BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BỘ Y TẾ CHƯƠNG TRÌNH KHCN CẤP NHÀ NƯỚC KC 10/06-10 BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI/DỰ ÁN Đề tài: NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT VẮC XIN ROTA SỐNG, UỐNG GIẢM ĐỘC LỰC PHÒNG BỆNH TIÊU CHẢY Ở VIỆT NAM Mã số: KC.10.03/06 – 10 Cơ quan chủ trì đề tài/dự án: Trung tâm Nghiên cứu Sản xuất Vắc xin Sinh phẩm Y tế Chủ nhiệm đề tài/dự án: PGS TS Lê Thị Luân 7898 Hà Nội – 2010 BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BỘ Y TẾ CHƯƠNG TRÌNH KHCN CẤP NHÀ NƯỚC KC 10/06-10 BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI/DỰ ÁN Đề tài: NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT VẮC XIN ROTA SỐNG, UỐNG GIẢM ĐỘC LỰC PHÒNG BỆNH TIÊU CHẢY Ở VIỆT NAM Mã số: KC.10.03/06 – 10 Chủ nhiệm đề tài/dự án: Cơ quan chủ trì đề tài/dự án: (ký tên) (ký tên đóng dấu) PGS.TS Lê Thị Luân Ban chủ nhiệm chương trình (ký tên) Nguyễn Đăng Hiên Bộ Khoa học Cơng nghệ (ký tên đóng dấu gửi lưu trữ) Hà Nội – 2010 TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT VẮC XIN VÀ SINH PHẨM Y TẾ _ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Hà Nội, ngày tháng năm 2010 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI/DỰ ÁN SXTN I THÔNG TIN CHUNG Tên đề tài/dự án: Nghiên cứu Qui trình cơng nghệ sản xuất vắc xin Rota sống, uống giảm độc lực phòng bệnh tiêu chảy Việt Nam Mã số đề tài, dự án: KC.10/06-10 Thuộc: - Chương trình (tên, mã số chương trình): Nghiên cứu ứng dụng phát triển cơng nghệ phục vụ bảo vệ chăm sóc sức khỏe cộng đồng Chủ nhiệm đề tài/dự án: Họ tên: Lê Thị Luân Ngày, tháng, năm sinh: 17/5/1962 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Phó giáo sư, tiến sĩ Chức danh khoa học: Phó Giáo sư Chức vụ Phó Giám đốc Điện thoại: Tổ chức: 9710581 Nhà riêng: 628528 Mobile: 0904001727 Fax: 8213203 E-mail: luanpolyvac@gmail.com poliovac@fpt.vn Tên tổ chức công tác:Trung tâm Nghiên cứu Sản xuất Vắc xin Sinh phẩm Y tế Địa tổ chức: 135 Lò Đúc, Hai Bà Trưng, Hà Nội Địa nhà riêng: Phòng 303 Khu tập thể Viện kiểm sát 622/11 Minh Khai, Hai Bà Trưng, Hà Nội Tổ chức chủ trì đề tài/dự án: Tên tổ chức chủ trì đề tài: Trung tâm Nghiên cứu Sản xuất Vắc xinv Sinh phẩm Y tế Điện thoại: 8211782 Fax: 38213203 E-mail: poliovac@fpt.vn Địa chỉ: 135 Lò Đúc, Hai Bà Trưng, Hà Nội Họ tên thủ trưởng tổ chức: Nguyễn Đăng Hiền Số tài khoản: 93101186 Ngân hàng: Kho bạc Nhà nước Hai Bà Trưng, Hà Nội Tên quan chủ quản đề tài: Trung tâm Nghiên cứu Sản xuất Vắc xin Sinh phẩm Y tế II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực đề tài/dự án: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng 04/ năm 2007 đến tháng 12/ năm 2008 - Thực tế thực hiện: từ tháng 01/năm 2007 đến tháng 12/năm 2008 Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 4.029,40 trđ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ SNKH: 1.900 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: 2.129,4 tr.đ + Tỷ lệ kinh phí thu hồi dự án (nếu có): b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn SNKH: Số TT Theo kế hoạch Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) 2007 2008 (Tr.đ) 1.448,28 451,72 Thực tế đạt Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) 2007 2008 (Tr.đ) 1.448,28 451,72 Ghi (Số đề nghị toán) 1.448,28 451,72 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đơn vị tính: Triệu đồng T T Nội dung khoản chi Trả công lao động (khoa học, phổ thông) Nguyên, vật liệu, lượng Thiết bị, máy móc Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác Tổng cộng Theo kế hoạch Tổng SNKH Thực tế đạt 786,54 786,54 Nguồn khác 1.456,86 574,56 590 750 446 4.029,4 Tổng SNKH 786,54 786,54 Nguồn khác 882,3 1.456,86 574,56 882,3 120 470 750 590 750 120 470 750 418,9 1.900 27,1 2.129,4 446 4.029,4 418,9 1.900 27,1 2.129,4 Các văn hành trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ công đoạn xác định nhiệm vụ, xét chọn, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì đề tài, dự án (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) Số, thời gian Số Ghi ban hành văn Tên văn TT Số 245/QĐ- Quyết định việc thành lập Hội đồng Khoa học công nghệ cấp nhà BKHCN ngày nước tư vấn tuyển chọn, xét chọn tổ chức cá nhân chủ trì thực 20/2/2006 Đề tài/Dự án SXTN cấp Nhà nước để thực kế hoạch năm 2006 thuộc lĩnh vực Y Dược Sức khỏe cộng đồng Ngày 7/3/2006 Biên họp Hội đồng KH&CN đánh giá hồ sơ đăng ký tuyển chọn, xét chọn tổ chức cá nhân chủ trì đề tài, dự án SXTN cấp nhà nước Số 775/QĐ- Quyết định phê duyệt tổ chức cá nhân trúng tuyển chủ trì thực BKHCN ngày đề tài, dự án SXTN năm 2006 thuộc lĩnh vực Y dược sức khỏe 19/4/2006 cộng đồng Số 2096/QĐ- Quyết định phê duyệt Chủ nhiệm, Cơ quan chủ trì kinh phí BKHCN ngày đề tài, dự án bắt đầu thực năm 2006 thuộc Chương trình 22/9/2006 KHCN trọng điểm cấp nhà nước 2006-2010 “Nghiên cứu ứng dụng phát triển cơng nghệ phục vụ bảo vệ, chăm sóc nâng cao sức khỏe cộng đồng, mã số KC.10/06-10 Số 03/2006/HĐ- Hợp đồng nghiên cứu khoa học phát triển công nghệ ĐTCTKC.10/06-10 ngày 11/4/2007 Tổ chức phối hợp thực đề tài, dự án: Số TT Tên tổ chức Tên tổ chức Nội dung Sản phẩm chủ yếu đăng ký theo tham gia tham gia chủ yếu đạt Thuyết minh thực Viện Công Viện Công Xác định sinh học phân Kết nghiên cứu nghệ sinh học nghệ sinh tử virus rota hệ gốc trình tự gen đoạn học giống vắc xin VP4, VP7 Ghi chú* Cá nhân tham gia thực đề tài, dự án: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 người kể chủ nhiệm) Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Lê Thị Luân Tên cá nhân tham gia thực Lê Thị Luân Đinh Duy Kháng Đinh Duy Kháng Nguyễn Đăng Hiền Nguyễn Đăng Hiền Nguyễn Thúy Hường Nguyễn Thúy Hường Ngô Thu Hường Ngô Thu Hường Nguyễn Thị Mai Nguyễn Thị Số TT Nội dung tham gia Chủ nhiệm đề tài Sản phẩm chủ yếu đạt Quản lý việc thực đề tài theo đề cương phê duyệt; Tham gia tạo chủng giống gốc, chủng sản xuất, văcxin; Viết báo cáo tổng kết, báo khoa học, đào tạo cán Xác định Trình tự gen 4, 6, 9, 10 trình tự gen 4, 6, 9, 10 Sản xuất tế Tiêu chuẩn sở, qui bào, xây dựng trình sản xuất chủng giống qui trình, xây văcxin dựng tiêu chuẩn cho chủng giống văcxin Hoàn thiện hồ Hồ sơ chủng, hồ sơ sản sơ chủng, hồ xuất văcxin sơ sản xuất văcxin Kiểm định tác Kết kiểm định tác nhân ngoại nhân ngoại lai văc xin lai, kiểm định bán thành phẩm vắc xin bán thành phẩm Kiểm định tác Kết kiểm định tác Ghi chú* Hương Mai Hương Trần Bích Hạnh Trần Bích Hạnh Trần Hồng Thủy Trần Hồng Thủy Nguyễn Nữ Anh Thu Nguyễn Nữ Anh Thu nhân ngoại lai, kiểm định vắc xin bán thành phẩm; Xác định trình tự gen Kiểm định vắc xin bán thành phẩm, thành phẩm Sản xuất môi trường cho sản xuất kiểm định hệ thống chủng vắc xin Lưu giữ bảo quản hệ thống chủng vắc xin nhân ngoại lai, vắc xin bán thành phẩm, trình tự gen Kết kiểm định vắc xin bán thành phẩm, thành phẩm Các loại môi trường cho sản xuất kiểm định hệ thống chủng vắc xin Hồ sơ lưu giữ bảo quản hệ thống chủng vắc xin Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Cử 02 cán sang Trung tâm Kiểm sốt Phịng ngừa bệnh tật (CDC), Atlanta, Mỹ đào tạo kiểm tra chất lượng hệ thống chủng giống sản xuất vắc xin vắc xin thời gian 60 ngày với kinh phí 256 triệu đồng Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) 02 cán sang Trung tâm Kiểm sốt Phịng ngừa bệnh tật (CDC), Atlanta, Mỹ đào tạo kiểm tra chất lượng hệ thống chủng giống sản xuất vắc xin vắc xin thời gian 60 ngày với kinh phí 256 triệu đồng Ghi chú* Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) điểm ) Tháng 12/2007 tổ chức Hội nghị Tháng 12/2007 tổ chức Hội nghị với với kinh phí 10 triệu đồng Hà kinh phí 10 triệu đồng Hà Nội Nội Ghi chú* Tóm tắt nội dung, cơng việc chủ yếu: (Nêu mục 15 thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát nước nước ngoài) Lê Thị Luân chủng gốc giống (Master Số TT Thời gian (Bắt đầu, kết thúc - tháng … năm) Theo kế hoạch Thực tế đạt Sản xuất kiểm định 1/2007-6/2007 1/2007- (POLYVAC) Các nội dung, công việc chủ yếu (Các mốc đánh giá chủ yếu) 6/2007 seed) Người, quan thực J.Baoming-CDC Gensch.J-CDC Sản xuất kiểm định chủng 1/2007-6/2007 1/2007- Lê Thị Luân sản 6/2007 Trần Bích Hạnh, Nguyễn xuất văcxin rota (working seed) Thúy Hường Sản xuất kiểm định 1/2007-6/2007 1/2007- Lê Thị Luân vawcxin rota đơn týp 6/2007 Trần Bích Hạnh, Nguyễn (5 loạt liên tiếp) Đánh giá qui trình cE$ Thúy Hường 1/2007-6/2007 1/2007- Lê Thị Luân 6/2007 Văcxin thành phẩm 7/2007- 7/2007- Lê Thị Luân (5 loạt liên tiếp) 12/2007 12/2007 Trần Bích Hạnh, Nguyễn Thúy Hường 1/2008- Lê Thị Luân văcxin Xây dựng tiêu chuẩn cho 1/2008-6/2008 6/2008 Nguyễn Đăng Hiền Lê Thị Luân Viết báo cáo chuẩn bị 6/2008- 6/2008- nghiệm thu 12/2008 12/2008 III SẢN PHẨM KH&CN CỦA ĐỀ TÀI, DỰ ÁN Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: Số TT Tên sản phẩm tiêu chất lượng chủ yếu Hệ giống gốc cho văcxin rota gồm: Chủng giống gốc (MS) G1P8 G1P4 G4P6 Chủng sản xuất (WS) G1P8 G1P4 G4P6 -Vô trùng theo tiêu chuẩn Việt Nam WHO - Hiệu giá >10 5,4 ffu/ml -Thử nhận dạng đặc hiệu týp -Hình thể: vi rút hồn chỉnh -An toàn đặc hiệu theo tiêu chuẩn WHO cho văcxin virus sống uống -Cấu trúc phân tử ổn định trình tự Đơn vị đo Số lượng Theo kế hoạch Thực tế đạt ml 100 100 2.430 2000 870 930 630 15.650 3.510 4.700 7.440 ml 2000 xếp Nucleotit -Đáp ứng miễn dịch khỉ: kháng thể trung hòa >1:8 Vắc xin rota bán thành phẩm G1P8 G1P4 G4P6 -Vô trùng : không phát ml 1.000 ml 50.483 20.315 16.928 13.240 vi khuẩn, nấm mycplasma -Hiệu giá >10 5,4 ffu/ml -Thử nhận dạng: đặc hiệu týp -Hình thể: virus hồn chỉnh -An tồn đặc hiệu theo tiêu chuẩn WHO cho văcxin virus sống uống Vắc xin rota thành phẩm Vô trùng: theo tiêu chuẩn Việt Nam WHO Hiệu giá >10 5,4 ffu/ml Liều 10.000 10.000 14.120 Viêm gan A, C Âm tính Âm tính Retrovirus Âm tính Âm tính SV40 Âm tính Âm tính Foamy virut Âm tính Âm tính Lao Âm tính Âm tính Virut gây hấp phụ hồng cầu Âm tính Âm tính Virut khơng gây hấp phụ hồng cầu Âm tính Âm tính Hiệu giá (lgffu/ ml) 7,47 7,60 Tính đặc hiệu chủng G1P8 G1P8 An toàn Đạt động vật thí nghiệm Hiệu giá kháng thể trung hồ sau An toàn đáp ứng miễn dịch uống cao trước uống lớn khỉ lần - Sản xuất 930ml chủng giống gốc G1P4 (2001019210) với chất lượng sau: G1P4.PL6-MS Chỉ số kiểm tra Lot1 Lot2 Thể tích (ml) 360 870 Mẫu KĐ (ml) 150 150 Thể tích cịn lại (930ml) 210 720 Bảo quản -700C -700C Vơ trùng Âm tính Âm tính Mycoplasma Âm tính Âm tính Viêm gan A, C Âm tính Âm tính Retrovirus Âm tính Âm tính SV40 Âm tính Âm tính Foamy virut Âm tính Âm tính Lao Âm tính Âm tính Virut gây hấp phụ hồng cầu Âm tính Âm tính Virut khơng gây hấp phụ hồng cầu Âm tính Âm tính Hiệu giá (lgffu/ml) 7,47 7,23 Tính đặc hiệu chủng G1P4 G1P4 An tồn động vật thí nghiệm Đạt Hiệu giá kháng thể trung hoà sau An toàn đáp ứng miễn dịch uống cao trước uống lớn khỉ lần - Sản xuất 630 ml chủng giống gốc G4P6 (2001019203) với chất lượng chủng sau: G4P6.PL6-MS Chỉ số kiểm tra Lot1 lot2 Thể tích (ml) 390 540 Mẫu KĐ (ml) 150 150 Thể tích cịn lại (630ml) 240 390 Bảo quản -700C -700C Vơ trùng Âm tính Âm tính Mycoplasma Âm tính Âm tính Viêm gan A, C Âm tính Âm tính Retrovirus Âm tính Âm tính SV40 Âm tính Âm tính Foamy virut Âm tính Âm tính Lao Âm tính Âm tính Virut gây hấp phụ hồng cầu Âm tính Âm tính Virut khơng gây hấp phụ hồng cầu Âm tính Âm tính Hiệu giá (lgffu/ ml) 7,69 8,25 Tính đặc hiệu chủng G4P6 G4P6 An toàn động vật thí nghiệm Đạt An tồn đáp ứng miễn dịch Hiệu giá kháng thể trung hoà sau khỉ uống cao trước uống lần • Chủng sản xuất (WS) - Sản xuất 3.510ml chủng sản xuất G1P8 (KH0118) với chất lượng chủng đạt sau: Chỉ số kiểm tra G1P8.PL6-WS Lot1 Lot2 lot3 lot4 lot5 Thể tích (ml) 280 770 1020 980 840 Mẫu KĐ (ml) 30 70 120 80 80 250 700 900 900 760 Bảo quản -700C -700C -700C -700C -700C Vô trùng Âm tính Âm Âm Âm tính tính tính Mycoplasma Âm tính Âm Âm Âm Thể tích cịn lại (3.510ml) Âm tính Âm tính tính Viêm gan A, C SV40 Foamy virut Retrovirrus Lao Virut gây hấp phụ hồng cầu Virut khơng gây hấp phụ hồng cầu Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm Âm tính tính tính Âm Âm Âm tính tính tính Âm Âm Âm tính tính tính Âm Âm Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính tính Âm Âm tính tính tính Âm tính Âm Âm Âm tính Âm tính Âm tính tính Âm Âm tính tính tính tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Hiệu giá (lgffu/ ml) 7,47 7,04 6,35 6,90 6,68 Tính đặc hiệu chủng G1P8 G1P8 G1P8 G1P8 G1P8 An toàn Đạt động vật thí nghiệm An tồn đáp ứng miễn Hiệu giá kháng thể trung hoà sau uống cao dịch khỉ trước uống lớn lần - Sản xuất 4.700ml chủng sản xuất typ G1P4 (2001019210) với chất lượng chủng đạt sau: Chỉ số kiểm tra G1P4.PL6-WS Lot1 lot2 lot3 lot4 lot5 Thể tích (ml) 630 770 1610 1330 770 Mẫu KĐ (ml) 60 70 110 100 70 570 700 1500 1230 700 -700C -700C -700C -700C -700C Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Âm Âm tính tính Thể tích cịn lại (4.700ml) Bảo quản Vơ trùng Mycoplasma Viêm gan A, C Retrovirus SV40 Foamy virut Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Virut gây hấp phụ hồng Âm cầu tính Virut khơng gây hấp phụ Âm hồng cầu tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm Lao tính Âm Âm tính Âm tính tính Âm tính Hiệu giá (lgffu/ ml) 7,1 6,36 6,18 6,20 6,35 Tính đặc hiệu chủng G1P4 G1P4 G1P4 G1P4 G1P4 An toàn động vật thí Đạt nghiệm An tồn đáp ứng miễn Hiệu giá kháng thể trung hoà sau uống cao dịch khỉ trước uống lớn lần - Đã sản xuất 7.440 ml chủng sản xuất typ G4P6 (2001019203) với chất lượng chủng đạt sau: Chỉ số kiểm tra G4P6PL6-WS Lot1 Lot2 Lot3 Lot4 Lot5 Thể tích (ml) 2030 2800 1190 840 1119 Mẫu KĐ (ml) 130 100 90 100 119 Thể tích lại (7.440ml) 1900 2700 1100 740 1000 Bảo quản -700C -700C -700C -700C -700C Vơ trùng Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Mycoplasma Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Viêm gan A, C Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Retrovirrus Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính SV40 Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Foamy virut Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Lao Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Virut gây hấp phụ hồng Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính Âm tính 10 cầu Virut khơng gây hấp phụ Âm tính Âm tính Âm tính Hiệu giá (lgffu/ml) 7,06 7,10 7,0 7,57 7,22 Tính đặc hiệu chủng G4P6 G4P6 G4P6 G4P6 G4P6 hồng cầu An tồn động vật thí Đạt nghiệm An tồn đáp ứng miễn Âm tính Âm tính Hiệu giá kháng thể trung hồ sau uống cao trước dịch khỉ uống lớn lần - Vắc xin thành phẩm: Sản xuất 14.120 liều vắc xin Rota có tên thương mại Rotavin bao gồm: 1) 3.320 liều Vắc xin đơn giá typ G1P8 (Rotavin M1) bảo quản điều kiện < -200C với chất lượng sau: Loạt Liều Vô Hiệu Nhận trùng giá dạng AT trên ĐV pH MD Khỉ 012008 1.080 Âm tính 6,04 G1P8 7,5 Đạt Đạt 022008 1.150 Âm tính 6,04 G1P8 7,3 Đạt Đạt 032008 1.090 Âm tính 6,07 G1P8 7,4 Đạt Đạt Tổng 3.320 liều 11 2) 3.600 liều vắc xin đơn giá typ G4P6 (Rotavin M4) bảo quản điều kiện