Đang tải... (xem toàn văn)
P2 vật liệu và phương pháp thu nhận Ezym Papain để ứng dụng vào phả ứng thủy phân
[...]... 100ml, thêm vào 50ml dung dịch đệm phosphate 0.1M Bánh dầu đậu phộng được trộn với dung dịch đệm phosphate để đạt được pH mong muốn, hỗn hợp sau đó được gia nhiệt và khuấy từ liên tục Khi phản ứng đạt đến nhiệt độ cần khảo sát, cho enzyme vào với tỉ lệ thích hợp, phản ứng được tiến hành trong 26 giờ Sau mỗi 2 giờ phản ứng, lấy 0.1 gam dịch thủy phân từ erlen trên, thêm nước sôi để ngừng phản ứng, định... nguyên liệu đã pha loãng 20 lần (hoặc cân chính xác một lượng m gam nguyên liệu đã nghiền nhuyễn cho đồng nhất) cho vào trong bình cầu 500ml, thêm vào đó 150ml nước cất và vài giọt phenolphtalein, tiếp tục thêm vào bình cầu 5g MgO, dung dịch phải có màu hồng nhạt, đậy nút ngay để tránh amoniac bay ra, lắc đều, đun sôi và hơi nước được chưng cất sang một bình tam giác có chứa sẵn 10ml H2SO4 N/10 và vài... exopeptidase thủy phân các peptide thành các acid amin theo phản ứng sau: R2 H2N R3 R4 R3 C C N C C H O H H R1 + HOH O H2N C C H OH O + H2N C CO H Hiệu suất gần đúng của phản ứng thủy phân (%) được tính dựa trên tỉ lệ hàm lượng acid amin hòa tan trong nước của dung dịch sau phản ứng so với hàm lượng protein ban đầu được xác định thông qua hàm lượng nitơ tổng Hiệu suất gần đúng của phản ứng thủy phân H(%)... lượng đạm formol theo phương pháp Sorensen, phần dung dịch còn lại trong bình định mức dùng để xác định lượng protein theo phương pháp Lowry 2.2.8.3 Hiệu suất thủy phân[ 39] Papain có tính chất của endopeptidase thủy phân protein trong bánh dầu đậu phộng chủ yếu thành peptide theo phản ứng sau: H H N C C N C C H R1 R3 O H H R3 N C C H R4 O O R2 + HOH R1 R4 OH + H2N C CO H Ngoài ra, papain còn có tính chất... hành 3 lần) Sau đó cho nước vào với tỷ lệ trên sản phẩm là 2:1, khuấy đều, đem lọc Thực hiện sự rửa này 7 lần Sản phẩm thu được đem sấy khô ta được bánh dầu đậu phộng đã loại béo 2.2.8.2 Phƣơng pháp thực hiện phản ứng[ 5, 30, 31, 37] Phản ứng thủy phân được thực hiện tại tỉ lệ của bánh dầu đậu phộng với dung dịch đệm phosphate là 1:10 Cân 5g bánh dầu đậu phộng đã loại béo cho vào LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC... ba lần thử thật và ba lần thử không 2.2.7.3 Cách tính Số gam đạm NH3 có trong 1 lít nguyên liệu = (1.4*V)/2.5 V = (Vt – V0) là lượng NaOH tương đương với lượng đạm phóng thích đã được hấp thụ trong H2SO4 2.2.8 Phƣơng pháp chung tiến hành phản ứng thủy phân bánh dầu đậu phộng với xúc tác papain thô.[15, 27] 2.2.8.1 Phƣơng pháp loại béo: Sử dụng dung môi eter dầu hỏa: cho dung môi vào bánh dầu đậu... được tính theo công thức như sau: H G *100 P Trong đó: H: hiệu suất gần đúng của phản ứng thủy phân (%) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM R1 R2 29 G: hàm lượng acid amin tan của dung dịch sau thủy phân xác định theo phương pháp Lowry P: hàm lượng protein ban đầu trong bánh dầu đậu phộng xác định theo phương pháp Kjeldahl LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM ... sang một bình tam giác có chứa sẵn 10ml H2SO4 N/10 và vài giọt thu c thử Tashiro, đầu nhọn của ống sinh hàn nhúng chìm trong dung dịch H2SO4 N/10 Chưng cất trong 15-20 phút kể từ khi dung dịch trong bình cầu sôi Sau 15-20 phút chất đạm amoniac sẽ được hấp thụ vào dung dịch H2SO4 Lấy bình tam giác ra (rửa đầu ống sinh hàn trước khi lấy ra) Định phân lượng acid dư bằng NaOH có chuẩn độ là x N/10 từ màu xanh 123doc.vn
