Đang tải... (xem toàn văn)
MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Giới thiệu về cây sen 4 1.2. Các hợp chất hóa học chính có trong lá sen 5 1.3. Một số ứng dụng của lá sen trong y học dân gian 10 1.4. Tình hình nghiên cứu các loài sen trên thế giới 11 CHƢƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1. Nguyên liệu, dụng cụ và hóa chất 13 2.1.1. Nguyên liệu 13 2.1.2. Xử lí nguyên liệu 13 2.1.3. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất. 13 2.2. Xác định chỉ số hóa lí 14 2.2.1. Các phương pháp xử lí mẫu 14 2.2.2. Xác định độ ẩm 15 2.2.3. Xác định hàm lượng hữu cơ tổng bằng phương pháp tro hóa mẫu 15 2.2.4. Xác định hàm lượng kim loại bằng phương pháp quang phổ hấp 16 thụ nguyên tử AAS 2.3. Phương pháp ngâm chiết 17 2.4. Phương pháp sắc kí lỏng – khối phổ 18 2.4.1. Sắc kí lỏng (LCLiquid Chromatography) 18 2.4.2. Khối phổ (MSmass spectrometry) 18 2.4.3. Sắc kí lỏng ghép khối phổ (LCMSliquid chromatography mass spectrometry) 19 2.5. Phương pháp sắc kí khí – khối phổ 19 2.5.1. Sắc ký khí (GC Gas Chromatography) 20 2.5.2. Sắc kí khí ghép khối phổ (GCMS_Gas Chromatography Mass Spectometry) 20 CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1. Quy trình nghiên cứu 22 3.2. Kết quả xác định một số chỉ tiêu hóa lí của lá sen 23 3.2.1. Độ ẩm 23 3.2.2. Hàm lượng hữu cơ 24 3.3. Xác định hàm lượng kim loại có trong lá sen bằng phương pháp 26 quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 3.4. Kết quả nghiên cứu thành phần hóa học của các dịch chiết lá sen 28 3.4.1. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong nhexane 28 3.4.2. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong ethyl acetate 34 3.4.3. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong methanol 38 3.5. Hiệu suất chiết 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA VĂN QUỐC HOÀNG Đề tài: KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ SEN ĐƯỢC THU HÁI Ở HUYỆN ĐIỆN BÀN, TỈNH QUẢNG NAMKHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Đà Nẵng - 2012 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐHSP Đôc lập – Tự do – Hạnh phúc KHOA HÓA *** *** NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ và tên sinh viên: Văn Quốc Hoàng Lớp: 08SHH 1. Tên đề tài: “Khảo sát thành phần hóa học của lá sen đƣợc thu hái ở huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam” 2. Nguyên liệu, dụng cụ và thiết bị: - Nguyên liệu: lá sen được lấy ở huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam. - Dụng cụ và thiết bị: Máy đo quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS, máy đo sắc kí lỏng kết hợp khối phổ LC-MS, máy đo sắc kí khí kết hợp khối phổ GC-MS. Tủ sấy, lò nung, cân phân tích, cốc sứ, bình định mức, giấy lọc 3. Nội dung nghiên cứu: khảo sát thành phần hóa học lá sen với các dung môi n- hexane, ethyl acetate, methanol. 4. Giáo viên hướng dẫn: Ths. Giang Thị Kim Liên 5. Ngày giao đề tài: 01/08/2011 6. Ngày hoàn thành: 20/05/2012 Chủ nhiệm khoa Giáo viên hướng dẫn Sinh viên đã hoàn thành và nộp báo cáo cho khoa ngày tháng năm 2012 Kết quả đánh giá: Ngày tháng năm 2012 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cám ơn các thầy cô giáo trong khoa đã tạo điều kiện giúp đỡ để em hoàn thành bài luận văn này. Em xin cám ơn Cô Giang Thị Kim Liên là người trực tiếp hướng dẫn em trong quá trình nghiên cứu đề tài. Em xin chân thành cám ơn thầy cô quản lý phòng thí nghiệm đã tạo điều kiện cho em về phòng thí nghiệm, dụng cụ trong quá trình làm thực nghiệm. Em mong muốn tiếp tục nhận được sự giúp đỡ của cô Giang Thị Kim Liên cùng các thầy cô trong khoa trong quá trình học tập và nghiên cứu sau này. Đà Nẵng, tháng 5 năm 2012 Sinh viên thực hiện Văn Quốc Hoàng MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Giới thiệu về cây sen 4 1.2. Các hợp chất hóa học chính có trong lá sen 5 1.3. Một số ứng dụng của lá sen trong y học dân gian 10 1.4. Tình hình nghiên cứu các loài sen trên thế giới 11 CHƢƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1. Nguyên liệu, dụng cụ và hóa chất 13 2.1.1. Nguyên liệu 13 2.1.2. Xử lí nguyên liệu 13 2.1.3. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất. 13 2.2. Xác định chỉ số hóa lí 14 2.2.1. Các phương pháp xử lí mẫu 14 2.2.2. Xác định độ ẩm 15 2.2.3. Xác định hàm lượng hữu cơ tổng bằng phương pháp tro hóa mẫu 15 2.2.4. Xác định hàm lượng kim loại bằng phương pháp quang phổ hấp 16 thụ nguyên tử AAS 2.3. Phương pháp ngâm chiết 17 2.4. Phương pháp sắc kí lỏng – khối phổ 18 2.4.1. Sắc kí lỏng (LC-Liquid Chromatography) 18 2.4.2. Khối phổ (MS-mass spectrometry) 18 2.4.3. Sắc kí lỏng ghép khối phổ (LC/MS-liquid chromatography mass spectrometry) 19 2.5. Phương pháp sắc kí khí – khối phổ 19 2.5.1. Sắc ký khí (GC - Gas Chromatography) 20 2.5.2. Sắc kí khí ghép khối phổ (GC/MS_Gas Chromatography Mass Spectometry) 20 CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1. Quy trình nghiên cứu 22 3.2. Kết quả xác định một số chỉ tiêu hóa lí của lá sen 23 3.2.1. Độ ẩm 23 3.2.2. Hàm lượng hữu cơ 24 3.3. Xác định hàm lượng kim loại có trong lá sen bằng phương pháp 26 quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 3.4. Kết quả nghiên cứu thành phần hóa học của các dịch chiết lá sen 28 3.4.1. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong n-hexane 28 3.4.2. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong ethyl acetate 34 3.4.3. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong methanol 38 3.5. Hiệu suất chiết 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử GC Sắc ký khí LC Sắc ký lỏng MS Khối phổ GC-MS Sắc ký khí-khối phổ liên hợp LC-MS Sắc ký lỏng – khối phổ liên hợp LSH Dịch chiết của lá sen trong n-hexane LSE Dịch chiết của lá sen trong ethyl acetate LSM Dịch chiết của lá sen trong methanol T R Thời gian lưu CTPT Công thức phân tử DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1. Lá sen 4 Hình 1.2. Hoa sen 4 Hình 1.3. Nhị sen 5 Hình 1.4. Quả sen 5 Hình 1.5. Hạt sen 5 Hình 2.1. Sơ đồ cấu tạo máy quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 17 Hình 3.1.Sơ đồ quy trình nghiên cứu 22 Hình 3.2. Máy quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 26 Hình 3.3. Sắc kí đồ của dịch chiết lá sen trong dung môi n-hexan 27 Hình 3.4. Phổ khối của LSH1 30 Hình 3.5. Phổ khối của LSH2 31 Hình 3.6. Phổ khối của LSH3 31 Hình 3.7. Phổ khối của LSH4 32 Hình 3.8. Phổ khối của LSH5 32 Hình 3.9. Phổ khối của LSH6 32 Hình 3.10. Sắc kí đồ của dịch chiết lá sen trong etyl axetat 33 Hình 3.11. Phổ khối của leucocyanidin 36 Hình 3.12. Sắc kí đồ của dịch chiết lá sen trong methanol 37 Hình 3.13. Dịch chiết lá sen với các dung môi n-hexane, ethyl acetate, methanol. 39 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1. Kết quả khảo sát độ ẩm 24 Bảng 3.2. Kết quả khảo sát hàm lượng tro 25 Bảng 3.3. Kết quả khảo sát hàm lượng kim loại 26 Bảng 3.4. Thành phần hóa học của dịch chiết với dung môi n-hexane 28 Bảng 3.5. Thành phần hóa học của dịch chiết với dung môi ethyl acetate 34 Bảng 3.6. Thành phần hóa học của dịch chiết với dung môi methanol 38 Bảng 3.7. Kết quả xác định hiệu suất chiết 40 1 MỞ ĐẦU 1. Lí do chọn đề tài Sen là một loài cây đã quá quen thuộc với con người Việt Nam. Sen còn là biểu tượng về tinh thần của dân tộc Việt : “Gần bùn mà chẳng hôi tanh mùi bùn”. Cây sen thuộc loài Nelumbo nucifera Gaertn, ngành Ngọc Lan (magno liophyta), lớp Ngọc Lan (magno liopsida), phân lớp Sen (Nelumbonidae), bộ Sen (Nelumbonales), họ Sen (nelumbonaceae), chi Nelumbo Adans. Ngoài ra còn có tên khác như: Liên, Ngậu (Tày). Tên khoa học: Nelumbo nuciferagaertn. Tên nước ngoài: sacred lotus, chinese water-lily, Indian lotus, Egypian bean. Không chỉ có vẻ đẹp, hương thơm mà sen còn có nhiều công dụng, tác dụng quý báu. Hải Thượng Lãn Ông đã viết về cây sen như sau: “cây sen mọc dưới bùn đen mà không ô nhiễm mùi bùn, đượm khí thơm trong lành của đất trời; nên củ, lá, hoa, tua, vỏ, quả, ruột đều là thuốc hay”. Nhưng từ trước đến nay, người ta chỉ chú ý đến sử dụng hạt sen (liên nhục) để nấu chè, tâm sen (liên tâm) làm thuốc an thần, tua sen (liên tu) dùng ướp chè, ngó sen (liên ngẫu) làm thực phẩm. Còn lá sen chỉ được dùng để gói thức ăn, ít người nghĩ rằng lá sen có nhiều tác dụng quý để chữa bệnh. Ngày nay, nhờ công nghệ hiện đại, các nhà khoa học đã phát hiện ra một chất đặc biệt của cây sen, chất nuciferine có tác dụng chống viêm, giảm đau, trị béo phì, hạ cholesterol trong máu và hoạt tính chống lại serotonin. Lá sen chứa nhiều nuciferine nhất. Nuciferine chiết ra từ lá sen có công dụng kéo dài giấc ngủ. Ngoài ra, lá sen còn chứa nhiều vitamin C, alkaloid tác dụng an thần mạnh hơn tâm sen. Về hóa học, lá sen chứa 0,2-0,3% tanin, 0,77-0,84% alkaloid trong đó có nuciferine, nor-nuciferine, roemerine, anonain, liriodenin, pro-nuciferine, O-nor- nuciferine, armeparin, N-nor-amepavin, metyl-coclaurin, nepherin, dehydro roemerine, dehydro nuciferine, dehydro anonain, N-metyl lisococlaurin,. Trong đó, nuciferine là alkaloid chính [1]. 2 Về dược lý, lá sen được nghiên cứu có tác dụng an thần, chống co thắt cơ trơn, chống thoáng phản vệ, ức chế loạn nhịp tim, từ lâu đã được y học cổ truyền dùng làm thuốc chữa bệnh. Về sau này khi bệnh béo phì trở nên phổ biến, thì lá sen được sử dụng rất hiệu quả để chống lại căn bệnh này. Chính vì những lý do trên, tôi đã chọn đề tài “Khảo sát thành phần hóa học của lá sen đƣợc thu hái ở huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam” làm đề tài khoá luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm Hoá học của mình. 2. Mục đích nghiên cứu Xác định một số chỉ tiêu hóa lý của lá sen và khảo sát thành phần hoá học của các dịch chiết từ lá sen với các dung môi khác nhau. 3. Đối tƣợng nghiên cứu Lá sen được lấy từ huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam. Dịch chiết lá sen bằng các dung môi n-hexane, ethyl acetate, methanol. 4. Các phƣơng pháp nghiên cứu - Xác định hàm lượng hữu cơ bằng phương pháp tro hóa mẫu khô ướt kết hợp. - Xác định hàm lượng kim loại bằng phương pháp đo quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS). - Chiết bằng phương pháp ngâm chiết tĩnh với các dung môi n-hexane, ethyl acetate, methanol. - Xác định thành phần hóa học của dịch chiết bằng phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS), và phương pháp sắc kí lỏng ghép khối phổ (LC-MS). 5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài Cung cấp thêm thông tin khoa học về lá sen tạo cơ sở nghiên cứu cho các đề tài liên quan đến lá sen, ứng dụng của lá sen trong lĩnh vực y học. 6. Bố cục của đề tài Luận văn gồm 44 trang trong đó có 7 bảng và 11 hình. Phần mở đầu (3 trang), kết luận và kiến nghị (1 trang), tài liệu tham khảo (2 trang), và phụ lục (8 trang). [...]... Như vậy, hoạt tính dược lý của cây sen đã được nghiên cứu nhiều Tuy nhiên các công trình về thành phần hóa học của cây sen hầu như vẫn còn rất ít Đặc biệt ở Việt Nam sen đã được sử dụng rất nhiều trong y học 13 CHƢƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu, dụng cụ và hóa chất 2.1.1 Nguyên liệu Nguyên liệu được lấy ở huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam Trước đây lá sen chủ yếu dùng để gói... lượng kim loại nặng trong lá sen nhỏ dưới giới hạn cho phép, không gây ảnh hưởng đến sức khỏe con người 3.4 Kết quả nghiên cứu thành phần hóa học của các dịch chiết lá sen 3.4.1 Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong n-hexane Dịch chiết lá sen trong n-hexane (LSH) được đo bằng thiết bị GC-MS, sắc kí đồ được biểu diễn trên hình 3.3 Hình 3.3 Sắc kí đồ của dịch chiết lá sen trong dung môi n-hexane... lá mầm dày mập màu trắng , bên trong có tâm sen màu xanh Tâm sen gồm rễ mầm, thân mầm, chồi mầm và 2 lá đầu tiên Hình 1.1 Lá sen Hình 1.2 Hoa sen 5 Hình 1.3 Nhị sen Hình 1.4 Quả sen Hình 1.5 Hạt sen Phân bố: Chi Nelumbo Adans phân bố ở vùng nhiệt đới châu Á và châu Mỹ Mùa hoa: tháng 5-6, mùa quả: tháng 7-9 1.2 Các hợp chất hóa học chính có trong lá sen Theo Giáo sư Tiến sĩ Đỗ Tất Lợi thì trong lá sen- hà... và methanol thu được các cao chiết tương ứng Các cao chiết này được đem đi xác định thành phần hóa học bằng phương pháp sắc ký lỏng kết hợp ghép khối phổ (LC-MS) tại phòng nghiên cứu cấu trúc – Viện hóa học – Viện khoa học và công nghệ Việt Nam, 18 Hoàng Quốc Việt, Hà Nội 3.2 Kết quả xác định một số chỉ tiêu hóa lí của lá sen 3.2.1 Độ ẩm Để xác định độ ẩm tiến hành sấy mẫu trong tủ sấy ở nhiệt độ trong... huyết: Lá sen 40g, ngó sen hoặc cỏ nhọ nồi 40g, rau má 30g, hạt mã đề 20g, sắc uống ngày một thang Nếu xuất huyết nhiều có thể tăng liều của lá và ngó sen lên 60g - Chữa béo phì, hạ cholesterol trong máu: Đây là công dụng mới được phát hiện của lá sen Trên thị trường hiện có bán nhiều loại trà giảm béo có lá sen, song có thể tự dùng bằng cách nấu lá sen tươi uống thay nước hàng ngày, mỗi ngày 1 lá 1.4... oxalic… 10 1.3 Một số ứng dụng của lá sen trong y học dân gian Theo đông y lá sen có vị đắng tính bình, vào 3 kinh can, tỳ và vị Có tác dụng thăng thanh tán ứ, thanh thử hành thủy Dùng chữa thử thấp tiết tả, thủy chí phù thủng, lôi đầu phong, nôn ra máu, máu cam, băng trung huyết lỵ [18] Một số bài thu c nam có sử dụng lá sen: - Chữa mất ngủ: Lá sen loại bánh tẻ 30g rửa sạch, thái nhỏ, phơi khô sắc hoặc... oxy hóa Kết quả cho thấy, khả năng chống oxy hóa của lá sen được giải thích bởi các flavonoid [11] Theo nghiên cứu của Huang CF, Chen YW, Yang CY, Lin HY, Way TD, Chiang W và Liu SH, dịch chiết từ lá sen của loài Nelumbo nucifera có khả năng điều chỉnh nồng độ đường trong máu ở những con chuột bình thường và chuột mắc bệnh tiểu đường Nghiên cứu đã chỉ ra rằng chất catechin trong dịch chiết lá sen làm... bình của lá sen là 71.47% Giá trị này có thể khác nhau tùy thu c vào địa điểm lấy mẫu và thời gian thu hái 25 3.2.2 Hàm lượng tro Tro toàn phần là khối lượng cặn còn lại sau khi nung cháy hoàn toàn một mẫu thử trong điều kiện nhất định Cách tiến hành: Mẫu lá sen sau khi được sấy khô, đem than hóa sơ bộ trên bếp điện rồi cho vào lò nung ở 450-5000C trong thời gian từ 4 đến 6 tiếng, cho đến khi thu được... thức: % tro = m3 m0 100 m1 m0 Trong đó: m0: là khối lượng của chén sứ m1: là khối lượng của chén sứ và lá sen trước khi sấy m2: là khối lượng chén sứ và lá sen sau khi sấy m3: là khối lượng của chén sứ và lá sen sau khi tro hóa Hàm lượng tro được lấy trung bình từ các mẫu trên Kết quả được trình bày ở bảng 3.2 Bảng 3.2 Kết quả khảo sát hàm lƣợng tro STT m0 m1 m2 m3 % tro 1 28.539 33.551 29.969... glucose ở chuột mắc bệnh tiểu đường Dịch chiết của lá sen mở ra một hướng nghiên cứu cho việc kiểm soát tăng đường huyết ở người mắc bệnh tiểu đường mà không phụ thu c vào insulin [10] 12 Theo nghiên cứu của Ohkoshi E , Miyazaki H , K Shindo , Watanabe H , Yoshida A và Yajima H; lá của loài sen Nelumbo nucifera có tác dụng lợi tiểu và được sử dụng để điều trị bệnh béo phì Dịch chiết từ lá sen với . tài: Khảo sát thành phần hóa học của lá sen đƣợc thu hái ở huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam 2. Nguyên liệu, dụng cụ và thiết bị: - Nguyên liệu: lá sen được lấy ở huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam. . ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA VĂN QUỐC HOÀNG Đề tài: KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ SEN ĐƯỢC THU HÁI Ở HUYỆN ĐIỆN BÀN, TỈNH QUẢNG NAMKHÓA LUẬN TỐT. quả nghiên cứu thành phần hóa học của các dịch chiết lá sen 28 3.4.1. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong n-hexane 28 3.4.2. Thành phần hóa học của dịch chiết lá sen trong ethyl