Đang tải... (xem toàn văn)
Đề tài Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng (monoclono antibody) để chuẩn đoán nhanh bệnh virus trên tôm nuôi thuộc công trình nghiên cứu khoa học cấp bộ .Nôi dung gồm
VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG (MONOCLONO - ANTIBODY) ĐỂ CHUẨN ĐOÁN NHANH BỆNH VIRUS TRÊN TÔM NUÔI CNĐT: ĐINH THƯƠNG VÂN 8284 HÀ NỘI - 2010 1 VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC __________________ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Hà nội, ngày 5 tháng 10 năm 2010. BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I. THÔNG TIN CHUNG 1. Tên đề tài: Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng (Monoclono-Antibody) để chẩn đoán nhanh bệnh virus trên tôm nuôi Mã số đề tài: KC.06.16/06-10 Thuộc Chương trình: “Nghiên cứu, phát triển và ứng dụng công nghệ tiên tiến trong sản xuất các sản phẩm xuất khẩu chủ lực”. Mã số: KC.06/06-10 2. Chủ nhiệm đề tài: Họ và tên: Đinh Thương Vân Ngày, tháng, năm sinh: 31/07/1957 Nữ Họ c hàm, học vị: Tiến sĩ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên chính Điện thoại: Cơ quan: 04-37563386 Nhà riêng: 04-37673411 Mobile: 0904154789 Fax: 047914815 E-mail: thuongvan57@yahoo.co.uk Tên cơ quan đang công tác: Viện Công nghệ sinh học Địa chỉ: 18 Đường Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội Địa chỉ nhà riêng: 68/53/9 Đường Cầu Giấy , Hà Nội 3. Tổ chức chủ trì đề tài: Tên tổ chức chủ trì đề tài: Viện Công nghệ Sinh học, Viện KH&CN Việt Nam Điện thoại: : 04-8362599 Fax: 04-8363144 E-mail: tnhai@ibt.ac.vn Website: http://www.ibt.ac.vn/ Địa chỉ: 18, Đường Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội Họ và tên thủ trưởng cơ quan: Trương Nam Hải 2 Số tài khoản: 931. 01. 064 Ngân hàng: Kho bạc Nhà nước Ba Đình, Hà Nội Tên cơ quan chủ quản đề tài : Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam II. TÌNH HÌNH THỰC HIỆN 1. Thời gian thực hiện đề tài/dự án: - Theo Hợp đồng đã ký kết: từ 28 tháng 4/ năm 2008 đến tháng 9/ năm 2010 - Thực tế thực hiện: từ tháng 4/năm 2008 đến tháng 9/năm 2010 2. Kinh phí và sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 2705 triệ u đồng (Hai tỷ bảy trăm linh năm triệu đồng), trong đó: + Kính phí hỗ trợ từ SNKH: 2705 triệu đồng b) Tình hình cấp và sử dụng kinh phí từ nguồn SNKH: Theo kế hoạch Thực tế đạt được Số TT Thời gian (Tháng, năm) Kinh phí (Tr.đ) Thời gian (Tháng, năm) Kinh phí (Tr.đ) Ghi chú (Số đề nghị quyết toán) 1 2008 1199,75 2008 Lần 1: 840 Lần 2: 360 640 2 2009 1327,3 2009 Lần 1: 928 Lần 2: 399 916,009800 3 2010 177,95 1010 Lần 1: 124 686,607 Lần 2: 54 462,054045 TỔNG 2705 TÔNG 2705 c) Kết quả sử dụng kinh phí theo các khoản chi: Đối với đề tài: Đơn vị tính: Triệu đồng Theo kế hoạch Thực tế đạt được Số TT Nội dung các khoản chi Tổng SNK H Nguồn khác Tổng SN KH Nguồn khác 1 Trả công lao động (khoa học, phổ thông) 750 750 2 Nguyên, vật liệu, năng lượng 1620 1664,757645 3 Thiết bị, máy móc 100 133, 742 350 4 Xây dựng, sửa chữa nhỏ 30 CV xin chuyển mua máy móc 5 Chi khác 205 156,5 CV xin chuyển công tác phí nước ngoài mua 3 hóa chất Tổng cộng 2705 2704, 999 3. Các văn bản hành chính trong quá trình thực hiện đề tài/dự án: Số TT Số, thời gian ban hành văn bản Tên văn bản 1 QĐ283/QĐ- BKHCN ngày 28/11/2007 QĐ về viêc phê duyệt các tổ chức, cá nhân trúng tuyển chủ trì thực hiện 06 đề tài cấp nhà nước năm 2008 (đợt II) thuộc chương trình Nghiên cứu, phát triển và ứng dụng công nghệ tiên tiến trong sản xuất các sản phẩm xuất khẩu chủ lực Mã số: KC.06/06-10 2 QĐ 2474/QĐ- BKHCN ngày 26/10/2007 QĐ về việc thành lập HĐKH và công nghệ cấp nhà nước tư vấn tuyển chọn tổ chức cá nhân chủ trì đề tài để thực hiện trong kế hoạch năm 2008 thuộc chương trình KHCN trọng điểm cấp nhà nước giai đoạn 2006-2010 Nghiên cứu, phát triển và ứng dụng công nghệ tiên tiến trong sản xuất các sản phẩm xuất khẩu chủ lự c Mã số: KC.06/06-10 3 QĐ 2831/QĐ- BKHCN ngày 26/10/2007 QĐ về việc phê duyệt các tổ chức, cá nhân trúng tuyển chủ trì 06 đề tài cấp nhà nước năm 2008 thuộc chương trình Nghiên cứu, phát triển và ứng dụng công nghệ tiên tiến trong sản xuất các sản phẩm xuất khẩu chủ lực Mã số: KC.06/06-10 QĐ253/QĐ- BKHCN ngày 21/2/2008 QĐ Phê duyệt kinh phí 10 đề tài, 02 dự án SXTN trọng điểm cấp nhà nước giai đoan 2008-2010. Nghiên cứu, phát triển và ứng dụng công nghệ tiên tiến trong sản xuất các sản phẩm xuất khẩu chủ lực, Mã số: KC.06/06-10 HĐ01/HĐ- CNSH/DTKC.06- Hợp đồng nghiên cứu khoa học và công nghệ QĐ2070/QĐ- BKHCN ngày 18/9/2008 QĐ phê duyệt đấu thầu mua sắm tài sản của đề tài thuộc Chương trình Nghiên cứu, phát triển và ứng dụng công nghệ tiên tiến trong sản xuất các sản phẩm xuất khẩu chủ lực Mã số: KC.06/06-10 CV 374/CNSH ngày 28/8/2008 Tờ trình về kế hoạch mua thiết bị dùng cho TN thuộc đề tài KC.06.16/06-10 CV 381/CNSH ngày 10/9/2008 Công văn về kế hoạch mua hóa chất và thiết bị cho TN thuộc đề tài KC.06.16/06-10 CV 203/VPCT- HCTH ngày 26/8/2008 CV cho phép điều chỉnh giá mua thiết bị thuộc đề tài KC- 06.16/06-10 4 QĐ262/QĐ-CNSH ngày 24/9/2008 QĐ thành lập Hội đồng đấu thầu mua sắm tài sản năm 2008 đề tài KC.06.16/06-10 QĐ277/QĐ-CNSH ngày 06/10/2008 QĐ phê duyệt hồ sơ và danh sách đơn vị tham gia đấu thầu năm 2008 đề tài KC.06.16/06-10 QĐ307/QĐ-CNSH ngày 22/10/2008 QĐ phê duyệt nhà thầu trúng tuyển gói thầu ”mua sắm thiết bị” thuộc đề tài KC.06.16/06-10 QĐ308/QĐ-CNSH ngày 22/10/2008 QĐ phê duyệt nhà thầu trúng tuyển gói thầu ”mua hóa chất vật tư” thuộc đề tài KC.06.16/06-10 CV52/CNSH ngày 20/2/2009 Công văn kế hoạch mua hóa chất CV66/CNSH ngày 2/3/2009 Công văn xin điều chỉnh và kế hoạch mua hóa chất và vật tư tiêu hao của đề tài không qua đấu thầu CV80/CNSH ngày 12/3/2009 Công văn xin điều chỉnh và kế hoạch mua hóa chất CV 111/VPCT- TCKT ngày 31/3/2009 Lập bảng kê kinh phí chi thanh toán cho các sản phẩm, nội dung công việc đã hoàn thành của đề tài, dự án CV 112/VPCT- TCKT ngày 31/3/2009 Hướng dẫn báo cáo quyết toán kinh phí hàng năm của đề tài QĐ 237/QD-CNSH ngày 16/6/2009 QĐ về việc thành lập Hội đồng nghiệm thu chuyên đề QĐ 93/VPCT- HCTH ngày 23/3/2009 Về việc điều chỉnh một số hạng mục kinh phí của đề tài KC06.16/06-10 QĐ 439/QD- BKHCN ngày 30/3/2009 QĐ phê duyệt kế hoạch đấu thầu mua sắm tài sản của đề tài Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng (Monoclono-Antibody) để chẩn đoán nhanh bệnh virus trên tôm nuôi Mã số: KC.06/06-10 QĐ135/QD-CNSH ngày 13/4/2009 QĐ thành lập Hội đồng đấu thầu mua sắm tài sản năm 2009 thuộc đề tài KC.06.16/06-10 QĐ144/QD-CNSH ngày 23/4/2009 QĐ phê duyệt nhà thầu trúng tuyển gói thầu ”mua hóa chất vật tư” thuộc đề tài KC.06.16/06-10 CV90/CNSH ngày 15/3/2010 Công văn xin điều chỉnh kinh phí điện nước cho nội dung mua hóa chất và vật tư tiêu hao của đề tài QĐ 93/VPCT- THKH ngày 24/3/2009 Về việc điều chỉnh một số hạng mục kinh phí của đề tài KC06.16/06-10 4. Tổ chức phối hợp thực hiện đề tài, dự án: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức đã tham gia thực hiện Nội dung tham gia chủ yếu Sản phẩm chủ yếu đạt được 5 1 Viện Nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1 TT quốc gia giống hải sản miền Bắc - Cung cấp mẫu tôm nhiễm bệnh để viện CNSH tách chiết tinh chế WSSV - Thu thập các mẫu ấu trùng tôm (post larvae 10-15) nhiễm MBV - Kiểm tra que thử tại các cơ sở nuôi tôm của Viện - Cung cấp 3000 tôm post nhiễm WSSV - Cung cấp 5000 tôm post nhiễm MBV - Kiểm tra 200 que thử tạ i các cơ sở nuôi tôm 2 Viện Kỹ thuật Hóa sinh và tài liệu nghiệp vụ Viện Kỹ thuật Hóa sinh và tài liệu nghiệp vụ - Chọn màng phù hợp để gắn sinh phẩm - Tìm nồng độ thích hợp của các sinh phẩm để gắn màng một cách hiệu quả nhất - Xác định độ nhạy và độ đặc hiệu và độ bền của que thử đã chế tạo 5. Cá nhân tham gia thực hiện đề tài, dự án: (Người tham gia thực hiện đề tài thuộc tổ chức chủ trì và cơ quan phối hợp, không quá 10 người kể cả chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Tên cá nhân đã tham gia thực hiện Nội dung tham gia chính Sản phẩm chủ yếu đạt được 1 TS. Đinh Thương Vân TS. Đinh Thương Vân Chủ nhiệm 2 TS. Lê Thị Tâm TS. Lê Thị Tâm Tham gia 3 PGS. TS. Đinh Duy Kháng PGS. TS. Đinh Duy Kháng Tham gia 4 TS. Đỗ Thị Thảo TS. Đỗ Thị Thảo Tham gia 5 TS. Đồng Văn Quyền TS. Đồng Văn Quyền Tham gia 6 ThS. Hà Thị Thu ThS. Hà Thị Thu Thư kí 7 TS. Phạm Anh Tuấn Th.S Nguyễn Thị Thu Hiền Tham gia 8 ThS. Nguyễn Hữu Ninh KS.Nguyễn Thị Phương Tham gia 9 CN. Võ Anh Tú KS.Nguyễn Viết Vương Tham gia 10 ThS. Lê Trọng Văn ThS. Lê Trọng Văn Tham gia 11 ThS. Bạch Thị Như Quỳnh Tham gia 12 ThS. Nguyễn Thị Hoa Tham gia 13 ThS. Trần Minh Trí Tham gia 14 CN. Hoàng Thế Yên Tham gia 6 Lý do thay đổi: Việc thay đổi cán bộ tham gia đề tài chủ yếu do điều kiện bận công tác, thay đổi công tác, học tập ở nước ngoài 6. Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Thực tế đạt được (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Ghi chú* 1 Trao đổi kinh nghiệm với BIOTEC Thái Lan về sản xuất kháng thể đơn dòng kháng VP28 của virus gây bệnh đốm trắng và Polyhedrin của MBV. Sử dụng các kháng thể đơn dòng này để chế tạo que thử phát hiện nhanh virus gây bệnh đốm trắng và MBV. Một đoàn: 2 người, 10 ngày Trong thời gian 2008 đề tài đã có quan hệ với đối tác là GS. Paisarn Sithigorgul, Dept. of Biology, Faculty of Science, Srinakharinwirot University, Bangkok,Thailand. Giáo sư đã cung cấp các tài liệu liên quan cùng một số sinh phẩm đã và s ẽ đươc chuyển cho đề tài sau những lần qua Việt Nam công tác, điều này giúp cho đề tài thực hiện được thuận lợi. Chính vì vậy đề tài nhận thấy không cần thiết lắm để tổ chức cho đoàn đi nước ngoài - Lý do thay đổi (nếu có): 7. Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) Thực tế đạt được (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) 1 Hội thảo Tổ chức 3 hội thảo cấp Viện Công nghệ sinh học với mục đích thảo luận các kết quả nghiên cứu, nghiệm thu các chuyên đề 8. Tóm tắt các nội dung, công việc chủ yếu: (Nêu tại mục 15 của thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát trong nước và nước ngoài) Thời gian Từ tháng 4/2008 đến tháng 9/2010) Số TT Các nội dung, công việc chủ yếu (Các mốc đánh giá chủ yếu) Theo kế hoạch Thực tế đạt được Người, cơ quan thực hiện 1 Tạo ra được quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ của WSSV và MBV 10/2008 10/2008 Viện Công nghệ sinh học 2 Tạo ra được các dòng tế bào lai (Hybridoma) sinh kháng thể đơn Viện Công nghệ sinh học 7 dòng kháng protein vỏ của WSSV và MBV 3 Tạo ra được quy trình công nghệ sản xuất bộ thử phát hiện nhanh, chính xác WSSV và MBV trên tôm nuôi 10/2009 10/2009 Viện kỹ thuật hóa sinh và tài liệu nghiệp vụ- Tổng cục kỹ thuật- Bộ Công an; Viện CNSH 4 Sử dụng quy trình công nghệ đã tạo ra để sản xuất được được 500 bộ thử cho mỗi loại bệnh đạt chất lượng tương đương hàng ngoại nhập. 8/2010 8/2010 Viện kỹ thuật hóa sinh và tài liệu nghiệp vụ- Tổng cục kỹ thuật- Bộ Công an III. SẢN PHẨM KH&CN CỦA ĐỀ TÀI, DỰ ÁN 1. Sản phẩm KH&CN đã tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: Yêu cầu khoa học cần đạt Số TT Tên sản phẩm Theo kế hoạch Thực tế đạt được Ghi chú 1 Các dòng tế bào lai (Hybridoma) tạo kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ của WSSV 02 dòng tế bào lai 02 dòng tế bào lai Phản ứng đặc hiệu với VP28 của WSSV 2 Các dòng tế bào lai (Hybridoma) tạo kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ của MBV 02 dòng tế bào lai 02 dòng tế bào lai Phản ứng đặc hiệu với polihedrin của MBV 3 Que thử phát hiện nhanh WSSV 500 500 Độ nhạy và độ đặc hiệu của que thử sẽ được đánh giá dựa trên việc so sánh với kit của nước ngoài và các kỹ thuật khác 4 Que thử phát hiện nhanh MBV 500 200 Độ nhạy và độ đặc hiệu của que thử sẽ được đánh giá dựa trên việc so sánh với kit của nước ngoài và các kỹ thuật khác 8 b) Sản phẩm Dạng II: 1 Quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein Polyhedrin của MBV 01 quy trình 01 quy trình Sản xuất được kháng thể đơn dòng kháng protein Polyhedrin của MBV 2 Quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein VP28 của virus đốm trắng 01 quy trình 01 quy trình Sản xuất được kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ VP28 của WSSV 3 Quy trình công nghệ sản xuất bộ thử phát hiện nhanh MBV 01 quy trình 01 quy trình Sản xuất được bộ thử phát hiện nhanh MBV 4 Quy trình công nghệ sản xuất bộ thử phát hiện nhanh WSSV 01 quy trình 01 quy trình Sản xuất được bộ thử phát hiện nhanh WSSV c) Sản phẩm Dạng III: Số TT Tên sản phẩm và chỉ tiêu chất lượng chủ yếu Đơn vị đo Số lượng Theo kế hoạch Thực tế đạt được 1 Báo cáo định kì 6 tháng/lần Báo cáo 04 04 04 2 Báo cáo tóm tắt Báo cáo 15 15 15 3 Báo cáo trung gian (Chuyên đề) Báo cáo 03 03 03 4 Báo cáo thống kê Báo cáo 05 05 05 5 Các số liệu nhật kí thí nghiệm Báo cáo 03 03 03 6 Bài báo Bài báo 04 04 04 7 Đào tạo sau đại học: Thạc sĩ 2 2 01 Th.S 01 TS 8 Phiếu đăng kí bản quyền giải pháp hữu ích về que thử phát hiện nhanh WSSV Phiếu 1 1 1 d) Kết quả đào tạo: Số lượng Số TT Cấp đào tạo, Chuyên ngành đào tạo Theo kế hoạch Thực tế đạt được Ghi chú (Thời gian kết thúc) 9 1 Thạc sỹ 2 1 2008 2 Tiến sỹ 0 1 2011 - Lý do thay đổi (nếu có): đ) Tình hình đăng ký bảo hộ quyền sở hữu công nghiệp, quyền đối với giống cây trồng: Kết quả Số TT Tên sản phẩm đăng ký Theo kế hoạch Thực tế đạt được Ghi chú (Thời gian kết thúc) 1 Phiếu đăng kí bản quyền giải pháp hữu ích về que thử phát hiện nhanh WSSV 01 01 2. Đánh giá về hiệu quả do đề tài, dự án mang lại: a) Hiệu quả về khoa học và công nghệ: (Nêu rõ danh mục công nghệ và mức độ nắm vững, làm chủ, so sánh với trình độ công nghệ so với khu vực và thế giới…) - Đề tài đã ứng dụng một cách thành công các kỹ thuật sinh học phân tử trong việc sản xuất thành công kháng thể đa dòng cũng như kháng thể đơn dòng và các que thử nhanh sử dụ ng kháng thể đơn dòng để chẩn đoán bệnh ở tôm nói riêng và thủy sản nói chung mà ởViệt Nam, cho đến nay chưa có cơ sở nào nghiên cứu sản xuất thành công kháng thể đơn dòng vì vậy các sản phẩm dạng II & III của đề tài có tính thời sự và khoa học cao. - Đã tạo ra những quy trình kỹ thuật như: quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein Polyhedrin của MBV. Quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein VP28 của virus đốm trắng. Quy trình công nghệ sản xuất bộ thử phát hiện nhanh WSSV và quy trình công nghệ sản xuất bộ thử phát hiện nhanh MBV góp phần phát triển lĩnh vực khoa học chẩn đoán virus tôm nói riêng và chẩn đoán bệnh tôm nói chung, tăng cường quản lý nhà nước về nhập khẩu que thử chẩn đoán bệnh tôm - Đưa công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng thành công cụ đắc lực cho công tác chẩn đoán, điề u trị bệnh cho gia súc, vật nuôi và con người đồng thời nâng cao năng lực tiếp cận các lĩnh vực khoa học hiện đại trong lĩnh vực kháng thể đơn dòng - Góp phần đưa sinh học phân tử kết hợp phương pháp sản xuất kháng thể đơn dòng làm tăng độ nhạy và độ đặc hiệu của công tác chẩn đoán và điều trị bệnh - Góp phần nâng cao năng lực của cán bộ nghiên c ứu tham gia đề tài, trong lĩnh vực kháng thể đơn dòng và góp phần đào tạo nhân lực, góp phần đưa nền khoa học nước ta từng bước hội nhập khu vực và quốc tế trong lĩnh vực công nghệ sinh học hiện đại sản xuất kháng thể đơn dòng tạo kit chẩn đoán nói chung và tạo kit chẩn đoán trong lĩnh vực thủy sản nói riêng b) Hiệu quả về kinh tế xã hội: (Nêu rõ hiệ u quả làm lợi tính bằng tiền dự kiến do đề tài, dự án tạo ra so với các sản phẩm cùng loại trên thị trường…) [...]... đề tài: Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng (Monoclono- Antibody) để chẩn đoán nhanh bệnh virus trên tôm nuôi với mục tiêu phát triển công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng để tạo bộ thử phát hiện nhanh, chính xác bệnh virus trên tôm nuôi Mục tiêu cụ thể: - Xây dựng được quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ của WSSV và MBV - Tạo ra được các dòng tế bào... đề tài Công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng là công nghệ nền cho việc sản xuất nhiều sinh phẩm chẩn đoán và điều trị bệnh ở người và vật nuôi Hoàn chỉnh được công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng tại Việt Nam sẽ có đóng góp có ý nghĩa cho khoa học và công nghệ của nước nhà 2 Báo cáo Tổng kết đề tài KC06-16/06-10 Viện Công nghệ Sinh học coi kháng thể đơn dòng là chiếc chìa khóa mở ra công nghệ chế tạo... 15 1.3.2.2 Kháng thể đơn dòng và ứng dụng trong chẩn đoán bệnh ở tôm 18 1.3.2.2.1 Lý thuyết chung về chọn lọc các dòng tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng .18 1.3.2.2.2 Cộng hợp kháng thể đơn dòng với chất nhũ vàng (Gold colloid) .20 1.3.3 Tình hình nghiên cứu về kháng thể đơn dòng và chế tạo que thử .21 1.4 Nghiên cứu lựa chọn màng trong chế tạo kit thử nhanh 24 1.4.1... tra tính đặc hiệu của dòng tế bào bằng Elisa 68 3.2.5 Nhân nuôi lượng lớn tế bào hybrid kháng VP28 tự nhiên dòng WS-E4C2 69 3.2.6 Thu nhận kháng thể đơn dòng của dòng WS-E4C2 kháng VP28 .70 3.2.7 Tóm tắt qui trình sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ VP28 của virus WSSV gây bệnh đốm trắng trên tôm 71 3.2.8 Tinh sạch kháng thể đơn dòng của dòng WS-E4C2 kháng VP28 72 3.2.9 Xác... 1.1 Tình hình nuôi tôm trên thế giới và tại Việt Nam .4 1.2 Một số đặc điểm của virus WSSV và MBV .7 1.2.1 Virus gây hội chứng đốm trắng (White spot syndrome virus- WSSV) 7 1.2.2 Monodon Baculovirus (MBV) 10 1.3 Kháng thể 12 1.3.1 Kháng thể đa dòng .14 1.3.2 Kháng thể đơn dòng và ứng dụng trong chẩn đoán WSSV và MBV 15 1.3.2.1 Kháng thể đơn dòng ... với polihedrin của MBV 5 Quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ của WSSV 6 Báo cáo về sản xuất KT đa dòng 7 Các số liệu cho quy trình công nghệ sản xuất bộ thử phát hiện nhanh MBV 8 Báo cáo về nghiên cứu chọn màng phù hợp để gắn sinh phẩm; tìm nồng độ thích hợp của các sinh phẩm để gắn màng một cách hiệu quả nhất 9 Thu thập số liệu nghiên cứu 4-5-6-Hoàn thành thu số liệu, Hoàn... liệu về tạo dịch báng trong chuột BALB/c Thu nhận, tinh chế kháng thể đơn dòn Găn kháng thể đơn dòng đã tinh chế với nhũ vàng 6.Quy trình công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng kháng protein vỏ của WSSV 7 CĐ: Tinh chế polihedrin bằng li tâm siêu tốc 8 Dung hợp tế bào để tạo kháng thể đơn dòng kháng Polyhedrin của MBV 8 Sè liÖu vÒ thu nhận ấu trùng tôm nhiễm MBV 9.Hoạt chất Polyhedrin 10 Sè liÖu vÒ xác định... đa dòng kháng IgG của chuột 11 Sè liÖu vÒ sử dụng Polyhedrin tinh chế g©y miễn dịch cho chuột thuần chủng BALB/c 12 Sè liÖu kiểm tra đáp ứng miễn dịch của chuột bằng ELISA 13.Số liệu về các tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng có tính đặc hiệu cao với polihedrin của MBV 14.CĐ: Kháng thể đa dòng, kháng thể đa dòng kháng IgG của chuột 15.Số liệu sản xuất kháng thể đa dòng kháng WSSV MBV 16.Số liệu sản xuất. .. dòng do 69 05 dòng tế bào tạo ra trên các kháng nguyên khác nhau Hình 3.12 Kiểm tra hiệu giá kháng thể đơn dòng ở các độ pha loãng 73 khác nhau của (A): dịch báng sau li tâm; (B): Dịch kháng thể tinh sạch Hình 3.13 Đánh giá phản ứng đặc hiệu của kháng thể đơn dòng 74 kháng VP28 tái tổ hợp với kháng nguyên tự nhiên ở tôm mắc bệnh đốm trắng Hình 3.14 Kiểm tra kết quả gắn kháng thể đơn dòng với chất nhũ... chẩn đoán của Viện Vì vậy, từ lâu Ban lãnh đạo Viện đã quan tâm đầu tư để có được công nghệ tạo ra sản phẩm này Đối với các cơ sở ứng dụng kết quả nghiên cứu như Viện Kỹ thuật hóa sinh và tài liệu nghiệp vụ, Viện Nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1, kết quả của đề tài sẽ là cầu nối để cho ra đời các sản phẩm chẩn đoán nhanh bằng que thử và đưa vào ứng dụng thực tiễn, trước mắt là cho chẩn đoán các bệnh virus . VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG (MONOCLONO - ANTIBODY) ĐỂ CHUẨN ĐOÁN NHANH BỆNH VIRUS TRÊN TÔM NUÔI. tài: Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng (Monoclono- Antibody) để chẩn đoán nhanh bệnh virus trên tôm nuôi Mã số đề tài: KC.06.16/0 6-1 0 Thuộc Chương trình: Nghiên cứu, . sản của đề tài Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng (Monoclono- Antibody) để chẩn đoán nhanh bệnh virus trên tôm nuôi Mã số: KC.06/0 6-1 0 QĐ135/QD-CNSH ngày 13/4/2009