  K 14 – LỚP 07 - 5 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI BỆNH UNG THƯ SVTH: VŨ VĂN TRƯỜNG Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 MỤC LỤC Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội   Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 MỞ ĐẦU   !"#$%&'!( )*+,,"-%  ./"01"23 +%4 *$, $"+5'67"1"89:"; ,7 !'<=#$ 5*./2">!#3"23=#3"2"!?"7 @!+A  B+ !C"8!.;" 5#$ 5*"?"D 1"23#*E ./"#$%4 *0$23 +F 0!>!5&*"7'!%&0$"5%G%E,=H IJ% #$  5  *  B+  IH  &"  C"  "  ?"8  K28L!+2#"J  M+0">  N  'C  ?"  A + J2J'N0$K28" +J#O"%%J'%+N'C?"A "##+!0+'! "6 ) B+%PH@QRS & 23IH&"C""?"HT..G U,%?2VP$ B+"W,73E,8 KJ!>V*/! B+ / $@!+A =7@XY="7.Z #$ 5 * T[#F0! +!'67"1"8!+A 0\ +-P%'+ / "W'R >)"-% / 'C.@3"/ :=0$ \ IJ%#$ 5* +,@T (+8 KJ!3@6 B+K] ) ^"6._3 =1"5%`a`=23 / 'C.%4 '67"1"2b5c."W#G !23"+,0$23 / 'C.F0!>!2b"Wc.9" !23H 3@6'6 71"0$!5%``d8KJ!1 :$,=23C"*RF0!>!2b#6 1"@!;eYa='"C"0$!5%`a`8".&""6 ) _3 7fL g !*"7=@!;Y=h'"'C.%4 %1"2b  ./"0$!5%`a`0$2bi.' B,7?" / 1 j!=e" T %) 23c.0$[#%4 * +!c7"1"8^k";" !0" 23 +F0! >!2b5#6'!e#+"= / $@!+A  !'<=>!"W@" 23+,]"=T"_J2"!?=@j%J!T#$2V+,]"@:i!$ G >\1"2V@4 " B+C""7=%9"'C*R9"l%mW8n& / Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội a a Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 .EF.TI?V>!'!%9"'C5 +!@"7 !, e"7.Io 01"#.TI?"+50$#$"W@"i#" !2VIc" B+* E8 p#$%&0c?"6%'A B+ !C"60" "W'R 'c_+'A'! e'Pqr 3s%A"_3 "+8 3E +! c#"W'R=@9 [!$ [0W@ti B+%u" .e./.="7*R=%$ r.;" T@""%=@"7) = U!/ : I/ =IE,>V./ n"W'R !%u"*E%& / .#kc8/ .e./."W'R"+,S fqe./."W'R?" uSq\i0$"+I?= T@;5"W'R '"-@"* rs"+"!?21%=]e [@ os?" u !m ?"0v8 f/ .e./."W'R!$ES"W'RT+ c="W'R&""7= "W'R%"l>R w f!$" / .e./."W'R'6"+, T'c"W$"6 )H)>ZJx,%J'!"W'R0:>ZS,-YJ%HT+ Jx,%J- ,-T+3  ,6>Z$ cE, 77*$!= !m 2F>Z@/- T4%&Jx,%J ,-T+3  ,6>Z $ cE,& 7*$!8^J%+"#$%&'!"WJx,%JH0$+ )>Z"W'!,A 8 ^J%+" *"-" +!s%&23#!?"@3"= Q?,7"W#"=?"'$0$0o8!$"'+=T r *"-" +!'!?"'$8M!T o9""7$V "W$" yThiết kế vector biểu hiện gen mã hóa legumainz8<%%Z : 2;Ic #J%+"01"##1-.Z 0Z !,A 8 Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội h h Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Giới thiệu chung về Enzyme 1.1.1 Định nghĩa K'! e-23{ / 7*$!|#9#9I;,'+_/'P'+!]" c8V '+!]" c}P2V23@9n?"8~/'P'+!]" B+%& c#$ i.. / _,#i B+'c"W / .;)T+A @/ +8/ .; )T+A .) ?.$, T#"6_+ m b01"+0$"W [#\+8 Jx,%J#$ / . c.'!J"Io /  ! / .;)T+A T8o T @;5Io / m " / .;)T+A cR0$;%*;! ! / .;)I;,'+J!%& "W1cR01"3 &R.$'! e -238•Y€ o T'!G7 / #!?"7*$! B+ e-238:>!( / EIo /  Tn3 2"A 6Jx,%J r A"#$ /  cIo / 2"A {*"! ++#,2+!'2|<%-.E*"01" /  cIo / T+A 8•€ 1.1.2. Lịch sử nghiên cứu Enzyme M!•x,%JA   !" &23 B+T+2"A 6.G#1 / "6 )T+2"}'1 7+,W#"6_+"W7Jx,%J8 V.c'"- B+Jx,%J T- "+$h"+"!?•€ f "+"!?YS'1 7@X)‚ f "+"!?S}7@X‚7F+G B+7@X‚‚ f "+"!?aS}"(+7@X‚‚7a`5%G B+7@X‚‚ f "+"!?hS}(5%a` B+7@X‚‚7+, 1.1.2.1. Giai đoạn 1 K'1 7@X‚C"+H*"72F>Z / _/'PJx,%J'! C"232! [ T: c@""%V 70$9_+!?& B+0" Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội ƒ ƒ Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 2"0i8T#$ / _/'P#6%J'=%3">+=#$%e0$1 c%wC"@„$,C"+ +"-0W*; cJx,%J0$ / _/'P #6%Jw•€ 1.1.2.2. Giai đoạn 2 "+"!?$, / $*/ A H"7$P%"-*; c B+ / _/'P#6%J8KC"@„$,H@/"_/"#6%J#$" .]*"7'!2V230$Jx,%J#$,73E,62V ,-T+ / c'!_/'P#6%J8 $!(5%Y…`` B+7@X‚=†++."2++J#%!{$ ^+=Yƒ‡‡NY…hh|#$C"G"6P%"-2E*; c B+_/'P#6%J8 +J#%!Hic,*; c B+2V"6T+#$2V ,-T+T+A B+) 50$";":  e 7 B+T01"2V2!2/T01"_/'P#6%J '8M+}ˆferment‰ +J#%!>v- [/ EE,'+2V ,-*"7 /  c'!_/'"#6%J'8 $!F+ 3"7@X)‚=$V"6A C"q/.#$LŠ+%' gH"6 )*; c B+2V"6T+8H"6 )'60i: "%#$ "%_?J8 G7@X‚‚= / $"6 )H/   /  cE,'+_/ 'P #6  %J8  5%  YdYh  "' !‹‹=  0"  2Œ  +"  qJJ' *'  H  ./  " +%,#+2J'!%G%?"%? 8 5%Ydaa=+"$@!+A C"q/.#$q+,J0$qJ22!xH ) %" c T!?&.E";""*&$C T-/  s>? *&8K"7.TC"+HP%'+0$/  "W•x,%J@/ •x,%J .E";".'!J" B+>" "6T+'!>?>$,qJ.2"8 +T=#k,7Io / H'+C"85%Ydaƒ=$@!+A J'xJ#"2 {$T+A KZ,"-| T_+"-% !'<53 &.;)#$" Io / 8E,#$%&_+"-%o8!"7  !$@!+A $,H Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội … … Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 !" /  cIo / $,!?& #$>!y#V 23z@9J!"W@"- B+ !C"8E,#$_+"-%>,E%=2"6PH#$%'P'2V./'"- B+@!+A c#$;s2E24 72V.c'"- B+$•x,%J A 8•€ 1.1.2.3. Giai đoạn 3 "+"!?}"(+7@X‚‚7a`5%G B+7@X‚‚8"+"!? $,%&23#'c#1 / •x,%Js>?r++H /  "78 K'!C"@„$,= T+"'C./"c'++ST#$'C./" q+2J'N$*/ A 0t?"C"q/.0$'C./"^"J*"N$*/ A ]""7C") 8 *Trường phái Pasteur: 5%Ydƒ…q+2J'HW i.7*; c B+_/'P#6%J8 ! '<@9-/  / •x,%J@•"7*$!8K/ >Z0$: c B+•x,%J 4#"W01"2V23 B+7*$!0$_/'P#6%J'#$@7_;!?& 23 B+7*$!c%%J )@9.;"#$@7_; B+/ >Z•x,%J8 H"7$:"%0$ic,7%&>>R ( e=0:>Z>>R  # !2J-'!*PH@F'vP@9I;,'+_/'P#6%J'8 :C2,tc,=q+2J'H "+ / •x,%J$+"#!?"Sy•x,%J T ] ) z0$y•x,%J@9 T] ) z8 KJ!9= / y•x,%J T] ) z#$(•x,%J@9-/ @•" 7*$!=7/  o2b%c/ >Z8/ y•x,%J@9 T] ) z#$ / •x,%J T'!>R "6T+{0:>ZqJ.2"s'!>?>$,=+%,#+2Js'! ,71 *A='!%G%T w|8~+"-%2+"#G%$, B+q+2J'H3 'R$•x,%JA '!%&C""+>$"8 5%Yd‡dJHWR>v>+}y‹J'%Jz-A" / y•x,%J T] ) z8ry•x,%Jz-A" / y•x,%J@9 T] ) z8M+} •x,%J Ic./}E,8 Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội ‡ ‡ Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 * Trường phái Liebig 3#?"_+"-%'6 B+q+2J'=^"J*"{'1 T T ;J'xJ#"| !'<@9 T!?& B+ / 7*$!0"2"0i g T_/'P#6 %J8"WT Tt+#$9 !"•x,%J%& cT+A E,#6"_; eV cIo / =/ >Z ;s'!0$!$"7*$!=@9.Z& 0$! !?&23 B+0"2"0i8  5%Yd‡Y^"J*"c*?"0PV "%@9 )%" _+"-%'6 B+%P8/ :"% "7$*< / #c,>R  "7}7*$!c%%J"W/=W@9 T/ >ZE,%J'8g 0$!5%Yd‡Y++IJ"#$%&*/ 2ŒC"+H>v /? +"W / 7*$!c%%J0$ >R  "7@9 )+7*$! T@;5*"7 ]"C$'8(_+2/$,H@9 +" ok1"8 :0P0i,=_+"-%2"6P B+q+2J'H? 7@/"W2V./'"- B+$•x,%JA 875%YdŽ‡=8 J'N%&$@!+A C" ) Hi >R  "7c%%J*< / .EB,7*$!!$" e8K'!:"%$,= / 7*$!c%%J "W/!$!$ v 01"*&B,"=2+T Š.*</.2c +!8MR  "7 @9 )+7*$!0\ T@;5E,'+_/'P#6%J{ ,-T+} C# !2J$'|8"WT )•_/'P#6%J@9.;"#$ @7_; B+!?&23 B+7*$!c%%J%$#$@7_; B+ / •x,%J 03 T'! / 7*$!8M!T=_+"-%2+"#G%0W•x,%J!$!$*RIT+ *•8g}T@9 T2V.E*"0W&">"(+i(yfermentz0$ yenzymez8T-T" 9'P B+ J'H/>c%&*1 !m_+ 'A'!#R 2F./'"- B+•x,%JA 8  K}T T'c"W•x,%J'! e-23 P%'+8P0i,0" .E#!?"0$A"6 / •x,%J%& / 3c#$'c G"785%Ydda= M, #!$*/ A C"q/.HW'+,64 .E#!?"•x,%JJ! e Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội d d Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 c{2*2'+J|>! o*"7]"0$6%9"i v#$y+2Jz0$!8K,0i,= '!V 7 rn?"'c"W!?"#0Wi(=0:>Z(6A" •x,%J.J.2"=',.2"= ++#+2J'1 E,0\ >v8 "+"!?_+'Ac'!C"@P$,#$ /  9'P B+$*/ A 0t?"C") •8•"2J'8HmW%T !(@/""%"?" 0W:m " B+•x,%J=0W2Ve/ @9"+"(+•x,%J0$ e c8";,7]""7 B+9#$"(+•x,%J0$ e c@7.01"+ yổ khóa với chìa khóaz8Ln"("6 ) B++ 0$q+##+>"0W / •x,%J!I,T+@F?!6 e2s !0" IE,>VA ,7!I,T+@F 2"A 8K'!C""+$,C"+ gH./"'+ :/ >Z iR  B+•x,%J{+"#J.22@"=YdŽh|= /  !Jx,%J g ./ "{+'>J0$•!=YŽ`…|8A#$(C"@/%./'+'<>R  "7 7*$!c%%J )++"#!?" c G"7 !_/'P#6%J#$yx,%+2Jz 0$y !Jx,%Jz8•€ 1.1.2.4. Giai đoạn 4  ; cT+A  B+•x,%J [ I/ Ro4}2+@"@7 " •x,%J85%YŽ…$@!+A C"Œ'‘]"%J'{aŽ]"| H$ 9'!0"  )%".'!J" @7"}?ie#$ c"3•x,%JIo /  !.;)B,.E'J=0$E, g :#$ •x,%JG"6 @7"85%YŽa`sŒ!''!.H/  .J.2"s >?"-=0$0$!5%YŽaY!''!.0$"x gH/  ',.2"s >?"-8  /  9'P B+%J'0$!''!.H%s'+%& e%1"'! #R 2F./'"- B+•x,%JA "?"8(@7_;? H@Q R%& / >)@!/*; c B+•x,%J#$.'!J"8q;"T"'<*; c T+A .G#1•x,%J#$.'!J"0$Rt+ T: c@""-0W •x,%J.;"IJ%#?"}2+./" B+K8L8J 5%YŽdY8J H./ Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội Ž Ž Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 "%&L T!?:Io / •x,%J0$A"#$'"*!x,%J8L"*!x,%J Io /  !_/'P ,-T+"W cL9"{.'JN%L|$ %NL8M!T•x,%J@9c"7.;"#$.'!J"=E,#$./%" Tk t+'c#18K/ "; B+./%"$, ";"!*J#5%YŽdŽ8  K}"(+7@X‚‚=c#$C""+GE,Jx,%JA ./'"-'c %?8C)>Z / .e./.%1"="?"S">"=24 @k=_+ .]=n0R.TI?wH !.Š."6 ) c'o  g e 7/ >Z B+"W•x,%J0$2V"Wr+!?9 B+•x,%J'!7*$!8  5%  YŽ…Ž  C"  +  H  ]  .    •x,%J  G "6  #$  '"*! #J+2J {MJ@J’+#J'0$"'2 %+=J0$J''"‹"J#+>|8E,#$•x,%Jn%Yh +%"!+ ">=*W01""= T-T#6d`“01"C""+48  K'!%c, Z 5% 3" B+7@X‚‚0$c7@X‚‚=C"+H ok"6 )0" )>Z•x,%J8C"+Hi>Z / ,6#" "$•x,%J-/ •x,%J=> 7.U%•x,%J$,- 7 *"7 / ,6#"@/ +!m 2F>Z0$!%Z : @/ +8"W1 H P$$ 9•x,%J=$5%H2;Ic$'5%c 7 .U%•x,%J-.Z 0Z ! / $2;Ic@/ +0$ !,A 8•€ 1.1.3. Phân loại Enzyme Z :  B+.E#!?"Jx,%J#$-c%?%& /  :I/ 0$] _/=%3"_+0$("W"3+ B+%&#!?"Jx,%J8 1.1.3.1. Các lớp enzyme K"-*+0WJx,%J{KJJx,%J!%%"22"!8•| ] ) *s"&" T+2"_3 7{KJ"J'+"!#p"!!‹"! J%"2',=p|H+'+ /  .E#!?"3c>V+'6 / #!?".;)0$ e 7.;)8KJ! /  .E#!?"$,PJx,%J  "+'+#$%2/#1.#1/23}Y7…8/ 23 )V$,#$ 3R !%u"#1.8 Sáu lớp enzyme theo phân loại quốc tế gồm có: Khoa Công nghệ Sinh học Viện Đại Học Mở Hà Nội Y` Y` [...]... - Phân tử thường chứa một vài trung tâm hoạt động, có khi có đến 3,4 trung tâm hoạt động - Khả năng tương tác của một trung tâm hoạt động với cơ chất sẽ phụ thuộc vào trạng thái chức năng của các trung tâm hoạt động khác Trong một số trường hợp, mỗi tiểu phần có một trung tâm hoạt động nhưng sự tương tác giữa các tiểu phần sẽ ảnh hưởng đến cấu hình không gian của trung tâm hoạt động trên mỗi tiểu phần,... dưới đơn vị trong phân tử enzyme thường có tính chất đối xứng cao 1.1.4.4 Trung tâm hoạt động của enzyme Trung tâm hoạt động của enzyme là phần của phân tử enzyme trực tiếp kết hợp với cơ chất, tham gia trực tiếp trong việc tạo thành và chuyển hóa phức chất trung gian giữa enzyme và cơ chất để tạo thành sản phẩm phản ứng Trung tâm hoạt động bao gồm nhiều nhóm chức năng khác nhau của amino acid, phân... rộng từ 12000 dalton đến 1.000.000 dalton hoặc lớn hơn Do kích thước phân tử lớn, các enzyme không đi qua được màng bán thấm Enzyme tan trong nước, khi tan tạo thành dung dịch keo; chúng cũng tan trong dung dịch muối loãng, glycerin và các dung môi hữu cơ có cực khác Enzyme không bền và dễ dàng bị biến tính dưới tác dụng của nhiệt độ cao Enzyme bị biến tính thì mất khả năng xúc tác Mức độ giảm hoạt tính... và vô cơ Ở các enzyme một thành phần, trung tâm hoạt động thường bao gồm một tổ hợp các nhóm chức năng của amino acid không tham gia tạo thành trục chính của sợi polypeptide Trung tâm hoạt động của các enzyme hai thành phần thường bao gồm nhóm ngoại (vitamin, ion kim loại ) và các nhóm chức năng của các amino acid ở phần apoenzyme Theo quan niệm của Fisher thì trung tâm hoạt động của enzyme đã được hình... Koshland đã đưa ra một giả thuyết khác hấp dẫn và tế nhị hơn Theo thuyết này thì đặc điểm của vùng trung tâm hoạt động là rất mềm dẻo và linh hoạt, các nhóm chức năng của trung tâm hoạt động của enzyme tự do chưa ở tư thế sẵn sàng hoạt động, khi tiếp xúc với cơ chất, các nhóm chức năng ở trong phần trung tâm hoạt động của phân tử enzyme thay đổi vị trí trong không gian, tạo thành hình thể khớp với hình... lượng hoạt hóa của phản ứng hóa học, có nghĩa là nó chỉ tham gia vào các phản ứng trung gian mà không đóng vai trò là chất tham gia phản ứng Sau phản ứng, chất xúc tác lại phục hồi về trạng thái ban đầu để tiếp tục xúc tác Hầu như tất cả các biến đổi hóa sinh trong tế bào và cơ thể sống đều được xúc tác bởi enzyme ở pH trung tính, nhiệt độ và áp suất bình thường trong khi đa số các chất xúc tác hóa học... khối u và cho rằng khối u thể hiện ở mức cao nên legumain được dự kiến sẽ để hiển thị một hành vi hung hăng hơn và có tiên lượng xấu Tuy nhiên, không có dữ liệu sẵn có xác định các mối quan hệ của sự biểu hiện legumain và lâm sang hoặc sinh học trong ung thư vú Nhưng tỷ lệ sự biểu hiện legumain trong ung thư vú (n = 432) và các mô vú không có khối u (n = 128) đã được nghiên cứu bởi miễn dịch mô hóa... của vi sinh vật để sản xuất vaccine, kháng sinh,… Protease tự nhiên hay tổng hợp chưa được sử dụng trực tiếp trong việc điều trị ung thư ở người Mặc dù vậy, các chất ức chế protease đang được nghiên cứu sâu hơn về cơ chế, kiểu hoạt động và khả năng ứng dụng thực tế chống ung thư trong tương lai kể cả các chất ức chế protease được tổng hợp nhân tạo 1.3 Giới thiệu về Legumain [22, 23, 24] 1.3.1 Khái... lý cathepsin D lợn và β-N-acetylhexosaminidase Cho đến bây giờ điều này vẫn chưa chỉ ra rằng peptidase có thể chịu trách nhiệm cho điều này, nhưng chúng ta có thể đề xướng rằng đó là legumain Legumain có thể được tiết ra từ các tế bào ở pH trung hòa enzyme không ổn định có thể có khả năng giới hạn hoạt tính ngoài tế bào của nó, có lẽ ngoại trừ trong một môi trường acid hóa quanh tế bào Enzyme này hoạt... trong khoảng 5,5 1.3.3 Chức năng của Legumain Legumain đã được tìm thấy được đánh giá cao trong biểu hiện một số loại khối u, chẳng hạn như tuyến tiền liệt, đại tràng và ung thư vú Ngoài ra, nó còn được đánh giá cao trong biểu hiện ung thư đại tràng Biểu hiện của nó đã được quan sát thấy có sự quy định trong quá trình phát triển khối u trong cơ thể, cho thấy một phản ứng môi trường, và có vẻ là một .   K 14 – LỚP 07 - 5 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI BỆNH UNG THƯ SVTH: VŨ VĂN TRƯỜNG Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 MỤC LỤC Khoa Công nghệ Sinh học. học Viện Đại Học Mở Hà Nội h h Vũ Văn Trường K14 – Lớp 07 - 5 CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Giới thiệu chung về Enzyme 1.1.1 Định nghĩa K'! e-23{ / 7*$!|#9#9I;,'+_/'P'+!]". %;>1"e0R'!.EFJx,%JC T: c 3"I) +!8 1.1.4.4. Trung tâm hoạt động của enzyme K'E%!?& B+Jx,%J#$.G B+.EFJx,%J'V