LÊ VĂN KHANG Chuyên ngành: HOÁ HỮU CƠ Chuyên ngành: HOÁ HỮU CƠ Mã số: 60.44.01.14 Mã số: 60.44.01.14 TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ NẤM (DALDINIA CONCENTRICA (BOLTON EX FRIES) CESATI & NOTARIS) Ở VIỆT NAM BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH VINH 2014 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học : PGS. TS. LÊ VĂN HẠC MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 3 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4 NỘI DUNG KẾT LUẬN 5 MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU  Nấm là một món quà qúi mà thiên nhiên ban tặng cho con người. 1. Lý do chọn đề tài VỪA CÓ GIÁ TRỊ DINH DƯỠNG VỪA CÓ GIÁ TRỊ Y DƯỢC Giá trị của nấm  Từ lâu, các tính chấy y dược của nấm đã thu hút sự chú ý của các nhà nghiên cứu. Trong số 14,000– 15,000 nấm lớn trên thế giới, khoảng 400 có các tính chất y dược biết được, nhưng dự kiến khoảng 1800 loài có tiềm năng về các tính chất y dược. MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài  Trong những năm gần đây, có nhiều nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học của các loài nấm, ở châu Á, đặc biệt ở Trung Quốc và Nhật Bản, ghi nhận sự kéo dài cuộc sống của các bệnh nhân bị ung thư khi uống hay tiêm chiết suất từ nấm. MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU  Chính vì vậy chúng tôi chọn đề tài: “Tách và xác định cấu trúc một số hợp chất từ nấm (Daldinia concentrica (Bolton ex Fries) Cesati & Notaris) ở Việt Nam” từ đó góp phần xác định thành phần hoá học của các hợp chất và tìm ra nguồn nguyên liệu cho ngành hoá dược. 1. Lý do chọn đề tài 2. Nhiệm vụ nghiên cứu  Nhiệm vụ của luận văn: Chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu được hỗn hợp các hợp chất từ nấm Daldinia Concentrica. 2. Nhiệm vụ nghiên cứu • Sử dụng các phương pháp sắc ký và kết tinh phân đoạn để phân lập các hợp chất. • Sử dụng các phương pháp phổ để xác định cấu trúc các hợp chất thu được. 3. Đối tượng nghiên cứu • Đối tượng nghiên cứu là dịch chiết từ loài nấm Daldinia Concentrica ở Việt Nam. CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN 1.1. Chi Daldinia Chi Daldinia được xây dựng bởi Cesati & De Notaris (1863) bao gồm những loài của Xylariaceae có quả thể nấm khá lớn, quả nấm dễ tìm thấy trên cây gỗ chết của thực vật hạt kín, dựa trên các vùng đồng tâm bên trong của chúng. Phân bố rải rác trên tất cả các châu lục: Châu Á, Châu Phi, Châu Âu, Châu Mỹ, Châu Úc. Daldinia thuộc nhóm nấm lớn rất phổ biến. Chi Daldinia có hơn 80 loài Daldinia, nhưng chi này chỉ có 25 loài có giá trị. 1.2. Nấm Daldinia concentrica  Tên khoa học : Daldinia concentrica (Bolton ex Fries) Cesati & Notaris Tên khác: Sphaeria concentrica Bolton, Hypoxylon concentricum (Bolton Wanderers) Grev.  Đặc điểm thực vật Daldinia concentrica cứng, nấm hình bán cầu ( thường không đều). Thịt nấm thường có màu nâu, màu hạt dẻ cuối cùng trở thành màu đen khi chín. Thịt xơ được cấu tạo bằng nhiều lớp đồng tâm. 1.2. Nấm Daldinia concentrica • Bề mặt của quả trưởng thành có xuất hiện mụn chấm. Trong giai đoạn sinh sản vô tính nấm giải phóng bào tử màu đen. Đây là những khe hở được hình thành trên quả thể nối với khoang chứa bào tử hình trụ nằm ngay dưới bề mặt. 1.1.3. Thành phần hóa học của Daldinia Concentrica • Allport và Bu'Lock là những người đầu tiên nghiên cứu thành phần hóa học của Daldinia concentrica năm 1958 tìm ra hợp chất Binaphthyl (BNT) và dihydroxyperylene quinone từ thịt quả nấm D. concentrica [...]... pháp phân tích, phân tách các hỗn hợp và phân lập các chất Để phân tích và phân tách cũng như phân lập các hợp chất, sẽ sử dụng các phương pháp sắc ký như: - Sắc ký lớp mỏng (TLC) - Cột thường (CC) - Sắc ký cột nhanh (FC) - Sắc ký lỏng cao áp (HPLC) - Các phương pháp kết tinh phân đoạn 2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc các hợp chất Cấu trúc các hợp chất được khảo sát nhờ sự kết hợp các phương pháp... COSY của chất A Kết hợp phổ MS, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC và COSY và so sánh với tài liệu tham khảo cho phép xác định cấu trúc của hợp chất A là [11]-Cytochalasa-6(12), 13-diene- 1, 21-dione-7, 18, 19trihydroxy-16,18-dimethyl-10-phenyl-(7S*, 13E, 16S*, 18S*, 19R*) KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hoá học của nấm Daldinia concentrica ở Nghệ An, chúng tôi đã thu được một số kết quả như sau: •... các chất tinh khiết Sơ đồ: Phân lập hợp chất trong quả thể nấm Quả thể nấm (50kg) Cất thu hồi metanol Chiết lần lượt với clorofom, etyl axetat, butanol Cao clorofom (142 g) Ngâm với metanol Cao metanol (470g) Phân bố trong nước Cao etylaxetat (291 g) Sắc kí cột n-hexan:axeton (4:1) Cao butanol (155 g) Sắc kí cột cloroform: metanol (1:0-2:1) Chất A Chất B CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2 Xác định cấu. .. cứu D concentrica ở Đức giáo sư Hashimoto (2002) và các cộng sự không chỉ thu dược BNT, mà còn thu được 13 hợp chất khác: daldinone A daldinone B daldiniapyrone 3,4,5-trihydroxy-1-tetralone daldinialanone (+)-orthosporin Khi nghiên cứu về Daldinia concentrica( 1996) và một số loài Daldinia nhiệt đới khác Hashimoto,Yukiko và các cộng sự đã tìm thấy các hợp chất cytochalasins 1.1.4 Hoạt tính sinh học Từ. .. lập từ thịt quả nấm Daldinia concentrica thể hiện hoạt tính sinh học kháng virut HIV đi vào các tế bào bình thường với liều lượng EC50 0.83 µg/ml Chương 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 2.1 Phương pháp nghiên cứu 2.1 1.Phương pháp lấy mẫu • Mẫu nấm được thu hái về được rửa sạch, để nơi thoáng mát hoặc sấy khô ở 400C Sau đó chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu được hỗn hợp các hợp chất. .. một số kết quả như sau: • Cao etyl axetat được phân tách trên bằng sắc ký nhồi silicagel, dung môi giải hấp là n-hexan : axeton, cloroform : metanol, thu được chất A • Cao n-butanol được phân tách trên bằng sắc ký nhồi silicagel, dung môi giải hấp là: cloroform : metanol, thu được chất B • Sử dụng các phương pháp phổ hiện đại: Xác định cấu trúc các hợp chất A là [11]-Cytochalasa-6(12), 13-diene- 1, 21dione-7,... QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất A • Chất A là chất rắn vô định hình, nhiệt độ nóng chảy 217-219°C M+ =467.2669 Phổ khối lượng cho tín hiệu: [M]+ = 467,2669 ứng với công thức phân tử C28H37O5N Hình 3.1: Phổ MS của chất A H của nhóm metyl 3H của 3 nhóm OH( δH = 2,25 ; 1,85 ; 1,75) Hình 3.2: Phổ giản 1H – NMR của chất A H của Nối đôi olefin H của nhóm exometylen H của nhân thơm H của ancol... 13E, 16S*, 18S*, 19R*) .Hợp chất B là β-D-fructofuranozylα-D-glucopyranozit LỜI CẢM ƠN • Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn tới: • PGS.TS Lê Văn Hạc - khoa Hoá học - Trường Đại học Vinh, người đã giao đề tài và tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thiện luận văn này • PGS TS Trần Đình Thắng- Phó trưởng khoa Hoá học Trường... sinh học Từ lâu Daldinia concentrica là một loại nấm được sử dụng trong y học cổ truyền châu Phi • Đặng Ngọc Quang và các cộng sự (2012) tìm ra ba hợp chất cho thấy khả năng gây độc chống lại bốn tế bào ung thư, ung thư biểu bì,ung thư vú, ung thư phổi và ung thư biểu mô tế bào gan Ngoài ra, isocoumarin ức chế sự phát triển của tụ cầu khuẩn, với IC 50 giá trị 87,81 mg mL-1 • Một lacton benzofuran mới... trình làm luận văn • TS Nguyễn Tiến Công và PGS.TS Nguyễn Hoa Du đã có những ý kiến đóng góp quý báu cho luận văn này • Nhân dịp này, tôi cũng xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới các thầy giáo, cô giáo khoa Hoá học, khoa Sau đại học - Trường Đại học Vinh; các anh chị nghiên cứu sinh, các bạn đồng nghiệp, học viên cao học, các bạn sinh viên trong phòng thí nghiệm chuyên đề hóa hữu cơ, gia đình và người . giá trị. 1.2. Nấm Daldinia concentrica  Tên khoa học : Daldinia concentrica (Bolton ex Fries) Cesati & Notaris Tên khác: Sphaeria concentrica Bolton, Hypoxylon concentricum (Bolton Wanderers). Daldinia concentrica(1996) và một số loài Daldinia nhiệt đới khác Hashimoto,Yukiko và các cộng sự đã tìm thấy các hợp chất cytochalasins. 1.1.4. Hoạt tính sinh học Từ lâu Daldinia concentrica. ra, isocoumarin ức chế sự phát triển của tụ cầu khuẩn, với IC 50 giá trị 87,81 mg mL -1 . • Một lacton benzofuran mới có tên concentricolide, được phân lập từ thịt quả nấm Daldinia concentrica