 3 1. KHÁI QUÁT: 3 1.1. Nhim khun và nhim khun vt thng, vt m (nhim khun ngoi khoa) 3 1.2. Tình hình gây bnh ca Staphylococcus aureus trên vt thng, vt m trên th gii và ti Vit Nam 4 1.2.1. Trên th gii 4 1.2.2. Ti Vit Nam 5 1.3. Tình hình đ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus 7 1.3.1. Trên th gii 7 1.3.2. Ti Vit Nam 9 2. CăIM SINH HC CA STAPHYLOCOCCUS AUREUS 10 2.1. Gii thiu chung v Staphylococcus aureus 10 2.2. Phân loi 13 2.2.1. DaăvƠoăkhángănguyên: 13 2.2.2. DaăvƠoăphage: 13 2.3. Các yu t đc lc: 13 2.3.1. Các kháng nguyên: 13 2.3.2. Cácăyuătăxơmăln: 14 2.3.3. Căchăgơyăbnh 17 3. KHÁNG SINH 17 3.1. Khái nim 17 3.2. Phân loi 18 3.3. C ch tác đng 19 3.4. S đ kháng kháng sinh ca vi khun 19 3.5. C ch đ kháng kháng sinh ca S. aureus 21 CHNG II: I TNG, VT LIU VÀ PHNG PHÁP NGHIÊN CU 23 1. THIăGIANăVẨăAăIM THC HIN 23 2. IăTNG NGHIÊN CU 23 3. TRANG THIT B 23 4. VT LIU VÀ HÓA CHT: 24 5. PHNGăPHÁPăNGHIểNăCU 24 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu SVTH: Trn Th Phng 6. K THUT NGHIÊN CU 25 6.1. Phng pháp kho sát trc tip (nhum Gram) 25 6.2. Phng pháp cy phân lp 26 6.2.1. Nguyên tc 26 6.2.2. Cách ly bnh phm 26 6.2.3. X lý bnh phm, nuôi cy và phân lp. 27 6.2.4. nh danh 28 7. KHÁNGăSINHăăTHEOăPHNGăPHÁPăKIRBY-BAUER 31 7.1. Nguyên tc: 31 7.2. Vt liu – Phng pháp 31 7.2.1. aăkhángăsinh 31 7.2.2. Môiătrng 31 7.2.3. Chunăbăhuynădchăviăkhun 32 7.2.4. CácăbcătinăhƠnh 32 CHNG III: KT QU 34 1. KHOăSÁTăTỊNHăTRNGăGỂYăBNHăCAăSTAPHYLOCOCCUS AUREUS 34 1.1. Mt s hình nh thu nhn đc 34 1.2. C cu vi khun phân lp đc t mu bnh phm trên vt thng, vt m 37 1.3. T l nhim khun theo loi bnh lý 39 1.4. V gii tính và nhóm tui 40 1.5. Mi liên quan gia thi gian bnh nhân nm vin vi t l nhim khun S. aureus trên vt thng, vt m. 41 1.6. Mi liên quan gia tin s sc khe đi vi t l nhim khun S.aureus trên bnh nhân ngoi khoa. 42 2. KHăNNGăăKHÁNGăKHÁNGăSINHăCAăS. AUREUS 44 CHNG IV: KT LUN VÀ  NGH 48 1. KTăLUN 48 2. ăNGH 48 PH LC 54 Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu 1 SVTH: Trn Th Phng T VN  Ngày nay, các bnh nhim trùngăđangălƠăvnăđ đángăquanătơm ca y t th gii, nhtălƠăcácăncăđangăphátătrin. S bùng n dân s, ô nhimămôiătrng, đc bită lƠă môiă trng bnh vin, làm t l nhimă trùngă ngƠyă cƠngă giaă tng.ă Trongăđó,ăvnă đ nhim khun bnh vin (NKBV) nói chung và nhim khun ngoi khoa nói riêng hinănayăđangălƠătháchăthc ln ti các bnh vin trên toàn th gii.ăTheoăđiu tra ca t chc Y t th gii,ăc tính  bt c thiăđim nào cngăcóăhnă1.4ătriuăngi bnh trên th gii mc NKBV. Ti Vit Nam mi nmăcóăkhongă600,000ătrng hp b nhim khun bnh vin trên tng s 7.5 triu bnh nhân nhp vin [35] . Nguyên nhân gây nhim trùng vtăthng,ăvt m có th do các loài vi sinh vtăthng trú trên da, niêm mc caăngi; trên dng c, thit b y t,ămôiătrng trong bnh vin, Trongăđó,ăStaphylococcus aureus (t cu vàng) là mt trong nhngătácănhơnăthng gp nht. Mt vnăđ vôăcùngăkhóăkhn, mang tính thi s đi vi ngành y hc trong vicăngnănga và kim soát nhim khun,ăđóălƠăvic s dng kháng sinh ba bãi hoc tngămc s dngăkhángăsinhătrongăquáătrìnhăđiu tr s dnăđnăgiaătngăs kháng thuc ca vi sinh vt. Vnăđ này rt cn đc s quanătơmăhƠnhăđng ca h thng y t th gii, bao gm c Vit Nam. Trong s các loài vi khun, Staphylococcus aureus (t cu vàng) là mt trong nhng loài kháng thuc ph bin nht ậ là tác nhân ca rt nhiu bnh nhim khun trong cngă đngăcngă nhă trongă môiă trng bnh vin vi bnh cnh lâm sàng nng và cp tính, có th dnăđn t vong nuăkhôngăđc cha tr kp thi. Theo mt báo cáo ti Hi tho v chng nhim khun  Bnh vin Bch Mai, hàngănmăcóă1γ.9%ăs trng hp mc bnh phi nhp vinăđiu tr do t cu vàng [36] . ángăchúăỦălƠămt s bnh nghiêm trng nhă: Viêm ni tâm mc, nhim trùng huyt, ng đc thc phm, nhim trùng bnh vin,ầ Vnăđ đángăloă ngi là t cu vàng có kh nngă khángă li nhiu loi kháng sinh thông dng, [...]... Châu h m i và c khu n này làm cho vi u tr tr nên r D a trên tình hình th c t c tr cho loài vi và ph c t p tài: "Kh o sát kh nhi m khu n và kháng kháng sinh c a Staphylococcus aureus (t c u vàng) trên b nh nhân ngo i khoa t i b nh vi n 175 t 07/ 2013 n 04/ 2014 c th c hi n, nh m kh o sát tình tr ng nhi m khu n do t c u vàng trên các v t m , v ng th i kh kháng c a vi khu a các b nh nhân ngo i khoa; i v... SSI nh t Và hi kháng kháng sinh c a các tác nhân gây nhi m trùng ngo kháng methicillin (Methicillin Resistant S aureus S .aureus (MRSA) và Candida albicans[24] 1.2 Tình hình gây b nh c a Staphylococcus aureus trên v v t m trên th gi i và t i Vi t Nam 1.2.1 Trên th gi i Nhi m khu n v t m là h u qu không mong mu nh t và là nguyên nhân quan tr ng gây t vong ib ng g p c ph u thu t trên toàn th gi i T i... i kháng c s d ng hi n nay M c tiêu tài: - Tìm hi u vai trò và tình hình gây b nh c a Staphylococcus aureus trên các v t t m c a b nh nhân ngo i khoa - nh t l kháng các lo i kháng sinh c a Staphylococcus aureus 2 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu NG QUAN Khái quát: 1 1.1 Nhi m khu n và nhi m khu n v t m (nhi m khu n ngo i khoa) [9] (SSI) : hép và implant) (NKNK) ), [5] [19] : - Các tác nhân. .. các b nh ph m cho th y t l nhi m khu n S aureus chi m 23,6% và là phân l c t các b nh ph m m (chi m 36,3%)[1] kháng kháng sinh c a Staphylococcus aureus 1.3 1.3.1 Trên th gi i S aureus kháng l i r t nhi u lo i kháng sinh thông d c bi t là methicillin[31] S xu t hi n c c ti n m i cho ngành y h c, tuy nhiên ch ng S aureus xu t hi n Trong th p k ti p theo, S aureus kháng Penicillin tr nên ph bi n các b nh... ng: Staphylococcus Loài: Staphylococcus aureus Staphylococcus thì Staphylococcus aureus , Staphylococcus aureus c 0.5-1.5 hình thành chùm này Staphylococcus aureus -) khi già S aureus là 35o -45oC; phòng (20-25oC) là t 4.5- -7.5 S aureus thành khúm mà dòng S aureus S aureus -2 ngày 11 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu Streptococci), coagulase (+), lên men glucose, manitol, lysotaphin- a Staphylococcus. .. (67%), (43%), và Ciprofloxacin (65%), Levofloxacin Cotrimoxazol (35%) MRSA (47%), kháng 15% và và Linezolid (0%) và MRSA sinh kháng khá cao - Ticarcillin/clavulanic xicillin/clavulanic acid (49%), acid (57%),Cefuroxim (79%) và Cefepim (72%) (Hình 1.2)[21] T i b nh vi ng 2, Staphylococcus aureus kháng nhi u kháng sinh m c cao: Penicilline G (94%), Erythromycine (70%), Clindamycine (50,2%), Kháng th p v... 5 2 0 Hình 1 2 T l kháng m t s kháng sinh tiêu bi u không ph i beta-lactams c a MRSA so v i MSSA 2 2.1 m sinh h c c a Staphylococcus aureus Gi i thi u chung v Staphylococcus aureus [28, 30] Tên Staphylococcus có ngu n g c t ti ng Latinh, staphylo ( nho) và coccus c nghiên c t tên là Staphylococcus pyrogen aureus b 10 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu Phân lo i c a t c u vàng: Gi i: Eubacteria... nhân gây trùng khoa[ 5]: 3 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu là Staphylococcus aureus và Streptococcus pyrogens [10] Theo s li u th ng kê t h th Infections Surveillance) K H th ng giám sát nhi m trùng b nh vi n qu c gia Hoa c thành l Staphylococcus aureus, coagulase-negative staphylococci, Enterococcus spp., và Escherichia coli là các tác nhân gây b nh c phân l p t các b nh ph m SSI nh t Và hi kháng. .. nghi p - o Châu Rifampin: kháng -DNA polymerase 22 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu NG, V T LI U VÀ U 1 Th m th c hi n c th c hi n t i Khoa Vi sinh v t-B nh vi n 175 t n tháng 4 2 ng nghiên c u M u b nh ph c thu th p là m , d ch t i v b nh nhân ngo u tr t i b nh vi n 175 t , v t m trên các n tháng 04/ 2014 3 Trang thi t b - T c y vô trùng - T - T l nh m nuôi c y vi sinh v t - Mc Farland c a... -toxin: bào khác nhau - Leucocidin: hì tác S aureus Staphylococci - 15 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu công - S aureus g necrosis factor) và các interleukin I, II - Enterotoxin: S aureus A- g gây n - (hemolysin, staphylolysin): S aureus 16 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t t nghi p o Châu [8,6, 28] 2.3.3 Vi S aureus tr S aureus h 3 Kháng sinh 3.1 [6, 7] Kháng sinh là hóa 17 SVTH: Tr n Th Khóa lu n t . rtăkhóăkhn và phc tp. Da trên tình hình thc t trên, ăđ tài: "Kho sát kh nng gây nhim khun và đ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus (t cu vàng) trên bnh nhân ngoi khoa. đ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus 7 1.3.1. Trên th gii 7 1.3.2. Ti Vit Nam 9 2. CăIM SINH HC CA STAPHYLOCOCCUS AUREUS 10 2.1. Gii thiu chung v Staphylococcus aureus. VI SINH- SINHăHCăPHỂNăT CBHD: TS.BSăVăBOăCHỂU SVTH:ăTRNăTHăPHNG MSSV: 1053012602 KHÓA: 2010 -2014 KHO SÁT KH NNG GÂY NHIM KHUN VÀ  KHÁNG KHÁNG SINH CA STAPHYLOCOCCUS AUREUS