Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM ĐỖ TIẾN LÂM NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY NGŨ VỊ TỬ NAM (SCHISANDRA SPHENANTHERA REHD. ET WILS.), HỌ SCHISANDRACEAE Ở DAK GLEI - KONTUM LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC Thái Nguyên - 2012 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM ĐỖ TIẾN LÂM NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY NGŨ VỊ TỬ NAM (SCHISANDRA SPHENANTHERA REHD. ET WILS.), HỌ SCHISANDRACEAE Ở DAK GLEI - KONTUM Chuyên ngành: Hoá học Hữu cơ Mã số : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS. NGUYỄN QUYẾT TIẾN Thái Nguyên - 2012 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Bản luận văn này được hoàn thành tại phòng Hoạt chất Sinh học, Viện Hóa học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam. Tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc của mình tới TS. Nguyễn Quyết Tiến, TS. Phạm Thị Hồng Minh, PGS.TS Phạm Văn Thỉnh những người thầy đã chỉ ra hướng nghiên cứu, hướng dẫn tận tình, động viên và giúp đỡ từng bước đi của tôi trong quá trình nghiên cứu thực hiện luận văn. Xin chân thành cảm ơn Phòng Hoạt chất Sinh học, Phòng Nghiên cứu Cấu trúc phân tử -Viện Hóa học đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành các kế hoạch nghiên cứu. Nhân dịp này, tôi cũng xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban Lãnh đạo Khoa Hóa, Khoa Sau đại học - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành bản luận văn này. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Bố, Mẹ tôi, những người thân trong gia đình và các đồng nghiệp đã giúp đỡ, động viên tôi rất nhiều trong quá trình thực hiện luận văn. Thái Nguyên, tháng 04 năm 2012 Tác giả Đỗ Tiến Lâm Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các số liệu, kết quả nêu trong luận văn này là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả Đỗ Tiến Lâm Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i MỤC LỤC Trang Trang bìa phụ Lời cảm ơn Lời cam đoan Mục lục i Danh mục các kí hiệu, các chữ viết tắt iii Danh mục các bảng iv Danh mục các hình, sơ đồ v Danh mục các phụ lục vii MỞ ĐẦU 1 Chƣơng 1. TỔNG QUAN 3 1.1. Khái quát về các thực vật chi Schisandra 3 1.2. Thành phần hóa học các loài thuộc chi Schisandra 4 1.2.1. Các hợp chất lignan 4 1.2.1.1. Các hợp chất cyclolignan 4 1.2.1.2. Các hợp chất epoxylignan 10 1.2.2. Các hợp chất tecpenoit 12 1.2.2.1. Các hợp chất tritecpen lacton 12 1.2.2.2. Các hợp chất tritecpen khung lanostan 22 1.3. Hoạt tính sinh học của các hợp chất tritecpenoit và lignan 25 1.3.1. Hoạt tính sinh học của các hợp chất tritecpenoit 25 1.3.2. Hoạt tính sinh học của các hợp chất lignan 29 Chƣơng 2. THỰC NGHIỆM 32 2.1. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 32 2.1.1. Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu 32 2.1.2. Phương pháp ngâm chiết và phân lập các hợp chất từ dịch chiết 32 2.1.3. Phương pháp xác định cấu trúc hoá học các chất phân lập được 33 2.2. Dụng cụ, hóa chất và thiết bị nghiên cứu 33 2.2.1. Dụng cụ, hoá chất 33 2.2.2. Thiết bị nghiên cứu 34 2.3. Thu nhận các dịch chiết từ cây Ngũ vị tử nam 35 2.3.1. Thu nhận các dịch chiết 35 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii 2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết 36 2.3.2.1. Phát hiện các hợp chất sterol 36 2.3.2.2. Phát hiện các ancaloit 37 2.3.2.3. Phát hiện các flavonoit 37 2.3.2.4. Phát hiện các cumarin 37 2.3.2.5. Định tính các glucosit tim 38 2.3.2.6. Định tính các saponin 38 2.3.2.7. Định tính các tanin 38 2.4.1. Cặn dịch chiết n-hexan của cây Ngũ vị tử nam (SSH) 39 2.4.1.1. Hợp chất β-sitosterol (SSH1) 40 2.4.1.2. Hợp chất 1-linoleoylglycerol (SSH2) 40 2.4.1.3. Hợp chất (+)-gomisin M 2 (SSH3) 41 2.4.1.4. Hợp chất (±)-gomisin M 1 (SSH4) 42 2.4.2. Cặn dịch chiết etyl axetat của cây Ngũ vị tử nam(SSE) 42 2.4.2.1. Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (SSE1) 43 2.4.2.2. Hợp chất axit kadsuric [axit 3,4-seco-lanosta- 4(28),9(11),24(Z)-trien-3,26-dioic] (SSE2) 43 Chƣơng 3. THẢO LUẬN KẾT QUẢ 45 3.1. Nguyên tắc chung 45 3.2. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác nhau của cây Ngũ vị tử nam 45 3.2.1. Hợp chất β-sitosterol hay stigmast-5-en-24R-3-ol (SSH1) 46 3.2.2. Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (SSE1) 46 3.2.3. Hợp chất 1-linoleoylglycerol (SSH2) 49 3.2.4. Hợp chất (+)-Gomisin M 2 (SSH3) 57 3.2.5. Hợp chất (±)-Gomisin M 1 (SSH4) 67 3.2.6. Hợp chất axit kadsuric [axit 3,4-seco-lanosta-4(28),9(11),24(Z)- trien-3,26-dioic] (SSE2) 76 KẾT LUẬN 86 CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ CÔNG BỐ 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO 88 PHỤ LỤC PL1 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN  Các phƣơng pháp sắc ký CC : Column Chromatography GC : Gas Chromatography SKLM : Sắc ký lớp mỏng  Các phƣơng pháp phổ MS : Mass Spectroscopy ESI-MS : Electron Spray Ionization Mass Spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance 1 H-NMR : 1 H-Nuclear Magnetic Resonance 13 C-NMR : 13 C- Nuclear Magnetic Resonance DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HMQC : Heteronuclear Multiple - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1. Danh sách một số loài thực vật chi Ngũ vị tử 3 Bảng 2.1. Khối lượng các cặn chiết thu được từ cây Schisandra sphenanthera 36 Bảng 2.2. Kết quả định tính các nhóm chất trong cây Schisandra sphenanthera 39 Bảng 3.1. Độ dịch chuyển hóa học 13 C NMR của SSH1 và SSE1 47 Bảng 3.2. Các số liệu NMR và các tương tác xa trong SSH3 59 Bảng 3.3. Các số liệu NMR và các tương tác xa trong SSH4 68 Bảng 3.4. Số liệu phổ NMR và các tương tác xa của SSE2 78 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn v DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1. Cây và quả Ngũ vị tử nam 32 Hình 2.2. Hoa Ngũ vị tử nam 32 Hình 3.2. Cấu trúc hóa học của SSH2 49 Hình 3.2.1. Sắc ký đồ (GC) thủy phân este hóa của SSH2 50 Hình 3.2.2. Phổ FT-IR của SSH2 51 Hình 3.2.3. Phổ 1 H – NMR của SSH2 52 Hình 3.2.4. Phổ 13 C – NMR của SSH2 53 Hình 3.2.5. Phổ 13 C-DEPT của SSH2 54 Hình 3.2.6. Phổ HSQC của SSH2 55 Hình 3.2.7. Phổ HMBC của SSH2 56 Hình 3.3. Cấu trúc hóa học của SSH3 58 Hình 3.3.1. Phổ FT-IR của SSH3 60 Hình 3.3.2. Phổ LC-ESI-MS của SSH3 61 Hình 3.3.3. Phổ 1 H–NMR của SSH3 62 Hình 3.3.4. Phổ 13 C – NMR của SSH3 63 Hình 3.3.5. Phổ 13 C-DEPT của SSH3 64 Hình 3.3.6. Phổ HSQC của SSH3 65 Hình 3.3.7. Phổ HMBC của SSH3 66 Hình 3.4. Cấu trúc hóa học của SSH4 67 Hình 3.4.1. Phổ FT-IR của SSH4 69 Hình 3.4.2. Phổ LC-ESI-MS của SSH4 70 Hình 3.4.3. Phổ 1 H-NMR của SSH4 71 Hình 3.4.4. Phổ 13 C-NMR của SSH4 72 Hình 3.4.5. Phổ 13 C-DEPT của SSH4 73 Hình 3.4.6. Phổ HSQC của SSH4 74 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vi Hình 3.4.7. Phổ HMBC của SSH4 75 Hình 3.5. Cấu trúc hóa học của SSE2 77 Hình 3.5.1. Phổ FT-IR SSE2 79 Hình 3.5.2. Phổ LC-ESI-MS của SSE2 80 Hình 3.5.3. Phổ 1 H-NMR của SSE2 81 Hình 3.5.4. Phổ 13 C-NMR của SSE2 82 Hình 3.5.5. Phổ 13 C-DEPT của SSE2 83 Hình 3.5.6. Phổ HSQC của SSE2 84 Hình 3.5.7. Phổ HMBC của SSE2 85 DANH MỤC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1. Ngâm chiết mẫu cây Ngũ vị tử nam (Schisandra sphenanthera). 35 [...]... Schisandra sphenanthera ở Trung Quốc nói trên cho thấy nó có nhiều tác dụng rất phong phú Do vậy, chúng tôi đã chọn đề tài với tên: Nghiên cứu thành phần hoá học cây Ngũ vị tử nam (Schisandra sphenanthera Rehd et Wils.), họ Schisandraceae ở Dak Glei-KonTum làm đối tượng nghiên cứu để tìm hiểu thành phần hóa học với mục đích tìm ra những hợp chất có hoạt tính sinh học làm sáng tỏ việc sử dụng cây này... và sử dụng hiệu quả cây dược liệu quí này Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3 Chƣơng 1 TỔNG QUAN CÁC THỰC VẬT CHI NGŨ VỊ TỬ (SCHISANDRA) VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CHÚNG 1.1 Khái quát về các thực vật chi Schisandra Cây Ngũ vị tử nam với danh pháp khoa học là Schisandra sphenanthera Rehd et Wils., chi Ngũ vị tử (Schisandra) , họ Ngũ vị (Schisandraceae) , bộ Hồi... vật chi Ngũ vị tử (Schisandra) trong họ Ngũ vị (Schizandraceae) ở Việt Nam nói chung còn ít được nghiên cứu Phần lớn các Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2 loài thực vật ở chi này hầu hết đều là nguồn nguyên liệu làm thuốc có giá trị Cây Ngũ vị tử nam có tên khoa học Schisandra sphenanthera Rehd et Wils được sử dụng làm thuốc bổ Hiện nay ở Việt Nam chưa... đường hô hấp, đường tiêu hóa,…[14] 1.2 Thành phần hóa học các loài thuộc chi Schisandra Cho đến nay đã có khoảng 25 loài thực vật chi Schisandra được nghiên cứu hoá thực vật [68], đã phân lập và nhận dạng được nhiều chất, thuộc các nhóm chất khác nhau Thành phần hóa học chính của các loài chi Ngũ vị tử là các lignan và tritecpenoit Ngoài ra, cây còn chứa các thành phần khác như: flavonoit, axit cacboxylic,... (Plantae) Hiện nay, chi Ngũ vị tử (Schisandra) có khoảng 25 loài [68] Cây thường mọc trên sườn núi hoặc dọc theo bờ sông tại một số nơi ở Việt Nam từ Cao Bằng, Lào Cai, Yên Bái, Thanh Hoá, Kon Tum, … Ngoài ra, còn phân bố ở Ấn Độ, Trung Quốc, Hoa Kỳ, Nhật Bản, Hàn Quốc, Quả khô của chúng được dùng trong y học [13] Chi Schisandra được gọi là Ngũ vị tử vì quả của nó có đủ năm vị cơ bản: mặn, ngọt, chua,... chưa có công trình công bố nào về thành phần hóa học của cây này cũng như việc sử dụng nó trong y học Ở Trung Quốc người ta thường hay sử dụng quả của loài Schisandra sphenanthera chữa ho viêm phế quản, hen suyễn, chữa bệnh di mộng tinh, trẻ em hay đái dầm, ra mồ hôi vào ban đêm, chữa tiểu đường, bệnh tim đập nhanh và chứng mất ngủ [63] Mới đây các nhà khoa học đã nghiên cứu về tác dụng dược lý dịch chiết... schisanlacton D (49) từ cây Schisandra sphenanthera [33] 46 Schisanlacton A Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 13 47 Schisanlacton B 48 Schisanlacton C 49 Schisanlacton D Năm 1984 Li, R và các cộng sự đã tách chiết được hợp chất là henridilacton D (50) từ thân cây Schisandra henryi [22] 50 Henridilacton D Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn... phần hóa học của vỏ cây Schisandra sphenanthera cho biết sự có mặt của các hợp chất lignan cùng với tritecpenoit khung lanostan và một số hợp chất khác [40] Một số hợp chất lignan và schiphenanlacton phân lập từ lá và vỏ loài này được chứng minh có hoạt tính anti-HIV-1 yếu với giá trị nồng độ tối thiểu IC50 15,5-29,5µg/ml [47] Những kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học của... hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1 MỞ ĐẦU Nền Y dược học cổ truyền ở Việt Nam đã có từ bao đời nay, đang được coi là một trong những phương pháp chữa bệnh có vai trò và tiềm năng to lớn trong sự nghiệp bảo vệ và phòng chống các loại dịch bệnh phục vụ sức khỏe cho nhân dân của Nhà nước ta Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới, gió mùa nên được thừa hưởng... cây thuốc cổ truyền của Trung quốc [12] Các hợp chất phân lập được đem thử hoạt tính chống viêm xơ gan trên thỏ, trong đó một số chất cho kết quả rất tốt đó là các lignan, các lacton và một số tritecpenoit khung lanostan [27] Những nghiên cứu nói trên chủ yếu là về quả còn thành phần lá và vỏ cây hầu như chưa được nghiên cứu đến Tuy nhiên gần đây các nhà khoa học Trung quốc đã có công bố về thành phần . tên: Nghiên cứu thành phần hoá học cây Ngũ vị tử nam (Schisandra sphenanthera Rehd. et Wils. ), họ Schisandraceae ở Dak Glei-KonTum làm đối tượng nghiên cứu để tìm hiểu thành phần hóa học với. NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY NGŨ VỊ TỬ NAM (SCHISANDRA SPHENANTHERA REHD. ET WILS. ), HỌ SCHISANDRACEAE Ở DAK GLEI - KONTUM LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC Thái. CÂY NGŨ VỊ TỬ NAM (SCHISANDRA SPHENANTHERA REHD. ET WILS. ), HỌ SCHISANDRACEAE Ở DAK GLEI - KONTUM Chuyên ngành: Hoá học Hữu cơ Mã số : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC