TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA SƯ PHẠM Đề tài KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG CHẤT CHỐNG OXY HÓA - ETHOXYQUIN CÓ TRONG TÔM Ở MỘT SỐ CHỢ TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ CẦN THƠ Luận văn Tốt nghiệp Ngành: SƯ PHẠM HÓA HỌC Giáo viên HD: Sinh viên thực hiện: TS. Nguyễn Thị Thu Thủy Tên: Vỏ Thị Thúy An Th.S Lê Bảo Ngọc MSSV: 2091948 Lớp: Sư phạm Hóa Học K35 Cần Thơ – 5/2013 Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An LỜI CẢM ƠN  Trong suốt thời gian thực hiện đề tài luận văn tốt nghiệp, tôi đã gặp không ít khó khăn. Ngoài sự nỗ lực, phấn đấu của bản thân trong việc tìm tòi, học hỏi và nghiên cứu thì chính sự quan tâm, động viên và giúp đỡ của gia đình, thầy cô, bạn bè là động lực để tôi vươn lên và đạt được kết quả tốt nhất. Tôi xin gởi lời cảm ơn chân thành đến:  Cô Nguyễn Thị Thu Thủy – Bộ môn Sư Phạm Hóa Học – Khoa Sư Phạm đã trực tiếp hướng dẫn tôi. Cô đã tận tình giúp đỡ, quan tâm, động viên và tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất để tôi hoàn thành đề tài tốt nghiệp.  Cô Lê Bảo Ngọc – Giám Đốc Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm TP.HCM chi nhánh Cần Thơ đã giúp đỡ tôi và tạo điều kiện thuận lợi về trang thiết bị, dụng cụ, hóa chất để tôi hoàn thành đề tài.  Tập thể các thầy cô Bộ môn Hóa - Khoa Sư Phạm đã truyền thụ những kiến thức, kinh nghiệm trong suốt bốn năm đại học.  Các anh chị làm việc tại Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm TP.HCM chi nhánh Cần Thơ, đặc biệt là các anh trong phòng Sắc Ký đã nhiệt tình giúp đỡ và chia sẽ những kinh nghiệm bổ ích trong quá trình thực hiện phân tích mẫu.  Gia đình và tập thể các bạn lớp Sư phạm hóa khóa 35 đã luôn bên cạnh, ủng hộ và chia sẽ những khó khăn, vất vả trong suốt thời gian qua. Xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, tháng 05 năm 2013 Sinh viên thực hiện Vỏ Thị Thúy An Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An ii TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ CỘNG HÒA Xà HÔI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA SƯ PHẠM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc BỘ MÔN HÓA HỌC NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN 1. Cán bộ hướng dẫn: Ts. Nguyễn Thị Thu Thủy 2. Tên đề tài: “Khảo sát hàm lượng chất chống oxy hóa - ethoxyquin có trong tôm ở một số chợ trên địa bàn thành phố Cần Thơ” 3. Sinh viên thực hiện: Vỏ Thị Thúy An MSSV: 2091948 Lớp Sư phạm Hóa học K35 4. Nội dung nhận xét: a. Nhận xét về hình thức LVTN: b. Nhận xét về nội dung của LVTN: - Đánh giá nội dung thực hiện đề tài: - Những vấn đề còn hạn chế: Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An iii c. Nhận xét đối với từng sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nội dung chính do sinh viên nào chịu trách nhiệm nếu có): d. Kết luận, đề nghị và điểm: Cần Thơ, ngày tháng….năm 2013 Cán bộ hướng dẫn Ts. Nguyễn Thị Thu Thủy Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ CỘNG HÒA Xà HÔI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA SƯ PHẠM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc BỘ MÔN HÓA HỌC NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN 1. Cán bộ phản biện: Phan Thành Chung 2. Tên đề tài: “Khảo sát hàm lượng chất chống oxy hóa - ethoxyquin có trong tôm ở một số chợ trên địa bàn thành phố Cần Thơ”. 3. Sinh viên thực hiện: Vỏ Thị Thúy An MSSV: 2091948 Lớp Sư phạm Hóa học K35 4. Nội dung nhận xét: a. Nhận xét về hình thức LVTN: Đề tài gồm 55 trang kể cả phần phụ lục và tài liệu tham khảo. Văn bản được in ấn đẹp và đúng qui cách. Tuy nhiên cần sửa chữa: Viết thêm phần tóm tắt đề tài. Trong phần này cần nêu một cách tóm lược mục đích và giới hạn, nội dung và kết quả, kết luận của đề tài. b. Nhận xét về nội dung của LVTN: - Đánh giá nội dung thực hiện đề tài: Trong phần mở đầu, tác giả đã nêu rõ và cụ thể mục tiêu và giới hạn của đề tài, phương pháp và phương tiện nghiên cứu. Đề tài chọn phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC/MS/MS) để xác định dư lượng Ethoxyquin là chất phụ gia chống oxy hóa cho thức ăn chăn nuôi nói chung và nuôi trồng thủy sản nói riêng mà dư lượng của nó trong các sản phẩm thủy sản được qui định nghiêm ngặt. Các kết quả phân tích trên một số mẫu tôm ở thị trường thành phố Cần Thơ cho thấy dư lượng Ethoxyquin vượt mức qui định chiếm một tỷ lệ khá lớn. Phương pháp định lượng dư lượng Ethoxyquin đã sử dụng là một phương pháp phân tích với phương tiện hiện đại nên kết quả có thể tin cậy được. Đây là một thông tin có giá trị đối với người tiêu dùng ở địa phương thành phố Cần Thơ trong việc sử dụng tôm làm thực phẩm và các cơ sở nuôi tôm và xuất khẩu tôm cần quan tâm đúng mức. - Những vấn đề còn hạn chế: Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An ii Tác giả chưa nêu được các kết quả của các nghiên cứu trước đây về sử dụng phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC/MS/MS) để xác định dư lượng Ethoxyquin để chứng minh rằng phương pháp này là lựa chọn thích hợp. c. Nhận xét đối với từng sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nội dung chính do sinh viên nào chịu trách nhiệm nếu có): d. Kết luận, đề nghị và điểm: Nhìn chung, tác giả đã hoàn thành cơ bản mục tiêu của đề tài đã đề ra. Cần Thơ, ngày tháng …. năm 2013 Cán bộ phản biện Phan Thành Chung Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An i MỤC LỤC  Trang MỤC LỤC i DANH MỤC VIẾT TẮT iv DANH SÁCH HÌNH v DANH SÁCH BIỂU BẢNG vi TÓM TẮT NỘI DUNG vii Phần 1: MỞ ĐẦU 1 Phần 2: NỘI DUNG 3 A. LÍ THUYẾT 3 I. ĐẠI CƯƠNG VỀ PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 3 I.1. Lịch sử phát hiện sắc ký 3 I.2. Phân loại phương pháp sắc ký 3 I.3.1. Phân loại sắc ký theo bản chất của hai pha sử dụng 3 I.3.2. Phân loại sắc ký theo bản chất của hiện tượng xảy ra trong quá trình tách chất 4 I.3.3. Phân loại sắc ký theo cấu hình 4 I.3. Một số đại lượng đặc trưng cho phân tích sắc ký 4 I.3.1. Hệ số phân bố ( Partition coefficient) 4 I.3.2. Thời gian lưu ( Retention time) 5 I.3.3. Hệ số dung lượng k’ (Capacity factor) 6 I.3.4. Số đĩa lý thuyết 6 I.3.5. Độ chọn lọc 7 I.3.6. Độ phân giải 7 II. HỆ THỐNG MÁY SẮC KÝ LỎNG GHÉP KHỐI PHỔ (HPLC/MS/MS) 8 II.1. Sơ lược về hệ thống sắc ký lỏng (HPLC) 8 II.1.1. Bình chứa pha động 9 II.1.2. Bộ khử khí Degases 9 II.1.3. Bơm cao áp 10 Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An ii II.1.4. Bộ phận tiêm mẫu 10 II.1.5. Cột sắc ký 10 II.1.6. Đầu dò 11 II.1.7. Bộ phận ghi nhận tín hiệu 11 II.1.8. In dữ liệu 11 II.2. Đầu dò khối phổ - Đầu dò MS ba tứ cực 12 II.2.1. Một số vấn đề chung về đầu dò khối phổ 12 II.2.2. Cấu tạo đầu dò khối phổ ba tứ cực 13 II.2.3. Một số k thuật ghi phổ trong đầu dò khối phổ 17 III. Tổng quan về gốc tự do và chất chống oxy hóa trong thực phẩm 18 IV. Giới thiệu về ethoxyquin 19 IV.1. Công thức cấu tạo và một số tính chất của Ethoxyquin 19 IV.2. Ứng dụng và ảnh hưởng của Ethoxyquin 19 IV.3. Giới hạn cho phép 20 IV.4. Một số nghiên cứu về ethoxyquin 20 IV.4.1. Nghiên cứu trên động vật 20 IV.4.2. Nghiên cứu trên thực vật 21 V. Các phương pháp xác định hàm lượng ethoxyquin 22 V.1. Phương pháp tham khảo AOAC 2007.01 22 V.2. Phân tích dư lượng ethoxyquin bằng máy HPLC 23 V.3. Phân tích dư lượng ethoxyquin bằng máy HPLC/MS/MS 23 B. THỰC NGHIỆM 24 I. Các thiết bị, dụng cụ và hóa chất 24 I.1. Hệ thống máy LC/MS/MS 24 I.2. Các thiết bị và dụng cụ 24 I.3. Hóa chất 24 II. Chuẩn bị các dung dịch chuẩn 25 II.1. Dung dịch chuẩn gốc 25 II.2. Dung dịch chuẩn trung gian 25 II.3. Dung dịch chuẩn làm việc 25 III. Chọn lọc các yếu tố trong phân tích 26 III.1. Khảo sát khoảng tuyến tính 26 Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An iii III.2. Khảo sát độ chính xác của phương pháp 26 III.2.1. Chuẩn bị mẫu kiểm soát 27 III.2.2. Xử lí mẫu 28 III.2.3. Các thông số cài đặt của máy HPLC/MS/MS 28 III.2.4. Công thức tính toán kết quả 29 III.2.5. Kết quả khảo sát độ chính xác của phương pháp 30 IV. Thu mua mẫu 31 V. Kết quả phân tích 31 V.1. Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa - ethoxyqiun trên nền mẫu tôm sú 32 V.2. Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên nền mẫu tôm thẻ 33 Phần 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 35 I. KẾT LUẬN 35 II. ĐỀ NGHỊ 36 PHỤ LỤC 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An iv DANH MỤC VIẾT TẮT AOAC Association of Offical Analytical Chemists - Hiệp hội các nhà phân tích Hóa học APCI Atmospheric Pressure Chemical Ionization - Ion hóa hóa học ở áp suất khí quyển ESI Electrospray Ionization - Ion hóa bằng cách phun ion EU European - Liên minh Châu  FDA America Food and Drug Administration - Cục quản lí thực phẩm và dược phẩm HPLC High Performance Liquid Chromatography - Sắc ký lỏng hiệu năng cao LOD Limit of detection - Giới hạn phát hiện LOQ Limit of quantitation - Giới hạn định lượng Ppb Parts per billion Ppm Parts per million PSA Primary secondary amine MRL Maximum Residue Limits – Giới hạn cho phép MS Mass spectroscopy - Khối phổ SPE Solid phase extraction - Chiết pha rắn UV Ultra Violet - Cực tím [...]... này có năng lượng cao, rất kém bền nên dễ dàng tham gia vào nhiều phản ứng hóa học như phản ứng oxy hóa, phản ứng polymer hóa, …làm thay đổi chất lượng và giá trị của thực phẩm Chất chống oxy hóa là những chất có khả năng ngăn chặn hoặc làm chậm lại quá trình oxy hóa chất khác Chất chống oxy hóa ngăn quá trình phá hủy này bằng cách khử các gốc tự do, kìm hãm sự oxy hóa bằng cách oxy hóa chính chúng Trong. .. khẩu tôm ở Việt Nam Xuất phát từ thực trạng này, chúng tôi tiến hành đề tài: “KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG CHẤT CHỐNG OXY HÓA - ETHOXYQUIN CÓ TRONG TÔM Ở MỘT SỐ CHỢ TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ CẦN THƠ” Đề tài được tiến hành tại TRUNG TÂM DỊCH VỤ PHÂN TÍCH THÍ NGHIỆM TP HCM - CHI NHÁNH CẦN THƠ II MỤC ĐÍCH CỦA ĐỀ TÀI Đề tài được thực hiện nhằm mục đích đánh giá được phần nào dư lượng của chất chống oxy hóa – ethoxyquin. .. chuẩn Ethoxyquin 26 Bảng 4 Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp 30 Bảng 5 Kết quả khảo sát độ chụm của phương pháp 30 Bảng 6 Số lượng mẫu thu mua ở các chợ trên địa bàn thành phố Cần Thơ 31 Bảng 7 Kết quả phân tích tổng hợp dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên cả hai nền mẫu tôm sú và tôm thẻ 32 Bảng 8 Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun... tôm hàng đầu của Việt Nam Tuy nhiên, việc xuất khẩu tôm sang Nhật Bản vài năm trở lại đây gặp không ít khó khăn Năm 2012 vừa qua, Nhật Bản cho kiểm tra hàm lượng chất chống oxy hóa Ethoxyquin có trong tôm của Việt Nam Mặc dù, Ethoxyquin vẫn chưa được nghiên cứu trên người nhưng đã có một vài nghiên cứu trên vật nuôi cho thấy Ethoxyquin có ảnh hưởng đến sức khỏe vật nuôi, điều đó cho thấy khả năng Ethoxyquin. .. có trong tôm ở một số chợ trên địa bàn thành phố Cần Thơ” được thực hiện với mục đích đánh giá được phần nào dư lượng của chất chống oxy hóa – ethoxyquin có trong tôm ở một số chợ thuộc địa bàn thành phố Cần Thơ và giúp các nhà sản xuất nâng cao chất lượng tôm để cung cấp cho thị trường trong nước và ngoài nước Do thời gian và điều kiện thực hiện nên giới hạn của đề tài là chỉ khảo sát những mẫu tôm. .. tính trong khoảng nồng độ 1–16ppb  Hiệu suất thu hồi nằm trong khoảng từ 60 – 115% Thu mua và phân tích 56 mẫu tôm, có 22/56 mẫu phát hiện dư lượng ethoxyquin Trong đó có 12/22 mẫu có dư lượng cao hơn MRL, 10/22 mẫu có dư lượng thấp hơn MRL vii Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An Từ kết quả thu được ta thấy:  Tỉ lệ mẫu có dư lượng ethoxyquin vượt mức cho phép vẫn còn cao  Việc sử dụng ethoxyquin. .. phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên nền mẫu tôm sú 32 Bảng 9 Dư lượng của một số mẫu nhiễm ethoxyquin trên nền mẫu tôm sú 33 Bảng 10 Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên nền mẫu tôm thẻ 33 Bảng 11 Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên nền mẫu tôm thẻ 34 vi Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ... Ethoxyquin ảnh hưởng đến sức khỏe con người cũng rất cao Nếu người tiêu dùng sử dụng lâu ngày các loại tôm có chứa chất bảo quản nói chung và Ethoxyquin nói riêng thì sẽ rất có hại cho sức khỏe và có thể gây ra một số bệnh ở người, việc tìm hiểu nguyên nhân của các bệnh này thì rất khó khăn Đây cũng là một vấn đề gây nhiều bức xúc hiện nay Đề tài Khảo sát hàm lượng chất chống oxy hóa - ethoxyquin có. .. và ảnh hưởng của Ethoxyquin [10], [18] Ethoxyquin được phát hiện vào thập niên 50 bởi Monsanto, ethoxyquin được sử dụng như một loại chống oxi hóa chất béo, chất bảo quản (E324) trong thức ăn chăn nuôi nhằm tăng tính ổn định các vitamin tan trong dầu, đảm bảo chất lượng của thức ăn chăn nuôi Ethoxyquin có hoạt tính giúp các sản phẩm trái cây sau thu hoạch hạn chế quá trình mất mát hàm lượng carotenoid... Hydroquinone), Ethoxyquin, Propyl gallate (PG),… 18 Luận văn tốt nghiệp SVTH: Vỏ Thị Thúy An IV Giới thiệu về ethoxyquin Ethoxyquin có tên thương mại là Santoquin, santoflex hay EQ Ethoxyquin là một chất chống oxy hóa được FDA chấp thuận và đã cho phép được sử dụng trong thức ăn chăn nuôi hơn 30 năm qua IV.1 Công thức cấu tạo và một số tính chất của Ethoxyquin [9], [16]  Công thức cấu tạo: 6-ethoxy-1,2-dihydro-2,2,4-trimethylquinoline . 10. Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên nền mẫu tôm thẻ 33 Bảng 11. Kết quả phân tích dư lượng chất chống oxy hóa ethoxyqiun trên nền mẫu tôm thẻ 34 . hóa - ethoxyquin có trong tôm ở một số chợ trên địa bàn thành phố Cần Thơ” được thực hiện với mục đích đánh giá được phần nào dư lượng của chất chống oxy hóa – ethoxyquin có trong tôm ở một. các doanh nghiệp xuất khẩu tôm ở Việt Nam. Xuất phát từ thực trạng này, chúng tôi tiến hành đề tài: “KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG CHẤT CHỐNG OXY HÓA - ETHOXYQUIN CÓ TRONG TÔM Ở MỘT SỐ CHỢ TRÊN ĐỊA