VIÊN NÉN ETHAMBUTOL HYDROCLORID VÀ ISONIAZID Tabellae Ethambutoli hydrochloridum et Isoniazidum Là viên nén bao phim chứa ethambutol hydroclorid và isoniazid. Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc viên nén" mục "Viên bao" (Phụ lục 1.20) và các yêu cầu sau: Hàm lượng ethambutol hydroclorid, C 10 H 24 N 2 O 2 .2HCl, từ 90,0% đến 110,0%, so với hàm lượng ghi trên nhãn. Hàm lượng isoniazid, C 6 H 7 N 3 O, từ 90,0% đến 110,0%, so với hàm lượng ghi trên nhãn. Tính chất Viên bao phải nhẵn, không nứt cạnh, không dính tay, đồng đều về màu sắc. Bên trong của viên bao có màu trắng. Định tính A. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF 254 dày 0,25 mm. Dung môi khai triển: Aceton : acid acetic băng (100 : 1). Dung dịch thử: Lắc kỹ một lượng bột viên đã nghiền mịn tương ứng với khoảng 60 mg isoniazid với 20 ml methanol (TT) và lọc. Pha loãng dịch lọc với đồng thể tích aceton (TT) và trộn đều. Dung dịch đối chiếu: Chuẩn bị dung dịch của isoniazid chuẩn có nồng độ 3 mg/ml trong methanol (TT). Pha loãng dung dịch trên với đồng thể tích aceton (TT) và trộn đều. Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 2 l mỗi dung dịch trên. Sau khi triển khai sắc ký, để bản mỏng khô ngoài không khí và quan sát bản mỏng dưới ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 254 nm. Vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải phù hợp với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu về vị trí, màu sắc và kích thước. B. Trong phần định lượng isoniazid, pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của pic isoniazid trên sắc ký đồ của dung dịch chuẩn. C. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF 254 dày 0,25 mm. Dung môi khai triển: Amoniac13,5 M : nước : methanol (10 : 15 : 75). Dung dịch ninhydrin: Hòa tan 1,0 g ninhydrin (TT) trong 50 ml ethanol (96%) (TT) và thêm 10 ml acetic acid băng (TT), trộn đều. Dung dịch thử: Lắc kỹ một lượng bột viên đã nghiền mịn tương ứng với khoảng 50 mg ethambutol hydroclorid với 10 ml methanol (TT) và lọc. Dung dịch đối chiếu: Dung dịch của ethambutol hydroclorid chuẩn 0,5% trong methanol (TT). Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 2 l mỗi dung dịch trên. Sau khi triển khai sắc ký, để bản mỏng khô ngoài không khí. Phun lên bản mỏng dung dịch ninhydrin và sấy ở 110 o C trong 10 phút. Vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải phù hợp với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu về vị trí, màu sắc và kích thước. D. Trong phần định lượng ethambutol hydroclorid, pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của pic ethambutol hydroclorid trên sắc ký đồ của dung dịch chuẩn. Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Thiết bị: Kiểu cách khuấy. Môi trường: 900ml dung dịch đệm phosphat pH 6,8 được chuẩn bị bằng cách hòa tan 8,4 g dinatri hydrophosphat khan (TT) trong 6 lít nước, điều chỉnh đến pH 6,8 bằng acid phosphoric (TT). Tốc độ quay: 100 vòng/phút. Thời gian: 45 phút. Định lượng ethambutol hydroclorid hòa tan: Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3). Pha động, dung dịch chuẩn, điều kiện sắc ký và cách tiến hành như phần định lượng ethambutol hydroclorid. Dung dịch thử: Lấy một phần dung dịch môi trường đã hoà tan mẫu thử, lọc qua giấy lọc (bỏ dịch lọc đầu), pha loãng với pha động (nếu cần) để thu được dung dịch có nồng độ tương đương với dung dịch chuẩn và lọc lại dịch lọc qua màng lọc 0,45 m. Yêu cầu: Không ít hơn 75% lượng ethambutol hydroclorid, C 10 H 24 N 2 O 2 .2HCl, so với lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 45 phút. Định lượng isoniazid hòa tan: Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3). Pha động, dung dịch chuẩn, điều kiện sắc ký và cách tiến hành như phần định lượng isoniazid. Dung dịch thử: Lấy một phần dung dịch môi trường đã hoà tan mẫu thử, lọc qua giấy lọc (bỏ dịch lọc đầu). Pha loãng dịch lọc bằng pha động để thu được dung dịch có nồng độ tương đương với dung dịch chuẩn. Lọc qua màng lọc 0,45 m. Yêu cầu: Không ít hơn 75% lượng isoniazid, C 6 H 7 N 3 O, so với lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 45 phút. Mất khối lượng do làm khô Không được quá 3,0% (Phụ lục 9.6). Cân chính xác khoảng 0,1 g bột thuốc vào bình sấy nắp đậy có mao quản và sấy trong chân không ở 60 o C trong 3 giờ. Định lượng Định lượng ethambutol hydroclorid Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3). Dung dịch đệm: Trộn 1,0 ml triethylamin(TT) và 1000 ml nước, điều chỉnh đến pH 7,0 bằng acid phosphoric (TT). Pha động: Hỗn hợp acetonitril và dung dịch đệm (50: 50). Điều chỉnh tỷ lệ nếu cần. Dung môi pha mẫu: Hòa tan 1,4 g dinatri hydrophosphat khan (TT) trong 1000 ml nước, điều chỉnh đến pH 6,8 bằng acid phosphoric (TT). Dung dịch chuẩn: Hoà tan một lượng ethambutol hydroclorid chuẩn trong dung môi pha mẫu để thu được dung dịch có nồng độ khoảng 0,3 mg/ml. Lọc qua màng lọc 0,45 m. Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên đã loại bỏ lớp bao phim và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột chế phẩm, tương ứng với khoảng 30 mg ethambutol hydroclorid vào bình định mức 100 ml, thêm 90 ml dung môi pha mẫu và lắc siêu âm khoảng 10 phút. Pha loãng bằng dung môi pha mẫu vừa đủ đến vạch và trộn đều. Lọc qua giấy lọc (bỏ dịch lọc đầu) và lọc lại dịch lọc qua màng lọc 0,45 m. Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (15 cm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh nitrilsilan silica gel (5 m). Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 200 nm. Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút. Thể tích tiêm: 100 l. Cách tiến hành: Kiểm tra khả năng thích hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký đối với dung dịch chuẩn. Phép thử chỉ có giá trị khi hệ số đối xứng pic ethambutol hydroclorid không được lớn hơn 3 và độ lệch chuẩn tương đối của diện tích pic ethambutol hydroclorid trong 6 lần tiêm lặp lại không được lớn hơn 2,0%. Tiến hành sắc ký lần lượt đối với dung dịch chuẩn và dung dịch thử. Tính hàm lượng ethambutol hydroclorid, C 10 H 24 N 2 O 2 .2HCl, có trong một đơn vị chế phẩm dựa vào diện tích pic thu được từ sắc ký đồ của dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng C 10 H 24 N 2 O 2 .2HCl trong ethambutol hydroclorid chuẩn,. Định lượng isoniazid Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3). Dung dịch đệm: Hòa tan 1,4 g dinatri hydrophosphat (TT) trong 1000 ml nước và điều chỉnh tới pH 6,8 bằng acid phosphoric (TT). Dung môi A: Hỗn hợp acetonitril và dung dịch đệm (4: 96). Dung môi B: Hỗn hợp acetonitril và dung dịch đệm (55: 45). Pha động: Hỗn hợp của dung môi A và dung môi B theo phần điều kiện sắc ký. Dung dịch chuẩn: Hoà tan một lượng cân chính xác của isoniazid chuẩn trong hỗn hợp của dung dịch đệm và methanol (96: 4) để thu được dung dịch có nồng độ khoảng 0,08 mg/ml. Lọc qua màng lọc 0,45 m. ( chỉ sử dụng dung dịch này trong vòng 10 phút). Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên đã loại bỏ lớp bao phim và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột chế phẩm, tương ứng với khoảng 8 mg isoniazid vào bình định mức 100 ml, thêm 90 ml dung dịch đệm và lắc siêu âm 10 phút. Để dung dịch cân bằng về nhiệt độ phòng và pha loãng bằng dung dịch đệm vừa đủ đến vạch và trộn đều. Lọc qua giấy lọc và bỏ dịch lọc đầu, lọc lại dịch lọc qua màng lọc 0,45 m. (chỉ sử dụng dung dịch này trong vòng 2 giờ). Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh C (5 m). Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 238 nm. Chương trình gradient dung môi: Thời gian (phút) % Dung môi A % Dung môi A 0 100 0 cân bằng cột 0 - 5 100 0 đẳng dòng 5 - 6 100→0 0→100 gradient 6 - 15 0 100 đẳng dòng Tốc độ dòng: 1,5 ml/phút. Thể tích tiêm: 20 l. Cách tiến hành: Kiểm tra khả năng thích hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký đối với dung dịch chuẩn. Phép thử chỉ có giá trị khi số đĩa lý thuyết, tính cho pic isoniazid, không dưới 6.000 và độ lệch chuẩn tương đối của diện tích pic isoniazid trong 6 lần tiêm lặp lại không được lớn hơn 2,0%. Tiến hành sắc ký lần lượt đối với dung dịch chuẩn và dung dịch thử. Tính hàm lượng isoniazid, C 6 H 7 N 3 O, có trong một đơn vị chế phẩm dựa vào diện tích pic thu được trên sắc ký đồ của dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng C 6 H 7 N 3 O trong isoniazid chuẩn. Bảo quản Trong vỉ nhôm hay trong chai lọ nút kín. Để nơi khô mát, tránh ánh sáng. Loại thuốc Chống lao. Hàm lượng thường dùng Ethambutol 400 mg và isoniazid 150 mg . VIÊN NÉN ETHAMBUTOL HYDROCLORID VÀ ISONIAZID Tabellae Ethambutoli hydrochloridum et Isoniazidum Là viên nén bao phim chứa ethambutol hydroclorid và isoniazid. Chế phẩm. ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc viên nén& quot; mục " ;Viên bao" (Phụ lục 1.20) và các yêu cầu sau: Hàm lượng ethambutol hydroclorid, C 10 H 24 N 2 O 2 .2HCl, từ 90,0%. (TT) và thêm 10 ml acetic acid băng (TT), trộn đều. Dung dịch thử: Lắc kỹ một lượng bột viên đã nghiền mịn tương ứng với khoảng 50 mg ethambutol hydroclorid với 10 ml methanol (TT) và lọc.