Trường Đại Học Mở TP.HCM Khoa Công Nghệ Sinh Học Báo cáo môn : Công Nghệ Sinh Học Nông Nghiệp Đề tài : Nuôi Cấy Tế Bào Trần Giáo viên hướng dẫn : Lao Đức Thuận Nguyễn Trần Đông Phương Sinh viên thực hiện : Nguyễn Hoàng Vũ Nguyễn Văn Luận Nội Dung I. Khái niệm tế bào trần II. Cách thu nhận tế bào trần V. Ứng dụng tế bào trần III. Nuôi tế bào trần IV. Sự dung hợp tế bào I. Khái niệm tế bào trần Là các tế bào thực vật trong đó có thành tế bào được loại bỏ và màng tế bào chất là lớp ngoài cùng nhất của tế bào. Hình ảnh tế bào trần II. Cách thu nhận tế bào trần Phương pháp cơ học Mô Dd ưu chương Cắt các mô cùng lớp vỏ Ngâm vào môi trường nuôi cấy pha loãng Tế bào chất phòng to Tách khỏi vỏ cellulose Tế bào trần Phương pháp Enzym Ví dụ : phương pháp tạo tế bào trần từ lá Lá Làm sạch bằng clorox 10% Rửa lại bằng nước cất 3 lần Tách lớp biểu bì dưới của lá Ngâm trong dd Enzym Xenlulaza có bổ xung Mannitol 10% trong 1h Tế bào trần III. Nuôi tế bào trần Thành phần của môi trường nuôi cấy lỏng hay đặc tùy thuộc vào loài thực vật lấy tế bào.Môi trường này có thêm Auxin và Xitokinin để giúp sự tái tạo vách và các lần phân chia đầu tiên. • Đảm bảo đủ các yếu tố dinh dưỡng: axit amin, polyamin, Hydrolysat Cazein, nước dừa, mạch nha… • Đảm bảo điều kiện nhiệt độ, PH, ánh sáng,áp suát thẩm thấu…. • Trong lần tự nhân đôi đầu tiên, môi trường phải có áp suất thẩm thấu cao, Auxin, Xitokinin thích hợp, ánh sáng yếu. • Sau đó cần giảm áp suất thẩm thấu bắng cách pha loãng môi trường để giúp cho sự tăng trưởng tế bào. [...]... ở tế bào nên gọi là lai tế bào và thông qua tế bào soma nên gọi là lai soma hay lai vô tính tế bào Hai tế bào trần đang dung hợp Các phương pháp dung hợp tế bào  Dung hợp bằng hóa chất : thường sử dụng polyethylenglycol(PEG 5-25%) trong môi trường kiềm(pH 8-10) và bổ sung CaCl2 (50250mM)  Dung hợp bằng điện V Ứng dụng tế bào trần • Chọn dòng đột biến • Tạo dòng lai khác loài qua dung hợp tế bào trần. .. thường, tế bào trần cần 1-2 ngày cho sự hình thành vách, 27 ngày cho các lần nhân đôi đầu tiên, 3-4 tuần cho sự tăng trưởng mô sẹo, sau đó 1-2 tháng để có phôi hình cầu, 1tháng nữa để có cây nảy mầm IV Sự dung hợp tế bào • Tế bào trần là những tế bào không có thành tế bào Chính vì thế chúng có thể hòa lẫn vào nhau (dung hợp) và thành 1 tế bào lai mang trong mình vật chất di truyền của cả 2 tế bào • Tế bào. .. khối tế bào trong môi trường lỏng (nuôi lắc, nuôi trong bioreactor) Một số thành tựu của nuôi cấy tế bào • Carlson thành công trong cây thuốc lá dung hợp từ tế bào trần của 2 loài N-glanca và Nlangsdorf • Melchers với thành tựu dung hợp thành công tế bào trần khoai tây với tế bào trần cà chua đã đánh dấu 1 mốc rất quan trọng trong lĩnh vực này • Ngày nay việc sử dụng kĩ thuật dung hợp tế bào trần. .. nuôi cấy tế bào thực vật trong phòng thí nghiệm Cây nuôi cấy được trồng bên ngoài sau khi nảy mầm Trinh nữ hoàng cung được nhân giống bằng phương pháp nuôi tế bào Thăm vườn ươm chuối bằng phương pháp nuôi tế bào Giống dâu được tạo từ nuôi cấy mô tại Đà Lạt Sâm quý Ngọc Linh được trồng thành công bằng nuôi cấy mô tại Đà Lạt The end Tài liệu tham khảo :  PGS-TS Lê Văn Hoàng – Công Nghệ Nuôi Cấy Mô Và Tế. .. nuôi cấy mô tại Đà Lạt Sâm quý Ngọc Linh được trồng thành công bằng nuôi cấy mô tại Đà Lạt The end Tài liệu tham khảo :  PGS-TS Lê Văn Hoàng – Công Nghệ Nuôi Cấy Mô Và Tế Bào Thực Vật – Ebook  PGS-TS Nguễn Thị Lí Anh – Công Nghệ Tế Bào Thực Vật - Ebook  Tài liệu.vn  Violet.vn . tế bào trần V. Ứng dụng tế bào trần III. Nuôi tế bào trần IV. Sự dung hợp tế bào I. Khái niệm tế bào trần Là các tế bào thực vật trong đó có thành tế bào được loại bỏ và màng tế bào chất. hợp tế bào • Tế bào trần là những tế bào không có thành tế bào. Chính vì thế chúng có thể hòa lẫn vào nhau (dung hợp) và thành 1 tế bào lai mang trong mình vật chất di truyền của cả 2 tế bào. • . bào. • Tế bào lai này được tái sinh và thành 1 cây lai. Quá trình này xảy ra ở tế bào nên gọi là lai tế bào và thông qua tế bào soma nên gọi là lai soma hay lai vô tính tế bào. Hai tế bào trần