Đang tải... (xem toàn văn)
Bài trình bày về " các PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CÁC CHẤT CHUYỂN HOÁ THUỘC NHÓM NITROFURAN TRONG THỦY SẢN"
RT: 0.00 - 10.00 SM: 5B 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Time (min) 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance RT: 5.18 MA: 488579 SN: 812 5.74 7.296.60 8.22 9.318.65 RT: 5.18 MA: 1197952 SN: 6318 RMS 5.88 4.68 7.46 8.72 9.486.64 8.22 NL: 3.80E4 TIC F: + c APCI SRM ms2 236.000@cid22.0 0 [103.500- 104.500] MS KS5-3 NL: 8.93E4 TIC F: + c APCI SRM ms2 236.000@cid14.0 0 [133.500- 134.500] MS KS5-3 RT: 0.00 - 10.00 SM: 5B 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Time (min) 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance RT: 3.76 MA: 344845 SN: 8227 RMS 4.27 1.010.73 3.212.131.32 2.66 RT: 3.75 MA: 1298932 SN: 197 3.281.36 1.88 2.780.38 NL: 3.50E4 TIC F: + c APCI SRM ms2 335.000@cid18.0 0 [261.500- 262.500] MS KS5-3 NL: 1.35E5 TIC F: + c APCI SRM ms2 335.000@cid11.0 0 [290.500- 291.500] MS KS5-3 RT: 0.00 - 10.00 SM: 5B 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Time (min) 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance RT: 5.14 MA: 523877 SN: 149 5.57 6.23 9.87 7.39 9.148.78 8.22 RT: 5.14 MA: 494581 SN: 535 4.87 9.47 8.71 6.39 7.06 8.05 NL: 4.74E4 TIC F: + c APCI SRM ms2 209.000@cid11.0 0 [165.500- 166.500] MS KS5-3 NL: 4.18E4 TIC F: + c APCI SRM ms2 209.000@cid12.0 0 [191.500- 192.500] MS KS5-3 RT: 0.00 - 10.00 SM: 5B 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Time (min) 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance RT: 5.09 MA: 87263 SN: 94 5.68 5.91 6.25 6.84 7.54 8.938.36 9.75 RT: 5.09 MA: 119615 SN: 13519 5.85 6.18 9.268.937.776.75 9.92 NL: 6.24E3 TIC F: + c APCI SRM ms2 249.000@cid22.0 0 [103.500- 104.500] MS KS5-3 NL: 9.32E3 TIC F: + c APCI SRM ms2 249.000@cid12.0 0 [133.500- 134.500] MS KS5-3 MỤC LỤC Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 1 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CÁC CHẤT CHUYỂN HOÁ THUỘC NHÓM NITROFURAN TRONG THỦY SẢN I. NITROFURAN An toàn vệ sinh thực phẩm là vấn đề đang được cả xã hội quan tâm, đặc biệt là ở đô thị và các khu công nghiệp, khi ngày càng có nhiều tác nhân độc hại bị phát hiện trong thực phẩm khiến dư luận lo ngại. Tuy nhiên trong lĩnh vực sản xuất kinh doanh nói chung và trong chăn nuôi gia súc, gia cầm nói riêng còn nhiều vấn đề đáng lo ngại, như việc quản lý sử dụng thuốc kháng sinh còn lỏng lẻo, tình trạng sử dụng các chất bổ trợ trong chăn nuôi khá tùy tiện. Từ đó đã để lại tồn dư các hóa chất, kháng sinh trong sản phẩm chăn nuôi, gây nguy hại nghiêm trọng đến sức khỏe người tiêu dùng. Nitrofuran là một nhóm kháng sinh tổng hợp thường được sử dụng trong thức ăn gia súc như kích thích tăng trưởng và là phương pháp điều trị dự phòng, điều trị các bệnh nhiễm trùng đường tiêu hóa gây ra bởi Escherichia và Salmonella trong chăn nuôi gia súc, gia cầm. Chúng cũng đã được sử dụng để điều trị nhiễm trùng do vi khuẩn và sinh vật đơn bào trong nuôi trồng thủy sản Tuy nhiên chúng gây tác hại cho sức khỏe con người, đặc biệt là gây ung thư và đột biến ở người. Năm 2002 – 2003 phát hiện dư lượng chất chuyển hóa của nitrofuran trong số lượng lớn các mẫu từ gia cầm và nuôi trồng thủy sản các sản phẩm nhập khẩu vào Châu Âu từ một số khu vực Đông Nam Á và các nước Nam Mỹ. Từ đó đã dẫn đến lệnh cấm sử dụng trong sản xuất thực phẩm động vật tại nhiều quốc gia bao gồm Mỹ, Canada và EU Các nước này đã đặt lệnh cấm trên tất cả các loại thực phẩm nhập khẩu có chứa dư lượng nitrofuran. Tháng 3 năm 2003 EU đã quy định yêu cầu giới hạn nhỏ nhất cần thực hiện phương pháp (MRPL) đối với các chất chuyển hóa nhóm nitrofuran là 1 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 2 μg/kg. Năm 2002, ở Việt Nam, Bộ nông nghiệp và phát triển nông thôn đã quyết định cấm sản xuất, nhập khẩu, lưu thông và sử dụng một số loại kháng sinh hóa chất trong sản xuất và kinh doanh TACN trong đó có nitrofuran. 1. Tác dụng của các chất kháng sinh nhóm nitrofuran Nitrofuran là một nhóm kháng sinh tổng hợp có chứa nhóm 5-nitro, thường được sử dụng làm thức ăn gia súc kích thích sự tăng trưởng, chủ yếu đối với gia súc (như gia cầm, lợn), nuôi trồng thủy sản (cá, tôm) và nuôi ong để điều trị các vi khuẩn và sinh vật đơn bào nhiễm trùng như viêm ruột tiêu hóa gây ra bởi Escherichia coli và Salmonella spp, gia cầm bệnh tả và bênh cầu trùng màu đen đầu. Các chất nhóm nitrofuran bao gồm Furazolidone, furaltadone, furazolidone, nitrofurazone, khi đi vào cơ thể sinh vật nó tạo thành các chất chuyển hóa tương ứng (AOZ, AMOZ, AHD, SEM) liên kết trong các mô tồn tại trong nhiều tuần sau khi sử dụng. McCracken và các cộng sự 1995, Nouws và Laurensen 1990 chỉ ra rằng các hợp chất nhóm nitrofuran sau khi vào cơ thể tạo thành các chất chuyển hóa tương ứng liên kết trong các mô. Về mặt cơ chế tác dụng, các chất chuyển hóa từ nitrofuran đã kìm hãm hoặc phá hủy các hệ thống men điều hòa trao đổi chất ở vi khuẩn. Do đó vi khuẩn không phát triển và không sinh sản được nữa. Tác dụng tốt với vi khuẩn gram âm và gram dương. Đồng thời còn tác dụng cả với nguyên sinh động vật, một số chất có tác dụng tốt trong việc giệt trừ giun đũa. Với nồng độ thấp, nitrofuran có tác dụng kháng sinh, nồng độ cao có tác dụng diệt khuẩn. Theo nhiều báo cáo, nitrofuran tác dụng rất tốt trong việc diệt khuẩn salmonellosis, colisepticeamia. Nitrofuran còn có tác dụng kích thích dinh dưỡng. Trộn nitrofuran với thức ăn, theo tỉ lệ thích hợp sẽ giúp cho gà và lợn còn tăng trọng nhanh. Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 3 Nitrofuran ảnh hưởng đến sức khỏe con người như gây ung thư và đột biến, khi thực phẩm có tồn dư nitrofuran và các dẫn xuất của nó. Do đó hầu hết các nước trên thế giới đã cấm sử dụng kháng sinh nhóm nitrofuran trong chăn nuôi. Ở Việt Nam, bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn đã quyết định cấm sử dụng nitrofuran cho vào trong thức ăn chăn nuôi. EU đã quy định yêu cầu giới hạn nhỏ nhất cần thực hiện phương pháp (MRPL) đối với các chất chuyển hóa nhóm nitrofuran là 1 μg/kg. 2. Dư lượng kháng sinh nhóm nitrofuran trong thực phẩm Từ năm 2002 – 2003 nitrofuran thường xuyên được phát hiện thấy trong thịt gia cầm và các sản phẩm nuôi trồng thủy sản nhập khẩu vào các nước EU từ Thái Lan, Trung Quốc, Đài Loan, Ấn Độ, Việt Nam, Ecuador và Brazil. Hơn nữa, dư lượng nitrofuran cũng được tìm thấy trong sản phẩm gia súc và gia cầm ở Châu Âu như: Bồ Đào Nha, Ý, Hy Lạp, Romania và Bulgari. Sau đó EU đã kiểm tra và cho thấy nitrofuran ô nhiễm trong các sản phẩm có nguồn gốc từ hơn 9 quốc gia trong năm 2007, tỷ lệ mắc cao nhất là từ Ấn Độ (37%), Trung Quốc (37%), Bangladesh (10%) và Thái Lan (5%) trong một loạt cá sản phẩm bao gồm tôm, mật ong và thịt hộp. Từ tháng 10/2006 đến tháng 5/2007, FDA liên tục phát hiện thủy sản nhập khẩu từ Trung Quốc có nhiễm nitrofuran. Kết quả lấy trên các sản phẩm tôm, cá trê, cá ba sa cho thấy, 22/89 mẫu (chiếm 22%) bị phát hiện có chất cấm nitrofuran trong tôm. Ở Việt Nam theo kết quả khảo sát của TS. Nguyễn Quốc Ân, phó trưởng phòng quản lý thuốc, cục thú y vào năm 2007 đã phát hiện 5 mẫu thủy sản nuôi lấy tại ao nuôi nhiễm SEM (3 mẫu tôm, 1 mẫu cá và 1 mẫu cua lột) với hàm lượng từ 0 – 3,55 ng/g. Năm 2008 phát hiện 1 mẫu tôm thẻ chân trắng tại Phú Mỹ – Bình Định nhiễm AOZ với hàm lượng 12,6 ng/g; 2/754 mẫu cua lột tại Cần Guộc – Long An nhiễm SEM với hàm lượng từ 2 – 2,2 ng/g. 3. Các phương pháp xác định kháng sinh nhóm nitrofuran Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 4 Hiện nay có nhiều phương pháp để xác định kháng sinh nhóm nitrofuran, bao gồm: phương pháp sắc ký lỏng với detector UV, phương pháp vi sinh (kỹ thuật Elisa), phương pháp sắc ký lỏng với detector MS/MS. II. ĐỊNH LƯỢNG CÁC CHẤT CHUYỂN HOÁ THUỘC NHÓM NITROFURAN TRONG THỦY SẢN BẰNG SẮC KÝ LỎNG GHÉP ĐẦU DÒ KHỐI PHỔ BA TỨ CỰC (LC/MS/MS) 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này qui định phương pháp định lượng kháng sinh nhóm nitrofuran và các chất chuyển hoá (metabolite) tương ứng trong thủy sản bằng sắc kí lỏng ghép đầu dò khối phổ ba tứ cực (gọi tắt là LC/MS/MS). Giới hạn phát hiện của phương pháp cho bốn chất họ Nitrofuran là 1 g/Kg. 2. Công thức 3. Nguyên tắc Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 5 Dư lượng liên kết với mô của các chất chuyển hoá nhóm nitrofuran trong thức ăn chăn nuôi được thuỷ phân bằng hydrochloric acid loãng để thu được các metabolite tương ứng. Các metabolite này được dẫn xuất hoá với 2- nitrobenzaldehyde. Định tính và định lượng các chất dẫn xuất bằng thiết bị LC /MS/MS. 4. Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, chất chuẩn 4.1 Thiết bị - Hệ thống sắc kí lỏng: Water Alliance 2690 hoặc tương đương gồm bơm và hệ thống tiêm mẫu; - Cột bảo vệ pha đảo C18 (Symmetry Sentry Guard hoặc tương đương), kích thước 20 x 3,9mm; - Cột C18 (Symmetry hoặc tương đương) kích thước150 x 3,0 mm, 5 µm. [Cột sắc ký Agilent C18 (150mm x 2,1mm x 3,5μm)]. - Ðầu dò khối phổ dạng bốn cực với giao diện ESI (Triple quadrupole Micromass Quattro Ultima hoặc tương đương). - Cột chiết pha rắn SPE (Oasis HLB). - Máy lắc vortex VELP. - Máy đồng nhất mẫu. - Máy li tâm MIKRO 22R. - Cân phân tích (có độ đọc 0,1mg và 0,01mg). - Cân kĩ thuật (có độ đọc 0,01g). - Máy thổi khí N2 làm khô có điều nhiệt. - Bể điều nhiệt 4.2 Dụng cụ Cốc có mỏ dung tích 50, 100, 200 ml. Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 6 - Ống đong dung tích 10, 100, 200 ml. - Pipetman, pipet nhựa, pipet pasteur 200 μl; 1000 μl; 5 ml…đầu côn. - Ống ly tâm 50 ml, màng lọc 0,2 μm. - Vial loại 1,8 ml. - Bình định mức loại A dung tích 10, 25, 50, 100 ml. - Ống nghiệm thủy tinh… 5. Hóa chất, dung dịch 5.1 Hóa chất - Methanol (Merck hoặc tương đương, độ tinh khiết 99,9%) - Amoni acetate (Merck hoặc tương đương, độ tinh khiết 98%) - 2-NBA (Merck hoặc tương đương, độ tinh khiết 99%) - K2HPO4.3H2O (Merck hoặc tương đương, độ tinh khiết 99%) - NaOH (Merck hoặc tương đương, độ tinh khiết 99,9%) - HCl 37% (Merck hoặc tương đương, độ tinh khiết 99,9%) - HCl 0,2M: Hút 17 ml HCl 37% vào bình định mức 1000 ml, định mức đến vạch bằng nước cất. - 2-NBA 1000 mg/l: cân 100 mg 2-NBA hòa tan và định mức vào bình 10 ml bằng methanol. Dung dịch chuẩn bị hằng ngày. - K2HPO4 0,2 M: cân 45,7 mg K2HPO4.3H2O hòa tan và định mức vào bình 1000 ml bằng nước cất 2 lần. - Nước cất 2 lần khử ion - Dimethyl sulfoxide (DMSO) Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 7 - NaOH 2 M: cân 8 g NaOH hòa tan và định mức vào bình định mức 1000 ml bằng nước cất 2 lần. - CH3COONH4 10 mM: cân 0,077 g CH3COONH4 hòa tan và định mức vào bình định mức 1000 ml bằng nước cất 2 lần. 5.2 Chất chuẩn 5.2.1 Chất chuẩn gốc - Furazolidone VETRANAL, 99,9% Sigma-Aldrich Laborchemikalien GmbH D-30918 Seelze CAS-No: [67-45-8] - Furaltadone VETRANAL, 99,9% Sigma-Aldrich Laborchemikalien GmbH D-30918 Seelze CAS-No: [139-91-31] - 3-amino-2-oxazolidinone (AOZ) VETRANAL, 99,4% Sigma-Aldrich Laborchemikalien GmbH D-30918 Seelze CAS-No: [80-65-9] - 5-methylmorpholino-3-amino-2-oxazolidinone (AMOZ) VETRANAL, 99,9% Sigma-Aldrich Laborchemikalien GmbH D-30918 Seelze CAS-No: [43056-63-9] - Nitrofurazone 100 ng/µL trong acetonitrile VETRANAL Sigma-Aldrich Laborchemikalien GmbH D-30918 Seelze - Nitrofurantoin VETRANAL, 99,9% Sigma-Aldrich Laborchemikalien GmbH D-30918 Seelze CAS-No: [67-20-9] 5.2.2 Pha chế chất chuẩn Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 8 - Chuẩn AHD 1000 mg/l: cân 13,2 mg ± 0,1 mg chuẩn AHD.HCl hòa tan và định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. - Chuẩn AHD 10 mg/l: hút 100 μl chuẩn AHD 1000 mg/l định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. - - Chuẩn SEM 1000 mg/l: cân 14,9 mg ± 0,1 mg chuẩn SEM.HCl hòa tan và định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. - - Chuẩn SEM 10 mg/l: hút 100 μl chuẩn SEM 1000 mg/l định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. - - Hỗn hợp chuẩn 4 chất (AOZ, AMOZ, SEM, AHD) 1 mg/l: hút lần lượt 1 ml chuẩn AOZ 10 mg/l, AMOZ 10 mg/l, AHD 10 mg/l, SEM 10 mg/l định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 3 tháng. - - Hỗn hợp chuẩn 4 chất (AOZ, AMOZ, SEM, AHD) 20 μg/l: hút 200 μl hỗn hợp chuẩn 4 chất (AOZ, AMOZ, SEM, AHD) định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 1 tháng. - - d4-AOZ 1000 mg/l: Cân 10 mg ± 0,1 mg d4-AOZ định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. - - d4-AOZ 10 mg/l: hút 100 μl d4-AOZ 1000 mg/l định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. - - d5-AMOZ 1000 mg/l : Cân 10 mg ± 0,1 mg d5-AMOZ định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 9 - - d5-AMOZ 10 mg/l: Hút 100 μl d5-AMOZ 1000 mg/l định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 6 tháng. - - Hỗn hợp nội chuẩn (d4-AOZ, d5-AMOZ, d2-AHD.HCl,13C15N2-SEM.HCl) 1 mg/l: hút lần lượt 1 ml chuẩn d4-AOZ 10 mg/l, d5-AMOZ 10 mg/l, d2- AHD.HCl 10 mg/l và 13C15N2-SEM.HCl 10 mg/l định mức bằng methanol vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 3 tháng. - - Hỗn hợp nội chuẩn (d4-AOZ, d5-AMOZ, d2-AHD.HCl,13C15N2-SEM.HCl) 20 μg/l: hút lần lượt 200 μl hỗn hợp nội chuẩn (d4-AOZ, d5-AMOZ, d2- AHD.HCl, 13C15N2-SEM.HCl) 1 mg/l vào bình định mức 10 ml. Bảo quản ở - 200C sử dụng được trong 1 tháng. 6. Tiến hành phân tích 6.1 Mẫu thử nghiệm Nếu lượng mẫu dưới 500g: Đem tất cả đi xay nhuyễn để đồng nhất mẫu. Sau đó chia lượng mẫu đã xay thành 2 phần bằng nhau. Một phần đem phân tích, phần còn lại đem lưu mẫu. Nếu lượng mẫu trên 500g: Trải mẫu đều trên khay hình chữ nhật. Chia mẫu theo nguyên tắc đường chéo, lấy 2 phần mẫu đối diện, thực hiện như vậy đến khi phần mẫu mang xay còn khoảng 200g÷500g mẫu. Sau đó, đem xay nhuyễn để đồng nhất mẫu Phần mẫu còn lại đem lưu mẫu. Cân khoảng 2-3g mẫu đã được đồng nhất cho vào ống ly tâm 50 mL. Lưu ý: Mẫu kiểm soát dương tính có thể được bổ sung một hoặc hai hoặc cả bốn chất trong họ Nitrofuran, (chuẩn bổ sung phải nằm trong khoảng tuyến tính của đường chuẩn, để yên 30 phút. Sau đó, tiến hành xử lý mẫu như quy trình ) 6.2 Xử lý mẫu Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 10 [...]... TÍNH KẾT QUẢ Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 13 Xây dựng đường chuẩn biểu thị mối quan hệ giữa diện tích pic ion định lượng với nồng độ chuẩn (đã quy đổi về độ tinh khiết) của các chất nitrofuran tương ứng (bảng 1) Lượng chất cần phân tích có mặt trong mẫu kiểm được tính theo công thức sau: Hàm lượng nitrofuran: X Nitrofuran = C0 × 1 m Hàm lượng các metabolite... 0,568 309785 0,947 522875 [165.999166.001] [192.199192.201] MA: 114930 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 26 0,2 MA: 105212 KS2-1 KS2-1 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 27 d Nitrofurantoin Bảng 9, Độ lặp lại của phương pháp Mẫu Blank CNITROFURANTOIN_mẫu(*) CoNITROFURANT O ppb 0 µg/L 0 KS1_1 KS1_2 CoAHD µg/L 0 Diện tích (m/z AreaTB... lượng mẫu cân là 2 g Bảng 4, Đường chuẩn Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 20 AOZ CoAOZ, Diện µg/L tíchTB 0,218 86909 0,363 145465 0,727 284936 1,453 632584 2,907 1198506 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 21 [103.999104.001] [133.999134.001] MA: 76927 MA: 146927 KS2-1 KS2-1 b Furaltadone Bảng 5: Độ lặp lại của phương pháp Các. .. 77,4 7,8 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 31 Xác định khoảng tuyến tính: Từ các kết quả thu được (mục 1), ứng với nồng độ ≤ 5 ppb, bốn chất nitrofuran cho độ tuyến tính tốt, 5 Xác định giới hạn phát hiện của phương pháp: Giới hạn phát hiện (LOD) chung cho 04 chất họ nitrofuran của phương pháp cho tất cả nền mẫu thức ăn chăn nuôi là 1 ppb Bảng 13 Xác định giới... trên lượng mẫu cân là 2 g Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 23 Bảng 6, Đường chuẩn AMOZ CoAMOZ, µg/L AreaTB 0,339 85564 0,679 190115 1,018 295442 1,697 572464 3,394 1297477 [261.900261.902] [290.079291.081] MA: 50212 MA: 186471 KS2-1 KS2-1 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 24 c Nitrofurazone Bảng 7, Độ lặp lại của phương pháp. .. như nhau Do đó, có thể sử dụng đường chuẩn nitrofuran để định lượng cho cả nitrofuran và metabolite 4.2 Đánh giá độ đúng và độ lặp lại của phương pháp: 4.2.1 Độ lặp lại của phương pháp a Furazolidone: Bảng 3, Độ lặp lại của phương pháp Mẫu CFURAZOLIDONE_mẫu (*) CoFURAZOLIDONE, CoAOZ Diện tích AreaTB Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản RSD 19 ppb Blank 0 µg/L µg/L... 198 SEM 75 Nitrofurantoin 238 AHD 115 324.29 Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 15 III BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ PHƯƠNG PHÁP 1 Các thông số cần đánh giá: Mục này được thực hiện nhằm đánh giá độ độ lặp lại của thiết bị, vùng tuyến tính, hiệu suất thu hồi và giới hạn phát hiện của phương pháp - được thực hiện lần đầu tiên bởi người phát triển phương pháp Trong quá trình... tích Furazolidone hay AOZ Furaltadone AMOZ hay Chất đo đạc Ion bị phân Ion định Ion mảnh lượng nhận 236 134 104 2_NB_AMOZ 335 291 xác 261.9 2_NB_AOZ Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 14 Nitrofurazone hay SEM Nitrofurantoin AHD hay 2_NB_SEM 209 166 2_NB_AHD 249 134 192.2 104 Bảng 2 Phân tử khối các chất họ nitrofuran Nitrofuran M1 Metabolite M2 Furazolidone 225.16... định giới hạn phát hiện của phương pháp: Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 16 Giới hạn phát hiện của phương pháp được xác định thông qua: - Mẫu trắng được bổ sung Furazolidone, Furaltadone, Nitrofurazone và Nitrofurantoin tại nồng độ nhỏ nhất mà máy có thể phát hiện (tỉ lệ tín hiệu/nhiễu S/N phải thỏa điều kiện : 3 ≤ S/N ≤ 10) - Khối lượng mẫu phân tích là 2 g 2... Nitrofurazone, Nitrofurantoin và các metabolite tương ứng sẽ được bổ sung Furazolidone, Furaltadone, Nitrofurazone và Nitrofurantoin với nồng độ ≤ 1 ppb (thực hiện 02 lần), để yên 1 giờ Sau đó, tiếp tục thuỷ phân và dẫn xuất hoá theo qui định tại E.3 (KTSK 81) 4 Kết quả Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 17 4.1 So sánh quá trình dẫn xuất hóa của nitrofuran và metabolite . lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 14 Nitrofurazone hay SEM 2_NB_SEM 209 166 192.2 Nitrofurantoin hay AHD 2_NB_AHD 249 134 104 Bảng 2. Phân tử khối các chất họ nitrofuran Nitrofuran M 1 Metabolite. dưỡng. Trộn nitrofuran với thức ăn, theo tỉ lệ thích hợp sẽ giúp cho gà và lợn còn tăng trọng nhanh. Các phương pháp xác định dư lượng hợp chất họ nitrofuran trong thủy sản 3 Nitrofuran ảnh. lượng kháng sinh nhóm nitrofuran trong thực phẩm Từ năm 2002 – 2003 nitrofuran thường xuyên được phát hiện thấy trong thịt gia cầm và các sản phẩm nuôi trồng thủy sản nhập khẩu vào các nước