Chuyên Chuyên đ đ ề ề KI KI Ể Ể M NGHI M NGHI Ệ Ệ M THU M THU Ố Ố C B C B Ằ Ằ NG PHƯƠNG PH NG PHƯƠNG PH Á Á P SINH H P SINH H Ọ Ọ C C I. M I. M Ở Ở Đ Đ Ầ Ầ U U Trong Trong ng ng à à nh nh Dư Dư ợ ợ c c c c ó ó nhi nhi ề ề u u phương phương ph ph á á p p kh kh á á c c nhau nhau đ đ ể ể ki ki ể ể m m tra tra ch ch ấ ấ t t lư lư ợ ợ ng ng c c ủ ủ a a thu thu ố ố c c như như phương phương ph ph á á p p ho ho á á h h ọ ọ c c , , phương phương ph ph á á p p v v ậ ậ t t lý lý , , phương phương ph ph á á p p sinh sinh h h ọ ọ c c . . Phương Phương ph ph á á p p ho ho á á , , v v ậ ậ t t lý lý ti ti ế ế n n h h à à nh nh nhanh nhanh , , ch ch í í nh nh x x á á c c nhưng nhưng ch ch ỉ ỉ á á p p d d ụ ụ ng ng đư đư ợ ợ c c v v ớ ớ i i c c á á c c ch ch ấ ấ t t th th à à nh nh ph ph ầ ầ n n ho ho á á h h ọ ọ c c đã đã bi bi ế ế t t . . M M ộ ộ t t s s ố ố dư dư ợ ợ c c ph ph ẩ ẩ m m c c ó ó yêu yêu c c ầ ầ u u v v ề ề hi hi ệ ệ u u l l ự ự c c t t á á c c d d ụ ụ ng ng , , ho ho ặ ặ c c nh nh ữ ữ ng ng t t í í nh nh ch ch ấ ấ t t riêng riêng bi bi ệ ệ t t như như đ đ ộ ộ an an to to à à n n c c ủ ủ a a vaccine, vaccine, đ đ ộ ộ c c t t í í nh nh b b ấ ấ t t thư thư ờ ờ ng ng hay hay y y ế ế u u t t ố ố gây gây s s ố ố t t c c ủ ủ a a m m ộ ộ t t s s ố ố lo lo ạ ạ i i thu thu ố ố c c … … Nh Nh ữ ữ ng ng tiêu tiêu chu chu ẩ ẩ n n n n à à y y không không th th ể ể x x á á c c đ đ ị ị nh nh đư đư ợ ợ c c b b ằ ằ ng ng phương phương ph ph á á p p lý lý , , ho ho á á m m à à ph ph ả ả i i d d ù ù ng ng phương phương ph ph á á p p sinh sinh h h ọ ọ c c . .   1.1. 1.1. Nguyên Nguyên t t ắ ắ c c   • • Phương Phương ph ph á á p p sinh sinh h h ọ ọ c c d d ự ự a a trên trên nguyên nguyên t t ắ ắ c c : :   So So s s á á nh nh hi hi ệ ệ u u l l ự ự c c t t á á c c d d ụ ụ ng ng ho ho ặ ặ c c c c á á c c đ đ ặ ặ c c t t í í nh nh riêng riêng c c ủ ủ a a ch ch ấ ấ t t th th ử ử v v ớ ớ i i ch ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n tương tương ứ ứ ng ng trong trong c c ù ù ng ng đi đi ề ề u u ki ki ệ ệ n n v v à à th th ờ ờ i i gian gian th th í í nghi nghi ệ ệ m m . .   Trong Trong l l ĩ ĩ nh nh v v ự ự c c ki ki ể ể m m nghi nghi ệ ệ m m thu thu ố ố c c , , hai hai lo lo ạ ạ i i th th ử ử nghi nghi ệ ệ m m đư đư ợ ợ c c á á p p d d ụ ụ ng ng nhi nhi ề ề u u nh nh ấ ấ t t l l à à : :   - - Ki Ki ể ể m m nghi nghi ệ ệ m m thu thu ố ố c c b b ằ ằ ng ng phương phương ph ph á á p p th th ử ử trên trên đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t   - - Ki Ki ể ể m m nghi nghi ệ ệ m m thu thu ố ố c c b b ằ ằ ng ng c c á á c c th th ử ử nghi nghi ệ ệ m m vi vi sinh sinh v v ậ ậ t t . .   1.2. 1.2. Ch Ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n   Ch Ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n l l à à m m ộ ộ t t y y ế ế u u t t ố ố quan quan tr tr ọ ọ ng ng đ đ ể ể đ đ á á nh nh gi gi á á ch ch ấ ấ t t lư lư ợ ợ ng ng ch ch ấ ấ t t th th ử ử . . Ch Ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n đư đư ợ ợ c c chia chia l l à à m m hai hai lo lo ạ ạ i i : :   - - Ch Ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n g g ố ố c c   - - Ch Ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n th th ứ ứ c c ấ ấ p p   Ch Ch ấ ấ t t chu chu ẩ ẩ n n ph ph ả ả i i đư đư ợ ợ c c b b ả ả o o qu qu ả ả n n trong trong c c á á c c ố ố ng ng thu thu ỷ ỷ tinh tinh ở ở nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ th th í í ch ch h h ợ ợ p p tu tu ỳ ỳ theo theo m m ẫ ẫ u u ( ( thư thư ờ ờ ng ng ở ở nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ < 5 < 5 0 0 C) C) trong trong đi đi ề ề u u ki ki ệ ệ n n khô khô , , tr tr á á nh nh á á nh nh s s á á ng ng . .   1.3. 1.3. Đ Đ á á nh nh gi gi á á k k ế ế t t qu qu ả ả   Th Th ử ử nghi nghi ệ ệ m m sinh sinh h h ọ ọ c c thư thư ờ ờ ng ng c c ó ó th th ờ ờ i i gian gian th th í í nghi nghi ệ ệ m m k k é é o o d d à à i i v v à à ph ph ụ ụ thu thu ộ ộ c c v v à à o o nhi nhi ề ề u u y y ế ế u u t t ố ố như như t t í í nh nh ch ch ấ ấ t t đ đ á á p p ứ ứ ng ng c c ủ ủ a a sinh sinh v v ậ ậ t t th th í í nghi nghi ệ ệ m m , , ngư ngư ờ ờ i i l l à à m m th th í í nghi nghi ệ ệ m m , , c c á á c c đi đi ề ề u u ki ki ệ ệ n n th th ử ử nghi nghi ệ ệ m m . . C C á á c c y y ế ế u u t t ố ố n n à à y y thư thư ờ ờ ng ng không không ổ ổ n n đ đ ị ị nh nh . . V V ì ì v v ậ ậ y y k k ế ế t t qu qu ả ả th th ử ử nghi nghi ệ ệ m m sinh sinh h h ọ ọ c c ph ph ả ả i i đư đư ợ ợ c c đ đ á á nh nh gi gi á á b b ằ ằ ng ng to to á á n n th th ố ố ng ng kê kê . . Đ Đ ộ ộ ch ch í í nh nh x x á á c c c c ủ ủ a a ph ph é é p p th th ử ử đư đư ợ ợ c c th th ể ể hi hi ệ ệ n n b b ằ ằ ng ng gi gi ớ ớ i i h h ạ ạ n n tin tin c c ậ ậ y y . .   II. KI II. KI Ể Ể M NGHI M NGHI Ệ Ệ M THU M THU Ố Ố C B C B Ằ Ằ NG PHƯƠNG NG PHƯƠNG PH PH Á Á P TH P TH Ử Ử TRÊN Đ TRÊN Đ Ộ Ộ NG V NG V Ậ Ậ T T   2.1. 2.1. Nguyên Nguyên t t ắ ắ c c   Ki Ki ể ể m m nghi nghi ệ ệ m m thu thu ố ố c c b b ằ ằ ng ng c c á á c c ph ph é é p p th th ử ử trên trên đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t d d ự ự a a trên trên s s ự ự đ đ á á p p ứ ứ ng ng c c ủ ủ a a đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t th th í í nghi nghi ệ ệ m m đ đ ố ố i i v v ớ ớ i i c c á á c c ch ch ế ế ph ph ẩ ẩ m m đư đư ợ ợ c c đưa đưa v v à à o o cơ cơ th th ể ể m m ộ ộ t t li li ề ề u u lư lư ợ ợ ng ng theo theo qui qui đ đ ị ị nh nh c c ủ ủ a a t t ừ ừ ng ng th th í í nghi nghi ệ ệ m m đ đ ẻ ẻ đ đ á á nh nh gi gi á á ch ch ấ ấ t t lư lư ợ ợ ng ng c c ủ ủ a a ch ch ế ế ph ph ẩ ẩ m m c c ầ ầ n n th th ử ử . .   2.2. 2.2. Đ Đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t th th í í nghi nghi ệ ệ m m   Yêu Yêu c c ầ ầ u u : : Đ Đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t th th í í nghi nghi ệ ệ m m ph ph ả ả i i đ đ ồ ồ ng ng đ đ ề ề u u , , thu thu ầ ầ n n khi khi ế ế t t v v ề ề nòi nòi gi gi ố ố ng ng , , kho kho ẻ ẻ m m ạ ạ nh nh không không nhi nhi ễ ễ m m b b ệ ệ nh nh , , không không c c ó ó thai thai v v à à đư đư ợ ợ c c nuôi nuôi dư dư ỡ ỡ ng ng đ đ ầ ầ y y đ đ ủ ủ . . Ch Ch ấ ấ t t lư lư ợ ợ ng ng c c ủ ủ a a đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t quy quy ế ế t t đ đ ị ị nh nh s s ự ự ch ch í í nh nh x x á á c c c c ủ ủ a a ph ph é é p p th th ử ử . .   2.3. 2.3. Th Th ử ử Invivo Invivo v v à à Invitro Invitro . .   Th Th ử ử nghi nghi ệ ệ m m đư đư ợ ợ c c ti ti ế ế n n h h à à nh nh trên trên cơ cơ th th ể ể đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t s s ố ố ng ng g g ọ ọ i i l l à à Invivo Invivo . .   Ph Ph é é p p th th ử ử c c ó ó th th ể ể đư đư ợ ợ c c ti ti ế ế n n h h à à nh nh trên trên c c á á c c cơ cơ quan quan cô cô l l ậ ậ p p c c ủ ủ a a đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t : : tim tim , , t t ử ử cung cung , , ru ru ộ ộ t t , , m m á á u u … … g g ọ ọ i i l l à à th th ử ử Invitro Invitro . .   2.4. 2.4. Li Li ề ề u u (Dose) (Dose)   Li Li ề ề u u l l à à lư lư ợ ợ ng ng ch ch ế ế ph ph ẩ ẩ m m th th ử ử đưa đưa v v à à o o cơ cơ th th ể ể đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t m m ộ ộ t t l l ầ ầ n n cho cho t t ừ ừ ng ng m m ụ ụ c c đ đ í í ch ch th th í í nghi nghi ệ ệ m m . . V V í í d d ụ ụ : : Li Li ề ề u u LD LD 0 0 , LD , LD 50 50 , LD , LD 100 100 , MLD, , MLD, li li ề ề u u th th ử ử ch ch ấ ấ t t h h ạ ạ á á p p , , li li ề ề u u th th ử ử ch ch ấ ấ t t gây gây s s ố ố t t . .   2.5. 2.5. M M ộ ộ t t s s ố ố th th ử ử nghi nghi ệ ệ m m trên trên đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t á á p p d d ụ ụ ng ng trong trong ki ki ể ể m m nghi nghi ệ ệ m m thu thu ố ố c c   2.5.1. 2.5.1. Th Th ử ử đ đ ộ ộ c c t t í í nh nh b b ấ ấ t t thư thư ờ ờ ng ng   • • Nguyên Nguyên t t ắ ắ c c : :   Đ Đ ộ ộ c c t t í í nh nh b b ấ ấ t t thư thư ờ ờ ng ng c c ủ ủ a a m m ẫ ẫ u u th th ử ử đư đư ợ ợ c c đ đ á á nh nh gi gi á á b b ằ ằ ng ng s s ố ố chu chu ộ ộ t t nh nh ắ ắ t t s s ố ố ng ng v v à à ch ch ế ế t t trong trong th th ờ ờ i i gian gian 48 48 gi gi ờ ờ sau sau khi khi chu chu ộ ộ t t nh nh ậ ậ n n đư đư ợ ợ c c m m ộ ộ t t lư lư ợ ợ ng ng thu thu ố ố c c th th ử ử th th í í ch ch h h ợ ợ p p b b ằ ằ ng ng đư đư ờ ờ ng ng tiêm tiêm ho ho ặ ặ c c đư đư ờ ờ ng ng u u ố ố ng ng . .   Th Th í í nghi nghi ệ ệ m m n n à à y y thư thư ờ ờ ng ng đư đư ợ ợ c c á á p p d d ụ ụ ng ng cho cho c c á á c c thu thu ố ố c c đông đông dư dư ợ ợ c c c c ó ó dư dư ợ ợ c c li li ệ ệ u u đ đ ộ ộ c c như như ô ô đ đ ầ ầ u u , , ph ph ụ ụ t t ử ử hay hay c c á á c c ch ch ế ế ph ph ẩ ẩ m m đông đông dư dư ợ ợ c c m m ớ ớ i i . .   • • Đ Đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t th th í í nghi nghi ệ ệ m m : :   D D ù ù ng ng chu chu ộ ộ t t nh nh ắ ắ t t tr tr ắ ắ ng ng kho kho ẻ ẻ m m ạ ạ nh nh , , n n ế ế u u chu chu ộ ộ t t c c á á i i không không đư đư ợ ợ c c c c ó ó thai thai , , cân cân n n ặ ặ ng ng t t ừ ừ 18g 18g đ đ ế ế n n 22g. 22g. • • Nguyên Nguyên t t ắ ắ c c ti ti ế ế n n h h à à nh nh : :   Ch Ch ấ ấ t t th th ử ử đư đư ợ ợ c c ho ho à à tan tan trong trong NaCl NaCl 0,9% 0,9% ho ho ặ ặ c c nư nư ớ ớ c c c c ấ ấ t t pha pha tiêm tiêm đ đ ể ể t t ạ ạ o o dung dung d d ị ị ch ch c c ó ó n n ồ ồ ng ng đ đ ộ ộ quy quy đ đ ị ị nh nh cho cho t t ừ ừ ng ng chuyên chuyên lu lu ậ ậ n n . .   Th Th í í nghi nghi ệ ệ m m đư đư ợ ợ c c th th ử ử trên trên 5 5 chu chu ộ ộ t t , , cho cho m m ỗ ỗ i i chu chu ộ ộ t t 0,5 ml 0,5 ml dung dung d d ị ị ch ch ch ch ấ ấ t t th th ử ử b b ằ ằ ng ng m m ộ ộ t t trong trong c c á á c c đư đư ờ ờ ng ng d d ù ù ng ng sau sau : :   + + Tiêm Tiêm t t ĩ ĩ nh nh m m ạ ạ ch ch   + + Tiêm Tiêm m m à à ng ng b b ụ ụ ng ng   + + Tiêm Tiêm dư dư ớ ớ i i da da   + + U U ố ố ng ng   • • Đ Đ á á nh nh gi gi á á k k ế ế t t qu qu ả ả : :   Sau Sau 48 48 h h d d ù ù ng ng thu thu ố ố c c ở ở l l ầ ầ n n th th ứ ứ nh nh ấ ấ t t , , n n ế ế u u không không c c ó ó chu chu ộ ộ t t n n à à o o ch ch ế ế t t , , m m ẫ ẫ u u th th ử ử đ đ ạ ạ t t yêu yêu c c ầ ầ u u . . N N ế ế u u c c ó ó m m ộ ộ t t hay hay nhi nhi ề ề u u chu chu ộ ộ t t ch ch ế ế t t trong trong th th ờ ờ i i gian gian trên trên ph ph ả ả i i l l à à m m l l ạ ạ i i th th í í nghi nghi ệ ệ m m l l ầ ầ n n th th ứ ứ hai hai . .   Th Th í í nghi nghi ệ ệ m m l l ầ ầ n n th th ứ ứ hai hai đư đư ợ ợ c c ti ti ế ế n n h h à à nh nh v v ớ ớ i i 10 10 chu chu ộ ộ t t cân cân n n ặ ặ ng ng t t ừ ừ 20g. 20g. Sau Sau 48 48 h h n n ế ế u u không không c c ó ó chu chu ộ ộ t t n n à à o o ch ch ế ế t t th th ì ì m m ẫ ẫ u u th th ử ử đ đ ạ ạ t t yêu yêu c c ầ ầ u u . . N N ế ế u u c c ó ó m m ộ ộ t t hay hay nhi nhi ề ề u u chu chu ộ ộ t t ch ch ế ế t t , , m m ẫ ẫ u u th th ử ử không không đ đ ạ ạ t t yêu yêu c c ầ ầ u u . .   2.2.2. 2.2.2. Th Th ử ử ch ch ấ ấ t t gây gây s s ố ố t t   • • Nguyên Nguyên t t ắ ắ c c : :   L L à à m m ộ ộ t t phương phương ph ph á á p p sinh sinh h h ọ ọ c c đ đ ể ể ki ki ể ể m m tra tra ch ch ấ ấ t t lư lư ợ ợ ng ng m m ẫ ẫ u u th th ử ử , , d d ự ự a a trên trên s s ự ự tăng tăng thân thân nhi nhi ệ ệ t t c c ủ ủ a a th th ỏ ỏ sau sau khi khi đư đư ợ ợ c c tiêm tiêm thu thu ố ố c c th th ử ử c c ầ ầ n n th th ử ử v v à à o o t t ĩ ĩ nh nh m m ạ ạ ch ch tai. tai.   C C á á c c d d ị ị ch ch tiêm tiêm truy truy ề ề n n yêu yêu c c ầ ầ u u b b ắ ắ t t bu bu ộ ộ c c ph ph ả ả i i th th ử ử ch ch ấ ấ t t gây gây s s ố ố t t . . C C á á c c thu thu ố ố c c tiêm tiêm n n ế ế u u ghi ghi trên trên nhãn nhãn “ “ không không c c ó ó ch ch ấ ấ t t gây gây s s ố ố t t ” ” ho ho ặ ặ c c c c ó ó th th ể ể t t í í ch ch t t ừ ừ 15ml 15ml tr tr ở ở lên lên c c ũ ũ ng ng ph ph ả ả i i th th ử ử ch ch ấ ấ t t gây gây s s ố ố t t . .   • • Đ Đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t th th í í nghi nghi ệ ệ m m : :   Th Th ự ự c c hi hi ệ ệ n n trên trên th th ỏ ỏ trư trư ở ở ng ng th th à à nh nh , , kho kho ẻ ẻ m m ạ ạ nh nh , , đ đ ự ự c c ho ho ặ ặ c c c c á á i i ( ( không không c c ó ó thai thai ) ) n n ặ ặ ng ng t t ừ ừ 1,5kg 1,5kg tr tr ở ở lên lên . .   Th Th ỏ ỏ đư đư ợ ợ c c nuôi nuôi đ đ ầ ầ y y đ đ ủ ủ v v ớ ớ i i c c á á c c ch ch ấ ấ t t kh kh á á ng ng sinh sinh . . Nhi Nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ nh nh à à chăn chăn nuôi nuôi v v à à phòng phòng th th í í nghi nghi ệ ệ m m không không chênh chênh l l ệ ệ ch ch nhau nhau qu qu á á 3 3 0 0 C. C. Trong Trong 3 3 ng ng à à y y trư trư ớ ớ c c ng ng à à y y th th í í nghi nghi ệ ệ m m , , th th ỏ ỏ đư đư ợ ợ c c l l ấ ấ y y nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ 3 3 l l ầ ầ n/ng n/ng à à y y v v à à o o bu bu ổ ổ i i s s á á ng ng , , m m ỗ ỗ i i l l ầ ầ n n c c á á ch ch nhau nhau 1 1 h h . .   Ch Ch ỉ ỉ d d ù ù ng ng th th ỏ ỏ c c ó ó nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ t t ừ ừ 38 38 - - 39,8 39,8 0 0 C. C. Trong Trong th th ờ ờ i i gian gian l l ấ ấ y y nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ không không cho cho th th ỏ ỏ ăn ăn , , nhưng nhưng c c ó ó th th ể ể cho cho u u ố ố ng ng nư nư ớ ớ c c . . Nh Nh ữ ữ ng ng con con th th ỏ ỏ c c ó ó s s ự ự chênh chênh l l ệ ệ ch ch nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ gi gi ữ ữ a a c c á á c c l l ầ ầ n n đo đo trong trong ng ng à à y y ≥ ≥ 0,6 0,6 0 0 C C không không đư đư ợ ợ c c d d ù ù ng ng đ đ ể ể th th í í nghi nghi ệ ệ m m . . [...]... chế phẩm Một chế phẩm chưa biết có tác dụng ức chế đối với vi sinh vật hay không thì cần phải kiểm tra : L y ít nhất 2 ống của mỗi loại môi trường phát hiện vi khuẩn hiếu khí, kỵ khí, vi nấm c y vào 1 trong 2 ống chế phẩm cần thử C y khoảng 100 tế bào vào 2 ống của môi trường tương ứng Nuôi c y 30 - 35 0C/ 7 ng y đối với vi khuẩn, và 25 - 280C/ 7 ng y đối với vi nấm Trong thời gian nuôi c y, nếu vi sinh... Staphylococcus aureus Baccillus subtilis Pseudomonas aeruginosa + Vi khuẩn kỵ khí: Clostridium sporogenes + Vi khuẩn nấm: Candida albicans Aspergillus niger Các ống thử vi khuẩn được nuôi c y 3 0- 35 0C/ 3 ng y, ống thử vi nấm ủ ở 2 5- 280C/ 5 ng y Sau thời gian nuôi c y vi sinh vật phải phát triển tốt trên các môi trường 3. 3.4 L y mẫu thử: Thông thường, khi một lô có ít hơn 100 đơn vị, l y 3 đơn vị để kiểm. .. hiện vi nấm) • Kiểm tra chất lượng môi trường: - Độ vô trùng: L y 1- 2 ống (hoặc bình) môi trường mới làm ủ ở 3 0- 35 0C ít nhất trong 4 ng y đối với môi trường phát hiện vi khuẩn, và 2 5- 280C ít nhất trong 7 ng y với môi trường phát hiện vi nấm Sau thời gian nuôi c y, các ống môi trường không được có vi sinh vật mọc - Khả năng dinh dưỡng: C y vào mỗi ống môi trường thích hợp khoảng 100 tế bào các vi sinh... trùng ch y qua để thu được ít nhất 15 ml và c y vào 100ml môi trường Môi trường phát hiện vi khuẩn được nuôi c y ở 3 0- 35 0C ít nhất trong 4 ng y, và ở 2 5- 280C ít nhất trong 7 ng y đối với vi nấm (Mỗi loại môi trường làm 2- 3 ống thử song song) • Nhận định kết quả: - Mẫu thử được coi là vô trùng nếu sau thời gian nuôi c y không có vi khuẩn, vi nấm phát triển - Nếu có 1 hoặc nhiều ống có vi sinh vật... kiểm nghiệm Nếu nhiều hơn thì cứ 50 đơn vị l y thêm 1 đơn vị nhưng không quá 10 Tuy nhiên, khi l y mẫu cũng cần dựa vào tiêu chuẩn nghành hoặc tiêu chuẩn cơ sở của từng sản phẩm để l y mẫu cho thích hợp 3. 3.5 Kiểm tra tác dụng ức chế vi sinh vật của chế phẩm thử Một số thuốc trong quá trình sản xuất dược thêm các chất bảo quản những chất n y có thể ảnh hưởng đến sự phát hiện vi sinh vật có trong chế. .. trường nuôi c y vi sinh vật Môi trường nuôi c y là những chất dinh dưỡng thích hợp nhằm đảm bảo cho vi sinh vật sinh trưởng và phát triển Môi trường cần có 3 điều kiện sau: Đ y đủ chất dinh dưỡng theo y u cầu thí nghiệm, có pH trong khoảng quy định và phải vô trùng Môi trường gồm 3 loại: - Môi trường tự nhiên - Môi trường tổng hợp - Môi trường bán tổng hợp Độ chính xác của kết quả thí nghiệm phụ thuộc... ch y qua màng lọc có kích thước lỗ lọc ≤ 0,22μm Phần ch y qua phễu được đựng trong các dụng cụ vô trùng • Khử trùng bằng các tia bức xạ: Tia tử ngoại (UV) được dùng nhiều nhất để khử trùng các buồng pha chế, tủ c y vi sinh vật 3. 3 Thử vô trùng 3. 3.1 Mục đích: Phát hiện sự có mặt của vi khuẩn, vi khuẩn nấm trong các chế phẩm như dịch tiêm truyền, một số loại thuốc tiêm, thuốc tra mắt và các dụng cụ y. .. màng lọc kiểm nghiệm được các thuốc có tác dụng ức chế vi sinh vật, đặc biệt là thuốc kháng sinh, nhưng đòi hỏi thiết bị tốt và điều kiện vô trùng cao • Phương pháp nuôi c y trực tiếp: Phương pháp n y có kỹ thuật đơn giản, nhưng khả năng phát hiện vi sinh vật giảm khi số lượng vi sinh vật ít và phân phối trong một thể tích chất thử lớn và không thực hiện được với các chế phẩm có tác dụng ức chế và các... định vi khuẩn trong quá trình kiểm nghiệm thuốc Log N 3 2 4 1 Thời gian Hình 1: Đường cong sinh trưởng của vi khuẩn 3. 1.2 Vi nấm (Microfungi) • Đặc điểm: Vi nấm có cấu tạo tế bào nhân thật (Eucaryote), tế bào rất nhỏ Nấm không có chất diệp lục, sống hoại sinh hoặc ký sinh, sinh sản vô tính hoặc hữu tính Vi nấm gồm: Nấm men (Yeast) và Nấm mốc (Mold) 3. 1 .3 Sự ảnh hưởng của các y u tố ngoại cảnh đối với... thí nghiệm: Lượng mẫu thử cần c y vào các môi trường tuỳ thuộc vào từng loại mẫu (bảng 2) Chất lỏng là dầu hay dung dịch dầu phải thêm vào môi trường nuôi c y 1% tween 80 hoặc các chất nhũ hoá khác với nồng độ thích hợp Mẫu thử là dạng mỡ hay kem được hoà loãng vào dung dịch pepton 0,1% vô trùng theo tỷ lệ 1/10 trước khi c y vào môi trường (dung dịch pepton cần tween 80 theo tỷ lệ 1ml/1lit Lượng chế . Nhi Nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ nh nh à à chăn chăn nuôi nuôi v v à à phòng phòng th th í í nghi nghi ệ ệ m m không không chênh chênh l l ệ ệ ch ch nhau nhau qu qu á á 3 3 0 0 C. C. Trong Trong 3 3 ng ng à à y y trư trư ớ ớ c c ng ng à à y y th th í í nghi nghi ệ ệ m m , , th th ỏ ỏ đư đư ợ ợ c c l l ấ ấ y y nhi nhi ệ ệ t t đ đ ộ ộ 3 3 l l ầ ầ n/ng n/ng à à y y v v à à o o bu bu ổ ổ i i s s á á ng ng ,. hay hay y y ế ế u u t t ố ố g y g y s s ố ố t t c c ủ ủ a a m m ộ ộ t t s s ố ố lo lo ạ ạ i i thu thu ố ố c c … … Nh Nh ữ ữ ng ng tiêu tiêu chu chu ẩ ẩ n n n n à à y y . : N N ấ ấ m m men men (Yeast) (Yeast) v v à à N N ấ ấ m m m m ố ố c c (Mold) (Mold)   3. 1 .3. 3. 1 .3. S S ự ự ả ả nh nh hư hư ở ở ng ng c c ủ ủ a a c c á á c c y y ế ế u u t t ố ố ngo ngo ạ ạ i i c c ả ả nh nh đ đ ố ố i i v v ớ ớ i i qu qu á á tr tr ì ì nh nh ph ph á á t t tri tri ể ể n n c c ủ ủ a a vi