nghiên cứu sử dụng các tác nhân vi sinh vật trong đấu tranh sinh học để phòng trừ bệnh nấm hại rễ (phytophthora spp.) ở cây trồng có múi

65 974 2
nghiên cứu sử dụng các tác nhân vi sinh vật trong đấu tranh sinh học để phòng trừ bệnh nấm hại rễ (phytophthora spp.) ở cây trồng có múi

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 1 Lớp 0601 MỞ ĐẦU Hàng năm trên thế giới các bệnh thực vật như bệnh đạo ôn, bệnh xì mủ, thối cổ rễ gây ra những tổn thất nặng nề cho sản xuất nông nghiệp. Khoảng hơn 8000 loài nấm khả năng gây bệnh cho cây trồng và một vài loài nấm thể gây hại trên nhiều loại cây trồng[5]. Trong đó các bệnh do nấm Phytophthora spp. gây ra được xem rất nguy hiểm nhiều loại cây như sầu riêng, cam, quýt, nhãn Mỹ, nấm Phytophthora spp. gây thiệt hại cho cây trồng gây thất thu hàng tỉ đô la mỗi năm. Chỉ bang Ohio của Mỹ, nấm Phytophthora spp. gây bệnh thối rễ trên cây đậu nành làm thiệt hại trên 50 triệu đô la mỗi năm. Việt Nam từ năm 1998 đến nay, bệnh này đã phát triển và gây hại một số tỉnh phía Nam. Bệnh do nấm Phytophthora spp. gây ra là bệnh rất nguy hiểm trên cây ăn quả, bởi chúng tấn công và gây hại cho cây từ giai đoạn cây con đến giai đoạn trưởng thành, thậm chí đến giai đoạn sau thu hoạch. Trong điều kiện khí hậu nhiệt đới gió mùa, trồng trọt quanh năm, sự lan truyền của các tác nhân gây bệnh trong nước tưới, hệ thống thoát nước kém, cây giống không sạch bệnh là những yếu tố tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của bệnh này. Trên thế giới, hàng loạt các biện pháp phòng trừ nấm bệnh đã được các nhà khoa học trong và ngoài nước nghiên cứu và được áp dụng[1, 8]. Việc sử dụng thuốc hoá học trừ nấm bệnh thường rất độc và rất tốn kém, khả năng tồn dư trong đất, nước, nông sản sẽ gây ảnh hưởng tới sức khoẻ con người, gây ô nhiễm môi trường và mất cân bằng sinh thái. Mặt khác việc sử dụng thuốc hoá học nhiều làm cho nhiều loài vi khuẩn và nấm bệnh hại khả năng kháng lại thuốc nên hiệu quả diệt trừ không cao. Chính vậy, Hội nghị tư vấn Khu vực Thái Bình Dương của FAO năm 1992 đã khẳng định: đấu tranh sinh học là nền tảng của chương trình IPM (quản lí dịch hại tổng hợp) với 3 chiến lược bản chính [23]: Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 2 Lớp 0601 1. Sử dụng các tác nhân sinh học để hạn chế sự phát triển của các quần thể kí sinh. Hướng dẫn áp dụng với các loại vi sinh vật đối kháng, các chất sinh học diệt khuẩn vào các vùng sinh thái khác nhau của cây trồng. 2. Làm tăng các vi sinh vật ích, đấu tranh chống các vi sinh vậtsinh cho cây trong đất. 3. Thúc đẩy khả năng sinh trưởng cây trồng, làm tăng sức chống chịu của cây. Hiện nay biện pháp phòng chống nấm bệnh cây trồng bằng chế phẩm sinh học, đang được sử dụng rộng rãi bởi tính bền vững, an toàn với môi trường sinh thái, an toàn với sức khỏe con người và tính hiệu quả của chúng. Trên thế giới đã nhiều thí nghiệm và thực nghiệm về việc sử dụng các vi sinh vật đối kháng như: vi khuẩn, xạ khuẩn, nấmtrong phòng chống bệnh hại cây trồng, đặc biệt là nhóm bệnh hại nguồn gốc trong đất (nấm, vi khuẩn…). Tại Việt Nam, việc tìm kiếm các vi sinh vật khả năng đối kháng, tiêu diệt nấm bệnh đã và đang được nhiều nhà khoa học tiến hành. Các chế phẩm từ vi sinh khả năng kháng nấm bước đầu đã được thử nghiệm nhiều quy mô khác nhau [3, 4, 5, 8]. Xuất phát từ những yêu cầu, thực trạng đó, cùng với xu hướng nghiên cứu trên thế giới hiện nay, chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài:"Nghiên cứu sử dụng các tác nhân vi sinh vật trong đấu tranh sinh học để phòng trừ bệnh nấm hại rễ (Phytopthora spp.) cây trồng múi”. Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 3 Lớp 0601 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. ĐẤU TRANH SINH HỌC (Biological control) 1.1.1. Khái niệm Đấu tranh sinh học là việc giảm các quần thể phá hoại bằng các đối thủ tự nhiên và thông thường sự tham gia tích cực của con người. Các đối thủ tự nhiên của các loài phá hoại, còn được gọi là các tác nhân đấu tranh sinh học bao gồm những loài ăn mồi, các loài kí sinhcác mầm bệnh. Các tác nhân đấu tranh sinh học đối với các bệnh thực vật thường được đề cập là các loài đối kháng (antagonist). Các tác nhân đấu tranh sinh học của cỏ dại bao gồm các loài ăn cỏcác mầm bệnh thực vật. Các loài ăn mồi như bọ cánh cứng (lady beetle) và lacewing, là các loài sống tự do mà sử dụng số lớn con mồi trong đời sống của nó. Các loài kí sinh (Parasitoids) là những loài mà giai đoạn chưa trưởng thành của nó phát triển trên hoặc trong một thể chủ duy nhất và cuối cùng tiêu diệt thể chủ. Hầu hết một dãy vật chủ rất hẹp. Nhiều loài côn trùng và một số loài ruồi là những sinh vật kí sinh. Các vi sinh vật gây bệnh được coi như là mầm bệnh bao gồm vi khuẩn, nấm và virut, chúng tiêu diệt hoặc làm suy yếu thể chủ và khá đặc hiệu với một số nhóm côn trùng nhất định [25]. 1.1.2. Đấu tranh sinh học các bệnh thực vật Đấu tranh sinh học (kiểm soát sinh học) đối với các loài gây hại và mầm bệnh thực vật tiếp tục thu hút nhiều nghiên cứu và phát triển nhiều lĩnh vực. Theo nghĩa hẹp, đấu tranh sinh học là quá trình ức chế các sinh vật gây hại bằng các sinh vật khác [11,36]. Tuy nhiên, mối quan hệ tương tác lẫn nhau của các môi trường thể tạo ra nhiều tương tác giữa các sinh vật và môi trường của chúng, nhiều trong số đó thể góp phần tạo nên quá trình đấu tranh sinh học hiệu quả. Hơn nữa, các sản phẩm tự nhiên và các chất hoá học đã được phát hiện như là kết quả của nghiên cứu về chế phân tử của Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 4 Lớp 0601 quá trình phát sinh bệnhđấu tranh sinh học đã dẫn đến sự phát triển của các chất diệt loài gây hại dựa trên nguyên lý sinh học [25,35]. Trải qua hàng trăm năm, các nghiên cứu liên tục chỉ ra rằng các vi sinh vật thể hoạt động như các tác nhân đối kháng với nhiều mầm bệnh khác nhau thực vật. Các tương tác giữa vi sinh vật thể thực vật chủ thể là rất phức tạp, những tương tác dẫn tới quá trình kiểm soát sinh học bao gồm: kháng sinh, cạnh tranh, cảm ứng sự kháng của vật chủ và tiêu diệt. Khi kiểm tra các chủng vi khuẩn và nấm được phân lập từ môi trường về hoạt tính đấu tranh sinh học thì ít nhất từ 1 đến 10% khả năng ức chế sự sinh trưởng của các mầm bệnh. Tuy nhiên, một vài dòng thể ức chế các bệnh thực vật dưới các điều kiện sinh trưởng khác nhau và một vài loài phổ tác dụng rộng chống lại nhiều loài mầm bệnh. Chính vậy, việc sàng lọc kỹ càng sẽ tạo ra nhiều vi sinh vật trong việc phát triển các chế phẩm thương mại. Một vài dòng vi sinh vật đã được thương mại hoá thành công và hiện tại được phân phối như là các chất diệt loài gây hại sinh học Mỹ, bao gồm các vi khuẩn thuộc về các chi Agrobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Streptomyces và nấm thuộc về các chi Ampelomyces, Candida, Coniothyrium, Trichoderma. Sàng lọc là một bước quan trọng trong việc phát triển các tác nhân đấu tranh sinh học. Thành công của các giai đoạn sau đó sẽ phụ thuộc vào phương pháp sàng lọc để xác định một loài thích hợp. Nhiều tác nhân đấu tranh sinh học hữu dụng đã được phát hiện bằng cách quan sát các vùng ức chế trên đĩa thạch. Đối với sự cạnh tranh, các phương pháp sàng lọc bao gồm việc tìm kiếm các vi sinh vật mà nhanh chóng tạo được khuẩn lạc trong đất vô trùng và khả năng loại bỏ các sinh vật khác lây nhiễm vào đó, tìm kiếm các vi sinh vật mà tạo khuẩn lạc bảo vệ đối với quá trình lây nhiễm. Việc sàng lọc bản đối với các vi sinh vật đấu tranh sinh học mới vẫn còn được sử dụng và dường như sẽ tiếp tục cần để làm đa dạng các ứng dụng của kiểm soát sinh học cũng như thay thế các sản phẩm đấu tranh sinh học đang được sử dụng thể sẽ dẫn tới sự kháng [36]. Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 5 Lớp 0601 1.2. TÁC NHÂN VI SINH VẬT TRONG ĐẤU TRANH SINH HỌC CHỐNG LẠI CÁC BỆNH THỰC VẬT (Biological control agents-BCAs). Các tác nhân đấu tranh sinh học thể là một phương pháp thay thế các chất hoá học trong việc quản lý các bệnh mùa màng do nấm. Nhiều tác nhân đấu tranh sinh học hiện nay đã sẵn trên thị trường. Cạnh tranh không gian và dinh dưỡng đối với các mầm bệnh cũng như sản sinh các hợp chất chống nấmcác chế đấu tranh sinh học quan trọng nhất. Điều này sẽ phụ thuộc vào khả năng tồn tại một lượng lớn các tác nhân đấu tranh sinh học vị trí đích. Ức chế cạnh tranh và gây độc đối với các vi sinh vật khác thường xảy ra trong tự nhiên là hai vấn đề đã được xác định là những ảnh hưởng bất lợi đến việc sử dụng các tác nhân đấu tranh sinh học 1.2.1 Vi khuẩn Nhiều tác nhân vi khuẩn đã được sử dụng rộng rãi để ức chế mầm bệnh thực vật. Chẳng hạn chế phẩm của B. subtilis đã được thương mại hoá với thương hiệu Quantum-4000, Kodiak và Epic, sử dụng để xử lý hạt quả đậu, rau, bông để kiểm soát bệnh do Rhizoctonia và Fusarium gây ra. Một tác nhân diệt nấm chống lại bệnh mốc xám dựa trên B. subtilis gần đây đã được chấp nhận cho thương mại hoá bởi EPA của Mỹ. Trung quốc, Bacillus sp đã được sử dụng để tăng năng suất của lúa gạo, lúa mì, ngô, củ cải đường, cải bắp và hạt cải dầu [36]. Nhiều sản phẩm khác từ B. subtilis cũng đang được phát triển bởi các tổ chức thương mại trên khắp thế giới [33]. Việc phối trộn sẽ cung cấp một môi trường bảo vệ cho các vi khuẩn đưa vào, do đó làm tăng khả năng sống sót của nó và cho quá trình hình thành khuẩn lạc thành công. Trong khi các sinh vật dựa trên Bacillus thể ổn định hơn về mặt di truyền thì một số loài vi khuẩn Gram âm như Pseudomonas cần phải những hệ thống bảo vệ đặc biệt. Vidhyazakara và Muthamilan đã phát triển một chế phẩm dựa trên bột đá tan, than bùn, chất khoáng bón cây, Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 6 Lớp 0601 cao nilit, mùn cưa và phân bón sân trại mà trong đó các chủng P. fluorescens thể sống sót tới 240 ngày dự trữ. Một chủng P. fluorescece được tạo ra trên methylcellulose: đá tan khả năng sống sót trong 10 tháng 4 o C và làm giảm tới 68,5% bệnh lúa gạo. Những chế phẩm vi sinh khác được sử dụng để kiểm soát bệnh tật bao gồm Agrobacterium radiobacter, hiện nay đã được thương mại hoá Úc, New Zealand và Mỹ dùng để kiểm soát các bệnh mụn cây (crown gall) dưới dạng lỏng, dưới dạng bột than, bùn ẩm [36]. Những chế phẩm này được hoà tan trong nước trước khi xử lý hạt và đào những rãnh nhỏ, phun hoặc nhúng. Streptomyces griseoviridis được sử dụng chống lại nhiều nấm gây bệnh sẵn nhiều nước trên thế giới dưới dạng bột thể làm ẩm, được sử dụng để kiểm soát các bệnh rễ gây ra bởi Pythium, Fusarium, Phytophthora và Phomopsis. Các chế phẩn dạng than bùn hoặc lỏng của Burkholderia cepacia cũng đang được sử dụng để kiểm soát các nấm gây bệnh như Phytophthora, Pythium và Fusarium. Ngày nay, các CKS trong bảo vệ thực vật sử dụng hiệu quả thường được dùng dưới dạng các chế phẩm như là: thuốc chống nấm blastixidin, kasugamyxin…; thuốc chống vi khuẩn streptomyxin, oxytetracylin…; thuốc trừ sâu avermectin – B, milbemctins…; thuốc diệt cỏ bilanafos và các chất điều hòa sinh trưởng của cây như là gibberellins. Nhật Bản, người ta đã những chế phẩm chống đạo ôn và khô vằn rất hiệu quả như: blastixidin S chiết từ S.griseochromogenes, kasugamixin từ S.kaysugaensis, validamixin từ S. hygroscopicus. Ấn Độ, sử dụng aureofulvin chống bệnh thối cổ rễ. Anh và một số nước Châu Âu cũng đã sử dụng griseofulvin trong nông nghiệp để chống các bệnh cây trồng [17]. Tại Việt Nam, hiện nay sử dụng nhiều loại thuốc như: validamycin chống bệnh khô vằn, polyoxin complex chống bệnh đen lá, streptomycin chống bệnh bạc lá hại lúa. Năm 1954 Trung Quốc đã phân lập được Streptomyces spp 5406 khả năng sinh ra chất kháng sinh phòng chống bệnh thối rễ cây và đã áp dụng trên 6 triệu ha trồng bông và đã thu hoạch được những kết quả rất khả quan. Ngoài Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 7 Lớp 0601 ra, Trung quốc còn ứng dụng chế phẩm YIB (yield increasing bacteria) trên 6,7 triệu ha 30 tỉnh khác nhau. Chế phẩm này không những phòng chống bệnh do vi khuẩn gây ra mà còn chứa các hormon thực vật như IAA, giberilin làm tăng năng suất cây trồng. Sau đó cũng tại Trung Quốc, jingangmycin, một chất kháng sinh được tách chiết từ một loài Streptomyces hygroscopicus, ứng dụng rất thành công trong phòng bệnh thối rễ [34].Vi khuẩn cũng khả năng ảnh hưởng đến chu trình sống của giun tròn trong đất do chúng bắm chặt vào vùng rễ. Nhiều vi khuẩn rễ được biết là tác dụng làm giảm quần thể giun tròn và các chi quan trọng bao gồm Agro-bacterium, Alcanigenes, Bacillus, Clostridium, Desulfovibrio, pseudomonas, Ser-ratia, and Streptomyces [39]. Các loài nấmsinh bắt buộc vào vi khuẩn như Pasteuria penetrans thường không được sản xuất mức thương mại vào thời điểm này, thể giảm quần thể giun tròn bằng khả năng kí sinh của chúng, trong khi các loài vi khuẩn trong rễ không kí sinh thể làm giảm quần thể giun tròn bằng cách tạo khuẩn lạc ưu tiên trên thực vật chủ hoặc tạo ra các chất trao đổi độc với giun tròn [37]. Các chế phẩm thương mại của B.cepacia đã được điều chế dưới dạng bột ẩm, hạt khuếch tán trong nước hoặc dưới dạng huyền phù đang được đánh giá để kiển soát các loại giun tròn. Trước khi một tác nhân đấu tranh sinh học vi khuẩn thể được thương mại hoá thì một đánh giá mức độ nguy hiểm cũng phải được hoàn thành. Đối với một tác nhân đấu tranh sinh học được đăng kí như là các chất diệt loài gây hại thì những quy định hiện hành đòi hỏi nhà sản xuất phải cung cấp các dữ liệu về sự phân tán của tác nhân đấu tranh sinh họccác tác động đến các vi khuẩn khác trong môi trường mà tác nhân này được sử dụng. 1.2.2 Nấm Các loài nấm chủ yếu sử dụng trong đấu tranh sinh học là Trichoderma spp, Gliocladium viens, Tilletiopsis pallescens, and Pseudozyma flocculose [19]. Nhiều nấm gây bệnh lá và rễ như Rhizoctonia, Pythium, Phytophthora, Botrytis khả năng được kiểm soát bởi những loài nấm này [19, 30, 36]. Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 8 Lớp 0601 nhiều phương pháp khác nhau dùng để phát triển các chế phẩm nấm, bao gồm làm khô sợi nấm đã phân đoạn, chứa một viên hệ sợi nấm [12], viên nang bào tử hoặc hệ sợi nấm trong tinh bột hoặc alginate và bao bọc các bao tử khô lên hạt cám, một số bào tử nấm sinh sôi nhanh chóng trong nước. Tương tự, các chế phẩm dạng nước thường dễ bị nhiễm do đó mà việc sử dụng các chế phẩm dưới dạng này không được ưa thích, các chế phẩm dạng bột ẩm hoặc dạng mùn thường được sử dụng hơn. Trichoderma harzianum biểu hiện sinh trưởng tốt hơn và đa dạng hơn khi được sản xuất dưới dạng đất diamomit bổ sung 10% mật đường để kiểm soát Sclerotium rolfsii trong lạc [15]. Ấn Độ, đã ứng dụng chế phẩm từ một loại nấm là Trichoderma viridae và dùng aureofulvin để phòng chống một số nấm bệnh rễ như Rhizoctonia spp., Fusarium spp., Pythium, Phytophthora spp. Một công thức đã đuợc tập trung vào Trichoderma và Gliocladium như là các tác nhân đấu tranh sinh học chống lại các nấm khác do dễ phân lập, nuôi cấy và lên men [31, 32]. Các chế phẩm sinh học của T.harzianum đã được điều chế bằng cách trộn sinh khối nấm trong môi trường đất. Các loài nấm Trichoderma đã được biết là hoạt tính đối kháng chống lại nhiều vi sinh vật, nhiều chủng. Công thức chế phẩm của những loài này đã được sử dụng để bảo vệ thực vật. Các quần thể Trichoderma thể được thiết lập một cách dễ dàng trong các loại đất khác nhau. Những quần thể này trở nên nhỏ hơn theo thời gian nhưng thể tiếp tục duy trì mức thể phát hiện được sau nhiều tuần hoặc thậm chí nhiều tháng. Điều này được xem như là một ưu điểm đối với BCA bởi một trong số những khó khăn trong việc sử dụng các BCA để chống lại nấm gây hại là khó khăn trong việc tạo dựng một mật độ quần thể cần thiết vị trí đích với việc giảm khả năng kiểm soát mầm bệnh tương ứng với việc giảm kích thước quần thể BCA. 1.3. CHẾ ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM GÂY BỆNH CÂY TRỒNG CỦA CÁC TÁC NHÂN VI SINH VẬT TRONG ĐẤU TRANH SINH HỌC Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 9 Lớp 0601 đâu vi sinh vật tồn tại thì sẽ những vi sinh vật cạnh tranh, đối kháng với nó, đó là quy luật cạnh tranh sinh tồn của sinh vật nói chung trong hệ sinh thái. Vi sinh vật trong đất cũng vậy, bao gồm cả vi sinh vật hữu ích và vi sinh vật gây bệnh. vùng rễ, vi sinh vật gây bệnh cho cây trồng nguy hiểm và đáng quan tâm là nấm gây bệnh. Những vi sinh vật hữu ích trong vùng rễcác vi khuẩn kiểm soát sinh học, xạ khuẩn, nấm chúng là hàng rào phòng thủ đầu tiên chống lại các nấm gây bệnh cho cây trồng. Sự mặt của các vi sinh vật đối kháng với nấm bệnh ngăn chặn bệnh và giảm tác động gây bệnh của nấm với cây trồng [4]. Các vi sinh vật đối kháng với nấm, cho đến nay đã được biết là nhờ các chế như cạnh tranh dinh dưỡng, tiêu diệt mầm bệnh (các sản phẩm trao đổi chất của các sinh vật kiểm soát sinh học tính kháng, tính độc đối với tế bào nấm), ký sinh đối với nấm (vi sinh vật sinh ra các emzym khả năng phân huỷ thành tế bào nấm bệnh làm nguồn chất và nguồn cacbon cho mình) và đề kháng cảm ứng của cây trồng với nấm bệnh. Các chế này cho đến nay vẫn chưa được hiểu một cách đầy đủ, nhưng các nhà khoa học cho rằng nấm bị tiêu diệt bởi các vi sinh vật đối kháng không chỉ đơn thuần từ một chế nào đó mà sự kết hợp bởi các chế nói trên [4, 35]. 1.4. ĐẤU TRANH SINH HỌC - HỘI VÀ THÁCH THỨC nhiều hội và thách thức của việc sử dụng biện pháp đấu tranh sinh học bao gồm việc phát hiện và sử dụng các vi sinh vật làm tác nhân đấu tranh sinh vật. Chúng bao gồm các thách thức về khoa học và công nghệ và các quá trình điều tiết các nước khác nhau mà đòi hỏi những xem xét và kiểm tra trước. nhiều nước cũng như cộng đồng Châu Âu, các tác nhân sinh học được xử lý với tầm quan trọng tương đuơng với các thuốc trừ sâu hoặc các thuốc diệt nấm thương mại. Đánh giá dữ liệu độc học và an toàn sinh học phải thu được và cung cấp bởi các quan luật pháp dẫn đến một thời gian chờ đợi dài trước khi được đăng kí, hơn nữa giá thành lại cao để thể phát triển sản phẩm. Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trần Thị Nguyệt 10 Lớp 0601 Việc hiểu động học giữa tác nhân vi sinh học trong đấu tranh sinh họccác quần thể vi sinh vật định cư trong đất là một tiêu chí quan trọng để đánh giá. Bằng việc nghiên cứu sự đa dạng và những thay đổi trong mật độ quần thể qua thời gian, người ta thể quan sát cách thức các quần thể tác nhân vi sinh vậtcác hệ vi sinh vật bản địa ảnh hưởng với nhau như thế nào và cho biết tác nhân vi sinh vật tác động gì đến quần thể vi sinh vật bản địa hay không. Trong thập kỉ trước, nhiều kĩ thuật dựa trên các phương pháp phân tử đã được phát triển để nghiên cứu các quần thể sinh vật trong đất. Để thiết lập nhanh thành phần quần thể với khả năng sinh sản sinh trong lượng mẫu lớn, phương pháp ELISA là một trong những phương pháp thích hợp nhất [25]. Bản chất của tác nhân vi sinh vật, đích tác dụng và kĩ thuật được sử dụngcác yếu tố rất quan trọng để quyết định các chiến lược nhằm đánh giá mức độ nguy hại đến các vi sinh khác trong đất. Phần lớn những nghiên cứu đánh giá mức độ nguy hại này tập trung vào các thể “địa phương” mà gần giống nhất với tác nhan vi sinh vật trong đấu tranh sinh học hoặc với các sinh vật đích do chúng khả năng ảnh hưởng nhất. Thậm chí trong các trường hợp mà những ảnh hưởng đến các thể khác của tác nhân vi sinh vật đã được phát hiện thì những ảnh hưởng này nhìn chung chỉ mang tính tạm thời và số lượng nhỏ. Bản chất tạm thời của bất kì ảnh hưởng nào đến quần thể vi sinh vật bản địa trong đất thể cho thấy rằng việc sử dụng các tác nhân vi sinh vật thể xem là an toàn và không ngây hại. Tuy nhiên do xác suất mà các tương tác đặc hiệu thể xảy ra giữa các chủng đưa vào và các vi sinh vật bản địa không thể được loại bỏ nên tính an toàn của mỗi dòng mới sẽ được đánh giá trước khi nó được sử dụng rộng rãi. 1.5. NẤM Phytophthora spp. 1.5.1. Các đặc tính chủ yếu của Phytophthora spp. Chi Phytophthora thuộc họ Pythiaceae, lớp Oomycetes (lớp nấm noãn hay lớp nấm 2 roi) trong giới Chromista. Nấm Phytophthora hay còn gọi là [...]... bệnh: Bệnh thể do các loại nấm trong đất gây hại như: Phytophthora, Fusarium hay Pythium, ngoài ra còn thể do các nấm Rhizoctonia và Sclerotium gây ra Nếu do nấm Sclerotium gây hại thì trên mắt đất gần gốc cây bệnh thể nhìn thấy các hạch nấm tròn màu nâu Trong khi nấm Rhizoctonia tạo nên các hạch nấm tròn dẹt và bề mặt hạch nấm sần sùi Đây là các loại nấm khả năng lưu tồn trong đất Chúng phát... khi làm cho vườn cây chết hàng loạt, hơn cả thiệt hại khi ngập Như vậy, vấn đề phòng chống nấm bệnh cây trồng là vô cùng quan trọng và cần thiết Biện pháp sử dụng hoá chất diệt nấm bệnh nhanh nhưng để lại nhiều hậu quả như: làm cho nấm bệnh quen và dẫn đến kháng thuốc, ngoài ra nhiều loài vi sinh vật ích trong đất cũng bị tiêu diệt từ đó làm mất cân bằng môi trường sinh thái vùng rễ Bên cạnh đó hoá... nghệ Sinh học nhóm cây múi đã chiếm đến 40.000 ha [14] Tuy nhiên từ 1998 đến nay, bệnh do Phytophthora trên cây múi ngày càng phát triển và gây hại nặng [25] • Bệnh thối gốc, chảy nhựa cây múi Triệu chứng: Bệnh thường xuất hiện và tấn công trên các vườn cam quýt trồng trên nền đất thấp, kém thoát nước nhất là vào mùa mưa Một số nấm Phytophthora trong đất thông qua vi c nhiễm trên bộ rễ mềm,... hết các vườn ươm cây giống Bệnh được gây ra bởi nhiều loại nấm hại trong đất Điều kiện độ ẩm cao của đất là yếu tố thích hợp cho bệnh phát triển Bệnh này xảy ra trên hầu hết các loại cây ăn trái khác nhau trong vườn ươm Triệu chứng của bệnh: Bệnh thể xảy ra hai giai đoạn: Giai đoạn trước khi cây mọc mầm, lúc mà các tử diệp của cây chưa nhô ra khỏi vỏ hạt thì đã bị nấm tấn công Giai đoạn sau khi cây. .. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học nấm trứng, chi này sản sinh ra các sợi nấm không vách ngăn, các vách tế bào cấu tạo bởi polysacarit và xenllulo Sợi nấm: cấu tạo dạng sợi giống như sợi chỉ với đặc tính phát triển phân nhánh - đây là một đặc tính phổ biến hầu hết các nấm Sợi nấm phát triển trên giá thể để vi sinh vật thể hấp thu dinh dưỡng từ đó [11, 22, 26] Các loài gây bệnh cây phát triển xuyên... vết bệnh phát triển rất nhanh khi gặp điều kiện độ ẩm cao Khi vết bệnh lan rộng, cây con thường bị ngã rạp, bộ rễ của cây bị thối đen Trên líp ươm, bệnh thường xuất hiện thành từng cụm sau đó lan rất nhanh Đối với những cây trồng trong bầu, những bầu bị ứ nước thì cây dễ bị thối toàn bộ rễ của cây, phần vỏ rễ bị lở ra làm cho cây bị héo và chết rất nhanh [14, 16, 25] Tác nhân gây ra bệnh: Bệnh thể... sp.T1 Vi t Nam là nước nông nghiệp, nông dân thói quen dùng nhiều phân chuồng và phân ủ bón cho cây trồng Vi c ứ đọng các chất hữu trong đất ảnh hưởng nghiêm trọng đến sự phát triển của cây trồng làm cho cây sức đề kháng kém hơn so với các bệnh do các tác nhân gây bệnh từ đất Nông dân không thể phun kháng sinh vào đất Do đó 2 chủng XS2 và Trichoderma sp.T1 là những chủng rất quí cần được nghiên. .. mạnh trong điều kiện đất độ ẩm cao, những lúc mưa kéo dài, luống ươm hay bầu đất bị ứ đọng nước, thiếu ánh nắng như vườn ươm Ngoài ra, nếu phần cổ rễ của cây con (nơi tiếp xúc với đất) bị sây xước mà trong đất chứa sắn mầm bệnh thì vi sinh vật gây bệnh sẽ dễ dàng tiếp xúc và xâm nhiễm vào cây hơn • Chết cây con Triệu chứng Bệnh thường tấn công vào cây con một năm tuổi trở lại, thân cây ngang... sấy Trộn các thành phần và nghiền nhỏ, đóng vào các gói polyme hai lớp 250g Kiểm tra biến động số lượng từng chủng và hoạt tính sinh học của chế phẩm mỗi tháng Trần Thị Nguyệt 29 Lớp 0601 Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành Công nghệ Sinh học CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG VI SINH VẬT KHẢ NĂNG ỨC CHẾ NẤM HẠI RỄ MẠNH Từ các mẫu đất mà phòng đa dạng vi sinh vật (trung... bị sọc nâu lan dần vào rễ lớn Bệnh nặng thì tất cả các rễ đều bị thối và cây chết [14, 16, 18] Tác nhân: Do nấm Fusarium solani, Phytophthora spp., Pythium tấn công vào chóp rễ và làm thối rễ Nếu rễ cây bị ngập úng làm rễ suy yếu hoặc do tuyến trùng chích hút tạo vết thương và từ đó nấm tấn công gây hại làm cây bị bệnh trầm trọng và chết nhanh hơn Ngoài ra nấm còn kích thích cây tạo ra ethylen làm . hành thực hiện đề tài:" ;Nghiên cứu sử dụng các tác nhân vi sinh vật trong đấu tranh sinh học để phòng trừ bệnh nấm hại rễ (Phytopthora spp. ) ở cây trồng có múi . Khóa luận. ăn mồi, các loài kí sinh và các mầm bệnh. Các tác nhân đấu tranh sinh học đối với các bệnh ở thực vật thường được đề cập là các loài đối kháng (antagonist). Các tác nhân đấu tranh sinh học của. nghiệm về vi c sử dụng các vi sinh vật đối kháng như: vi khuẩn, xạ khuẩn, nấm … trong phòng chống bệnh hại cây trồng, đặc biệt là nhóm bệnh hại có nguồn gốc trong đất (nấm, vi khuẩn ). Tại Vi t

Ngày đăng: 16/06/2014, 16:51

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan