ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN PHẠM THỊ THẢO UYÊN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA GỖ CÂY THÔNG ĐỎ (TAXUS WALLICHIANA ZUCC.) Họ Thanh Tùng (Taxaceae) CHUYÊN NGÀNH : HÓA HỮU CƠ MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS. NGUYỄN TRUNG NHÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2012 MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cảm ơ n Tóm tắt luận văn Mục lục Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình Danh mục các sơ đồ Trang MỞ ĐẦU 1 Phần 1 TỔNG QUAN 3 1.1 Đặc điểm thực vật 3 1.1.1 Mô tả thực vật 3 1.1.2 Phân bố và sinh thái 4 1.1.3 Bảo tồn 4 1.2 Độc tính và tính chất dược lý 4 1.2.1 Độc tính 4 1.2.2 Tác dụng dược lý theo kinh nghiệm dân gian 4 1.3 Taxol 5 1.4 Ứng dụng các hợp chất lignan 6 1.5 Thành phần hóa học 7 1.5.1 Thành phần hóa học có trong lá 7 1.5.2 Thành phần hóa học có trong gỗ 8 Phần 2 NGHIÊN CỨU 11 2.1 Giới thiệu chung 11 2.2 Kết quả và biện luận 11 2.2.1 Hợp chất T1 11 2.2.2 Hợp chất T2 18 2.2.3 Hợp chất T3 22 Khảo sát thành phần hóa học của gỗ cây thông đỏ Taxus wallichiana Zucc. 2.2.4 Hợp chất T4 28 2.2.5 Hợp chất T5 29 2.2.6 Hợp chất T6 31 2.2.7 Hợp chất T7 36 2.2.8 Hợp chất T8 40 2.2.9 Hợp chất T9 43 Phần 3 THỰC NGHI Ệ M 46 3.1 Các phương pháp sử dụng trong nghiên cứu 46 3.2 Điều kiện thí nghiệm 46 3.3 Thu hái và xử lý mẫu 47 3.4 Khảo sát cao ethyl acetate 48 3.4.1 Khảo sát phân đoạn F1 48 3.4.2 Khảo sát phân đoạn F4 59 3.4.3 Khảo sát phân đoạn F5 53 Phần 4 KẾT LUẬN 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệ u Tiếng Anh Tiếng Việt C Chloroform EA Ethyl acetate ED Petrolium ether Eter dầu hỏa Me Methanol MeC N A cetonitrile SK L M Sắc kí lớp mỏng SK C Sắc kí cột ODS sắc ký pha đảo 13 C- NMR Carbon (13) Nuclear M agnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon (13) 1 H-NM R Hydro (1) Nuclear M agnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1) DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Phổ D EPT HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhều liên kết HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation Phổ tương tác dị hạt nhân qua một liên kết δ Chemical shift Độ chuyển dịch hóa học P pm Part per million Một phần triệu S Singlet Mũi đơn D D oublet Mũi đôi Dd Double of doublet Mũi đôi đôi T Triplet Mũi ba M Multiplet Mũi đa J Coupling con s tant Hằng số ghép sp in ( M)H z (Mega) Hertz G G am Mg Miligam DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Ba ûn g 1. So á li e ä u pho å 1 H-NMR (500 MHz), 13 C-NMR (125 MHz) v a ø t öông quan HMBC cuûa T1 trong CDCl 3 16 Bảng 2: Dữ liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz) và 13 C-NMR (125 MHz) của h ợ p chất T1 trong dung môi CDCl 3 so với tài liệu tham khảo 17 Bảng 3. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHZ), 13 C-NMR (125MHz) và t ươ ng quan HMBC, COSY của T2 trong CDCl 3 và CD 3 OD 20 Bảng 4. Dữ liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz) và 13 C-NMR (125 MHz) của h ợ p chất T2 trong dung môi CDCl 3 so với tài liệu tham khảo 21 Bảng 5. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHZ), 13 C-NMR (125MHz) và t ươ ng quan HMBC, COSY của T3 trong CHCl 3 24 Bảng 6. Dữ liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz) và 13 C-NMR (125 MHz) của h ợ p chất T3 trong dung môi CDCl 3 so với tài liệu tham khảo 25 Bảng 7. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz), 13 C-NMR (125 MHz)và t ươ ng quan HMBC của T4 trong dung môi CDCl 3 28 Bảng 8. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz), 13 C-NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của T5 trong dung môi CDCl 3 30 Bảng 9. Số liệu phổ 1 H NMR (500 MHZ), 13 C NMR (125MHz) và t ươ ng quan HMBC, COSY của T6 trong CDCl 3 . 34 Bảng 10. Dữ liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz) và 13 C-NMR (125 MHz) của h ợ p chất T6 trong dung môi CDCl 3 so với tài liệu tham khảo 35 Bảng 11. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz), 13 C-NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của T7 trong dung môi CDCl 3 38 Bảng 12. Dữ liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz) và 13 C-NMR (125 MHz) của h ợ p chất T7 trong dung môi CDCl 3 so với tài liệu tham khảo. 39 Bảng 13. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz), 13 C-NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của T8 trong dung môi CDCl 3 42 Bảng 14. Số liệu phổ 1 H-NMR (500 MHz), 13 C-NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của T9 trong dung môi CDCl 3 45 Bảng 15. Kết quả sắc ký cột trên cao ethyl acetate. 49 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1 Lá thông đỏ 2 Hình 2 Thân và gỗ cây thông đỏ 2 Hình 3 Cây thông đỏ 2 Hình 1.1 Cấu trúc taxol 6 Hình 2.1 Tương quan HMBC và COSY trong vòng A của T1 13 Hình 2.2 Tương quan HMBC, COSY trong vòng B của T1 14 Hình 2.3 Tương quan HMBC và COSY trong vòng C của T1 14 Hình 2.4 Tương quan HMBC trong nhóm cinnamoyl của T1 15 Hình 2.5 Tương quan HMBC trong hợp chất T2. 19 Hình 2.6 Tương quan HMBC trong hợp chất T3 23 Hình 2.7 Tương quan HMBC và COSY trong hợp chất T4 27 Hình 2.8 Tương quan HMBC và COSY trong hợp chất T5 29 Hình 2.9 Tương quan HMBC trên vòng A trong hợp chất T6 32 Hình 2.10 Tương quan HMBC trên vòng B trong hợp chất T6 33 Hình 2.11 Tương quan HMBC của vòng lacton trong hợp chất T6 33 Hình 2.12 Tương quan HMBC trong hợp chất T7 37 Hình 2.13 Tương quan HMBC trong hợp chất T8 41 Hình 2.14 Tương quan HMBC trong hợp chất T9 44 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 1 : Quy trình ñieàu c h eá c a ùc l o aï i cao 47 Sơ đồ 2 : Sơ đồ cô lập T8 từ phân đoạn F1 của cao ethyl acetate 49 Sơ đồ 3 : Sơ đồ cô lập T9 từ phân đoạn F4 của cao ethyl acetate 49 Sơ đồ 4 : Sơ đồ cô lập T1, T2, T3 từ phân đoạn F4 của cao ethyl acetate 50 Sơ đồ 5 : Sơ đồ cô lập T5 từ phân đoạn F4 của cao ethyl acetate 51 Sơ đồ 6 : Sơ đồ cô lập T7 từ phân đoạn F4 của cao ethyl acetate 52 Sơ đồ 7 : Sơ đồ cô lập T6 từ phân đoạn F4 của cao ethyl acetate 53 Sơ đồ 8 : Sơ đồ cô lập T4 từ phân đoạn F5 của cao ethyl acetate 53 CONG TRINH KHOA HQC DA CONG BO: Tham gia poster treo ti h9i nghi khoa hQc IAn thu 7- Trn6ng Di hQc Khoa hQc Tl,f nhien vao thang 11 nam 2010. Khio sit thanh phin h6a hQc cua g6 cay thong do Taxus wallichiana Zucc. MỞ ĐẦU Cây thông đỏ đã được biết đến từ rất lâu trong dân gian như một loại d ượ c liệu quý. Trong y học cổ truyền Ấn Độ, lá và vỏ thông đỏ được dùng trị hen, viêm phế quản, tiêu hoá , cành và vỏ dùng trị bệnh thực tích, giun đũa, nước s ắ c của thân non dùng trị bệnh đau đầu…Trong y học dân gian Trung Quốc, thông đỏ có tác dụng tiêu ích, thông tim mạch, giảm đau. Ở Thổ Nhĩ Kỳ, thông đỏ dùng để trị bệnh tim và gỗ cây thông đỏ được dùng để trị bệnh tiểu đườ ng. Hiện nay, thông đỏ được biết đến nhiều khi hợp chất taxol được phân l ậ p trong cây. Taxol có hoạt tính chống ung thư - một loại bệnh nan y khó chữa. Do vậy, khảo sát thành phần hóa học có trong cây thông đỏ là một đề tài mà các nhà nghiên cứu về hợp chất thiên nhiên trên thế giới rất chú ý. Ở Việt Nam, đã có những nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của lá, vỏ của cây thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.), nhưng chưa có bất kỳ khảo sát nào về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học có trong gỗ. Vì vậy, chúng tôi tiến hành đề tài khảo sát thành phần hóa học của gỗ cây thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) (Taxaceae) thu lượm tại tỉnh Lâm Đồng, v ớ i mong muốn tìm kiếm các hợp chất diterpene, lignan - thành phần chính của gỗ thông đỏ - có nhiều hoạt tính sinh học thú v ị . Khảo sát thành phần hóa học của gỗ cây thông đỏ Taxus wallichiana Zucc. - 10 - [...]... (dd;J=6,5;2,5Hz) 2,96 (d;J=6,5Hz) 5,31 1,71 1,83 1,72 (brs) (m) (m) (m) 5,88 (d;J=10,5Hz) 6,01 (d;J=10,5Hz) 2,43 (dd; J=19,0; 4,0Hz) 2,84 (dd; J=19,0; 9,0Hz) 4,97 (dd;J=9,0; 5,0Hz) 1,72 1,12 2,14 0,85 5,33 4,87 (s) (s) (s) (s) (brs) (brs) 2,17 (s) 2,04 (s) 2,03 (s) 2,01 (s) 2,00 (s) dien  H (ppm) C (ppm) 58,8 70,4 44,4 141,7 78,5 [17] 1,90 (d;J=2,4Hz) 5,38 (dd;J=6,3;2,3Hz) 2,93 (d;J=6,3Hz) 5,24 (s) C (ppm) 58,4... J=7,0; 1,5Hz) 5,62 (dd, J=6,5;2,0Hz) 3,33 (d, J=6,0Hz) 5,38 1,76 2,10 5,44 (t, J=3,0Hz) (m) (dd, J=6,0; 3,0Hz) (dd, J=11,5;6,0Hz) 5,94 (d, J=11,0Hz ) 6,24 (d, J=10,5Hz) 2,34 (d, J=20,0Hz) 2,80 (dd, J=20,0;7,0Hz) 1,13 1,76 2,34 1,03 4,91 5,43 (s) (s) (s) (s) (s) (s) 6,44 (d, J=16,0Hz) 7,67 (d, J=16,0Hz) 2,06 (s) 2,06 (s) 2,06 (s) 2,04 (s) 7,77 (d, J=7,5Hz) 7,41 (m) 7,41 (m) Tương quan HMBC C(ppm) COSY J2... H(ppm) 2,24 (dd,J=7,0;2,0Hz) 5,61 (dd,J=6,2;2,0Hz) 3,32 (d, J=6,0Hz) 5,38 1,76 1,76 5,44 (dd,J=3,5;2,0Hz) (m) (m) (dd,J=11,0; 6,0Hz) 5,94 (d,J=10,0Hz) 6,24 (d,J=10,0Hz) 2,36 (d,J=20,0Hz) 2,84 (dd,J=20,0;7,0Hz) 1,15 1,76 2,38 1,03 4,91 5,44 (s) (s) (s) (s) (s) (s) 6,44 (d,J=16,0Hz) 7,68 (d,J=16,0Hz) 2,07 (s) 2,07 (s) 2,06 (s) 2,03 (s) 7,77 (dd,J=8,0Hz) 7,44 (m) 7,41 (m) C (ppm) 48,7 68,6 37,7 139,8 76,1... HÌNH ẢNH CÂY THƠNG ĐỎ (TAXUS WALLICHIANA ZUCC. ) Hình 1 : Lá thơng đỏ Hình 2: Thân gỗ và mẫu gỗ cây thơng đỏ Hình 3: Cây thơng đỏ 1 TỒNG QUAN 1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 1.1 [1],[2] Mơ tả thực vật Tên khoa học Taxus wallichiana Zucc Giới (regnum) : Plantae Ngành (divisio) : Pinophyta Lớp (class) : Pinopsida Bộ (ordo) : Pinales Họ (familia) : Taxaceae Chi (branch) : Taxus Thơng đỏ là một loại cây thân gỗ, lá... THÀNH PHẦN HĨA HỌC 1.5.1 Thành phần hóa học có trong lá [4],[5] Năm 1997, từ lá thơng đỏ (Taxus Wallichina Zucc. ) thu hái tại Lâm Đồng Nguyễn Hữu Tồn Phan và cộng sự đã cơng bố tách được hai hợp chất là 10deacetylbaccatin III ( 2) và 19-hydroxybaccatin III ( 3) Năm 2007, Nguyễn Thị Thanh Tâm tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học trong lá thơng đỏ và cơ lập được sáu hợp chất: 10-deacetyltaxuspine ( 4), ... F ( 7) 1.5.1 Thành phần hóa học có trong gỗ Trong gỗ thơng đỏ (Taxus wallichiana) , các nhà nghiên cứu tìm thấy các loại hợp chất chứa các dẫn xuất của taxane-diterpene và các hợp chất lignan • Taxane- diterpene[9], [11], [12] Trong gỗ Taxus wallichiana chứa taxane-diterpene: baccatin III ( 8), 19hydroxybaccatin III ( 3), baccatin IV ( 9), 9-dihydro-13-acetylbaccatin III (1 0), 1βhydroxybaccatin I (1 1), tasuxin... MeO O H MeO O O HO HO H H OMe OMe OH OH α-Conidendrin (1 7) β-Conidendrin (1 8) OCH3 H MeO MeO OH OH HO O HO OH H OMe OMe OH Isolariciresinol-6-methyl (1 9) O OH Hydroxymatairesinol (2 0) 2 NGHIÊN CỨU 2.1 GIỚI THIỆU CHUNG Trong luận văn này, chúng tơi tiến hành nghiên cứu thành phần hóa học của gỗ cây thơng đỏ (Taxus wallichiana Zucc. ) Mẫu gỗ thơng đỏ được lấy tại Hồ Tiên huyện Đơn Dương tỉnh Lâm Đồng vào... J=20,0Hz) 2,80 (dd,J=20,0;7,0Hz) 1,13 1,76 2,34 1,03 4,91 5,43 (s) (s) (s) (s) (s) (s) 6,44 (d, J=16,0Hz) 7,67 (d, J=16,0Hz) 2,06 (s) 2,06 (s) 2,06 (s) 2,04 (s) 7,77 (d, J=7,5 Hz) 7,41 (m) 7,41 (m) C (ppm) 48,8 68,8 42,1 139,5 76,2 35,0 69,6 47,7 75,0 72,8 151,1 138,5 199,0 37,2 36,4 37,8 25,3 14,3 13,2 118,5 166,1 117,5 146,5 169,3 20,8 169,6 21,3 169,7 21,4 169,1 20,7 134,5 128,9 128,7 134,5 H(ppm) 2,24... 17,5 118,3 170,2 22,0 170,8 21,2 170,0 21,2 169,9 21,5 169,8 21,5 5,76 (d;J=10,2 Hz) 6,03 (d;J=10,2 Hz) 2,40 (m) 2,83 (dd;J=19,2;9, 0) 4,93 (dd;J=9,0; 4, 8) 1,68 1,09 2,15 0,82 5,30 4,84 (s) (s) (s) (s) (brs) (brs) 39,4 69,8 36,9 25,8 31,6 21,0 17,3 118,3 2,14 (s) 170,2 2,01 (s) 170,8 22,0 170,0 2,00 (s) 2,01 (s) 2,00 (s) 169,9 21,2 169,8 21,2 2.3.3 Hợp chất T3 AcO OAc 19 10 18 11 12 8 16 3 17 15 13 O... (1H; m) 1,83 (1H; m) 1,72 (2H; m) 58,8 3 4, 7, 20, 5-OCO- 78,5 28,5 5 4, 8 27,5 44,6 7, 11, 19, 9-OCO8, 12, 15, 10-OCO- 133,1 137,5 1,72 1,12 2,14 0,85 5,33 4,87 (3H; (3H; (3H; (3H; (1H; (1H; s) s) s) s) brs) brs) 2,17 (3H; s) 2,04 (3H; s) 2,03 (3H; s) 2,01 (3H; s) 2,00 (3H; s) 170,2 22,0 170,8 21,2 170,0 21,2 169,9 21,5 169,8 21,5 2-OCO5-OCO9-OCO10-OCO14-OCO- Bảng 4-Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz) và . ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN PHẠM THỊ THẢO UYÊN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA GỖ CÂY THÔNG ĐỎ (TAXUS WALLICHIANA ZUCC. ) Họ Thanh Tùng (Taxaceae) CHUYÊN. sinh học thú v ị . Khảo sát thành phần hóa học của gỗ cây thông đỏ Taxus wallichiana Zucc. - 10 - MỘT SỐ HÌNH ẢNH CÂY THÔNG ĐỎ (TAXUS WALLICHIANA ZUCC. ) Hình 1 : Lá thông đỏ Hình 2: Thân gỗ. của cây thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc. ), nhưng chưa có bất kỳ khảo sát nào về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học có trong gỗ. Vì vậy, chúng tôi tiến hành đề tài khảo sát thành phần