CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật Các phương pháp chuyển gen • Phương pháp chuyển gen sử dụng virus • Phương pháp chuyển gen không sử dụng virus - Phương pháp hóa học - - Phương pháp vật lí CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật Chuyển gen không sử dụng virus • Phương pháp hóa học - Calcium Phosphate - DEAE dextran - Liposome - Liposome • Phương pháp vật lí - Điện biến nạp - Súng bắn gen [...]... NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp vật. .. ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học CHƯƠNG 3: NUÔI... Helium được giải phóng, tác động một sóng siêu âm lên các hạt vàng có phủ DNA → các hạt này di chuyển vào tế bào chất của tế bào Thường áp dụng cho tế bào thực vật (Bắp, Lúa mạch, Đậu nành, …) CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp vật lý CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Ứng dụng - Bệnh ung... protein kháng virus Sử dụng promoter thích hợp CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Ứng dụng CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 7 Các kỹ thuật bảo quản tế bào a/ Kỹ thuật Đông lạnh Tế bào • Đông lạnh tế bào động vật là sử dụng môi trường đông lạnh, nhiệt độ thấp (-800C, -1960C) để lưu giữ các tế bào động vật phục vụ cho nghiên cứu và ứng dụng • Các... - Thực hiện kích điện với các thông số thích hợp - Nuôi cấy tiếp tục, sau 2 – 3 ngày kiểm tra sự biểu hiện của protein CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp vật lý - Phương pháp điện biến nạp CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp vật lý - Phương pháp bắn gen Hệ thống bao gồm một xylanh... trên màng tế bào → vector dễ dàng di chuyển xuyên qua màng tế bào Thông số điện biến nạp giữa các dòng tế bào rất khác nhau Thường gây chết tế bào !!! CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp vật lý - Phương pháp điện biến nạp Vật liệu – Thiết bị - Dung dịch Hypoosmolar - DNA - Tế bào -Máy điện biến nạp Quy trình - Tách tế bào - Trộn tế bào với... tế bào b/ Kỹ thuật Giải Đông Tế bào Mục đích: Khôi phục lại trạng thái hoạt động, đặc điểm, tính chất của tế bào trong nuôi cấy tế bào động vật Kỹ thuật giải đông có ảnh hưởng đến chất lượng tế bào: - Nếu quá trình giải đông chậm, các tế bào bị tổn thương hoặc bị chết nhiều, ảnh hưởng đến kết quả nuôi cấy - Nếu giải đông càng nhanh, đúng kỹ thuật, chất lượng tế bào càng tốt CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO... phút - Trộn tế bào vào môi trường đông lạnh để tạo dạng huyền phù, mật độ thích hợp khoảng 107 tế bào/ ml CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 7 Các kỹ thuật bảo quản tế bào a/ Kỹ thuật Đông lạnh Tế bào Ghi nhãn, dùng giấy nến, bao gói và các ống đông lạnh có huyền phù vào tủ đông lạnh -800C trong một vài giờ, và chuyển vào giữ trong bình chứa Nitơ lỏng CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 7 Các kỹ... NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 7 Các kỹ thuật bảo quản tế bào b/ Kỹ thuật Giải Đông Tế bào Ly tâm trong 5 phút với tốc độ 1000 vòng/phút Bổ sung 5 - 6ml môi trường dung dịch đã làm ấm Chuyển sang bình nuôi, ủ ở 37 oC trong điều kiện nồng độ CO2 5 % Sau 24h thì kiểm tra kết quả nuôi cấy, bỏ môi trường cũ và bổ sung 5 - 6ml môi trường mới đã làm ấm và tiếp tục nuôi cấy CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT...CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3. 6 Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật • Phương pháp hóa học - Sử dụng lần đầu tiên vào năm 1965 - Giúp cho DNA dễ dàng bám và di chuyển qua màng tế bào, màng nhân - Hiệu quả thấp hơn so với các phương pháp chuyển gen sử dụng virus - Yêu cầu nghiêm ngặt về hóa chất sử dụng - Không liên quan đến các vấn đề về an toàn sinh học CHƯƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG . pháp chuyển gen bằng hóa học kém hiệu quả - Không phụ thuộc vào loại tế bào - Không có giới hạn về k ch cỡ DNA chuyển - Không có giới hạn về k ch cỡ DNA chuyển - Yêu cầu có các dụng cụ chuyên. bào động vật CH ƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CH ƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CH ƠNG 3: NUÔI. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CH ƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật CH ƠNG 3: NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT 3.6. Các kỹ thuật chuyển gen vào