8 Hình 2.5: Vƣờn cây bị tàn phá do virus tristeza (cành chết khô và không có trái) Hình 2.6: Cây bƣởi bị nhiễm bệnh virus tristeza (cây lùn và lá bị vàng) 2.2 Các loại bệnh virus và môi giới truyền bệnh trên cây thuộc họ cam quýt 2.2.1 Các loại bệnh do virus Loài virus citrus là loài rất nhỏ, chỉ có thể nhân lên trong tế bào sống, thƣờng là tế bào của citrus nhƣng nó cũng có thể nhân trong cơ thể của aphid hoặc một vài loài làm vector khác. Bệnh virus thì không chữa đƣợc, khi một cây nhiễm thì nó có thể tái nhiễm đến khi chết. Khi cây nhiễm, nó có thể là tác nhân nhiễm cho các cây khác. Bệnh virus thƣờng không lây qua hạt. Một vài loài virus chỉ nhiễm trên một vài loài citrus. Virus có thể nhiễm vài tháng hoặc vài năm trƣớc khi có một vài triệu chứng. Trong một vài trƣờng hợp, triệu chứng có thể nhanh chóng đƣợc phát hiện [27]. 2.2.1.1 Citrus Tristeza virus (CTV) Virus gây bệnh này có nguồn gốc từ nhiều năm trƣớc ở Trung Quốc. Tristeza là bệnh tàn phá rất lớn trên citrus ở Bắc và Nam Mỹ, mặc dù có khoảng phân bố rất rộng trên thế giới. Bệnh hiện không còn ở Argentina, Brazil và Uruguay, đây cũng là bệnh nguy hiểm ở Nhật Bản. Bệnh cũng đƣợc xác định là có hiện diện ở nƣớc ta [27]. Bệnh do virus dạng sợi dài (2 x 10 – 11 nm), tập trung và làm hỏng mạch dẫn nhựa libe trong cây, xuống rễ và làm suy dinh dƣỡng nhƣ rụng lá, chết đọt, lùn cây và thƣờng thối rễ. Bệnh có thể lộ ra ở cây con mới trồng hay ở cây lớn bị 9 Hình 2.7: Triệu chứng bệnh “nổ lá” suy dinh dƣỡng. Cây có mang mầm bệnh có thể vẫn thấy khỏe mạnh trong liếp ƣơm nhƣng sớm lộ triệu chứng ngay sau khi trồng. Cây mang bệnh mãn tính sẽ bị lùn, phù gốc do mắt tháp phát triển quá khổ. Hầu hết các giống cam quýt đều có triệu chứng sọc lõm ở gỗ thân và cành (stem pitting). Một dạng đặc trƣng của bệnh là triệu chứng tổ ong khi dùng cam chua làm gốc ghép: khi tách vỏ ở vùng bên dƣới mắt tháp sẽ thấy nhiều lỗ nhỏ xếp cụm trong gỗ [27]. Bệnh đƣợc truyền bởi một loài aphid có tên là Toxoptera citricida Kirkaldy. Ngƣời ta kiểm tra thấy rằng nếu 5 aphid tấn công cây thì 50% cây sẽ bị nhiễm và nếu 15 aphid tấn công cây thì 70% sẽ bị nhiễm. Ngƣời ta cũng nhận thấy rằng các type khác nhau của virus này đều gây bệnh đƣợc [27]. CTV nhiễm trên tất cả các loài (nhân giống và tháp ghép) của cây citrus. Nó đƣợc tìm thấy trên toàn thế giới và có nhiều giống khác nhau, trong các type khác nhau đó có các type tàn phá rất lớn. Bệnh chịu ảnh hƣởng của điều kiện môi trƣờng, các dạng khác nhau của cây citrus và các nòi virus khác nhau. Khi cây đƣợc ghép trên gốc kháng thì cây có khả năng phục hồi lại sau đó [27]. 2.2.1.2 Citrus tatter leaf virus ( CTLV) CTLV đƣợc phát hiện đầu tiên 1962, trên cây chanh Mayer thuộc Trung Quốc. Sau đó một vài loài virus cũng đƣợc phát hiện trên giống chanh đó ở Australia và ở phía Nam châu Phi [27]. Bệnh do virus dạng sợi tóc và truyền bệnh bằng côn trùng hoặc các vector khác. Con đƣờng chủ yếu là lây qua nhân giống và tồn tại ở chồi. Loại virus này đƣợc truyền qua nhựa cây, có thể truyền khi cắt cành và công cụ làm vƣờn khi cắt cây bệnh trƣớc [7]. Hầu hết các loài citrus khi nhân từ giống có chứa loài virus này không thấy triệu chứng. Tuy nhiên, cây nhiễm đều bị lùn, chậm tăng trƣởng, lá biến dạng và nổi u (sƣng tấy), cành non thì ngoằn ngèo. Ảnh hƣởng rõ ràng nhất là chồi vàng (khi chồi non ghép trên gốc ghép) [27]. 10 Hình 2.8: Gốc cây bị bệnh bong vỏ gốc thân 2.2.1.3 Citrus exocortis virus (CEV) CEV đƣợc phát hiện đầu tiên năm 1948, ở Australia và bây giờ nó có ở khắp nơi trên thế giới. Bệnh làm chậm tăng trƣởng trên cam. Bệnh rất dễ lây qua ghép, ở các chồi ghép và không thấy triệu chứng khi nhân giống. Thể viroid truyền qua cơ giới công cụ cắt và tỉa cành [27]. Mầm bệnh do một loài viroid của virus, viroid làm chết vỏ, khô, vỡ ra và có thể bóc vỏ đƣợc dễ dàng. Nhựa thì không có dƣới lớp vỏ của cây nhƣ vậy. Bệnh có thể nhiễm ở hầu hết loài citrus khi nhân giống và luôn tiềm ẩn trong cây [27]. 2.2.2 Môi giới truyền bệnh trên cây thuộc họ cam quýt Đối với cây thuộc họ cam quýt thì nguyên nhân truyền bệnh do công cụ làm cắt tỉa cành trong vƣờn, do các loại côn trùng truyền bệnh mà trong đó rệp là tác nhân chủ yếu. Rệp sống chủ yếu bằng cách hút nhựa và chất kích thích sinh trƣởng ở các bộ phận non của cây do đó thƣờng làm cho cây giảm quang hợp, nếu tấn công trên trái thì làm trái nhỏ sẽ bị rụng, bị đen, kích thƣớc trái nhỏ, dị dạng, giảm chất lƣợng quả từ đó làm giãm giá trị thƣơng mại. Đồng thời, rệp còn là tác nhân truyền bệnh virus gây hại rất lớn cho các cây thuộc họ cam quýt nói riêng và nhiều loại cây trồng khác nói chung. Phân của các loài rệp này thải ra quyến rũ nấm bồ hống đến cộng sinh làm giảm khả năng quang hợp của cây, do phân của chúng chứa một lƣợng đƣờng rất cao. Đồng thời phân của chúng còn có thể hấp dẫn các loài kiến khác nhau đến tha chúng đi nơi khác để tiếp tục gây hại cho cây trồng [3, 7]. Rệp hại cây trồng đƣợc phân ra làm hai nhóm chủ yếu là nhóm rệp muội hay còn gọi là rầy mềm, nhóm thứ hai là nhóm rệp sáp. 2.2.2.1 Rệp muội hại cây trồng Nhóm rệp này chỉ có một họ duy nhất là Aphididae thuộc bộ cánh đều, có thân mềm, dài từ 1 – 2 mm, dạng hình quả lê, trần trụi, cuối bụng có phiến đuôi và hai ống bụng hai bên. Có thể có cánh hoặc không có cánh tuỳ theo điều kiện sinh sống (thời 11 Hình 2.9: Các môi giới truyền bệnh trên cây thuộc họ cam quýt A: Rệp muội xanh Aphis citricola B: Rệp muội nâu Toxoptera citricidus C: Rệp muội đen Toxoptera aurantii A B C tiết và dinh dƣỡng, nếu không thích hợp thì số có cánh sẽ nhiều hơn và di chuyển đi nơi khác sinh sống) [3]. Trên cam quýt có ba dạng rệp chủ yếu sau và cũng là tác nhân thuyền bệnh virus tristeza:  Rệp muội xanh Aphis citricola  Rệp muội nâu Toxoptera citricidus  Rệp muội đen Toxoptera aurantii 2.2.2.2 Rệp sáp hại cây trồng  Gồm có 5 họ với 91 loài khác nhau phân bố rộng khắp các vƣờn cây ăn trái. Asterolecaniidae có 2 loài Coccidae với 19 loài (rệp sáp) Diaspididae với 53 loài (rệp sáp vảy và rệp sáp dính) Margarodidae với 3 loài (rệp sáp trắng và sáp bông) Pseudococcidae với 14 loài (rệp sáp giả) 12  Thành phần rệp hại cây trồng đã đƣợc thống kê tại Việt Nam Bảng 2.1 : Thành phần rệp hại cây trồng thuộc họ cam quýt chủ yếu ở Việt Nam Tên khoa học Họ Hình ảnh minh họa theo họ Toxoptera aurantii Aphididae Toxoptera citricidus Aphididae Toxoptera citricola Aphididae Icerya purchasi Margarodidae Planocuccus citri Pseudococcidae Planococcus citriculus Pseudococcidae Chloropulvinaria aurantii Coccidae Saissetia coffeae Coccidae Anonidiella aurantii Diaspididae Chrysonphalus aonidium Diaspididae (Theo Nguyễn Mạnh Chinh, 2002). 13 Hình 2.10: Hạt bƣởi nảy mầm 2.3 Các cách nhân giống của cây bƣởi Để nhân giống các cây cam quýt nói chung và cây bƣởi nói riêng ta có thể sử dụng các cách nhân giống khác nhau nhƣ gieo hạt, chiết cành, giâm cành, ghép. 2.3.1 Nhân giống cổ điển 2.3.1.1 Nhân giống bằng hạt Đây là cách nhân giống đƣợc bắt đầu khi loài ngƣời biết trồng cây ăn quả. Đây là quá trình tạo cây con từ hạt, hạt đƣợc hình thành do sự thụ tinh của tế bào hạt phấn và tế bào noãn, cây mới mọc mang đặc tính của cả bố và mẹ hoặc nghiêng hẳn về bố hoặc mẹ. Cách nhân giống này áp dụng chủ yếu để lấy cây con làm gốc ghép. Rất ít vùng dùng cây con làm giống vì phải 8 – 10 năm mới có thể cho quả đƣợc [6 – 12].  Các yêu cầu khi chọn hạt làm gốc ghép để nhân giống:  Chọn những hạt mẩy không sâu bệnh từ quả tốt để làm giống.  Chọn cây thích hợp với điều kiện tự nhiên của địa phƣơng có năng suất cao, phẩm chất tốt.  Chọn cây là những cây ổn định về mặt sinh trƣởng, có từ 6 – 7 năm tuổi trở lên.  Chọn cây sinh trƣởng khỏe, có bộ rễ phát triển mạnh, cành phân tán cân đối, lá tƣơi tốt, không sâu bệnh. 2.3.1.2 Nhân giống bằng cách chiết cành Cây có múi nói chung đều dễ nhân giống bằng phƣơng pháp chiết nhánh bó bầu. Nguyên liệu nhân giống là cành đã có búp sinh trƣởng, chỉ cần bóc một khoảnh vỏ bó đất, khi cành ra rễ mới cắt khỏi cây mẹ. Ƣu điểm của phƣơng pháp là vì chƣa cắt khỏi cây mẹ nên cành đƣợc nuôi một phần bằng nhựa cây mẹ nên cành dễ sống hơn [14, 15]. 14  Bó chổ cắt bằng rêu ẩm  Dùng bọc và dây buột chặt lại Hình 2.11: Cách thực hiện chiết cành Cách thực hiện gồm các bƣớc chủ yếu sau đây:  Chọn cành dài khoảng 15 – 30 cm, cũng có thể làm vào mùa hè lúc đó vỏ cây còn cứng. Sau đó, cắt lột bỏ lớp một lớp vỏ và cạo bỏ lớp vỏ cứng bên ngoài một cách nhẹ nhàng, có thể bổ sung indolebutyric acid lên bề mặt lát cắt (là một loại hormon tạo rễ). 2.3.1.3 Nhân giống bằng cách giâm cành Phƣơng pháp này dựa trên khả năng hình thành rễ phụ (rễ bất định) của các đoạn cành đã cắt rời khỏi thân mẹ (hoặc các đoạn rễ). Ngày nay, phƣơng pháp này đƣợc ứng dụng rộng rãi nhằm nhân giống các cây công nghiệp, cây lâm nghiệp. Ở nƣớc ta, việc nhân giống chanh bằng phƣơng pháp giâm cành rất phổ biến nhằm tạo cây lùn, nhanh thu hoạch quả và chu trình kinh doanh khai thác ngắn nhƣng hiệu quả cao [15]. Nhà giâm cành nói chung phải thoáng mát, kín gió, trao đổi không khí tốt. Cành để thực hiện nhân giống là những cành bánh tẻ, phần lớn là những cành ra trong năm, có khi ra cùng trong vụ xuân hoặc hè. Nguyên tắc chung là chọn những cành lƣng chừng tán, ngoài bìa tán và những cành ở cấp cành cao (những cành không mang hoa, quả và những cành ổn định sinh trƣởng chƣa lâu). Cắt cành giống vào thời gian không có nắng trong ngày: sáng sớm hay chiều tối vì cành lá sẽ mất nƣớc đột ngột, tỉ lệ ra rễ kém. Cành cắt xong cần đƣợc phun nƣớc cho ƣớt lá rồi dựng đứng vào trong xô hoặc thùng có chứa nƣớc sạch, đậy lại bằng vải màu tối đã thấm ƣớt. 15 Cành sau đó đƣợc xử lý lại, đối với cành dễ ra rễ có thể cắm thẳng vào nền giâm, hoặc xử lý hóa chất ra rễ ở nồng độ thấp (NAA, IAA hay IBA). Phải thƣờng xuyên duy trì độ ẩm từ lúc cắm cành cho đến lúc ra rễ. Nhiệt độ thích hợp cho quá trình tạo rễ ở cây ăn quả là 21 – 26 o C. Khi rễ của cành giâm mọc đủ dài, hơi chuyển từ màu trắng sang màu vàng và dẻo thì phải ra ngôi kịp thời trong vƣờn ƣơm hay túi polymer. 2.2.1.4 Nhân giống bằng cách ghép Ghép là phƣơng pháp đem cành hay mầm nhánh của cây mẹ có nhiều ƣu điểm nhƣ phẩm chất tốt, năng suất cao… gắn sang gốc một loại cây khác để tạo thành một thể mới thống nhất [12].  Ƣu điểm  Cây sau khi ghép giữ đƣợc đặc tính của cây mẹ, mau cho trái, tuổi thọ cao.  Nhân đƣợc nhiều cây giống.  Cây có bộ rễ ăn sâu, chống đƣợc gió bão va chạm tốt hơn so với giâm cành, chiết cành.  Sử dụng đƣợc các đặc tính tốt của cây mẹ làm gốc ghép nhƣ chịu hạn, chịu úng, chịu lạnh …  Cây cao có thể làm thấp xuống nhờ ghép.  Áp dụng đƣợc với những cây không hạt.  Phục tráng cho những cây già, quý hiếm.  Thay đổi đƣợc tính trạng đực khi ghép cây cái lên cây đực.  Nhƣợc điểm  Kỹ thuật ghép tiến hành phức tạp hơn giâm cành, chiết cành.  Cần phải có kiến thức nhất định về cây tiến hành ghép.  Cần phải nghiên cứu khi ghép khác họ khác loài.  Có khoảng 30 loại bệnh lây lan qua đƣờng ghép do mycoplasma, virus, viroid, vi khuẩn. 16 Biểu bì Nhu mô Cƣơng mô Libe Tƣợng tầng Nhu mô tủy Thân cây hai lá mầm Mộc Hình 2.12: Thân cây hai lá mầm (a) Cơ sở kết hợp của gốc ghép và cành ghép Cấu trúc thân cây cắt ngang có ba phần chính: lớp vỏ ngoài cùng có nhiệm vụ dẫn nhựa luyện từ lá xuống rễ, phần gỗ phía trong dẫn nhựa nguyên từ gốc lên cành lá, phần giữa gỗ và vỏ là tƣợng tầng mô phân sinh rất mỏng, có khả năng phân chia nhanh, tạo nên gỗ bên trong và vỏ bên ngoài. Việc kết hợp giữa gốc và cành ghép gồm 4 bƣớc nhƣ sau:  Áp sát phần tƣợng tầng của gốc với cành ghép.  Lớp tế bào tƣợng tầng ngoài của gốc và cành ghép tạo ra những tế bào nhu mô dính lại với nhau gọi là mô sẹo.  Các tế bào nhu mô của mô sẹo phân hoá thành những tế bào tƣợng tầng mới, kết hợp với tƣợng tầng nguyên thủy của gốc và cành ghép.  Các tế bào tƣợng tầng mới tạo ra những mô mạch mới, gỗ bên trong và libe bên ngoài, hình thành sự kết hợp mạch giữa gốc và cành ghép giúp dinh dƣỡng và nƣớc đƣợc vận chuyển qua lại. (b) Điều kiện để ghép cành Để đảm bảo việc ghép cành thành công cần phải lƣu ý một số yếu tố sau [12, 14, 15]:  Các cây ghép với nhau phải cùng một họ để có khả năng kết hợp cao, tốt nhất là cùng loài, cùng thứ.  Gốc ghép, cành ghép cần có mức sinh trƣởng tƣơng đƣơng nhau để có khả năng kết hợp tốt.  Hai bộ phận ghép phải đƣợc áp chặt nhau để tăng khả năng kết dính, chỗ ghép không đƣợc dơ, nóng hay bị ẩm ƣớt. 17 Cành ghép Gốc ghép Cài hai lƣởi gà vào với nhau Dùng kẹp kẹp lại Cắt rời cành ghép khỏi gốc ghép Hình 2.13: Cách ghép áp A : Gốc ghép B : Tạo lƣỡi gà cho gốc ghép C : Cành ghép cũng đƣợc tạo lƣỡi gà D : Áp cành ghép và gốc ghép lại E : Dùng dây quấn chặt cành ghép vào gốc ghép. Hình 2.14: Cách ghép cành  Muốn cho cành ghép tiếp hợp vào gốc ghép, nhất thiết phải có một bộ phận của mô phân sinh ở cành ghép tiếp xúc tƣơng đối chặt với một bộ phận tƣợng tầng của gốc ghép. (c) Các phƣơng pháp ghép  Ghép áp Khi gốc ghép và cành ghép có đƣờng kính tƣơng đƣơng nhau ta đem chúng lại gần nhau và áp lại với nhau. Dùng dao vát một miếng nhỏ để lộ tƣợng tầng ở gốc ghép và cành ghép, buộc chặt cành ghép và gốc ghép lại với nhau theo vị trí vết cắt. Sau 40 – 50 ngày vết cắt sẽ liền sẹo, cắt bỏ ngọn gốc ghép và cắt rời gốc cành ghép. Phƣơng pháp này cho tỷ lệ sống rất cao (90 – 95%) nhƣng rất công phu và hệ số nhân thấp [12, 15].  Ghép cành Ghép cành là một phƣơng pháp khá phổ biến trong nhân giống cây ăn quả, áp dụng trong các trƣờng hợp cây khó lấy mắt hoặc trong những thời vụ mà nhiệt độ và ẩm độ thấp, sự chuyển động của nhựa trong cây kém. Nhiều khi kết hợp giữa ghép đoạn cành và ghép mắt để tận dụng cành ghép [12, 15]. . Cành ghép Gốc ghép Cài hai lƣởi gà vào với nhau Dùng kẹp kẹp lại Cắt rời cành ghép khỏi gốc ghép Hình 2.1 3: Cách ghép áp A : Gốc ghép B : Tạo lƣỡi gà cho gốc ghép C : Cành ghép cũng. khi ghép cây cái lên cây đực.  Nhƣợc điểm  Kỹ thuật ghép tiến hành phức tạp hơn giâm cành, chiết cành.  Cần phải có kiến thức nhất định về cây tiến hành ghép.  Cần phải nghiên cứu khi ghép. cũng đƣợc tạo lƣỡi gà D : Áp cành ghép và gốc ghép lại E : Dùng dây quấn chặt cành ghép vào gốc ghép. Hình 2.1 4: Cách ghép cành  Muốn cho cành ghép tiếp hợp vào gốc ghép, nhất thiết phải có