i LỜI CẢM ƠN Trong thời gian tháng với nỗ lực thân với giúp đỡ từ nhiều phía, đến tơi hồn thành đề tài tốt nghiệp Qua tơi xin tỏ lịng biết ơn đến: Ban lãnh đạo nhà trường, khoa Công nghệ thực phẩm trường Đại học Nha Trang thầy tận tình giúp đỡ, giảng dạy trang bị cho kiến thức suốt thời gian học tập trường Xin gửi lời cảm ơn đến thầy Trang Sĩ Trung, thầy Nguyễn Công Minh tận tình hướng dẫn, bảo tơi suốt q trình thực đề tài Tôi muốn gửi lời cảm ơn chân thành đến cán phịng thí nghiệm mơn Hóa Vi sinh thực phẩm, mơn Cơng nghệ chế biến, Công nghệ thực phẩm Viện Công nghệ Sinh học tạo điều kiện cho thực tập suốt thời gian thực đề tài Cuối xin cảm ơn gia đình, bạn lớp 50TP2, bạn thực tập phịng thí nghiệm chị Phước động viên giúp đỡ nhiều suốt trình thực đề tài Nha Trang, tháng năm 2012 Sinh viên thực Nguyễn Thị Thảo ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC .ii DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi LỜI NÓI ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHITIN 1.1.1 Cấu trúc tính chất chitin .3 1.1.2 Ứng dụng chitin .4 1.1.3 Nguồn nguyên liệu sản xuất chitin 1.2 Tổng quan phế liệu tôm 1.2.1 Giới thiệu phế liệu tôm .6 1.2.2 Thành phần phế liệu tôm 1.2.3 Các ứng dụng phế liệu tôm .8 1.2.4 Xử lý bảo quản phế liệu tôm trước sản xuất chitin 1.3 Tình hình nghiên cứu sản xuất chitin 11 1.3.1 Công nghệ sản xuất chitin 11 1.3.2 Một số quy trình sản xuất chitin giới 12 1.4.3 Một số quy trình sản xuất chitin Việt Nam .17 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Đối tượng nghiên cứu 23 2.1.1 Phế liệu tôm thẻ chân trắng 23 2.1.2 Hóa chất .23 2.2 Phương pháp nghiên cứu .23 2.2.1 Phương pháp thu nhận mẫu 23 2.2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 24 iii 2.2.2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 24 2.2.2.2 Thuyết minh quy trình 26 2.2.3 Các phương pháp phân tích 26 2.2.3.1 Xác định màu sắc, độ mềm mại chitin (Phụ lục [1]) 26 2.2.3.2 Kiểm tra hàm lượng ẩm hàm lượng tro (AOAC, 1990) (Phụ lục [1]) 26 2.2.3.3 Đo pH 26 2.2.3.4 Xác định protein nguyên liệu phương pháp biuret .27 2.2.3.5 Xác định hàm lượng NH3 theo phương pháp chưng cất lôi nước 28 2.2.3.6 Xác định hàm lượng đạm acid amin phương pháp formol 28 2.2.3.7 Xác định hàm lượng lipit theo phương pháp Folch 28 2.2.3.8 Xác định protein sản phẩm phương pháp Microbiuret 30 2.2.3.9 Xác định độ deacetyl chitin 31 2.2.3.10 Xác định mật độ khối chitin 32 2.2.3.11 Xác định khả trương nở với nước chitin 32 2.2.3.12 Khả hấp phụ chất màu chitin 32 2.2.4 Phương pháp xử lý số liệu 33 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 Biến đổi chất lượng phế liệu tôm 34 3.2 Ảnh hưởng chất lượng phế liệu tôm đến chất lượng chitin 37 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO .45 PHỤ LỤC iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học số loại phế liệu thủy sản thông dụng để sản xuất chitin (No Meyers, 1997, Trung, 2003) Bảng 1.2 Thành phần trọng lượng đầu, vỏ tôm (%) Bảng 1.3 Một số tiêu chất lượng chitosan sản xuất theo quy trình papain (Trần Thị Luyến, 2003) 17 Bảng 1.4 Chỉ tiêu chất lượng chitin thu theo quy trình cải tiến quy trình hóa học truyền thống 20 Bảng 1.5 Chỉ tiêu chất lượng chitosan sản xuất từ chitin quy trình cải tiến 20 Bảng 3.1 Đánh giá cảm quan chất lượng nguyên liệu sản phẩm chitin tương ứng 37 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Công thức cấu tạo chitin .3 Hình 1.2 Sự xếp chuỗi polymer - chitin, - chitin, - chitin Hình 1.3 Quy trình sản xuất chitin từ vỏ tôm hùm Hackman 13 Hình 1.4 Quy trình sản xuất chitosan từ vỏ tơm Pháp 15 Hình 1.5 Quy trình thủy nhiệt Yamashaki Nakamichi .16 Hình 1.6 Quy trình sử dụng enzyme papain để sản xuất chitosan 18 Hình 1.7 Quy trình sản xuất chitin- chitosan từ vỏ tơm Đỗ Minh Phụng 19 Hình 1.8 Quy trình sản xuất chitin cải tiến từ phế liệu tơm có kết hợp xử lý enzyme protease thu hồi protein astaxanthin .21 Hình 1.9 Quy trình sản xuất chitin dự kiến 22 Hình 3.1 Hàm lượng khống từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 34 Hình 3.2 Hàm lượng protein từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 35 Hình 3.3 Hàm lượng lipit từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 35 Hình 3.4 Hàm lượng amoniac, acid amin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 35 Hình 3.5 pH từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 36 Hình 3.6 Hiệu suất thu hồi chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 38 Hình 3.7 Hàm lượng khống chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 39 Hình 3.8 Hàm lượng protein chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 39 Hình 3.9 Khả hấp phụ chất màu chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác .40 Hình 3.10 Khả trương nở với nước chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 40 Hình 3.11 Mật độ khối chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 41 Hình 3.12 Độ deacetyl chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 41 vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BQ : bảo quản HSTH : hiệu suất thu hồi HL : hàm lượng NTU : Nephelometric Turbidity Units đơn vị đo độ đục KNHP : khả hấp phụ KNTN : khả trương nở LỜI NÓI ĐẦU Thủy sản Việt Nam ngành kinh tế trọng tâm kinh tế quốc dân, đóng góp phần không nhỏ vào kinh tế tạo công ăn việc làm cho nhiều người dân, đặc biệt dân cư vùng ven biển Ở Việt Nam, ngành thủy sản năm gần phát triển không ngừng nuôi trồng, chế biến xuất nhập Song kèm với phát triển ngành vấn đề phế liệu thủy sản trở thành vấn đề cấp bách cần giải để tránh gây ảnh hưởng xấu tới môi trường Hàng năm lượng tôm nuôi trồng chế biến khơng phải nhỏ lượng phế liệu thải khơng Tuy nhiên biết phế liệu tôm chứa nhiều thành phần có giá trị cao protein, chitin, astaxanthin, carotenoprotein, glucosamine nên nhu cầu thu nhận chúng cao Vì ngồi việc sử dụng phế liệu tơm để sản xuất thức ăn chăn ni cịn sử dụng chúng để sản xuất chitin- chitosan, tách chiết protein chất lượng tốt sử dụng để sản xuất hạt nêm sử dụng cho người, glucosamine phục vụ y dược… Do nhu cầu tận dụng phế liệu tôm ngày lớn Tuy nhiên phế liệu tôm thu phụ thuộc vào mùa vụ chế biến sản phẩm tôm đông lạnh nên chúng cần bảo quản để đảm bảo việc sản xuất sản phẩm lâu bền Chitin polysaccharide đứng thứ hai lượng tự nhiên sau cellulose, thành phần chiếm hàm lượng lớn phế liệu tôm Chitin sản phẩm chúng ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực như: y học, sản xuất mỹ phẩm, bảo quản nơng sản, xử lý mơi trường Ngồi ta khử acetylene hợp chất chitin tạo thành chitosan đơn vị cao phân tử glucosamine, chất có ứng dụng rộng rãi ngành công nghiệp nhẹ, thực phẩm, nông nghiệp Xuất phát từ yêu cầu mà chọn đề tài “Ảnh hưởng chế độ bảo quản nguyên liệu đến chất lượng chitin thu từ phế liệu tôm” Tuy nhiên đề tài dừng việc bảo quản để thu hồi chitin, nghiên cứu ảnh hưởng chế độ bảo quản: nhiệt độ thường, nhiệt độ lạnh (570C) phơi khơ sau bảo quản tháng Chương TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHITIN 1.1.1 Cấu trúc tính chất chitin a Cấu tạo chitin Chitin polysaccharide cấu tạo monosaccharide liên kết với cầu nối 1,4- glucoside, có cơng thức phân tử (C8H13O5N)n , phân tử lượng (203,09)n Trong n thay đổi tùy thuộc vào loại nguyên liệu: Ở tôm thẻ: n = 400500 Ở tôm hùm: n = 700800 Ở cua: n = 500600 Cơng thức cấu tạo chitin Hình 1.1 Công thức cấu tạo chitin Chitin tồn dạng polymer: - chitin, - chitin, - chitin Sự khác chúng xếp mạch chitin: - chitin có mạch chitin xếp song song ngược chiều nhau, - chitin gồm mạch chitin song song chiều nhau, - chitin xếp mạch song song chiều có mạch ngược chiều [9] - chitin - chitin - chitin Hình 1.2 Sự xếp chuỗi polymer - chitin, - chitin, - chitin b Tính chất chitin - Chitin có màu trắng, khơng tan nước, kiềm, acid loãng dung môi hữu ete, rượu Tuy nhiên, chitin hòa tan dung dịch acid đậm đặc HCl, H3PO4 dimethylacetamide chứa 5% lithium chloride - Chitin tương đối ổn định với chất oxy hóa khử thuốc tím KMnO4, oxy già H2O2, nước Javen NaClO hay Ca(ClO)2… - Khi đun nóng chitin dung dịch NaOH đặc chitin bị khử gốc acetyl tạo thành chitosan - Khi đun nóng chitin dung dịch HCl đặc chitin bị thủy phân tạo thành phân tử glucosamine có hoạt tính sinh học cao - Chitin có khả hấp thụ tia hồng ngoại bước sóng =884890m 1.1.2 Ứng dụng chitin [10] - Dùng ngành dệt: làm cho vải vóc, tơ sợi bền màu, chịu cọ sát - Dùng để sản xuất giấy suốt màng mỏng - Dùng để sản xuất sợi chitin không tan acid, tăng độ dai, không độc - Sản xuất glucosamine: chitin dùng acid HCl đậm đặc thủy phân lấy glucosamine Glucosamine có tính thúc tiến thuốc kháng sinh dùng làm ngun liệu ni vi trùng chế thuốc - Chitin kết hợp với muối kim loại hình thành hợp chất associated, đem kết hợp với muối Pb, Cd, Zn tạo loại cellulose có khả chống tia phóng xạ 35 Hàm lượng protein (%) 40 30 20 10 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.2 Hàm lượng protein từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác Hàm lượng lipit (%) M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.3 Hàm lượng lipit từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác HL amoniac (%) HL acid amin (%) 3,5 Hàm lượng (%) 2,5 1,5 0,5 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.4 Hàm lượng amoniac, acid amin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 36 8,5 pH 7,5 6,5 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.5 pH từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác Qua đồ thị ta thấy mẫu M1 có hàm lượng khoáng, protein, lipit tương đối cao, hàm lượng acid amin đạm thối thấp: hàm lượng khoáng 24%, protein 37,3%, lipit 4,6%, acid amin 1,1%, amoniac 0,09% (Bảng phụ lục [2]) So sánh với kết nghiên cứu Trang Sĩ Trung cộng sự, 2010 [9] (hàm lượng khoáng 24,6%, hàm lượng protein 47,4%, hàm lượng lipit 4,7%), Đinh Thị Dung, 2009 [4] (hàm lượng khoáng 24,5%, hàm lượng protein 47,3%) nhận thấy biến động hàm lượng khoáng, lipit không lớn, hàm lượng protein thấp khoảng 10% chất lượng tơm tươi thành phẩm mẫu thu nhận ban đầu Như phế liệu chưa có thay đổi nhiều chất lượng Các mẫu M2, M3, M4, M8 có biến đổi lớn chất lượng, hàm lượng protein, lipit giảm, M4, M8 giảm mạnh (M4: hàm lượng protein 21,9%, lipit 3,6%; M8: hàm lượng protein 21,9%, lipit 1,4%) (Bảng phụ lục [2]) Điều giải thích mẫu bảo quản điều kiện nhiệt độ thường tạo điều kiện cho vi sinh vật hoạt động phân giải protein tạo sản phẩm cấp thấp gây mùi khó chịu làm giảm hàm lượng protein, bảo quản điều kiện nhiệt độ thường, lipit bị oxy hóa dẫn đến hàm lượng lipit bị giảm, đặc biệt mẫu M8 Hàm lượng khoáng, amoniac, acid amin, pH tăng theo thời gian bảo quản, đặc biệt mẫu M2, M3, M4 (M4: hàm lượng amoniac 1,2%, hàm lượng acid amin 2,9%, hàm lượng khoáng 32,6%) (Bảng phụ lục [2]), hàm lượng amoniac tăng nên pH tăng theo thời 37 gian bảo quản Các mẫu M5, M6, M7 tiêu chất lượng không biến đổi nhiều so với M1 bảo quản điều kiện lạnh nên hạn chế hoạt động vi sinh vật gây hư hỏng Như để nguyên liệu đạt chất lượng tốt nên đưa vào sản xuất thời gian bảo quản nhỏ tiếng phải bảo quản lạnh chưa sản xuất 3.2 Ảnh hưởng chất lượng phế liệu tôm đến chất lượng chitin Kết đánh giá cảm quan phế liệu trước đưa vào sản xuất sản phẩm chitin thu tương ứng trình bày bảng 3.2 Bảng 3.1 Đánh giá cảm quan chất lượng nguyên liệu sản phẩm chitin tương ứng Mẫu Chất lượng cảm quan phế liệu đưa vào sản xuất chitn Chất lượng cảm quan chitin thu M1 Màu sáng bóng, tự nhiên M2 Biến đỏ, biến đen, ươn thối Trắng hồng, vụn M3 Biến đỏ nhiều, biến đen, ươn thối nhiều M4 Đỏ ghạch, biến đen, thối Trắng đục, vụn M5 Sáng bóng, Trắng hồng, dai M6 Sáng bóng, Trắng hồng, dai M7 Màu xám nhạt, tanh, khai Trắng hồng, dai M8 Màu xám đục, khai ít, Trắng đục, độ dai Trắng hồng, dai Trắng hồng nhạt M2, vụn Kết cho thấy chất lượng phế liệu tôm ban đầu đưa vào sản xuất ảnh hưởng rõ rệt đến chất lượng cảm quan chitin thu tương ứng (Bảng 3.2) Chitin thu từ việc sản xuất từ nguồn phế liệu tươi bảo quản lạnh cho màu sắc, trạng thái, mùi tương đối tốt (M1, M5, M6, M7) So sánh chất lượng chitin sản 38 xuất từ mẫu phế liệu tươi với kết Đinh Thị Dung, 2009 [4] cho thấy chất lượng cảm quan chitin tương đối tốt Màu phế liệu bị biến đổi astaxanthin bị oxy hóa tạo astacin có màu đỏ ghạch, enzyme Tyrozinaza phân giải Tyrozin thành hợp chất melanin có màu đen Tuy nhiên, thời gian bảo quản lạnh kéo dài chất lượng phế liệu có xu hướng giảm Chất lượng phế liệu ban đầu ảnh hưởng tới hiệu suất thu hồi chitin (Hình 3.6) Hiệu suất thu hồi chitin từ mẫu M8 lớn 20,4%, tiếp đến M1 với 14,8%, mẫu M2, M3, M4 cho hiệu suất thu hồi chitin thấp Điều giải thích mẫu M8 có hàm lượng ẩm thấp, hàm lượng protein thấp nên khối lượng khô tuyệt đối nguyên liệu đưa vào sản xuất chitin lớn trình bảo quản tháng phế liệu không bị gãy vụn Các mẫu M2, M3, M4 bị nát vụn, dễ bị thất thoát cơng đoạn rửa trung tính, mẫu bảo quản điều kiện nhiệt độ cao thuận lợi cho hệ enzyme chitinase phân giải chitin Như thời gian bảo quản nhiệt độ thường cao hiệu suất thu hồi chitin thấp 25 HSTH chitin (%) 20 15 10 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.6 Hiệu suất thu hồi chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác Chất lượng chitin thu từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác đánh giá thông qua tiêu: hàm lượng khống (Hình 3.7), hàm 39 lượng protein (Hình 3.8), KNHP chất màu (Hình 3.9), KNTN với nước (Hình 3.10), mật độ khối (Hình 3.11), độ deacetyl (Hình 3.12) Hàm lượng khoáng (%) 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu ngun liệu Hình 3.7 Hàm lượng khống chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác Hàm lượng protein (%) 2,5 1,5 0,5 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.8 Hàm lượng protein chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 40 KNHP ch ất m àu (% ) 100 80 60 40 20 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.9 Khả hấp phụ chất màu chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 160 KNTN với nước (%) 140 120 100 80 60 40 20 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.10 Khả trương nở với nước chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 41 0,3 Mật độ khối (g/ml) 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.11 Mật độ khối chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 20 Độ deacetyl 15 10 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.12 Độ deacetyl chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác Qua đồ thị ta thấy mẫu M1 có hàm lượng khống protein cịn lại tương đối tốt, mẫu M4 có hàm lượng khống cịn lại cao (0,4%), nhiên lượng protein lại thấp (1,5%) (Bảng phụ lục [2]) Điều giải thích hàm lượng khoáng nguyên liệu ban đầu M4 cao nên chế độ khử khống hiệu khử khống khơng mẫu cịn lại, protein nguyên liệu bị rửa trôi nhiều công đoạn rửa trung tính sau cơng đoạn khử khống mẫu nguyên liệu bị nát vụn nên công đoạn khử protein 42 lượng protein cịn lại ngun liệu khử triệt để hơn, đồng thời lượng xút sử dụng công đoạn khử gốc [- OCH3] kết hợp với hoạt động enzyme deacetylase làm cho độ deacetyl mẫu M4 lớn KNHP chất màu độ deacetyl tăng dần theo thời gian bảo quản, mẫu M4 đạt kết tốt nhất: 86% 16,5 (Bảng phụ lục [2]), nhiên điều kiện bảo quản lạnh KNHP chất màu lại giảm với M5: 78,5%; M7: 73,2 % (Bảng phụ lục [2]) KNTN với nước có xu hướng giảm theo thời gian bảo quản với M1: 142,4%, M4: 132,8%, M8: 129,8%, mật độ khối tăng theo thời gian bảo quản với M1: 0,18g/ml, M4: 0,26g/ml (Bảng phụ lục [2]), điều hàm lượng khống cịn lại mẫu chitin tương ứng sau cơng đoạn khử khống cịn cao Các mẫu M5, M6, M7 có tiêu chất lượng khơng biến động so với M1 điều kiện bảo quản lạnh hạn chế hoạt động vi sinh vật nên chất lượng nguyên liệu không biến đổi nhiều so với M1 Như để thu chitin có tiêu chất lượng cao, màu sắc trạng thái tốt, đồng hiệu suất thu hồi lớn nên đưa nguyên liệu vào sản xuất trước 2h, không sản xuất cần bảo quản lạnh ngun liệu khơng chất lượng chitin bị biến đổi nhiều theo chất lượng nguyên liệu 43 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN Kết luận Từ kết nghiên cứu cho thấy, biện pháp bảo quản phế liệu ảnh hưởng lớn đến chất lượng chitin thu hồi - Khi bảo quản phế liệu cách phơi khô chất lượng phế liệu chitin giảm, hàm lượng protein giảm 16% so với phế liệu tươi, độ deacetyl thấp 0,2%, chất lượng cảm quan kém, nhiên hiệu suất thu hồi chitin lại cao gần 6% - Khi phế liệu bảo quản điều kiện lạnh, giữ nhiệt độ thấp chất lượng khơng bị biến đổi nhiều, màu, mùi phế liệu không biến đổi nhiều nên chitin có màu sắc đẹp, hàm lượng protein, khống, độ deacetyl, KNTN với nước, mật độ khối, KNHP chất màu không biến đổi nhiều so với mẫu chitin sản xuất từ mẫu phế liệu tươi - Khi phế liệu bảo quản điều kiện nhiệt độ thường, chất lượng phế liệu chitin bị biến đổi nhiều Phế liệu có mùi thối khó chịu, màu sắc kém, hàm lượng protein giảm mạnh, KNTN với nước HSTH chitin thấp Tuy nhiên chitin thu lại có KNHP màu, mật độ khối độ deacetyl cao so với mẫu chitin sản xuất từ mẫu phế liệu tươi Đề xuất ý kiến Thông qua kết nghiên cứu, xin đưa số đề xuất sau: - Cần nghiên cứu để tìm quy luật biến đổi chất lượng chitin sản xuất từ phế liệu tôm bảo quản điều kiện thường ảnh hưởng trình bảo quản lạnh phế liệu đến chất lượng chitin thu hồi - Qua kết nghiên cứu cho thấy, bảo quản điều kiện thường, thời gian bảo quản kéo dài hàm lượng protein phế liệu tôm giảm mạnh, nhiên độ deacetyl, KNHP chất màu chitin lại tăng Vì cần nghiên cứu để tận thu protein trước trình sản xuất chitin để làm tăng hiệu tận thu phế liệu tôm giảm thiểu gây ô nhiễm mơi trường 44 - Cần nghiên cứu tìm quy luật biến đổi chất lượng chitin sản xuất từ phế liệu tôm bảo quản điều kiện lạnh đông (- 180C), so sánh với chất lượng chitin sản xuất từ phế liệu tôm bảo quản điều kiện thường, điều kiện lạnh phơi khô từ đưa phương pháp bảo quản phế liệu tốt - Trong phế liệu tơm có chứa nhiều enzyme có lợi cho q trình thủy phân protein nên cần nghiên cứu để tận thu enzyme phục vụ cho trình thủy phân dần thay cho NaOH trình sản xuất chitin, giảm thiểu gây ô nhiễm môi trường 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Dự án cải thiện chất lượng xuất thủy sản (2005), Tận dụng phế liệu tôm, Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội Đỗ Minh Phụng, Đặng Văn Hợp (1995), Bài giảng phân tích kiểm nghiệm thủy sản, Nha Trang Đỗ Văn Nam ctv (2005), Nghiên cứu đánh giá trạng môi trường sở chế biến thủy sản, đề xuất giải pháp quản lý, Viện nghiên cứu hải sản Đinh Thị Dung (2009), Nghiên cứu ảnh hưởng chế độ bảo quản đến chất lượng phế liệu tôm thẻ chân trắng chitin- chitosan, Đồ án tốt nghiệp, Đại học Nha Trang Hoàng Thị Huệ An, Nguyễn Đại Hùng (2000), Bài giảng hóa phân tích, Đại học Nha Trang Lê Ngọc Tú (1998), Hóa sinh công nghiệp, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Thị Hiền (2008), Nghiên cứu sử dụng enzyme protease quy trình sản xuất chitin- chitosan, Luận văn thạc sĩ kỹ thuật Nguyễn Thị Lệ Nin (2011), Xác định số đặc trưng sinh hóa giá trị dinh dưỡng phế liệu đầu tôm thẻ chân trắng, Đồ án tốt nghiệp, Đại học Nha Trang Trang Sĩ Trung, Trần Thị Luyến, Nguyễn Anh Tuấn, Nguyễn Thị Hằng Phương (2010), Chitin- Chitosan từ phế liệu thủy sản ứng dụng, Nhà xuất nông nghiệp thành phố Hồ Chí Minh 10 Trần Thị Luyến (1996), Công nghệ chế biến tổng hợp- tập 3, Đại học Thủy Sản 11 Trần Thị Luyến, Đỗ Minh Phụng, Nguyễn Anh Tuấn (2004), giáo trình Sản xuất chế phẩm kỹ thuật y dược từ phế liệu Thủy Sản, Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội 12 Trần Thị Luyến (2004), Báo cáo tổng kết dự án sản xuất thử nghiệm cấp sản xuất chitin, chitosan từ phế liệu chế biến thủy sản, Mã số B2002- 33- 01- DA, 8- 15 46 Tài liệu tiếng Anh 13 Hong Kyoon No and Samuel P Meyers (1997), Preparation of chitin and chitosan, Chitin Handbook, R.A.A Muzzarelli and M.G.Peter, eds, European Chitin Society, ISBN 88- 86889- 01- 14 Shahidi, F., & Sgnowiecki, J., (1991), Isolation and characterization of nutrients of value- added products from snow crab (chinoecetes opilio) and shrimp (Pandalus borealis) processing discards, Journal of Argicultural and Food chemistry, 39, 1527- 1532 15 Pratya Charoenvuttiham; John Shi; Gauri S Mittal – CANADA (2006), Chitin Extraction from Black Tiger Shrimp (Penaeus monodon) Waste using Organic Acids, Journal Separation science and technology ISSN 0149- 6395 CODEN SSTEDS, volume 41, number 6, paper 1135- 1153 16 Rao, M K, Kyaw, Trung, Trang Si Stevens, W F (2007), Optimun parameters for production of chitin and chitosan from Squilla Journal of Applied Polymer Science, 103, 3694- 3700 17 Pradip Kumar Dutta, Joydeep Dutta and VS Tripathe (2004), Chitin and chitosan: chemistry, properties and applications, Journal of scientific & Industrial Research, vol 63, pp 20- 31 Một số trang web 18 http://www.seafood1.net/vi/04/2012/xuat- khau- thuy- san- viet- nam- 3- thangdau- nam- 2012/ 19 http://www.thuocbietduoc.com.vn/home/newdt9393tt1ev22.aspx PHỤ LỤC Phụ lục 1: Một số phương pháp phân tích tiêu phế liệu tơm chitin -Xác định màu sắc chitin theo phương pháp cảm quan Đặt chitin lên tờ giấy trắng để phân tích màu sắc Dùng tay để xác định độ mềm mại mẫu -Xác định hàm lượng ẩm (theo phương pháp sấy khô đến khối lượng không đổi 1050C), hàm lượng khoáng tổng số (theo phương pháp nung nhiệt độ 5506000C) +Kiểm tra hàm lượng ẩm: Cốc sấy sấy khô nhiệt độ 1050C/3h (đến khối lượng không đổi), sau để bình hút ẩm để làm nguội Cân xác định khối lượng cốc W1 Cân lượng mẫu khoảng 25g cho vào cốc sấy, cân khối lượng W2 Sấy 1050C/1618h, bỏ bình hút ẩm khoảng 30 phút, cân khối lượng W3 Tiếp tục sấy tiếng cân lại, chênh lệch lần cân không 0.01g Tất khổi lượng tính theo gam %Hàm lượng ẩm = ( W2  W3 ) *100 ( W2  W1 ) +Kiểm tra hàm lượng tro: đem nung cốc sấy có chứa mẫu khơ xác định hàm lượng ẩm trên, nung 6000C/16h đến mẫu có màu trắng, lấy mẫu bỏ bình hút ẩm 30 phút, cân khối lượng W4 Tiếp tục nung tiếng cân lại, chênh lệch lần cân không 0.01g dừng %Hàm lượng tro  ( W4  W1 ) *100 ( W2  W1 ) -Hiệu suất thu chitin theo phương pháp trọng lượng Y M1 *100 (%) M2 Trong đó: M1: khối lượng chitin thu khô tuyệt đối (g) M2: khối lượng phế liệu tơm đem xử lý tính theo trọng lượng khơ tuyệt đối (g) Y: hiệu suất thu chitin (%) Phụ lục 2: Bảng kết phân tích tiêu chất lượng chitin Bảng Chất lượng phế liệu sau bảo quản chế độ khác Mẫu nguyên liệu Chỉ tiêu M1 Mùi M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 Tanh tự nhiên Ươn thối Ươn thối nhiều Rất thối Tanh Tanh Biến đỏ Đỏ Biến đỏ, nhiều, ghạch, biến biến biến đen đen đen Sáng bóng Sáng bóng Xám nhạt Xám đục Tanh, Hơi, hơi khai khai Màu sắc Sáng bóng HL khống (%) 24 29,2 29,3 32,6 24,2 24,2 24,9 26,7 HL ẩm (%) 78,9 80,7 80,5 81,1 75,4 75,3 75,3 14,9 HL protein (%) 37,3 28,4 27,9 21,9 32,2 30,3 29,5 21,9 HL lipit (%) 4,6 4,2 3,9 3,6 4,5 4,5 4,4 1,4 pH 6,7 7,5 7,7 8,0 6,8 6,8 6,9 7,2 HL amoniac (%) 0,09 0,7 0,9 1,2 0,1 0,2 0,3 0,12 HL acid amin (%) 1,1 1,9 2,1 2,9 1,1 1,2 1,3 1,16 Bảng Chất lượng chitin thu từ mẫu phế liệu bảo quản chế độ khác Mẫu nguyên liệu Chỉ tiêu M1 Màu sắc, trạng thái M2 M3 M4 Trắng Trắng Trắng hồng Trắng hồng, hồng, (nhạt đục, dai vụn M2), vụn vụn M5 Trắng hồng, dai M6 M7 M8 Trắng Trắng Trắng đục, độ hồng, hồng, dai dai dai HL khoáng (%) 0,2 0,2 0,3 0,4 0,2 0,3 0,3 0,3 HL ẩm (%) 9,4 8,8 10,0 11,0 10,1 10,9 10,6 7,8 HL protein (%) 2,0 1,6 1,6 1,5 1,7 1,7 1,6 1,6 KNHP chất màu (%) 66,6 85 86 86 78,5 74,8 73,2 68,2 KNTN với nước (%) 142,4 137,4 134,4 132,8 142,3 141,2 139,9 129,8 0,18 0,21 0,24 0,26 0,2 0,21 0,22 0,22 Độ deacetyl 9,9 10,6 15,9 16,7 10,1 11,7 11,9 16,5 HSTH chitin (%) 14,8 13,8 13,2 13,1 13,9 13,7 13,6 19,5 Mật độ khối (g/ml) ... độ bảo quản nguyên liệu đến chất lượng chitin thu từ phế liệu tôm? ?? 2 Tuy nhiên đề tài dừng việc bảo quản để thu hồi chitin, nghiên cứu ảnh hưởng chế độ bảo quản: nhiệt độ thường, nhiệt độ lạnh... thu hồi chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 38 Hình 3.7 Hàm lượng khống chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác 39 Hình 3.8 Hàm lượng protein chitin từ mẫu phế liệu. .. M8 Mẫu nguyên liệu Hình 3.6 Hiệu suất thu hồi chitin từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác Chất lượng chitin thu từ mẫu phế liệu có chế độ bảo quản khác đánh giá thơng qua tiêu: hàm lượng khống