TRƯỜNG: CAO ĐẲNG KINH TẾ CÔNG NGHỆ TP HCM KHOA: CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO Thực Hành : SINH HỌC TẾ BÀO TP.HCM, Tháng 9/2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO 1 2 TRƯỜNG CAO ĐẲNG KINH TẾ - CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO Thực Hành : SINH HỌC TẾ BÀO GVHD: Thạc sĩ LÊ QUỲNH HOA SVTH: Chung Thuận Nguyên 1021090113 Quách Lê Minh 1021010002 Trần Thị Thùy Dương 1021090036 Phạm Thị Minh 1021090059 Huỳnh Lượm 1021090138 Tp. Hồ Chí Minh – 2011 3 Mục Lục Mục Lục 3 NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN 6 MỞ ĐẦU 7 Bài 1: Quan Sát Tế Bào 8 I. QUAN SÁT TẾ BÀO 8 1. Tế bào ở nhân không điển hình ở tảo lam 8 1.1. Cách làm tiêu bản 8 1.2. Quan sát 8 1.3. Lục lạp trong tế bào lá cây rong xương gà 8 1.3.1. Giới thiệu 8 1.3.2. Cách làm tiêu bản 9 1.4. Sắc lạp và màng bảo vệ của tế bào biểu bì quả ớt chin 9 1.4.1. Giới thiệu 9 1.4.2. Cách làm tiêu bản 10 1.4.3. Quan sát 10 1.2.4. Vô sắc lạp ở tế bào biểu bì là khoai lang 10 1.2.5. Vật thể tích lũy trong không bào 11 1.3. Kết luận và nhận xét 13 BÀI: 2 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC ION KALI VÀ CANXI LÊN ĐỘ NHỚT CỦA CHẤT NGUYÊN SINH 14 2.1. Đối tượng hóa chất và dụng cụ thí nghiệm 14 2.1.1. Đối tượng 14 2.1.2. Hóa chất 14 2.1.3. Dụng cụ thí nghiệm 14 2.2. Cách tiến hành 14 2.3. kết quả 15 2.4. Kết luận và nhận xét 16 BÀI 3: HIỆN TƯỢNG CO NGUYÊN SINH VÀ PHẢN CO NGUYÊN SINH 18 3.1Đối tượng, hoá chất và dụng cụ thí nghiệm 18 3.1.1Đối Tượng 18 3.1.2Hoá chất 18 3.1.3Dụng Cụ Thí Nghiệm 18 3.2Cách tiến hành 19 3.3Kết luận 19 BÀI 5: TÍNH THẤM CỦA TẾ BÀO CHẤT SỐNG VÀ CHẾT ĐỐI VỚI DỊCH BÀO 20 5.1Đối tượng, hoá chất và dụng cụ thí nghiệm 20 5.1.1Đối tượng 20 5.1.3Dụng cụ thí nghiệm 20 5.2Cánh tiến hành 20 5.3 Kết Luận 21 BÀI 6: XÁC ĐỊNH ÁP SUẤT THẨM THẤU CỦA TẾ BÀO THỰC VẬT BẰNG PHƯƠNG PHÁP CO NGUYÊN SINH 23 6.1.1 Đối tượng 23 6.1.2 Hóa chất 23 4 6.1.3 Dụng cụ thí nghiệm 23 6.1.4 Cách tiến hành 23 6.1.5 Kết luận và nhận xét 24 BÀI 7 : XÁC ĐỊNH SỨC HÚT NƯỚC CỦA TẾ BÀO THỰC VẬT BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐƠN GIẢN 27 7.1 ĐỐI TƯỢNG, HÓA CHẤT VÀ DỤNG CỤ THÍ NGHIỆM 27 7.1.1 Đối tượng 27 7.1.2Hóa chất 27 7.1.3Dụng cụ thí nghệm 27 7.2 CÁCH TIẾN HÀNH 27 7.3 KẾT QUẢ 28 7.3.1 KẾT LUẬN VÀ NHẬN XÉT 28 BÀI 8: RÚT SẮC TỐ LÁ VÀ THỰC HIỆN MỘT SỐ PHẢN ỨNG LÝ HÓA CỦA DIỆP LỤC 30 8.1. Đối tượng, hóa chất và dụng cụ thí nghiệm 30 8.1.1. Đối tượng 30 8.1.2. Hóa chất 30 8.1.3. Dụng cụ thí nghiệm 30 8.2. Cách tiến hành 31 8.2.1. Quan sát hiện tượng huỳnh quang 31 8.2.2. Xà phòng hóa diệp lục bằng kiềm 32 8.2.3. Tạo pheophytin và khử lien kết kim loại 32 BÀI 9: TÍNH CHẤT CẢM QUAN CỦA DIỆP LỤC 34 9.1. Đối tượng, hóa chất và dụng cụ thí nghiệm 34 9.1.1. Đối tượng 34 9.1.2. Hóa chất 34 9.1.3. Dụng cụ thí nghiệm 34 9.2. Cách tiến hành 34 9.3. Kết luận và giải thích 35 BÀI 10 : PHÁT HIỆN TINH BỘT VÀ PROTEIN HÌNH THÀNH TRONG QUANG HỢP. .37 10.1ĐỐI TƯỢNG, HÓA CHẤT VÀ DỤNG CỤ THÍ NGHIỆM 37 10.1.1Đối tượng 37 10.1.2Hóa chất 37 10.1.3 Dụng cụ thí nghiệm 37 10.2CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH 37 10.2. 1Phát hiện tinh bột 37 10.3 KẾT LUẬN VÀ NHẬN XÉT 38 5 LỜI CẢM ƠN Lời cảm ơn xin chân thành gửi đến Ban Giám Hiệu và quý thầy cô trường Cao Đẳng Kinh Tế Công Nghệ đã tận tình giảng dạy,truyền đạt những kiến thức bồ ích cho chúng em .Đặc biệt là cô Lê Quỳnh Hoa đã tạo điều kiện thuận lợi,cho chúng em những ý kiến bổ ích trong bài báo cáo này. Bài báo cáo khó tránh khỏi những thiếu sót.Kính mong cô đóng góp ý kiến để bài báo cáo được hoàn chỉnh hơn. Nhóm thực hiện 6 NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN 7 MỞ ĐẦU  Lược Sử Ra Đời Và Phát Triểm Của Sinh Học Tế Bào Sử dụng kính hiển vi để nghiêm cứu các vi sinh vật, phát hiện ra tế bào và xây dựng học thuyết tế bào vào những năm 1838 – 1839 đã khai sinh ra Tế bào học (Cytology) . F.Engels đã từng đánh giá học thuyết tế bào là một trong ba phát kiến vĩ đại của thế kỷ XIX ( cùng với học thuyết tiến hoá của Darwin và thuyết bảo tồn năng lượng ). Học thuyết tế bào đã gây ảnh hưởng to lớn đối với các chuyên nghành sinh học và từ đó hình thành các chuyên nghành mới như giải phẩu hiển vi, sinh lý tế bào, di truyền tế bào, bệnh học tế bào Một dẩn chứng rõ ràng nhất là các quy luật của Mendel được phát hiện từ năm 1865 nhưng chưa được công nhận vì chưa có cơ sở tế bào. Các cơ sở tế bào của quy luật Mendel như cấu trúc nhiễm sắc thể của tế bào, hiện tượng phân bào nguyên nhiễm, phân bào giảm nhiễm, thụ tinh cũng như các tập tính của nhiễm sắc thể qua phân bào và thụ tinh chỉ được phát hiện sau thời Mendel từ năm 1870 – 1890. Vì vậy vào năm 190o, quy luật Mendel được “ tái phát hiện “ bởi ba nhà nghiêm cứu là De Vries, Corens, và Tchermark đã được công nhận rộng rãi vì đã có cơ sở tế bào học của nó − Sang thế kỷ XX, Tế bào học phát triểm nhanh chóng không chỉ nhờ ứng dụng các phương pháp hiện đại như ly tâm siêu tốc, kính hiển vi điện tử, nuôi cấy tế bào mà còn nhờ sự tích hợp giữa Tế bào học với Di truyền học, sinh học phân tử, sinh học phát triểm, Miễm dịch học để ra đời các chuyên nghành trung gian như Di truyền tế bào,Tế bào học phân tử, Miển dịch học tế bào mà bản thân Tế bào học trước đây chỉ bó hẹp nghiêm cứu cấu trúc của tế bào thì nay cũng được mở rộng nghiên cứu các lĩnh vực sinh lý, di truyền, tiến hoá và đi sâu vào cơ chế phân tử của tế bào, của các cấu trúc tế bào và được gọi là sinh học tế bào( cell Biologer) 8 Bài 1: Quan Sát Tế Bào I. QUAN SÁT TẾ BÀO 1. Tế bào ở nhân không điển hình ở tảo lam 1.1. Cách làm tiêu bản - Lấy một vài sợi tảo lam, để lên lame, nhỏ lên trên các sợi tảo một giọt nước, đậy lame lên, quan sát. 1.2. Quan sát - Ở vật kính 10x, chọn trên tiêu bản đám nào thưa thớt đưa vào vi trường rồi chuyển sang vật kính 40x. Quan sát một sợi tảo có màu xanh, gồm nhiều đốt, mỗi đốt là một tế bào. Trong tế bào, các chất trong bào tương phân tán xung quanh tế bào, màu xanh sẫm, giữa tế bào có một vùng sáng đó là vùng nhân chưa điển hình. Cuối cùng xem sợi tảo dưới vật kính 100x (sử dụng dầu soi kinh hiển vi) - Tảo lam trong điều kiện đang hoạt động có cử động uốn lượn hình sin. 1.3. Lục lạp trong tế bào lá cây rong xương gà 1.3.1. Giới thiệu - Loại không có màu gọi là vô sắc lạp, loại có màu gọi là sắc lạp và lục lạp. Các lạp thể này có nguồn gốc chung và có thể biến đổi từ dạng này sang dạng khác. Chẳng hạn khi lục lạp biến thành sắc lạp cho hợp với ánh sáng yếu thì lá xanh biến thành lá đỏ hay lá vàng. Còn vô sắc lạp thì khi tích lũy diệp lục có thể biến đổi thành lục lục lạp và cũng có thể trở thành sắc lạp. - Lục lạp là cơ quan khởi nguyên tổng hợp nên Cacbonhydrat trong tế bào thực vật. Chúng có mặt trong các lá cây xanh. Ở tảo, lục lạp có nhiều dạng gọi là sắc thể, cũng có chức năng tổng hợp và tích lũy tinh bột. 9 - Dưới kính hiển vi quang học, lục lạp có dạng hình cầu hoặc hình bầu dục, màu lục sáng, kích thước vài Micromet. Bên trong lục lạp chứa chất nền và các hạt nhỏ bắt màu thẩm hơn. Phía ngoài là hai lớp màng mỏng. 1.3.2. Cách làm tiêu bản Ngắt lấy một đoạn lá ở phần ngoài của chồi rong, đặt lên phiến kính, nhỏ vào một giọt nước, đậy lamen, đưa ra quan sát. Chú ý: Trước đó lá rong được ngâm trong nước ấm từ 370 – 400, hoặc để trong chậu có ánh nắng, hoặc có thể nhỏ một vài giọt ancol để kích động sự vận chuyển của mọi chất của tế bào và hạt diệp lục. 1.3.2. Quan sát - Quan sát ở vật kính 10x và 40x. - Ở vật kính 10x, di chuyển tiêu bản để quan sát những tế bào ở vùng mép của lá rong, vì ở mép lá rong số ít hơn nên thưa hơn ở phía trong của lá (có khoảng 1 – 2 lớp), hơn nữa tế bào trong hơn, dễ nhìn hơn. - Sau khi đã nhỉn thấy ở vật kính 10x, chuyển sang quan sát ở vật kính 40x. Tế bào có dạng hình chữ nhật, xếp hang như những viên gạch, trong bào tương của tế bào chứa các hạt lục lạp hình tròn hay hình bầu dục sáng màu. - Quan sát kỹ sẽ thấy ở một số đám tế bào có sự chuyển động của các lục lạp. Sự chuyển động này là chuyển động thụ động theo dòng nội chất của tế bào. Các lục lạp đi chuyển men theo màng tế bào và đi theo một đường vòng hoặc đi rồi chuyển trở lại. 1.4. Sắc lạp và màng bảo vệ của tế bào biểu bì quả ớt chin 1.4.1. Giới thiệu - Sắc lạp không có chứa diệp lục mà chứa các chất màu khác như màu vàng đỏ, da cam và thường gặp là chất màu đỏ vàng Caroteoit. Có thể thấy các sắc lạp lớn trong tế bào biểu bì quả ớt chin, trong cánh hoa hồng, trong củ cà rốt v.v…. - Sắc lạp được tạo thành từ tiền lạp thể hoặc từ lục lạp. Nếu từ tiền lạp thể thì chất màu kết tinh trong tiền lạp thể và làm biến dạng nó. Thường các tinh thể Carotenoide hình kim làm rách màng của sắc lạp và hình chóp tinh thể nhô hẳn vào trong bào tương của tế bào. Nếu như phát sinh từ lục lạp thì trong lục lạp Carotenoit tích lũy dần, các hạt nhỏ tiêu biến đi, các thể hình thoi hay hình liềm 10 được tạo thành từ hệ thống bán mỏng. Đôi khi Carptenoit ở dạng hòa tan trong các giọt dầu. Sắc lạp chứa các Vitamin A,D và các kim loại Fe, Cu, Mn,Zn. - Về chức năng, sắc lạp tổng hợp Gluxit nhưng sử dụng ánh sáng mà lục lạp không dùng hoặc là ánh sáng sau khi đã xuyên qua các tầng nước bề mặt biển hoặc tầng mây khí quyển những mùa nắng yếu. 1.4.2. Cách làm tiêu bản - Lấy dao hoặc lưỡi dao lam cắt một mảnh vỏ quả ớt chín thật mỏng (loại ớt quả to). Dùng dao cạo bỏ phần thịt của vỏ quả, giữ lại phần biểu bì, đặt lên phiến kính, nhỏ lên một giọt glycerin, đậy lá kính và quan sát. 1.4.3. Quan sát - Quan sát ở vật kính 10x và 40x, nếu được sử dụng vật kính 100x để xem. - Quan sát ở vật kính 10x phía mép của lá cắt biểu bì vỏ quả ớt (chỗ lát cắt mỏng), sau đó chuyển sang vật kính 40x để quan sát. Các tế bào biểu bì quả ớt chín có hình đa giác, nhưng thường là sáu cạnh. Trong bào tương có các hạt sắc lạp hình thoi màu đỏ da cam, màng tế bào biểu bì quả ớt là một mảng dày, những rãnh này gọi là rãnh liên bào. - Muốn nhìn rõ rãnh liên bào phải nhấp nháy ốc vi cấp và hạ hộp tụ quang xuống một chút ( hoặc giảm ánh sáng một chút). 1.2.4. Vô sắc lạp ở tế bào biểu bì là khoai lang Giới thiệu Lạp bột là dạng vô sắc lạp hay gặp nhất. Trong lạp bột tích tụ các thể tinh bột hình cầu. Dưới kính hiển vi các tinh bột là những thể vùi chiết quang mạnh và có nhiều lớp. Một số vô sắc lạp khác tham gia vào việc tổng hợp chất cao su, dầu và các sản phẩm khác của tế bào. Cách làm tiêu bản Bóc lấy lớp biểu bì mặt dưới của lá khoai lang, đưa lên phiến kính, nhỏ vào một giọt nước rồi đậy lamen lại. [...]... 10x Di chuyển tiêu bản để tìm miền có những tế bào biểu bì trong, có một lớp tế bào, không có diệp lục Ở vật kính 40x: Hình dạng tế bào biểu bì có màng nhiều cạnh, do màng tế bào mềm mà tạo thành, màng tế bào có hình dạng không nhất định, giữa các tế bào khí khổng hình hai hạt đậu quay bụng vào nhau, để một khe hở Trong phần bào tương của tế bào biểu bì và tế bào khí khổng có những hạt tròn nhỏ, sang... thấy xuất hiện không bào Không bào có hình đa dạng: Hình cầu, mạng lưới, tổ sâu… Ở một số tế bào thực vật già, không bào chiếm gần hết tế bào, bào trương chỉ còn một lớp mỏng nằm giáp một phía của màng tế bào Không bào tham gia quá trình trao đổi nước nhờ áp suất thẩm thấu Thành phần và nồng độ các chất hòa tan trong dung dịch không bào quyết định áp suất thẩm thấu của tế bào thực vật Còn làm nhiệm... 40x Các tế bào vỏ củ hành khô hình đa diện, trong phần bào tương và không bào (đã teo khô) có các tinh thể oxalate canxi hình que hoặc hình chữ nhật dài nhỏ, nằm riêng lẻ hoặc chồng lên nhau Những tinh thể này lúc nhỏ nằm trong không bào, tích lũy trong bào tương của tế bào Sau đó khi tế bào lớn lên thì tinh thể này quá lớn, phá vở không bào tích lũy chúng, trở thành những thể vùi trong tế bào 1.2.6... nguyên sinh và tăng độ nhớt, làm giảm hoạt động sống Mẫu chứa ion hóa trị II, III, … độ nhớt của tế bào lớn, tế bào chất tách khỏi thành tế bào một cách khó khăn Nên thời gian co nguyên sinh lõm sâu hơn + Canxi ảnh hưởng đến tính thấm của màng, sự vận động của tế bào chất, hoạt động của enzim, phân bào và nhiều quá trình khác 16 Hình: Co nguyên sinh lồi Hình: Co nguyên sinh lõm 17 Hình: Co nguyên sinh. .. co nguyên sinh nửa không 3.3Kết luận − Co nguyên sinh là hiện tượng là hiện tượng nước rút khỏi thể nguyên sinh, thể nguyên sinh của tế bào co lại và tách ra khỏi vách tế bào − Khi nhỏ dung dịch NaCl vào tế bào hành thì NaCl là môi trường ưu trương còn tế bào hành là môi trường nhược trương, nước sẽ di chuyện từ môi trường nhược trương đến môi trường ưu trương và xảy ra hiện tượng co nguyên sinh − Với... vỏ (vì có tinh bột) 1.2.5 Vật thể tích lũy trong không bào Giới thiệu Không bào có cấu tạo là các tuối có màng giống như màng sinh chất, chứa đầy nước và các chất hòa tan hoặc các thể hữu hình Chúng rất phát triển ở tế bào thực vật Ở động vật, tế bào cũng có không bào nhưng ít và rất nhỏ thường thấy ở nguyên sinh động vật và tế bào gan Ở một số tế bào động vật khác, trong một số điều kiện đặc biệt như... luận: - Sự xâm nhập của nước vào tế bào được xác định bởi chỉ số hút nước của tế bào, đại lượng này phụ thuộc độ no nước của tế bào Ở trạng thái khép hoàn toàn (bắt đầu co nguyên sinh) , sức trương nước (T) lúc này bằng 0 (T = 0) và sức hút nước của tế bào lúc này đạt cực đại (S = P), tức là bằng áp suất thẩm thấu Khi tế bào 28 thực vật bão hòa nước, sức hút nước của tế bào bằng 0 (S = 0), còn sức hút... nguyên sinh Thời gian co nguyên sinh Vào dung dịch Góc Lõm Lồi 20 giây 2 phút 3.5 phút 4.5 phút 20 giây 2.5 phút 4 phút 5 phút 1 NaCl 2 CaCl2 Quan sát tế bào ta thấy chất nguyên sinh tách dần dần khỏi vách tế bào và cuối cùng thành những túi tròn hai đầu Đó là hiện tượng co nguyên sinh lồi Dùng đồng hồ bấm giây theo dõi thời gian tế bào chuyển từ dạng co nguyên sinh lõm sang dạng co nguyên sinh lồi... 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 dd Độ co Phần Co Co Co Đẳng Co Nguyên nguyên lớn tế nguyên nguyên nguyên trương nguyên sinh sinh bào bị sinh sinh 1/4 sinh xảy sinh xảy chất co 1/3 ra yếu ra rất chưa nguyên yếu tách hết sinh ra khỏi thành tế bào Hình vẽ 6.1.5 Kết luận và nhận xét Nồng độ đẳng trương là 0.3M Tính ấp suất thẩm thấu dịch bào theo phương trình Van- hop P=R*T*C*i trong đó : P: là áp suất thẩm thấu... làm nhiệm vụ tích lũy nhiều chất dự trữ như Cacbonhydrat, protid và một số sản phẩm của tế bào 11 Các không bào hình thành tử ẩm thực bào hay hình thành đế bao bọc các thành phần không còn hoạt động sống trong bào tương nữa, gọi là không bào tiêu hóa hay không bào tự tiêu Cách làm tiêu bản Vỏ hành khô bóc ở củ hành, lấy phần vảy màu nâu bóng, chon vảy mỏng và trong, cắt ra từng mảnh nhỏ cở 0.5cm* 0.5cm, . nhiều quá trình khác. 17 Hình: Co nguyên sinh lồi Hình: Co nguyên sinh lõm 18 Hình: Co nguyên sinh góc BÀI 3: HIỆN TƯỢNG CO NGUYÊN SINH VÀ PHẢN CO NGUYÊN SINH 3.1Đối tượng, hoá chất và dụng cụ. Quá trình co nguyên sinh xảy ra nhanh hơn mẫu 2 Các ion của mối khoáng có mặt trong môi trường ảnh hưởng lên hệ keo của chất nguyên sinh, có thể thay đổi độ nhớt chất nguyên sinh. * Các ion hóa. theo dõi thời gian tế bào chuyển từ dạng co nguyên sinh lõm sang dạng co nguyên sinh lồi. Đó là thời gian co nguyên sinh. Thời gian co nguyên sinh càng lâu thì độ nhớt của tế bào chất càng lớn. 16 2.4.