Đang tải... (xem toàn văn)
Đáp ứng miễn dịch của vịt, ngan được tiêm vaccine cúm gia cầm và viêm gan vịt tại trung tâm nghiên cứu vịt đại xuyên
ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA VỊT, NGAN ĐƯỢC TIÊM VACCINE CÚM GIA CẦM VÀ VIÊM GAN VỊT TẠI TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU VỊT ĐẠI XUYÊN Nguyễn Thị Thúy Nghĩa, 1Tô Long Thành, Đồng Thị Quyên, Đặng Thị Vui, Nguyễn Đức Trọng, Nguyễn văn Duy Trung tâm Nghiên cứu Vịt Đại Xun; 1Trung tâm Chẩn đốn Thú y trung ương Tóm tắt Kết nghiên cứu đáp ứng miễn dịch vịt, ngan sau tiêm vacxin cúm gia cầm viêm gan vịt từ năm 2008 đến 2010 Trung tâm Nghiên cứu Vịt Đại Xuyên cho thấy: Vịt có hiệu giá kháng thể trung bình 6,6log2, tỷ lệ bảo hộ 100% thời điểm 30 ngày sau tiêm vacxin H5N1 lần Cả vịt ngan có đáp ứng miễn dịch tốt với vacxin H5N1 Sau tiêm vacxin viêm gan lần vịt có đáp ứng miễn dịch kéo dài suốt thời gian mẫn cảm với bệnh Đàn vịt sinh sản tiêm vacxin lặp lại lần trước đẻ đàn chúng có miễn dịch thụ động cao vịt mẹ tiêm nhắc lại lần Đặt vấn đề Cúm gia cầm bệnh truyền nhiễm nguy hiểm có tốc độ lây lan nhanh với tỷ lệ chết cao đàn gia cầm bị nhiễm bệnh Bệnh xảy khắp nơi giới, gây thiệt hại kinh tế có ảnh hưởng lớn đến tình hình trị xã hội.Bệnh xuất lần đầu nước ta năm 2003 dự đoán nhiều năm mối đe dọa cho phát triển nghành chăn nuôi gia cầm nước ta sức khỏe cộng đồng Bệnh viêm gan vịt bệnh truyền nhiễm cấp tính vịt, khơng gây bệnh cho vịt mà lây lan gây bệnh cho ngan chí ngỗng số lồi chim nước hoang dã vịt trời Ở nước ta, bệnh phát lần năm 1978 từ số giống vịt nhập ngoại Năm 1983-1984, dịch viêm gan vịt xảy số địa phương Hà tây, Hải Dương, Hà Nam…làm chết 6000 vịt tuần tuổi Mấy năm gần đây, bệnh viêm gan vịt lại phát sinh, gây thành dịch qui mô lớn gây thiệt hại cho nghành chăn nuôi vịt, ngan đặc biệt ngan Pháp Việt Nam số nước giới tiến hành đồng biện pháp tiêu hủy đàn gia cầm, cấm lưu thông tiêu thụ gia cầm sản phẩm gia cầm, kiểm soát giết mổ biện pháp an toàn sinh học…Mặc dù biện pháp cho kết định song tốn gây thiệt hại lớn kinh tế Vì thế, song song với việc áp dụng biện pháp đồng khác, sử dụng vaccin xem biện pháp hỗ trợ tích cực việc phịng hạn chế bệnh cúm gia cầm viêm gan vịt Mặc dù có hướng dẫn nhà xản xuất lịch tiêm vacxin bệnh vấn đề cần phải nghiên cứu Vì chúng tơi tiến hành đề tài: “Đánh giá đáp ứng miễn dịch vịt ngan tiêm vacxin cúm gia cầm vacxin viêm gan vịt” Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu nghiên cứu Vịt, ngan nuôi Trung tâm nghiên cứu vịt Đại Xuyên Vacxin cúm gia cầm vô hoạt subtype H5N1 chủng Re – công ty Weike, Harbi ( Trung Quốc) sản xuất Vaccin H5N9 Vacxin viêm gan vịt xí nghiệp thuốc thú y TW Kháng nguyên H5 (H5 – Antigen of Avian Influenza) công ty Weike sản xuất 2.3 Nội dung nghiên cứu Đánh giá đáp ứng miễn dịch vịt sau tiêm vacxin cúm gia cầm H5N1 Đánh giá đáp ứng miễn dịch ngan sau tiêm vacxin cúm gia cầm H5N1, H5N9 Đánh giá đáp ứng miễn dịch vịt ngan sau tiêm phòng vacxin viêm gan siêu vi trùng 2.4 Phương pháp nghiên cứu Thí nghiệm triển khai trung tâm Nghiên cứu vịt đại Xuyên Trung tâm Chẩn Đoán Thú y Trung ương từ năm 2008-2010 2.4.1 Bố trí thí nghiệm cho nội dung Sau sử dụng vacxin lần 2, lần 3, lấy máu ngẫu nhiên đàn vịt thời điểm 30, 60, 90, 120 ngày kiểm tra hàm lượng kháng thể cúm 2.4.2 Bố trí thí nghiệm cho nội dung (n=150con/đàn) Thí nghiệm gồm đàn ngan đàn tiêm vacxin H5N1, đàn lại tiêm vacxin H5N9 Sau tiêm nhắc lại lần thứ lấy máu thời điểm 30,60,90,120 ngày kiểm tra hàm lương kháng thể kháng H5 2.4.3 Bố trí thí nghiệm cho nội dung (n=150 con/đàn) Thí nghiệm gồm đàn vịt tiêm vacxin viêm gan siêu vi trùng xí nghiệp thuốc thu y Trung ương 2.4.4 Các phương pháp nghiên cứu kỹ thuật sử dụng Phương pháp lấy máu vịt, ngan: dung bơm tiêm vô trùng lấy máu tĩnh mạch cánh để nghiêng sau chắt huyết Kiểm tra hiệu giá kháng thể cúm gia cầm huyết vịt ngan phản ứng HI (phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu) Kiểm tra kháng thể viêm gan siêu vi trùng vịt phản ứng trung hồ phơi trứng Phương pháp cơng cường độc virus viêm gan vịt phịng thí nghiệm Phương pháp xử lý số liệu: Số liệu xử lý theo phương pháp thống kê sinh học phần mềm Excel Kết thảo luận 3.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vacxin cúm gia cầm 3.1.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt sau tiêm vaccin H5N1 lần Để xác định đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vacxin H5N1 Trung quốc, tiến hành lấy mẫu đàn vịt tiêm vacxin trung tâm Thời điểm lấy mẫu sau tiêm mũi 30 ngày, 60 ngày, 90 ngày, 120 ngày Huyết chuyển kịp thời Trung tâm Chẩn đoán Thú y trung ương, để xác định hiệu giá kháng thể Các mẫu đạt yêu cầu xét nghiệm Kết kiểm tra trình bày bảng đây: Bảng Hiệu giá kháng thể trung bình tỷ lệ bảo hộ vịt tiêm vacxin H5N1 Thời điểm lấy mẫu sau tiêm vacxin mũi 2(ngày) 30 60 90 120 Tổng số mẫu 30 30 30 30 Số mẫu (+) 30 30 28 27 Số mẫu đạt bảo hộ 30 28 22 20 Tỷ lệ bảo hộ (%) 100 93 73 66 GMT (log2) 6,6 5,5 4,4 3,9 (STT-số thứ tự, GMT-hiệu giá kháng thể trung bình) Qua kiểm tra cho thấy: Tại thời điểm 30 ngày sau tiêm phòng mũi đáp ứng miễn dịch đạt cao với hiệu giá kháng thể 6,6 log2 , tỷ lệ bảo hộ 100% Sau đáp ứng miễn dịch giảm dần, thời điểm 120 ngày sau tiêm phòng mũi 2, hiệu giá kháng thể 3,9 log2, tỷ lệ bảo hộ 66% Theo tiêu chuẩn OIE hiệu giá kháng thể tối thiểu phải có huyết đàn gia cầm log2 tỷ lệ bảo hộ 70% đàn gia cầm bảo hộ Như đàn vịt sau tiêm phòng vacxin H5N1 cho đáp ứng miễn dịch đạt ngưỡng bảo hộ kéo dài tháng kết nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu Ninh Văn Hiểu (2006) 3.1.2 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch giống vịt sau tiêm vaccin H5N1 lần Để xác định thời điểm thích hợp tiêm nhắc lại cho giống vịt tiến hành xác định hiệu giá kháng thể vịt sau tiêm phòng lần thứ (khi vịt vào đẻ) Đáp ứng miễn dịch giống vịt thể bảng Bảng Hiệu giá kháng thể trung bình đàn vịt sinh sản sau tiêm phòng lần Giống vịt Vịt Khaki Campbell Vịt Triết Giang Vịt CV Supper M Trung bình Hiệu giá kháng thể thời điểm sau tiêm phòng (log2) 30 ngày 60 ngày 90 ngày 120 ngày 150 ngày 5,0 4,5 4,4 4,3 4,2 4,9 4,6 4,6 4,5 4,3 4,5 4,3 4,2 4,0 3,8 4,8 4,5 4,4 4,2 4,1 (HGKT- hiệu giá kháng thể, TLBH- tỷ lệ bảo hộ) Qua bảng cho thấy hiệu giá kháng thể trung bình giống vịt thời điểm sau tiêm phòng lần thấp hiệu giá kháng thể vịt sau tiêm phòng lần độ dài miễn dịch số giống vịt kéo dài đến tháng đạt mức bảo hộ (>4log2) Vịt CV Supper M hiệu giá kháng thể độ dài miễn dịch ngắn đạt mức tháng Như vậy, thời điểm tiêm nhắc lại giai đoạn sinh sản thích hợp cho vịt Khaki Campbell Triết giang (vịt chuyên trứng) tháng, vịt CV Supper M sau tháng 3.2 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch ngan tiêm vacxin H5N1 H5N9 Mỗi đàn ngan tiêm phòng loại vacxin theo hướng dẫn nhà sản xuất, kết trình bày bảng Đàn ngan tiêm vaccine H5N1 có đáp ứng miễn dịch với hiệu giá kháng thể độ dài miễn dịch cao hẳn đàn ngan tiêm vaccine H5N9 Hiệu giá kháng thể trung bình hai loại vacxin có sai khác rõ rệt Sau tiêm vacxin H5N1 lần đàn ngan có miễn dịch kéo dài tháng Theo nhiều kết nghiên cứu khác, ngan lồi có đáp ứng miễn dịch khơng cao vacxin cúm H5N9 sử dụng Việt Nam phải tiêm nhắc lại nhiều lần tạo miễn dịch đạt đến mức bảo hộ vacxin H5N1 dùng cho ngỗng ngan Trung Quốc (Trần Hoa Lan, tư liệu cá nhân) Theo Nguyễn Hoàng Đăng (2008), tỷ lệ bảo hộ vacxin H5N9 ngan thấp (17,22%) Như vậy, sau tháng phải tiêm vacxin nhắc lại để đàn ngan bảo hộ với bệnh cúm gia cầm Bảng 3.Hiệu giá kháng thể TB tỷ lệ bảo hộ ngan tiêm vacxin H5N1, H5N9 Đàn Loại vacxin H5N1 H5N9 Chỉ tiêu HGKT(log2) TLBH (%) HGKT(log2) TLBH (%) Thời gian sau tiêm phòng (ngày) 30 60 90 5,9 4,9 4,9 95 95 85 3,9 3,2 2,3 67 53 40 120 4,5 75 2,0 30 150 4,0 72 - 3.3 Đáp ứng miễn dịch vịt sau tiêm vacxin viêm gan siêu vi trùng Theo Crighton (1978), vịt nở tiêm vaccine nhược độc typ I, sau 48-72 vịt có miễn dịch, miễn dịch kéo dài suốt giai đoạn vịt mẫn cảm với bệnh Theo Trần Thị Liên (2008), vịt sử dụng vacxin theo đường tiêm bắp, tiêm da nhỏ mắt nhỏ mũi có đáp ứng miễn dịch tốt, miễn dịch kéo dài đến 30 tuần tuổi Để làm rõ khả kích thích sinh miễn dịch vacxin viêm gan siêu vi trùng kết thí nghiệm trình bày bảng Bảng Đáp ứng miễn dịch đàn vịt tiêm vacxin viêm gan siêu vi trùng Đàn Ngày tuổi tiêm vacxin 1 Liều 1 số mẫu kiểm tra 5 số mẫu (-) 0 Số mẫu (+) 5 Tỷ lệ bảo hộ (%) 100 100 80 Đàn vịt sau tiêm vacxin 14 ngày tiến hành lấy máu, làm phản ứng trung hoà phơi trứng cho kết quả: đàn vịt có tỷ lệ bảo hộ đạt từ 80-100% Vịt có đáp ứng miễn dịch tốt sau tiêm vacxin viêm gan siêu vi trùng nên với vịt nuôi thương phẩm cần dùng lần vacxin giúp cho vịt có miễn dịch suốt giai đoạn mẫn cảm với bệnh 3.3.1 Đáp ứng miễn dịch thụ động đàn vịt Hanson (1976), Tripathy (1986) cho biết, vịt nở từ đàn vịt mẹ có miễn dịch, hàm lượng kháng thể giảm dần tuần đầu Như vậy, đàn vịt có miễn dịch thụ động hàm lượng kháng thể có chịu ảnh hưởng số lần tiêm vacxin thời điểm đẻ trứng đàn mẹ hay không Theo Hwang (1973) số lần sử dụng vacxin vịt mẹ có ảnh hưởng đến miễn dịch thụ động vịt Để làm rõ vấn đề dùng vacxin cho đàn mẹ với số lần khác nhau: - Đàn mẹ tiêm vacxin lần: ngày tuổi, trước vào đẻ - Đàn mẹ tiêm vacxin lần: ngày tuổi, 28 ngày tuổi, trước vào đẻ Sau vịt mẹ đẻ 1,3,6 tháng tiến hành thu trứng cho ấp nở, chọn vịt khoẻ mạnh kiểm tra miễn dịch thụ động (3 ngày tuổi) phương pháp công cường độc Kết thu trình bày bảng Kết thí nghiệm cho thấy: Vịt mẹ tiêm vacxin lần: Vịt nở từ trứng sau đẻ tháng cho tỷ lệ bảo hộ lúc ngày tuổi 100%, sau tháng 80%, sau tháng 70% Vịt mẹ tiêm vacxin lần: Sau đẻ tháng cho đàn có tỷ lệ bảo hộ 90%, sau tháng 70%, sau tháng 40% Bảng Ảnh hưởng số lần dùng vacxin vịt mẹ đến miễn dịch thụ động vịt Thời gian thu trứng Đối tượng TN ĐC TN ĐC TN ĐC Kết công cường độc Vịt mẹ tiêm vacxin lần Số vịt Số vịt Số vịt sống TN chết sót (con) (con) (con) 10 5 10 5 10 5 Tỷ lệ bảo hộ (%) 90 70 40 Vịt mẹ tiêm vacxin lần Số vịt Số vịt Số vịt sống TN chết sót (con) (con) (con) 10 10 5 10 5 10 5 Tỷ lệ bảo hộ (%) 100 80 70 (TN- thí nghiệm, ĐC- đối chứng) Như vậy, vịt mẹ gây miễn dịch cách tiêm vacxin lần cho đàn có tỷ lệ bảo hộ cao so với vịt đàn mẹ tiêm vacxin lần Đàn vịt mẹ có miễn dịch truyền cho đàn chúng, miễn dịch có hướng giảm dần theo thời gian Để đàn sinh bảo hộ phải tiêm vacxin nhắc lại cho đàn mẹ 5-6 tháng lần Theo OIE (2000), nên tiêm vacxin nhược độc viêm gan vịt typ I cho vịt mẹ trước đẻ 12,8 tuần (2-3 lần) Sau đẻ tháng lần tiêm vacxin nhắc lại cho vịt mẹ để tạo miễn dịch chủ động cho vịt suốt chu kỳ đẻ trứng 3.3.2 Xác định thời điểm dùng vacxin thích hợp cho đàn vịt Việc nghiên cứu ảnh hưởng kháng thể thụ động đến đáp ứng miễn dịch vịt dùng vacxin việc làm cần thiết, tạo sở chọn thời điểm thích hợp dùng liều vacxin cho đàn vịt Thí nghiệm sử dụng vacxin cho đàn vịt khơng có miễn dịch thụ động đàn vịt có miễn dịch thụ động Kết trình bày bảng Bảng Kết xác định thời điểm dùng vacxin thích hợp cho đàn vịt 10 Ngày công cường độc 14 21 10 14 21 28 10 Đàn mẹ dùng vacxin Số vịt Số Số vịt thí sống ốm nghiệm xót 5 5 5 5 5 5 14 80 40 40 60 60 80 40 60 80 100 60 20 21 28 Ngày tiêm vacxin 5 60 100 TLBH (%) Đàn mẹ không dùng vacxin Số vịt Số Số vịt thí sống ốm nghiệm xót 5 5 5 5 5 5 TLBH (%) 20 40 60 80 20 60 80 100 (TLBH- tỷ lệ bảo hộ) - Đối với đàn vịt khơng có miễn dịch thụ động, sử dụng vaxin viêm gan vịt liều vào thời điểm ngày tuổi ngày tuổi tạo miễn dịch cao cho đàn vịt Sau tiêm vacxin ngày vịt có miễn dịch sau 21 ngày vịt có tỷ lệ bảo hộ 80-100% - Đối với đàn vịt có miễn dịch thụ động sử dụng vacxin viêm gan vào thời điểm khác 1,7 10 ngày tuổi cho thấy: + Vịt dùng vacxin lúc ngày tuổi tỷ lệ bảo hộ vịt giảm nhanh chóng, sau ba ngày giảm từ 80% xuống cịn 20% sau tăng dần đạt cao lúc 21 ngày tuổi 60% + Vịt dùng vacxin lúc ngày tuổi, sau ngày tỷ lệ bảo hộ giảm từ 80% xuống 40% sau tăng dần đạt 100% thời điểm 21 ngày sau dùng vacxin + Vịt dùng vacxin lúc 10 ngày tuổi, sau dung vacxin ngày tỷ lệ bảo hộ vịt có giảm từ 60 xuống 20%, sau tăng dần đạt bảo hộ 100% sau tiêm vacxin hai tuần Như vây, đàn vịt khơng có miễn dịch thụ động viêm gan vịt dùng liều vacxin vào lúc 1,7 ngày tuổi tạo miễn dịch tốt cho đàn vịt dùng vacxin vào lúc ngày tuổi có thời gian dài đàn vịt khơng có miễn dịch, không bảo hộ với bệnh nên dung vacxin vào lúc ngày tuổi thích hợp Đàn vịt có miễn dịch thụ động sử dụng vacxin liều đầu tiên, tỷ lệ bảo hộ cho vịt có giảm xuống sau tăng lên đạt cao dùng thời điểm 7,10 ngày tuổi Theo Tripathy (1986), vịt đàn vịt giống khơng có miễn dịch với bệnh viêm gan vịt dung vacxin viêm gan vịt typ I lúc ngày tuổi đường cho uống tiêm da để gây miễn dịch Vịt nở từ đàn vịt mẹ có miễn dịch, khángthể thụ động giảm dần tuần nên dung vacxin nhược độc typ I cho vịt vào thời gian 7-10 ngày tuổi Kết luận đề nghị 4.1 Kết luận - Vịt, ngan có đáp ứng miễn dịch tốt tiêm vacxin cúm gia cầm H5N1 Trong giai đoạn sinh sản, vịt hướng trứng ngan có thời gian miễn dịch cao, miễn dịch kéo dài so với vịt chuyên thịt - Vịt tiêm vacxin viêm gan siêu vi trùng lần cho đáp ứng miễn dịch với tỷ lệ bảo hộ từ 80-100% Vịt sinh từ đàn bố mẹ phòng bệnh lần thời điểm 7, 28 ngày tuổi lúc vào đẻ có miễn dịch thụ động với tỷ lệ bảo hộ lúc ngày tuổi 70-100% tuỳ thuộc vào thời điểm sinh sản sau tiêm vacxin Vịt sinh từ đàn bố mẹ khơng tiêm phịng có đáp ứng miễn dịch tương đương dùng vacxin thời điểm ngày tuổi Vịt sinh từ đàn bố mẹ có miễn dịch có đáp ứng miễn dịch cao tiêm vacxin 7-10 ngày tuổi Qua kết nghiên cứu khuyến cáo lịch tiêm phòng cho loại vịt, ngan sau: - Đối với vịt ngan thương phẩm: Tiêm vacxin viêm gan siêu vi trùng lần lúc ngày tuổi đàn bố mẹ khơng tiêm phịng, lúc ngày tuổi đàn bố mẹ có miễn dịch - Đối vịt, ngan sinh sản: Tiêm vacxin viêm gan lần trước vào đẻ thời điểm 7, 28 ngày tuổi, lúc vào đẻ Trong thời gian sinh sản 5-6 tháng tiêm vacxin nhắc lại + Vịt chuyên thịt tiêm vacxin H5N1 nhắc lại giai đoạn sinh sản sau tháng + Vịt chuyên trứng ngan tiêm vacxin H5N1 nhắc lại giai đoạn sinh sản sau tháng 4.2 Đề nghị Cơng nhận lịch tiêm phịng vacxin H5N1 vacxin viêm gan siêu vi trùng vịt TBKT Tài liệu tham khảo Ninh Văn Hiểu (2006) Tình hình dịch cúm gia cầm Kết tiêm vacxin H5N2, H5N1 Trung Quốc để phòng bệnh cho gà, vịt địa bàn tỉnh Nam Định, Luận văn Thạc sĩ NN, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Tô Long Thành, Nguyễn Hoàng Đăng, Hoàng Đăng Huyến (2008) Đáp ứng miễn dịch gà vịt tỉnh Bắc Giang tiêm phịng vacxin cúm gia cầm Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, Tập XIV, Số 6, 2008, 21-27 Trần Thị Liên (2008) Sản xuất thử nghiệm vacxin nhực độc đơng khơ phịng bệnh viêm gan vịt Crighton, G.W., and P.R Woolock, 1978 Active immunization of ducklings against duck virus hepatitis Vet Rec 102, P 358-361 Hanson, L.E., and D N Tripathy 1976 Oral immunization of ducklings with attenuated duck hepatitis virus Dev Biol Stand 33, P 357-363 Hwang, J (1973) “Active immunization against duck hepatitis virus” Amj Vet Res 33, pp 2539- 2544 OIE (2000) Manual of standards for diagnostic test and vaccines Tripathy, D.N., and L.E Hanson 1986 Impact of oral immunization against duck viral hepatitis in passively immune ducklings Prevent vet Med 4, P 355-360 MỘT SỐ HÌNH ẢNH BỆNH TÍCH CỦA BỆNH VIÊM GAN VỊT Ảnh Bệnh tích vịt bị viêm gan siêu vi trùng Ảnh Hình ảnh gan vịt viêm xuất huyết Ảnh Tư vịt chết bệnh viêm gan siêu vi trùng ... dung nghiên cứu Đánh giá đáp ứng miễn dịch vịt sau tiêm vacxin cúm gia cầm H5N1 Đánh giá đáp ứng miễn dịch ngan sau tiêm vacxin cúm gia cầm H5N1, H5N9 Đánh giá đáp ứng miễn dịch vịt ngan sau tiêm. .. - Vịt, ngan có đáp ứng miễn dịch tốt tiêm vacxin cúm gia cầm H5N1 Trong giai đoạn sinh sản, vịt hướng trứng ngan có thời gian miễn dịch cao, miễn dịch kéo dài so với vịt chuyên thịt - Vịt tiêm. .. cúm gia cầm 3.1.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt sau tiêm vaccin H5N1 lần Để xác định đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vacxin H5N1 Trung quốc, tiến hành lấy mẫu đàn vịt tiêm vacxin