Đang tải... (xem toàn văn)
các phương pháp xác định protein
[...]... còn gọi là phương pháp diêm tích ) : + Giải thích về phương pháp này : Diêm tích là phương pháp dùng muối trung tính như : NaCl , (NH4)2SO4 …để kết tủa protein + Nguyên nhân kết tủa : Các tiểu phân tử protein trung hoà diện tích Các protein khác nhau sẽ tủa ở nồng độ muối khác nhau ( vì vậy ta có thể tách riêng các protein ra khỏi hỗn hợp và tiến hành đònh tính , đònh lượng chúng) Phương pháp này... NH … ) B PROTEIN SẼ KẾT TỦA RÕ RÀNG NẾU ĐỒNG THỜI LÀM MẤT 2 YẾU TỐ HOÀ TAN Làm mất điện tích của protein hoà tan bằng cách : + Đưa PH của dung dòch protein về PI của protein đó ,khi đó đa số protein ở dạng lưỡng cực , không mang điện tích + Thêm các chất NaCl ,( NH4)2 SO4 , … các ion này sẽ trung hoà điện tích của tiểu phần protein Ở phần này ta sẽ xem xét cách tạo tủa protein bằng phương pháp dùng... xuất riêng của dung dòch protein để xác đònh hàm lượng protein Lưu ý : các protein khác nhau có độ tăng chiết suất khác nhau 11 XÁC ĐỊNH PROTEIN DỰA VÀO KHẢ NĂNG TẠO TỦA A PROTEIN CÓ THỂ HOÀ TAN TRONG NƯỚC TẠO DUNG DỊCH KEO LÀ DO : + Trong dung dòch các tiểu phân protein cùng loại tích điện cùng dấu + Xung quanh tiểu phân protein có lớp áo nước ( phân tử lưỡng cực liên kết với các nhóm phân cực như... chỉ so sánh 4 loại axitamin này − Đây là phương pháp phân tích đối chiếu các axitamin để tính tỉ lệ tận dụng protein thức ăn , còn gọi là phân loại axitamin − Việc xác đònh giá trò dinh dưỡng của protein giúp ta xác đinh được lượng protein đưa vào cơ thể ,từ đó có sự điều chỉnh cho hợp lý 19 20 CÁCH XÁC ĐỊNH NHU CẦU PROTEIN TRONG CƠ THỂ A CƠ THỂ SỬ DỤNG PROTEIN CHO NHỮNG NHU CẦU SAU : − Nhu cầu duy... ống nghiệm : 5 giọt dung dòch protein 2 giọt dung dòch acid sulfosalislic 0,1% 20% Quan sát kết quả sẽ thấy có kết tủa trắng protein xuất hiện Mục đích của việc làm tủa protein trong trường hơpï này: đầu tiên là để tách protein ra khỏi hỗn hợp và sau đó sẽ tiến hành đònh lượng nó 14 CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH GIÁ TRỊ DINH DƯỢNG CỦA PROTEIN TRONG THỨC ĂN Như ta đã biết protein là thành phần cơ bản... Cl3COOH làm tủa protein nhưng không tủa peptid và acidamin (người ta đã sử dụng tính chất này để loại bo protein ra khỏi huyết thanh trong việc đònh lượng các chất không phải là protein có trong huyết thanh ) Acid sulfosalislic C6H3OHCOOHSO3H phát hiện protein trong nước tiểu và trong các dòch sinh vật Cách tiến hành khi tạo tủa protein bằng acid sulfosalislic + Thuốc thử : Dung dòch protein Dung... trytophan, tyrozin + So với phương pháp so màu phương pháp này đơn giản, nhạy, mẫu dùng lại thường ổn đònh hoá phần lớn protein B TÍNH KHÚC XẠ ÁNH SÁNG + Dung dòch protein có tính chất khúc xạ ánh sáng Chỉ số khúc xạ còn gọi là chiết xuất phụ thuộc nồng độ protein trong dung dòch ( chiết xuất của protein lớn hơn chiết xuất của nước) + Hiệu số giữa chiết xuất của dung dòch protein 1% trong nước và chiết... cách : + Gây biến tính protein , cấu trúc protein sẽ bò đảo lộn bằng cách đun sôi , thêm muối của ion kim loại nặng , thêm axit ( axit tricloaxetic 10% Cl3CCOOH, axit sulfosalisilic C6H5OHCOOHSO3H ) , kiềm mạnh ,các tác nhân lý học + Thêm các chất hút nước như ancol ethylic , ( NH4) 2 SO4 , tanin … 13 Ở phần này ta sẽ xem xét cách tạo tủa protein bằng acid hữu cơ : Nguyên tắc : + Phản ứng kết tủa protein. .. percent) − Các xét nghiệm trên chỉ đánh giá về chất lượng protein − Để thể hiện về chất và lượng protein trong khẩu phần ăn, ta sẽ xem xét đến NDp Cals % (phần trăm năng lượng protein được sử dụng ) NDp Cal% = ( NPU) (% năng lượng do protein) 18 Tỉ lệ protein tònh NPR : Tỉ số giữa nhóm động vật chênh lệch về cân nặng được nuôi lần lượt bằng protein thức ăn thử nghiệm và bằng thức ăn không có protein. .. 54mgN/kg Để tính lượng protein thức ăn đảm bảo cho việc thay thế protein cơ thể, ta làm như sau : Hàm lượng protein thức ăn được xác đònh bằng việc đo hàm lượng Nitơ trong đó.Hàm lượng Nitơ trong protein tương đối ổn đònh-chiếm khoảng 16% Do đó: Hàm lượng protein= (hàm lượng Nitơ đo được trong thức ăn) ( 6,25) Bảng hệ số qui đổi hàm lượng Nitơ trong thức ăn Protein trong thức ăn Hệ số Protein trong thức 123doc.vn