ĐIỆN DI PROTEIN VÀ LAI WESTERN BLOT NHÓM 09 09-04 I.Điện di là gì? • Hiện tượng dịch chuyển các vật thể mang điện tích dưới tác động của điện trường. • Điện di hay điện di trên gel áp dụng trong sinh học là một kỹ thuật để phân tích các phân tử DNA, RNA va protein dưa trên các đặc điểm vật lý của chúng Nguyên lý chung • Dựa vào tính chất vật lý(khối lượng phân tử, cấu hình, kích thước,…) của các phân tử protein hay acid nucleic khi đặt chúng trong điện trường chúng sẽ di chuyển. • Hiện nay để phân tích protein va nucleic acid thì diện di gel agrose, polyacrylamide được sử dụng phổ biến nhất. Thiết bị và vật liệu điện di • Máy điện di • Bộ nguồn điện • Dung dịch đệm • Một bản gel • Các chất nhuộm CẤU TRÚC VÀ ĐẶC TÍNH PROTEIN  Cấu tạo từ khoảng 20 loại axit amin.  Cấu trúc bậc I, II, III, IV.  Chuỗi polypeptid có thể tích điện (+) hoặc (-).  Mỗi loại protein thi có kích thước và sự cuộn xoắn khác nhau. Quy trình chung điện di protein CHIẾT PROTEIN BIẾN TÍNH PROTEIN ĐIỆN DI CHôP ¶NH Vµ PH¢N TÝCH KÕT QU¶ 1.Điện di một chiều – SDS-PAGE • Điện di trên polyacrylamide gel với sự có mặt của SDS( sodium dodecyl sulfate) • Được dùng trong hóa sinh, di truyền, sinh hoc phân tử để phân tách protein theo tính linh động điện di của chúng. 1.1 CHIẾT PROTEIN • Protein được triết trong mẫu tươi bằng dung dich đệm ở 4oC( NaCl, H2O, Tris-HCl…) trong 24h • Ly tâm thu dịch chứa protein . ĐIỆN DI PROTEIN VÀ LAI WESTERN BLOT NHÓM 09 09-04 I.Điện di là gì? • Hiện tượng dịch chuyển các vật thể mang điện tích dưới tác động của điện trường. • Điện di hay điện di trên gel. chung điện di protein CHIẾT PROTEIN BIẾN TÍNH PROTEIN ĐIỆN DI CHôP ¶NH Vµ PH¢N TÝCH KÕT QU¶ 1.Điện di một chiều – SDS-PAGE • Điện di trên polyacrylamide gel với sự có mặt của SDS( sodium dodecyl. trường chúng sẽ di chuyển. • Hiện nay để phân tích protein va nucleic acid thì di n di gel agrose, polyacrylamide được sử dụng phổ biến nhất. Thiết bị và vật liệu điện di • Máy điện di • Bộ nguồn