Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM TRẦ N THU NGA XÁC ĐNH ĐNG THI ACETAMINOPHEN V AXIT ASCOBIC TRONG THUỐ C HAPACOL KIDS VÀ EFFE-PARACETAMOL THEO PHƢƠNG PHÁ P PHỔ HẤ P THỤ PHÂN TƢ̉ SƢ̉ DỤ NG CHƢƠNG TRNH LỌC KALMAN LUẬ N VĂN THẠ C SĨ HA HỌC Thái Nguyên – 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM TRẦ N THU NGA XÁC ĐNH ĐNG THI ACETAMINOPHEN V AXIT ASCOBIC TRONG THUỐ C HAPACOL KIDS VÀ EFFE-PARACETAMOL THEO PHƢƠNG PHÁ P PHỔ HẤ P THỤ PHÂN TƢ̉ SƢ̉ DỤ NG CHƢƠNG TRÌ NH LỌ C KALMAN Chuyên ngành: Hoá Phân tí ch Mã số: 60.44.29 LUẬ N VĂN THẠ C SĨ HA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS.TS. TRẦ N TƢ́ HIẾ U TS. MAI XUÂN TRƢỜ NG Thái Nguyên - 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC Trang Danh mụ c cá c tƣ̀ viế t tắt trong luậ n văn 4 Danh mụ c cá c bả ng trong luậ n văn 5 Danh mụ c cá c hì nh trong luậ n văn 7 Mở đầ u 8 Chƣơng 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 10 1.1. Định luật hấp thụ quang 10 1.1.1. Định luật Bughe - Lămbe - Bia 10 1.1.2. Nhƣ̃ ng nguyên nhân gây sai lệ ch đị nh luậ t hấ p thụ quang 10 1.1.3. Tnh chấ t cộ ng tí nh độ hấ p thụ quang 11 1.2. Một số phƣơng pháp phân tch quang phổ UV-VIS xác định đồng thời các cấu tử có phổ hấp thụ phân tử xen phủ nhau 12 1.2.1. Phƣơng pháp phổ đạo hàm 13 1.2.2. Phƣơng pháp Vierordt 15 1.2.3. Phƣơng pháp bình phƣơng tối thiểu 16 1.2.4. Phƣơng pháp mạng nơ ron nhân tạo 18 1.2.5. Phƣơng pháp lọc Kalman 20 1.3 Tổ ng quan về acetaminophen , axit ascobic và một số loại thuốc giảm đau, hạ sôt 21 1.3.1. Sơ lƣợc về acetaminophen 21 1.3.2. Sơ lƣợc về axit ascobic 27 1.3.3. Một số loại thuốc chứa thành phần acetaminophen và axit ascobic trên thị trƣờ ng hiệ n nay 31 1.4. Phƣơng pháp xác định riêng acetaminophen và axit ascobic 33 1.4.1. Phƣơng pháp xác định acetaminophen 33 1.4.1.1. Xác định acetaminophen dạ ng nguyên liệ u 33 1.4.1.2. Acetaminophen dạ ng viên né n 34 1.4.2. Phƣơng pháp xác định axit ascobic ( vitamin C) 34 1.4.2.1. Xác định vitamin C nguyên liu 34 1.4.2.2. Quy trì nh xá c đị nh vitamin C 34 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Chƣơng 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1. Nội dung nghiên cứu 37 2.2. Phƣơng phá p nghiên cƣ́ u 38 2.2.1. Phƣơng phá p nghiên cƣ́ u tà i liệ u 38 2.2.2. Phƣơng phá p nghiên cƣ́ u thƣ̣ c nghiệ m 38 2.3. Đánh giá độ tin cậy của quy trì nh phân tch 38 2.3.1. Xác định giới hạn phá t hi n, giớ i hạ n đị nh lƣợ ng 38 2.3.1. Giớ i hạ n phá t hiệ n (LOD) 38 2.3.2. Giớ i hạ n đị nh lƣợ ng (LOQ) 39 2.3.3. Đá nh giá độ tin cậ y củ a phƣơng phá p 39 2.3.4. Đánh giá kết quả phân tch theo thống kê 40 2.4. Dụng cụ và hóa chất. 40 2.4.1. Dụng cụ 40 2.4.2. Hóa chất 41 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1. Khảo sát sơ bộ phổ hấ p thụ phân tƣ̉ củ a acetaminophen và axit ascobic 43 3.2. Khảo sát s phụ thuộc độ hấp thụ quang của ACE và ASC vào pH 44 3.3. Kiểm tra tnh cộng tnh độ hấp thụ quang củ a dung dị ch hỗ n hợ p acetaminophen và axit ascobic 45 3.4. Khảo sát khoảng tuyến tnh sƣ̣ tuân theo đị nh luậ t Bughe - Lămbe - Bia của acetaminophen và axit ascobic, xác định LOD, LOQ 46 3.4.1. Khảo sát khoảng tuyến tnh của ACE 46 3.4.2. Xác định LOD và LOQ của ACE 48 3.4.3. Khảo sát khoảng tuyến tnh của ASC 49 3.4.4. Xác định LOD và LOQ của ASC 50 3.5. Khảo sát s phụ thuộ c độ hấp thụ quang của acetaminophen và axit ascobic theo thờ i gian 51 3.5.1. S phụ thuộ c độ hấp thụ quang của dung dị ch chuẩ n acetaminophen theo thời gian 51 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.5.2. S phụ thuộ c độ hấp thụ quang của dung dị ch chuẩ n axit ascobic theo thời gian. 53 3.6. Khảo sát s phụ thuộ c độ hấp thụ quang c ủa acetaminophen và axit ascobic theo nhit độ 54 3.7. Khảo sát, đánh giá độ tin cậy của phƣơng pháp nghiên cƣ́ u trên mẫu t pha 55 3.8. Xác định hàm lƣợng acetaminophen và axit ascobic trong mẫu thuốc trên thị trƣờng hin nay 61 3.8.1. Đị nh lƣợ ng ACE và ASC trong gó i thuố c bộ t Hapacol Kids 61 3.8.2. Đị nh lƣợ ng ACE và ASC trong gó i thuố c bộ t Effe Paracetamol 62 3.9. Đánh giá độ đú ng củ a phé p phân tí ch theo phƣơng phá p thêm chuẩ n 64 3.9.1. Độ thu hồ i ACE và ASC trong thuố c Hapacol Kids 64 3.9.2 Độ thu hồi ACE và ASC trong gói thuốc sủi bọt Effe -paracetamol 65 KẾT LUẬN 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 PHỤ LỤC 72 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Tiếng vit Tiếng Anh Viết tắt Axetaminophen Acetaminophen ACE Axit ascobic (vitamin C) Ascorbic Acid ASC Sắc ký lỏng hiu năng cao High Performance Liquid Chromatography HPLC Giới hạn phát hin Limit Of Detection LOD Giới hạn định lƣợng Limit Of Quantity LOQ Bình phƣơng tối thiểu Least Squares LS Sai số tƣơng đối Relative Error RE Độ lch chuẩn Standard Deviation SD hoặ c S Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1. Độ hấp thụ quang của ACE và ASC ở cá c giá trị pH 44 Bảng 3.2. Độ hấp thụ quang củ a ACE, ASC và hỗ n hợ p ở mộ t số bƣớ c só ng. 46 Bảng 3.3. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang củ a ACE theo nồ ng độ 47 Bảng 3.4. Kết quả xá c đị nh LOD và LOQ củ a ACE 49 Bảng 3.5. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang của ASC theo nồ ng độ 49 Bảng 3.6. Kết quả tí nh LOD và LOQ củ a ASC 51 Bảng 3.7. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang củ a ACE theo thờ i gian 52 Bảng 3.8. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang củ a ASC theo thờ i gian 53 Bảng 3.9. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang củ a ACE và ASC theo nhiệ t độ 55 Bảng 3.10. Pha chế cá c dung dị ch hỗ n hợ p ACE và ASC khi hà m lƣợ ng ACE lớ n hơn ASC 56 Bảng 3.11. Pha chế cá c dung dị ch hỗ n hợ p ACE và ASC khi hà m lƣợ ng ASC lớ n hơn ACE 57 Bảng 3.12. Kế t quả tí nh nồ ng độ , sai số củ a ACE và ASC trong hỗ n hợ p khi hà m lƣợ ng ASC <ACE 59 Bảng 3.13. Kế t quả tí nh nồ ng độ , sai số củ a ACE và ASC trong hỗ n hợ p khi hà m lƣợ ng ACE <ASC 60 Bảng 3.14. Kết quả xá c đị nh hà m lƣợ ng ACE và ASC trong thuố c Hapacol Kids 62 Bảng 3.15. Kết quả xá c đị nh hà m lƣợ ng ACE và ASC trong thuố c Effe-Paracetamol 63 Bảng 3.16. Thành phần các dung dịch chuẩn ACE và ASC thêm vào dung dịch mẫu Hapacol Kids 64 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Bảng 3.17. Kết quả xác định độ thu hồ i ACE và ASC trong mẫ u thuốc Hapacol Kids 65 Bảng 3.18. Thành phầ n dung dịch chuẩ n ACE và ASC thêm và o dung dị ch mẫ u Effe-Paracetamol 66 Bảng 3.19. Kết quả xác định độ thu hồ i ACE và ASC trong mẫ u thuốc Effe-Paracetamol 66 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1. Mô hình hoạt động của mạng nơ ron 19 Hình 1.2. Các phả n ƣ́ ng tổ ng hợ p acetaminophen 22 Hình 1.3. Các phản ứng trong quá trình chuyển hóa acetaminophen 24 Hình 3.1. Phổ hấp thụ của dung dịch chuẩn acetaminophen và axit ascobic 43 Hình 3.2. Đƣờng hồi quy tuyến tnh biểu din s phụ t huộ c độ hấ p thụ quang A và o nồ ng độ ACE (0,2-25 g/ml) 47 Hình 3.3. Đƣờng hồi quy tuyến tnh biểu din s phụ thuộc độ hấ p thụ quang A và o nồ ng độ ASC (0,2-20,0 g/ml) 50 Hình 3.4. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang củ a dung dị ch ACE theo thờ i gian 52 Hình 3.5. Sƣ̣ phụ thuộ c độ hấ p thụ quang củ a dung dị ch ASC theo thờ i gian 54 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1 MỞ ĐẦU Trong những năm gần đây vic sản xuất các chế phẩm dƣợc dụng tăng nhanh, đặc bit vic sản xuất các thuốc đa thành phần ngày càng phong phú. Do đó công tác kiểm nghim chất lƣợng sản phẩm, xác định thành phần của thuốc ngày càng đòi hỏi kỹ thuật chnh xác hin đại và nhanh chóng. Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệ u năng cao (HPLC) có độ lặp và độ chnh xác cao đã đƣợc ứng dụng. Tuy nhiên phƣơng pháp HPLC đòi hỏi các hóa chất và dung môi phải có độ tinh khiết cao, h thống thiết bị đắt tiền và đòi hỏi kỹ thuật phƣ́ c tạ p nên chƣa thật s phổ biến. Phƣơng pháp quang phổ hấp thụ phân tử có nhiều ƣu điểm hơn nhƣ sƣ̉ dụ ng má y mó c đơn giả n , hóa chất phổ biến và thờ i gian phân tí ch nhanh tiế t kiệ m đƣợ c hó a chấ t , hạ giá thành phân tch mẫu đồ ng thờ i do thờ i gian phân tí ch nhanh cng tránh đƣợc s nhim bẩn . Tuy nhiên, để xác định đồng thời hỗn hợp nhiều cấu tử có phổ hấp thụ quang phân tử xen phủ nhau thì lại gặp khó khăn trong vic tách riêng từng cấu tử hoặc phải áp dụng các bin pháp thêm chất che, loại trừ ảnh hƣởng của từng cấu tử, đó là quy trình phức tạp mất nhiều thời gian và d gây sai số trong quá trình thc hin, đôi khi không thể thc hin đƣợc [3, 4, 5]. Đã có n hiều công trình nghiên cứu phƣơng pháp trắc quang xác định đồng thời hỗn hợp nhiều cấu tử có phổ hấp thụ quang phân tử xen phủ nhau mà không phải tách chúng ra khỏi nhau nhƣ: phƣơng pháp sai phân, phƣơng pháp phổ đạo hàm, phƣơng pháp hồi quy, phƣơng pháp Vierordt, phƣơng pháp bình phƣơng tối thiểu, phƣơng pháp lọc Kalman. Phƣơng pháp trắc quang dùng phổ toàn phần kết hợp với kỹ thuật tnh toán và ứng dụng phần mềm máy tnh đã bƣớc đầu đƣợc nghiên cứu và cho nhiều ƣu điểm: quy trình phân tch đơn giản, tốn t thời gian, tiết kim hóa chất và đạt độ chnh xác cao [3, 4, 6, 7, 12]. [...]... chúng Trong luõn vn nay, chỳng tụi s dng phng phỏp trc quang dựng ph ton phn kt hp ỏp dng thut toỏn lc Kalman xõy dng qui trỡnh nh lng ng thi acetaminophen (ACE) v axit ascorbic (ASC) trong thuc gim au - h st Hapacol Kids v trong thuc Effe-Paracetamol, phng phỏp xut cú th ỏp dng trong thc tiờn phõn tich v kim nghiờm dc Xuõt phat t nhng ly do trờn , chỳng tụi thc hiờn ti : "Xỏc inh ụng thi acetaminophen. .. Tớnh cht: Acetaminophen nguyờn cht l cht bt mu trng, khụng mựi, v ng nh, khú tan trong nc, tan tt trong nc núng, tan trong ancol v dung dch hydroxit kim loi kim do to mui phenolat Khi thy phõn acetaminophen bng dung dch axit HCl, sau ú thờm nc thỡ khụng xut hiờn kt ta vỡ p-aminophenol tan trong axit nhng nu thờm thuc th kalidicromat vo thỡ cú phn ng to kt ta mu tim Dc ng hc v tỏc dng ca hot cht acetaminophen. .. quang A, tinh c hm lng acetaminophen [13] 1.4.2 Phng phỏp xỏc nh axit ascobic( vitamin C) 1.4.2.1 Xỏc inh vitamin C nguyờn liu Phng phỏp xỏc nh hm lng vitamin C trong thc phm l s dng phng phỏp oxi húa - kh Phn ng oxi húa kh tt hn phng phỏp chun axit- baz It tng i it tan trong nc, nhng tan trong dung di ch I- to thnh triioua: I2 +I- I3 Triioua oxi húa vitamin C to axit dehydroascobic: C6 H8O6 +I3 ... Efferalgan 80mg, Hapacol Kids, Effe Paracetamol, - Ch phm dng bt tiờm: Pro-Dafalgan 2g proparacetamol tng ng 1g paracetamol - Ch phm dng dung dch ung - Cỏc ch phm kt hp vi cỏc thuc khỏc S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn 19 http://www.lrc-tnu.edu.vn 1.3.2 S lc v axit ascobic Axit ascobic co cụng thc phõn t l: C6H8O6 Khi lng mol phõn t: 176,13 (g/mol) Cụng thc cu to: Axit ascobic (vitamin... hp cho tr em 2 n 4 tui 1.4 Phng phỏp xỏc nh riờng acetaminophen v axit ascobic 1.4.1 Phng phỏp xỏc nh acetaminophen 1.4.1.1 Xỏc inh acetaminophen dng nguyờn liu Hũa tan 0,3000 gam ch phm vo hn hp gm 10 ml nc v 30 ml axit sunfuric loóng un hi lu trong 60 phỳt, sau ú lm lnh, thờm nc thnh 100 ml Ly 20 ml dung dch trờn thờm 40 ml nc, 40 gam nc ỏ, 15 ml axit clohidric loóng v 0,1 ml dung dch feroin Chun... theo s hỡnh 1.2 O HN CH3 NH2 O O O + + H3C H3C O OH CH3 OH OH p-aminphenol acetaminophen anhidrit axetic axit axetic Hinh 1.2 Cỏc phan ng tng hp acetaminophen Phenol c nitrat húa bi axit sunfuric v natri nitrat (phenol l cht cú hot tinh cao, s nitrat húa ca nú ch ũi hi iu kiờn thụng thng trong khi hn hp hi axit sunfuric v axit nitric cn cú nitrat benzen) Cht ng phõn para c tỏch khi ng phõn ortho bng... thuỷ phân (enzim) các glucuronit ion sun fat OH COCH3 NH O sự hyđroxyl hoá bằng oxi COCH3 HO O O N axit glucuronit S OH O OH COCH3 c NH sự sắp xếp lại (tách n-ớc-chuyển vị) S COCH3 N p với ên hợ ne Sự li athio Glut Glutathione OH Phản ứng với Protein và Axit nucleic Tính độc Hinh 1.3 Cỏc phan ng trong chuyn húa acetaminophen Trong o: Glutathione (C10H17O6N3S) l tripeptit phõn b rng rói v quan trng trong. .. ay, nng hn cú th kốm theo st do thuc v thng tn niờm mc Ngi bờnh mn cm vi salicylat him khi mn cm vi acetaminophen v nhng thuc cú liờn quan mt s it trng hp riờng l, acetaminophen ó gõy gim bch cu trung tinh, gim tiu cu v gim ton th huyt cu S dng acetaminophen trong nm u tiờn ca cuc sng v sau ú trong thi k th u cú th tng nguy c b hen, viờm mui, kt mc mt v eczema vo lỳc 6 n 7 tui, theo cỏc kt qu ca giai... dng trong thc tiờn phõn tich v kim nghiờm dc Xuõt phat t nhng ly do trờn , chỳng tụi thc hiờn ti : "Xỏc inh ụng thi acetaminophen va axit ascobic t rong thuục Hapacol Kids va Effe-Paracetamol theo phng phap phụ hõp thu phõn t s dung chng trinh lc Kalman" S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn 2 http://www.lrc-tnu.edu.vn Chng 1 TNG QUAN TAI LIU 1.1 nh lut hp th quang 1 1.1 nh lut... bot , Thnh phn cha trong 1 gúi l 200 mg acetaminophen, 200 mg vitamin C Cụng dng: Thuc tr gim au, khỏng viờm dựng iu tr cỏc chng bờnh gõy au nh hoc st -Hapacol Kids: Thnh phn cha trong 1 gúi thuc l 150 mg acetaminophen 75 mg vitamin C c bo ch di dng thuc bt dựng cho tr em Cụng dng: gim au, h st nhanh cú tỏc dng khỏng vi nhiờm khun c th tr nh, thuc cú mựi thm, v ngt, tan hon ton trong nc nờn dờ hp . phƣơng pháp phân tch quang phổ UV-VIS xác định đồng thời các cấu tử có phổ hấp thụ phân tử xen phủ nhau 12 1.2.1. Phƣơng pháp phổ đạo hàm 13 1.2.2. Phƣơng pháp Vierordt 15 1.2.3. Phƣơng pháp. XÁC ĐNH ĐNG THI ACETAMINOPHEN V AXIT ASCOBIC TRONG THUỐ C HAPACOL KIDS VÀ EFFE-PARACETAMOL THEO PHƢƠNG PHÁ P PHỔ HẤ P THỤ PHÂN TƢ̉ SƢ̉ DỤ NG CHƢƠNG TRNH LỌC KALMAN . đồ ng thờ i acetaminophen và axit ascobic t rong thuố c Hapacol Kids và Effe-Paracetamol theo phương phá p phổ hấ p thụ phân tử sử dụ ng chương trnh lọc Kalman"