Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 Hình 2.3: tƣ thế hút máu của muỗi Aedes.spp (www.comune.torino.it/ / 2004/article_562.shtml.) Hình 2.4: tƣ thế hút máu của muỗi Anopheles.sp (http://ipmworld.umn.edu/ chapters/curtiscf.htm) Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 Hình 2.5: ấu trùng loài Anopheles trong nƣớc (ipmworld.umn.edu/ chapters/curtiscf.htm) Hình 2.6 : Ấu trùng và nhộng loài Culicinea trong nƣớc (www.comune.torino.it/ / 2004/article_562.shtml.) Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 2.2. Sơ lƣợc chế phẩm Enchoice (Công ty Environmental Choices tại TP.HCM) 2.2.1. Giới thiệu chung về công ty Enviromental Choice Công ty Environmental Choices, Inc. đƣợc thành lập năm 2001 tại bang North Carolina, Hoa Kỳ, là nhà sản xuất và phân phối các sản phẩm an toàn cho môi trƣờng và các công nghệ ứng dụng trong lĩnh vực môi trƣờng. Environmental Choice, Inc. đã và đang phát triển thị trƣờng tại Mỹ và các quốc gia Đông Nam Á. Sản phẩm của công ty mang đến những giải pháp trực tiếp, hữu hiệu cho nhiều kỹ nghệ và ngành nghề trong công nghiệp, nông nghiệp và thƣơng mại, ứng dụng trong các lĩnh vực nhƣ sản xuất nông nghiệp, chế biến thực phẩm, xử lý nƣớc thải, sản xuất phân bón, tầy rửa và vệ sinh, kiểm soát hoạt động của các côn trùng nhỏ,…Công thức Multi-enzyme hữu cơ của công ty đã đƣợc đƣa và ứng dụng rộn rãi và an toàn cho ngƣời tiêu dùng. 2.2.2.Tổng quát chế phẩm Enchoice Enchoice là sản phẩm men hữu cơ tổng hợp đƣợc sản xuất tại Mỹ và đã đƣợc Bộ nông nghiệp Hoa Kỳ cấp phép sử dụng cho những ứng dụng tẩy rửa đặc biệt, khử mùi, kiểm soát côn trùng nhƣ ruồi, muỗi tại các nhà máy chế biến thực phẩm, thịt gia súc, gia cầm trên phạm vi toàn liên bang. Enchoice là sản phẩm công nghệ enzyme tiên tiến của thế kỷ 21, có ƣu điểm dễ sử dụng, hiệu quả và kinh tế. Thành phần: là sản phẩm hoàn toàn hữu cơ, đƣợc tổng hợp từ các thành phần thực vật; bao gồm: mật đƣờng mía, các loại men, tảo, các chất hoạt động bề mặt, acid citric, acid lactic, nƣớc. Ngoài công dụng làm sạch và tẩy nhờn, Enchoice còn đƣợc nghiên cứu đƣa vào sử dụng trong lĩnh vực khử mùi, diệt ruồi, muỗi và các loại côn trùng, xử lý nƣớc thải… nhƣ một sản phẩm tự nhiên thay thế cho các loại hóa chất thƣờng dùng gây ảnh hƣởng cho ngƣời sử dụng và môi trƣờng. Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 Tính chất hoạt động:  Thúc đẩy phản ứng thông qua xúc tác của các loại enzyme trong thành phần men tổng hợp.  Khử mùi thông qua phản ứng hóa học thay đổi tính chất của ammonia, hydrogen sulfide và các loại acid béo không ổn định. Chế phẩm có tác dụng khử mùi tức thời, hiệu quả với nhiều loại mùi khác nhau.  Hoạt động tốt trong môi trƣờng hiếu khí.  Hoạt động tốt trong dãy biến thiên nhiệt độ rộng (từ nhiệt độ trên điểm đông đến 55 o C).  Độ pH khoảng 4,5 và hoạt động hiệu quả trong môi trƣờng và độ pH trung bình từ 3,5 đến 9,5.  Hoàn toàn không nguy hiểm và độc hại đối với con ngƣời, các hệ sinh thái biển, động vật và thực vật.  Không gây dị ứng, không nguy hiểm, không cháy, nổ.  Không cần áp dụng các biện pháp an toàn khi vận chuyển cũng nhƣ cho ngƣời sử dụng sản phẩm. Ứng dụng trong tẩy rửa, làm vệ sinh, khử mùi trong các khu vực nhà hàng, khách sạn, các cơ sở chế biến thực phẩm,… Enchoice hoạt động hiệu quả trên mọi chất liệu bề mặt đối với các chất bẩn có nguồn gốc hữu cơ nhƣ dầu, mỡ, thức ăn,… Enchoice dùng dể khử mùi rất hiệu quả, đặc biệt là những mùi có nguồn gốc từ các khí ammonia (NH 3 ), hydrogen sulfide (H 2 S) và một số khí gây mùi hôi thối khó chịu đồng thời với tác dụng làm giảm và diệt các loài côn trùng nhỏ, nhƣng tuyệt đối an toàn cho môi trƣờng, con ngƣời và các loại động thực vật. Enchoice có tác dụng kích thích tăng trƣởng vi sinh, đặc biệt trong môi trƣờng hiếu khí, đồng thời có tính chất tẩy nhờn hiệu quả, do đó khi sử dụng để tẩy rửa, còn có khả năng phân hủy và thay đổi thành phần các chất Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 béo, mỡ có trong nƣớc thải, cải thiện đáng kể tính chất và thành phần nƣớc thải khi ứng dụng trong lĩnh vực xử lý nƣớc thải. Ứng dụng tẩy rửa ở các bến cảng, xưởng đóng tàu thuyền, ga-ra, xưởng cơ khí… Enchoice con đƣợc dùng để làm sạch, tẩy rửa dầu mỡ trên sàn (xi măng, gỗ, nhựa, kim loại…) tại các khu vực trạm xăng, trạm sửa chữa cơ khí, máy móc,…dùng để rửa dụng cụ, làm vệ sinh thiết bị, máy móc,… và làm sạch trên các tàu thuyền mà không gây hại cho môi trƣờng cũng nhƣ các hệ sinh thái biển. Ứng dụng trong công nghệ chế biến phân bón hữu cơ Enchoice thúc đẩy nhanh quá trình phân hủy và rút ngắn thời gian ủ phân khi ứng dụng trong công nghệ chế biến phân bón hữu cơ từ rác hữu cơ, xác bã động thực vật,… đồng thời khử mùi hôi và côn trùng, không gây ô nhiễm cho môi trƣờng xung quanh. Ứng dụng trong các bãi chôn lấp chất thải rắn hữu cơ Enchoice là sản phẩm kinh tế và hiệu quả trong việc kiểm soát côn trùng (là tác nhân truyền bệnh) và khử mùi hôi phát sinh từ các bãi chôn lấp rác. Tác động của các enzyme trong sản phẩm Enchoice đã mang lại những hiệu quả sau:  Giảm mùi phát sinh từ sự phân hủy vật liệu hữu cơ thông qua tác động lên khí thoát ra từ quá trình này.  Giết côn trùng nhỏ và ấu trùng ngay khi tiếp xúc và tác động làm vỡ vòng đời của chúng khi dùng đều đặn.  Làm tăng tốc quá trình phân hủy sinh học và dần dần làm giảm khối lƣợng của khối rác. 2.2.3. Cơ chế hoạt động của Multi-enzyme Multi-enzyme diệt muỗi, ấu trùng muỗi đồng thời giảm số lƣợng muỗi một cách hiệu quả nhờ cách những đặc tính sau:  Trong thành phần Multi-enzyme chứa đƣờng, các nguyên tố vi lƣợng, một số loại enzyme và hỗn hợp các acid hữu cơ và alcohol. Các acid này Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 có tác động đối kháng trên muỗi và ấu trùng muỗi nhờ bản chất làm se của chúng, các tác nhân làm ƣớt chứa trong Multi-enzyme có một tác động kép, phân tán các hoạt chất và đồng thời làm thay đổi áp lực nƣớc. Tác động làm thay đổi áp lực mặt nƣớc làm cho các giọt nƣớc chứa hoạt chất xâm nhập bề mặt da ấu trùng muỗi, phá vỡ lớp màng nhầy bảo vệ chúng, đồng thời cũng tác động trên cánh và các bộ phận khớp nối của muỗi trƣởng thành làm chúng mất khả năng bay và đậu. Nếu các hoạt chất này xâm nhập vào các lỗ thở, ở gần đầu và ngực của loài động vật chân khớp, nó sẽ phá vỡ lớp màng sáp bảo vệ gây ra nghẹt thở.  Các tác nhân làm ƣớt tác động ngắn hạn trong việc làm thay đổi áp lực mặt, ngăn cản không cho muỗi đậu và đẻ trứng trên bề mặt nƣớc. Tƣơng tự, các chất hoạt động bề mặt làm cho ấu trùng muỗi không nổi đƣợc dẫn đến việc ống thở của chúng không hấp thụ đƣợc oxy, ấu trùng bị ngạt thở và sẽ chết đuối. Tác động trên muỗi trƣởng thành cũng theo nguyên lý tƣơng tự, khi muỗi trƣởng thành đậu trên mặt nƣớc có Multi- enzyme. Cũng nhƣ các loại côn trùng khác, muỗi có thể đậu đƣợc trên mặt nƣớc nhờ áp lực bề mặt lớn hơn trọng lƣợng cơ thể của côn trùng. Multi-enzyme làm thay đổi áp lực nƣớc làm cho côn trùng không đậu đƣợc và bị chìm. Côn trùng có thể cảm nhận đƣợc mối nguy hiểm và tránh xa các khu vực có phun xịt Multi-enzyme. Các tác nhân làm ƣớt dễ phân hủy và không tồn tại lâu, do đó cần áp dụng phun xịt với số lần đủ để đảm bảo phá huỷ chu kỳ sống và sinh sản của côn trùng và ấu trùng.  Hình dung một lớp da có những lỗ chân lông nhỏ đến mức kích thƣớc của một phân tử nƣớc cũng không thể lọt qua đƣợc, cũng giống nhƣ ta nhỏ một giọt nƣớc lên mảnh giấy. Nhƣng nếu ta thêm chất làm ƣớt (hoạt động bề mặt) vào thì giọt nƣớc sẽ loang ra thấm vào giấy nhƣ miếng bọt biển. Chất hoạt động bề mặt giúp các acid hữu cơ trong Multi-enzyme xâm nhập vào các bộ phận của muỗi và ấu trùng tƣơng tự nhƣ vậy.  Những tác động trên không duy trì đƣợc lâu. Tính chất dễ phân hủy của chế phẩm làm giảm hoạt tính sau một thời gian. Vì vậy trên thực tế, Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 nồng độ chế phẩm sau một thời gian sử dụng sẽ ngày càng giảm trong nƣớc, cần phải phun xịt nhắc lại định kì để đảm bảo phá vỡ chu kì sống và sinh sản của côn trùng. Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 PHẦN 3 VẬT LIỆU – PHƢƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 3.1. Thời gian - Địa điểm thí nghiệm Tiến hành thí nghiệm tại khu thực nghiệm khoa Môi trƣờng - trƣờng Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh. Thí nghiệm thực hiện từ tháng 3 năm 2005 đến tháng 6 năm 2005. 3.2.Vật liệu thí nghiệm  Muỗi trƣởng thành (nuôi từ lăng quăng).  Ấu trùng muỗi (mua ở tiệm cá kiểng).  Cốc 100ml, 500ml.  Ống đong 10ml.  Bình xịt bằng tay  Vợt nhỏ.  Lồng lƣới thể tích: 43dm 3 ( 3,5cm*3,5cm*3,5cm).  Lọ thí nghiệm có thể tích: 500ml. 3.3.Phƣơng pháp tiến hành Bảng 3: các thí nghiệm tiến hành Đối tƣợng Thí nghiệm Tên thí nghiệm Muỗi trƣởng thành A1  Ảnh hƣởng liều lƣợng chế phẩm Enchoice lên muỗi trƣởng thành. A2  Ảnh hƣởng nồng độ chế phẩm Enchoice lên muỗi trƣởng thành. Ấu trùng muỗi B1  Ảnh hƣởng nồng độ chế phẩm Enchoice lên ấu trùng muỗi với phƣơng pháp pha loãng trực tiếp. B2  Ảnh hƣởng liều lƣợng chế phẩm Enchoice lên ấu trùng muỗi với phƣơng pháp phun xịt. B3  Ảnh hƣởng nồng độ chế phẩm Enchoice lên ấu trùng muỗi với phƣơng pháp phun xịt. Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 3.3.1. Đối với muỗi trƣởng thành Bố trí 2 thí nghiệm : kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, với 3 lần lặp lại. Tất cả các lần lặp lại trong mỗi nghiệm thức đều đƣợc bố trí trong mỗi lồng lƣới, nhiệt độ không khí 32 o C. 3.3.1.1. Thí nghiệm A1: Ảnh hưởng liều lượng chế phẩm Enchoice lên muỗi trưởng thành  Cho vào mỗi lồng lƣới 30 muỗi trƣởng thành, bảo đảm lồng lƣới là kín không cho muỗi thoát ra ngoài.  Dựa vào kết quả nghiên cứu của Trung Quốc (Kết quả đánh giá hiệu quả của chế phẩm Enchoice - Trung tâm nghiên cứu khoa học ứng dụng, 2002) pha loãng chế phẩm theo tỉ lệ 1:700 (1 thể tích Enchoice pha với 700 thể tích nƣớc).  Sau đó dùng bình xịt bằng tay phun xịt đều vào lồng lƣới. Liều lƣợng phun xịt trong mỗi nghiệm thức là :  Nghiệm thức 1: 20ml dung dịch chế phẩm.  Nghiệm thức 2: 40ml dung dịch chế phẩm.  Nghiệm thức 3: 60ml dung dịch chế phẩm.  Nghiệm thức 4: 80ml dung dịch chế phẩm.  Nghiệm thức 5: 100ml dung dịch chế phẩm. 3.3.1.2. Thí nghiệm A2: Ảnh hưởng nồng độ chế phẩm Enchoice lên muỗi trưởng thành  Cho vào mỗi lồng lƣới 30 muỗi trƣởng thành, bảo đảm lồng lƣới là kín không cho muỗi thoát ra ngoài.  Pha chế phẩm với tỉ lệ pha khác nhau và phun xịt đều vào lồng lƣới ứng với từng nghiệm thức khác nhau.  Nghiệm thức 1: tỉ lệ pha 1:200.  Nghiệm thức 2: tỉ lệ pha 1:400.  Nghiệm thức 3: tỉ lệ pha 1:600.  Nghiệm thức 4: tỉ lệ pha 1:800. Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005  Nghiệm thức 5: tỉ lệ pha 1:1000.  Sau đó dùng bình xịt bằng tay phun xịt đều vào lồng lƣới. Liều lƣợng phun xịt trong mỗi nghiệm thức là liều lƣợng đạt hiệu quả nhất ở thí nghiệm 1a. 3.3.2. Đối với ấu trùng muỗi Bố trí 3 thí nghiệm : kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, với 3 lần lặp lại. Tất cả các lần lặp lại trong mỗi nghiệm thức đƣợc bố trí trong mỗi lọ nhựa, thể tích nƣớc trong mỗi lọ là 400ml, nhiệt độ nƣớc là 26 o C. 3.3.2.1. Thí nghiệm B1: Ảnh hưởng nồng độ chế phẩm Enchoice lên ấu trùng muỗi với phương pháp pha trực tiếp  Pha chế phẩm theo tỉ lệ khác nhau ứng với từng nghiệm thức :  Nghiệm thức 1: tỉ lệ pha 1:1000.  Nghiệm thức 2: tỉ lệ pha 1:2000.  Nghiệm thức 3: tỉ lệ pha 1:3000.  Nghiệm thức 4: tỉ lệ pha 1:4000.  Nghiệm thức 5: tỉ lệ pha 1:5000.  Cho vào mỗi lọ thí nghiệm 400ml dung dịch chế phẩm và 100 ấu trùng muỗi. 3.3.2.2. Thí nghiệm B2: Ảnh hưởng liều lượng phun xịt chế phẩm Enchoice lên ấu trùng muỗi với phương pháp phun xịt  Cho vào mỗi lọ nhựa trong từng nghiệm thức cho vào 400ml nƣớc và 100 ấu trùng muỗi.  Dựa vào kết quả nghiên cứu của Trung Quốc (Kết quả đánh giá hiệu quả của chế phẩm Enchoice - Trung tâm nghiên cứu khoa học ứng dụng, 2002) chọn tỉ lệ pha 1:600.  Dùng bình xịt tay phun xịt lên bề mặt nƣớc. Liều lƣợng phun xịt trong các nghiệm thức là :  Nghiệm thức 1: 20ml dung dịch chế phẩm.  Nghiệm thức 2: 40ml dung dịch chế phẩm.  Nghiệm thức 3: 60ml dung dịch chế phẩm. . tỉ lệ pha 1:6 00.  Nghiệm thức 4: tỉ lệ pha 1:8 00. Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005  Nghiệm thức 5: tỉ lệ pha 1:1 000. . 2004/article_562.shtml.) Hình 2. 4: tƣ thế hút máu của muỗi Anopheles.sp (http://ipmworld.umn.edu/ chapters/curtiscf.htm) Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ. Enchoice lên ấu trùng muỗi với phƣơng pháp phun xịt. Khảo sát khả năng diệt muỗi của chế phẩm Enchoice Nguyễn Thị Lệ Ngọc Niên khóa 2001 – 2005 3. 3.1. Đối với muỗi trƣởng thành Bố