Đang tải... (xem toàn văn)
Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học”
Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 300 PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN AZOTOBACTER CĨ HOẠT TÍNH NITROGENAZA VÀ SINH TỔNG HỢP IAA (INDOL AXETIC AXIT) TỪ ĐẤT THƠN BÌNH KỲ- HÒA QUÝ- NGŨ HÀNH SƠN- TP ĐÀ NẴNG TO ISOLATE AND TO SELECT NITROGENASES ACTIVE BACTERIAL GENERA AZOTOBACTER AND SYNTHESIZE AIA FROM HAMLET BINH KY- HOA QUY- NGU HANH SON LAND SVTH: NGUYỄN KIM ANH, lớp 04SM PHẠM THỊ NGỌC ANH, lớp 05CSM1 LÊ THỊ THÚY HOA lớp 05CSM1 NGUYỄN THỊ QUỲNH NHƯ, lớp 05CSM1 ĐẬU THỊ TỈNH, lớp 04SM GVHD:TS ĐỖ THU HÀ Khoa: Sinh- Môi trường, Trường Đại học Sư phạm Đà Nẵng TÓM TẮT Từ 30 mẫu đất trồng lúa, trồng rau đất bỏ hoang… thơn Bình Kỳ- Hịa Q- Ngũ Hành Sơn- TP.Đà Nẵng, phân lập tuyển chọn 08 chủng vi khuẩn Azotobacter có khả cố định đạm, có 02 chủng có khả sinh tổng hợp IAA Tuyển chọn chủng có hoạt tính mạnh nhất: Chủng BK6 cố định đạm mạnh nhất, chủng BK- sinh tổng hợp IAA mạnh Có thể ứng dụng chủng làm phân bón vi sinh để kích thích sinh trưởng thực vật bổ sung vào vùng đất bạc màu, nghèo dinh dưỡng để nâng cao nguồn đạm đất, cải thiện sinh thái đất SUMMARY Laterfrom 30 soil sample is different: abandonned land rice cultivar, vegetable-raising,.at Binh Ky hamlet, us have already been isolated and selections to genera have Azotobacter bacteria capable of nitrogen fixation, among them there iss genera be capable to synthesize AIA can apply those active banian make cropped's growth excitation microbiological fertilizer or additives bacterial genera to ash level of nitrogen exacerbation degraded earth regions Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề Phân bón vi sinh (PBVS) có nhiều ưu điểm trội so với phân bón hóa học, ngồi tác dụng nâng cao xuất chất lượng trồng, tiết kiệm phân vô cơ, giảm chi phí sản xuất PBVS cịn góp phần quan trọng việc bảo vệ môi trường phát triển nơng nghiệp bền vững Tuy nhiên tình hình sản xuất PBVS nước ta chưa đáp ứng đủ nhu cầu thực tiễn sản xuất nông nghiệp quy mô sản xuất nhỏ, chất lượng sản phẩm chưa hồn thiện ổn định Do dó, nghiên cứu để hoàn thiện nâng cao chất lượng PBVS việc làm cần thiết Trong đó, việc tuyển chọn, đánh giá hoạt tính chủng VSV khâu quan trọng quy trình tạo chế phẩm Azotobacter loại vi khuẩn (VK) hiếu khí, sống tự đất, chúng có khả cố định đạm cao không phụ thuộc vào chủ Ngồi đặc điểm số chủng thuộc chi cịn có khả sinh tổng hợp nên IAA (chất kích thích sinh trưởng thực vật) Chính nhờ đặc điểm quan trọng VK Azotobacter ứng dụng rộng rãi chế phẩm PBVS làm tăng suất trồng Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 301 Xuất phát từ lý chọn đề tài: “Phân lập tuyển chọn số chủng VK Azotobacter có hoạt tính Nitrogenaza sinh tổng hợp IAA từ đất thơn Bình KỳHịa Q- Ngũ Hành Sơn- TP Đà Nẵng” nhằm tìm chủng VK Azobacter đa hoạt tính để ứng dụng cho nông nghiệp đia phương 1.2 Mục đích đề tài Phân lập tuyển chọn số chủng VK Azotobacter có hoạt tính Nitrogenaza sinh tổng hợp IAA từ đất thơn Bình Kỳ- Hòa Quý- Ngũ Hành Sơn- TP Đà Nẵng 1.3 Nội dung đề tài - Phân lập, tuyển chọn chủng vi khuẩn Azotobacter có hoạt tính nitrogenaza sinh tổng hợp IAA (Indol Axetic Axit) từ đất thơn Bình Kỳ- Hoà QuýNgũ Hành Sơn- TP Đà Nẵng - Nghiên cứu đặc điểm ni cấy hình thái chủng vi khuẩn tuyển chọn - Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng, khả cố định nitơ sinh tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn - Thăm dị ảnh hưởng dịch ni cấy chủng VK tuyển chọn đến nảy mầm hạt đậu đen 1.4 Những đóng góp đề tài Đề tài sâu vào nghiên cứu chủng VK Azotobacter có khả cố định đạm sinh tổng hợp IAA, ứng dụng nơng nghiệp làm phân bón vi sinh kích thích sinh trưởng thực vật bổ sung vào vùng đất bạc màu để nâng cao nguồn đạm đất, cải thiện hệ sinh thái đất Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng - Các chủng VK Azotobacter phân lâp từ số mẫu đất thơn Bình Kỳ- Hòa Quý- Ngũ Hành Sơn- TP Đà Nẵng 2.2 Phương pháp nghiên cứu Phương pháp thu mẫu, theo Erogov (1983) - Phương pháp phân lập tuyển chọn chủng VK Azotobacter , Erogov,(1983) - Phương pháp đếm số lượng tế bào CFU/ml, theo Nguyễn Lân Dũng (1982) - Phương pháp xác định khả cố định đạm VK Azotobacter: - Phương pháp so màu với thuốc thử Nessler, theo Lê Văn Khoa (1996) Phương pháp xác định hàm lượng IAA theo Miska Skovski,1983 - Phương pháp nghiên cứu đặc điểm ni cấy hình thái chủng VK tuyển chọn, theo Nguyễn Lân Dũng (1988) - Phương pháp nghiên cứu thử nghiệm dịch nuôi cấy chủng VK tuyển chọn, Mai Thị Hằng, (2000) - Khóa phân loại Bergey (1989), Gauzse cộng (1983) Kết thảo luận 3.1 Phân lập tuyển chọn chủng VK cố định nitơ sinh tổng hợp IAA 3.1.1 Phân lập tuyển chọn chủng VK Azotobacter cố định nitơ Từ 30 mẫu đất khác (trồng lúa, trồng màu, đất bỏ hoang) thơn Bình Kỳ- Hịa Q- Ngũ Hành Sơn- TP.Đà Nẵng Chúng tơi phân lập 08 chủng VK có khả cố định nitơ, MT AT Qua nghiên cứu nhận thấy 08 chủng VK phân lập thuộc chi Azotobacter Bảng 3.1 Hàm lượng NH4+ dịch nuôi cấy chủng VK Azotobacter tuyển chọn Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 302 STT Chủng VK Hàm lượng NH4+ (mg/ml) Mức độ cố đinh nitơ BK-1 3,10 Mạnh BK-2 2,76 Trung bình BK-3 2,98 Trung bình BK- 3,14 Mạnh BK-5 1,34 Yếu BK-6 3,28 Mạnh BK-7 1,65 Yếu BK-8 1,74 Yếu Hình 3.1: Hình ảnh ống giống phản ứng màu 08 chủng VK tuyển chọn với thuốc thử Nessler 3.1.2 Tuyển chọn chủng VK cố định nitơ mạnh Sau sơ tuyển 08 chủng VK Azotobacter cố định nitơ, tiếp tục tuyển chọn chủng có khả cố định nitơ mạnh dựa vào phản ứng màu với thuốc thử Nessler Kết có chủng mạnh, chủng trung bình chủng yếu Trong chủng BK- có khả cố định đạm mạnh (3,28mg/ml), chọn chủng làm đối tượng cho nghiên cứu sau Hình 3.2: Hình ảnh ống giống phản ứng màu chủng BK- với thuốc thử Nessler 3.1.3 Tuyển chọn chủng VK Azotobacter sinh tổng hợp IAA Từ chủng VK phân lập được, tiếp tục tuyển chọn chủng có khả sinh tổng hợp IAA, dựa vào phản ứng màu với thuốc thử Salkowski Kết quả, xác định chủng có khả sinh tổng hợp IAA Trong chủng BK5 có khả sinh tổng hợp IAA mạnh (4,313 μg/ml) Chúng chọn chủng làm đối tượng cho nghiên cứu Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 303 Hình 3.3: Hình dạng ống giống phản ứng màu chủng BK- với thuốc thử Salkowski 3.2 Đặc điểm sinh học chủng VK tuyển chọn 3.2.1 Đặc điểm ni cấy hình thái chủng VK tuyển chọn Bảng 3.3: Đặc điểm nuôi cấy hình thái chủng VK tuyển chọn Chủng VK Đặc điểm ni cấy hình thái Ngày Màu sắc KL Hình dạng KL xuất KL BK- - Non: Trắng - Bề mặt nhẵn nhầy - Già: Trắng đục nhớt, già nhăn nheo, trịn Nhuộm Gram - Gram âm Hình dạng tế bào - Hình cầu BK- - Gram âm - Hình que ngắn - Non màu trắng đục, già chuyển màu vàng - KL lồi, bề mặt nhẵn, nhầy nhớt Hình 3.4: Hình ảnh khuẩn lạc hình dạng tế bào chủng BK- BK- Trên MT lỏng, dịch nuôi cấy chủng có màu trắng đục đặn, có cặn Khi già chuyển sang màu nâu đen, độ sánh cao 3.3 Ảnh hưởng số yếu tố MT tới sinh trưởng hoạt tính chủng VK tuyển chọn - Chủng BK- có khả sinh trưởng cố định nitơ mạnh (4,52mg NH4+/ml) MT AT sau ngày nuôi cấy nhiệt độ từ 28-300C - Chủng BK- có khả sinh tổng hợp IAA cao( 6,24μg/ml) MT nước mắm- pepton có bổ sung 0,1% tryptophan sau ngày nuôi cấy lắc nhiệt độ 300C 3.4 Ảnh hưởng dịch nuôi cấy chủng VK BK-5 tới nảy mầm hạt đậu đen Sau 24 h, hạt đậu đen xử lý dịch nuôi cấy chủng BK5 nồng độ pha loãng 10-2 10-3 Sau 72h, tỷ lệ nảy mầm nồng độ pha loãng 10-2 vượt 23% so với đối chứng Như dịch nuôi cấy chủng BK- kích thích rút ngắn thời gian nảy mầm hạt giống Vì vậy, ứng dụng chủng để xử lý hạt giống trước gieo Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 304 Hình 3.5: Hình ảnh hạt đậu đen nảy mầm đĩa petri sau 72h Kết luận: + Từ 30 mẫu đất thơn Bình Kỳ- Hịa Q- Ngũ Hành Sơn- TP Đà Nẵng, phân lập tuyển chọn 08 chủng VK thuộc chi Azotobacter có khả cố định đạm, chủng BK- có khả cố định đạm mạnh (4,52mg NH4+) Chủng BK- BK- vừa có khả cố định đạm, vừa có khả sinh tổng hợp IAA, chủng BK- sinh tổng hợp IAA mạnh (4,313μg/ml) + Từ 08 chủng VK Azotobacter trên, chúng tơi chọn 02 chủng đầu dịng: - Chủng BK- có khả sinh trưởng cố định nitơ mạnh (4,52mg NH4+/ml) MT AT sau ngày nuôi cấy nhiệt độ từ 28-300C KL non màu trắng đục, nhày nhớt, già chuyển màu vàng nâu, TB hình que ngắn, bắt màu Gram âm - Chủng BK- có khả sinh tổng hợp IAA cao( 6,24μg/ml) MT sau ngày nuôi cấy lắc nhiệt độ 300C KL màu trắng đục, nhày nhớt, TB hình cầu, bắt màu Gram âm TÀI LIỆU THAM KHẢO Xử lý dịch nồng độ 10-2 Đối chứng [1] Nguyễn Lân Dũng, Đoàn Xuân Muộn, Nguyễn Phùng Tiến, Phạm Văn Ty (1972), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học tập NXB KH-KT Hà Nội [2] Nguyễn Thành Đạt, Mai Thị Hằng (2000), Sinh học vi sinh vật NXB GD, Hà Nội [3] Egorov N.X (1983) , Thực hành VSV ( Nguyễn Lân Dũng dịch) NXB MirMatcơva, NXB KH-KT Hà Nội [4] Bergey’s Manual systermatic Baderiology, vol.4(1989) [5] G.F Gause T.P Preobrazenskai, M.A.Srensnicora, P.P Terekhova, T S Macsimova “ Opredelitels actinomycetes”, Nauka, M.1983 PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CHỦNG AZOTOBACTER CHO SẢN XUẤT PHÂN BÓN VI SINH VẬT Thứ bảy, 30- 7-2005, 14:31:02 CN Nguyễn Thu Hà, PTS Nguyễn Ngọc Quyên - viện KHKTNNVN PTS Vũ Thị Minh Đức - Trường ĐHQG hà nội I/ ĐẶT VẤN ĐỀ Hiệu tốt việc xử lý hạt với huyền phù dịch Azotobacter trước gieo trồng ghi nhận hàng chục năm trước Ngồ cố định nitơ, Azotobacter cịn có khả hình thành vitamin (B1, B2, piridoxin, nicotinic, xianocobalamin v.v ), chất kích thích trưởng thực vật (axit indolacetic, axit gibberellic) Việc nghiên cứu để tận dụng khả cố định nitơ khả kích thích sinh trưởng thực vật vi khuẩn Azotobacter nhằm góp ph suất trồng hướng thiết thực Vì vậy, tiến hành phân lập, tuyển chọn chủng Azotobacter cho sản xuất phân sinh vật II/ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1/ Phân lập chủng vi sinh vật từ đất: Đất thu thập từ vùng chuyên canh rau, màu, sau chia làm lơ: lơ 1: để ướt, bảo quản tủ lạnh; lô 2: hong khơ nhiệt nghiền mịn Sau cho g đất khơ (hoặc g đất ướt) vào bình chứa 50ml môi trường dịch thể Burk cải tiến Sau tuần lấy vòng que váng mỏng bề mặt dịch thể cấy ria lên đĩa thạch môi trường Burk, ủ 300C ngày Thu nhận khuẩn lạc lần đầu Tiếp tục làm s lần để thu khuẩn lạc khiết 2/ Xác định đặc điểm, hình thái khuẩn lạc, tế bào: 3/ Xác định ảnh hưởng chất kháng sinh tới phát triển chủng vi sinh vật phân lập: Bằng cách xác định vòng ức chế phát triển vi sinh vật phương pháp đục lỗ 4/ Xác định IAA thô: Khả tổng hợp IAA thô chủng vi sinh vật xác định theo phương pháp Salkowski cải tiến Tiến hành: • • • Lấy 2ml dịch vi sinh vật li tâm loại bỏ tế bào, bổ sung thêm 8ml thuốc thử Salkowski cải tiến, lắc Theo Misra Kauskik, IAA tác dụng với thuốc thử Salkowsli cải tiến cho màu hồng nhạt đến đỏ phụ thuộc hàm l IAA sinh Hàm lượng IAA thô xác định theo phương pháp so màu 530nm với đồ thị chuẩn IAA 5/ Xác định khả cố định nitơ: Đo hoạt tính nitrogenaza phương pháp khử axetylen máy sắc ký khí PYE UNICAM series 204 chromatograp (Anh) 6/ Xác định ảnh hưởng dịch vi sinh vật mầm ngô: Hạt giống ngô tẻ P.11 ngô lai ĐK.888 khử trùng HgCl 0,1% phút Rửa lại nước cất vô trùng nhiều Ngâm hạt nước cất vơ trùng từ đến Sau ủ hạt với dịch vi sinh vật li tâm loại bỏ tế bào (pha loãng tỷ lệ 5% ngày 7/ Xác định ảnh hưởng chủng vi sinh vật phân lập rau cải trắng: Thí nghiệm tiến hành vụ Đơng xn Hè thu 1998 chậu 7kg đất/chậu Nền phân bón: 40 N : 80 P 205 : 40 Cơng thức thí nghiệm bón thêm 107 tế bào vi sinh vật/chậu Thí nghiệm lặp lại lần Sau 45 ngày trồng, thu hoạc giá theo tiêu: số lá/chậu, khối lượng tươi thân lá, cao cây, % vật chất khô, vitamin C, đường tổng số hàm lượng N III/ KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN: 1/ Phân lập chủng vi sinh vật từ đất: Sau phân lập thu kết quả: 13/38 mẫu đất khô 6/12 mẫu đất ướt phát có chứa Azotobacter Các chủ nhận từ đất khô dễ tồn điều kiện nuôi cấy nhân tạo Các chủng phân lập từ đất ướt ổn định hơn, số bị chế thời gian bảo quản ống môi trường Do có khả hình thành cyst nên Azotobacter chống chịu khơ hạn, vậ tăng cường tính chọn lọc, việc làm khơ đất nhiệt độ phịng trước phân lập Azotobacter cần thiết Qua phân tích pH mẫu đất có chứa Azotobacter cho thấy mẫu đẫt có độ pH khoảng 5,15 - 7,75 Một số khác có độ pH thấp không phát thấy Azotobacter Điều phù hợp với nghiên cứu trước Azotobact thường phát đất có pH từ axít đến kiềm Bảng 1: stt Mẫu đất pH stt mẫu đất pH 1 6,35 10 20 6,45 2 7,25 11 21 6,35 6,85 12 24 6,70 5,95 13 25 6,70 7,75 14 26 6,60 7,05 15 28 6,15 11 5,95 16 32 7,45 18 6,35 17 35 5,15 19 6,45 18 36 5,40 Từ 18 chủng vi sinh vật phân lập được, chọn chủng vi sinh vật phát triển ổn định, có sinh khối mạnh cho c cứu Đồng thời, sử dụng chủng AT.19 (chủng nhập nội, sử dụng cho sản xuất chế phẩm vi si làm chủng đối chứng 2/ Đặc điểm, hình thái khuẩn lạc, tế bào chủng vi sinh vật: ảnh: Hình dạng khuẩn lạc chủng 86.2 sau ngày nuôi cấy môi trường Burk Bảng 2: Đặc điểm chủng vi sinh vật 86.2 76.6 20.2 Nguồn gốc Đất số Đất số 20 Đất số Hình dạng khuẩn lạc Lúc cịn non có màu trắng đục, lỏng Khi già ngả màu đen, không tiết sắc tố môi trường Lúc cịn non có màu trắng đục, lỏng Khi già ngả màu đen, không tiết sắc tố môi trường Lúc cịn non có màu trắng đục Khi già ngả màu vàng, khơng tiết sắc tố mơi trường Hình dạng tế bào Khi cịn non có dạng trịn, tế bào thường dính liền thành hình số Khi cịn non có dạng trịn, thường 2-3 tế bào dính liền Khi cịn non có dạng hình trứng, tế bào thường dính liền thành hình số Khả di chuyển Di chuyển chậm Di chuyển chậm Khơng di chuyển Hình thành cyst + + + Tạo homopolisaccarit khuếch tán + + + Phân huỷ tinh bột + + +- 3/ Xác định ảnh hưởng chất kháng sinh tới phát triển chủng vi sinh vật: Một tiêu chuẩn để đánh giá tính cạnh tranh vi sinh vật sức đề kháng chúng chất kháng tiết vi sinh vật sống lân cận Bảng 3: ảnh hưởng chất kháng sinh tới phát triển chủng vi sinh vật S ĐK vòng T ức chế Tetraxiclin Streptomixin 100 m g/ml 1,0 m g/ml 0,5 m g/ml 100 m g/ml 1,0 m g/ml 0,5 m g/ml 86.2 5,6 0,6 0,2 3,4 1,4 0,5 76.6 5,8 1,0 0,2 4,2 1,0 0,5 20.2 4,8 1,2 0,2 4,0 1,2 0,4 Qua bảng cho thấy chủng 86.2, 76.6, 20.2 có độ mẫn cảm với steptomixin tetraxiclin nồng độ khác kh Điều theo nghiên cứu Tchan Peter (1984): độ mẫn cảm Azotobacter với steptomixin tetraxiclin thay loài 4/ Khả tổng hợp IAA thô chủng vi sinh vật: Bảng 4: Stt tên chủng vi sinh vật Hàm lượng IAA thô (m g/ml) 86.2 7,57 76.6 9,50 20.2 5,73 AT.19 (Chủng đối chứng) 7,13 CV (%) 8,3 LSD0,05 1,24 Qua bảng cho thấy, chủng 86.2, 76.6, 20.2 có khả tổng hợp IAA thơ Trong chủng 86.2 76.6 có hàm lượ thơ tổng hợp tăng từ 6,17 đến 33,24% so với chủng AT.19 (chủng đối chứng) 5/ Khả cố định nitơ chủng vi sinh vật: Khả khử axetylen chủng vi sinh vật Bảng 5: stt tên chủng vi sinh vật nm c2h4/ml/h 86.2 181,58 76.6 141,90 20.2 167,55 AT.19 (Chủng đối chứng) 124,80 CV (%) 3,1 LSD0,05 9,46 Qua bảng cho thấy, chủng 86.2, 76.6, 20.2 có khả khử axelylen cao chủng AT.19 (chủng đối chứng) từ 56,78 nm c2h4/ml/h (13,7 - 45,49%) 6/ ảnh hưởng dịch vi sinh vật đến nảy mầm hạt ngô: Bảng 6: tt tên chủng vi sinh vật Tỷ lệ nảy mầm (%) Ngô lai ĐK.888 Ngô tẻ P.11 Đối chứng (Không nhiễm VSV) 48,57 94,29 86.2 57,14 100,00 76.6 60,00 100,00 20.2 60,00 100,00 AT.19 (Chủng đối chứng) 62,86 100,00 Qua bảng cho thấy, chủng 86.2, 76.6, 20.2 có khả kích thích nảy mầm hạt ngô, tăng từ 8,57 đến 14,11 lai ĐK.888) 5,71% (ngô tẻ P.11) so với đối chứng (không nhiễm vi sinh vật) Đặc biệt, chủng 86.2 làm tăng nảy mầm củ lai ĐK.888 lên 2,86% so với chủng AT.19 (chủng đối chứng) 7/ ảnh hưởng chủng vi sinh vật rau cải trắng: Bảng 7: ảnh hưởng dịch nuôi cấy vi sinh vật tới suất rau cải trắng vụ hè thu vụ xuân 1998 Qua bảng cho thấy, công thức nhiễm chủng 86.2, 76.6, 20.2 vụ (xuân hè thu 1998) cho suất rau cao h chứng (không nhiễm vi sinh vật) tương đương với chủng AT.19 (chủng đối chứng) Bảng 8: ảnh hưởng dịch nuôi cấy vi sinh vật tới chất lượng rau cải trắng vụ hè thu vụ xuân 1998 tt Chủng vi sinh vật vụ xuân vụ hè thu Đường tổng số (%) Vitamin C (mg/100g) NO3- (mg/kg) Đường tổng số (%) Vitamin C (mg/100g) NO3- ( 0,92 70,37 2,745 0,96 62,91 2, 1,04 78,17 2,095 1,36 64,52 1, Đối chứng (Không nhiễm VSV) 86.2 76.6 1,16 72,47 2,106 1,28 69,50 1, 20.2 1,02 70,64 2,609 1,34 63,45 2, 1,06 72,65 2,132 1,20 62,21 1, AT.19 (Chủng đối chứng) Qua bảng cho thấy, công thức nhiễm chủng 86.2, 76.6 có chất lượng rau tốt đối chứng, hàm lượng nitrat thấp đ chứng IV/ KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 1/ Đã phân lập 18 chủng Azotobacter từ đất rau, màu Trong chủng 86.2, 76.6, 20.2 có khả tổng hợp IAA thơ 7,14 - 42,86% so với chủng đối chứng), khả khử axetylen (tăng 13,3 - 50,39% so với chủng đối chứng), kích thích nả hạt ngô, tăng suất rau chất lượng rau tăng đáng kể 2/ chủng 86.2, 76.6, 20.2 có triển vọng dùng để sản xuất phân bón vi sinh vật, Cần tiếp tục đánh giá diện rộng SUMMARY PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CHỦNG AZOTOBACTER CHO SẢN XUẤT PHÂN BÓN VI SINH VẬT CN Nguyễn Thu Hà, PTS Nguyễn Ngọc Quyên - viện KH PTS Vũ Thị Minh Đức - Trường ĐHQ Đã phân lập 18 chủng Azotobacter từ 50 mẫu đất thu thập 18 chủng phân lập từ mẫu đất có pH 5.15 mẫu đất có pH thấp không phát thấy Azotobacter Từ 18 chủng Azotobacter này, sơ tuyển chủng (86 20.2) phát triển ổn định, có khả sinh sinh khối cao, cho nghiên cứu Đồng thời, sử dụng c Tt Chủng vi sinh vật vụ xuân vụ hè thu AT.19 (chủng nhập nội, sử dụng cho sản xuất chế phẩm vi sinh vật) làm chủng đối chứng Chủng 86.2, 76.6, 20.2 có khả tổng hợp IAA thô (tăng 6,17 - 33,24% so với chủng đối chứng), khả khử axetylen (tă Số lá/chậu Khối nảy mầm hạt ngơ, tăng lá/chậu Tích luỹ Số suất chất lượng lượng trắng luỹ Cao Khối rau cải Tích 45,49% so với chủng đối chứng), kích thích lượng tươi thân chất khơ tươi thân chất khô (g/chậu) (%) (cm) (g/chậu) (%) chủng 86.2, 76.6, 20.2 có triển vọng dùng để sản xuất phân bón vi sinh vật, Cần tiếp tục đánh giá diện rộng Đối chứng ISOLATING, SELECTING AZOTOBACTER FOR PRODUCTION OF BIOFERTILIZER 49,0 90,2 5,86 33,3 22,5 108,3 (Không nhiễm VSV) 5,81 PTS Nguyen Thu Ha, Dr Nguyen Ngoc Quyen - Vietnam Agricultural Sience Dr Vu Thi Minh Đuc - Hanoi Univesity of Science, Vietnam National U 18 Azotobacter strains isolated from 50-vegetable and rice soil samples in the North Vietnam Azotobacter strains was found 86.2 53,7 121,9 6,63 34,7 23,3 126,7 6,33 collected samples that pH from slightly acid to slightly alkaline (5.15 - 7.75) In there, three strains (86.2, 76.6, 20.2) that have growth, big biomass for further research In the same time, AT.19 strain is import strain and has been using for productive biofertilizer as control strain 76.6 49,0 141,5 6,33 35,3 22,4 110,0 6,25 The obtained results show that, three strains (86.2, 76.6, 20.2) had productive raw IAA ability (raise 6.17-33.24% compare wit strain), acetylen assay ability (raise 13.7-44.49% compare with control strain), stimulated growth, raised the yields and qualit celery cabbage 20.2 49,7 110,0 5,98 33,0 22,6 120,0 6,02 Three Azotobacter strains (86.2, 76.6, 20.2) can use for production of biofertilizer AT.19 50,3 121,9 6,32 33,7 23,6 108,7 6,55 ảnh hưởng đối chứng) vật đến nảy mầm hạt ngô Khả tổng hợp IAA thô chủng vi sinh vật Đặc điểm (Chủng dịch vi sinh thái khuẩn lạc, tế bào chủng vi sinh vật pH mẫu đất phát có chứa Azotobacter Cấy chủng vi sinh vật vào bình tam giác chứa mơi trường Burk, có bổ sung Tryptophan 0,1% khử trùng, nuôi cấy lắc (22 CV (%) 9,5 21,5 5,8 11,2 12,9 vòng/phút) nhiệt độ 300C ngày theo Tchan Peter (1984) LSD0,05 8,5 46,2 - 3,4 2,1 26,1 - ... Qua nghiên cứu nhận thấy 08 chủng VK phân lập thuộc chi Azotobacter Bảng 3.1 Hàm lượng NH4+ dịch nuôi cấy chủng VK Azotobacter tuyển chọn Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học”. .. tổng hợp IAA mạnh (4,313 μg/ml) Chúng chọn chủng làm đối tượng cho nghiên cứu Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 303 Hình 3.3: Hình dạng ống... nảy mầm hạt giống Vì vậy, ứng dụng chủng để xử lý hạt giống trước gieo Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ Đại học Đà Nẵng - 2008 304 Hình 3.5: Hình ảnh hạt đậu đen
