BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM KHOA: MÔI TRƯỜNG VÀ TÀI NGUYÊN BÀI TIỂU LUẬN Chuyên đề: GVHD:Th.S Nguyễn Ngọc Tâm Huyên Tên nhóm: Trần Thị Kim Ngân MSV 10149122 Nguyễn Thị Hồng Nhung MSV 10149137 Trịnh Bửu Hồng Phương MSV 10149152 Cao Thị Thanh Thảo MSV 10149176 Đinh Thị Cẩm Thu MSV 10149190 Phan Thị Ngọc Tuyền MSV 10149236 TP.HCM, tháng 8 năm 2011. MỤC LỤC 1. Khái quát      !" #$%! & '& 2. Quy trình sản xuất Insulin& ()*+,-*.%)& /01& 12 ()*+3456789:;,-2 <9=9=)*+6789:;2 $%>;? @ !A!*9:;? #B' ;789:;C!'C!D EEF !4GCHIAJ KLI3456789:;,- #()*+,-M678 #$;9; #$;9; 9;;9;,-MN9" 3. Ưu và nhược điểm của Insulin2 4. Nguyên tắc dử dụng và bảo quản InsulinD )OP345D B,!=,D 5.Kết luận và kiến nghịJ Tài liệu tham khảo 2 9 Q'>CR>6STUN6*6 )M1P@)TFV W,X6S!.' HIVI Y.Z;9*[.HIC>EFE;%3C4 *)EF9C>E)EQO\F6CR+ >W]*!RNFM145R! ^W_LIHI W !*I9';`1W]aI-FN9F!!1!FbV;;G *c! C)-IdC)I)FWReWc3*%F;:'C %)NWNeF*X !*cM94;`1!9EF*!WW Y>)W;9;C!N9V;f9%C)g%*,C > /.FI4S1^! >*cWC %T0*IX%)C!945+F.R1C! I%)FVIQ)SI.C!+19C)Ih    3 GIỚI THIỆU CHUNG C_EII4ICi*A4BICI*ABA+1*I e1D(9*+O\,-WZWW;*=I*EHI9 VWBICBAQPT)'5)HIRVWC>=,CVc 99!jEQP'*I1^!*1!AWIE[5)C'- C;k[,!lIA*IIWFRC)O1C!VW c99!31CE>)99!c`)SBI kFO1m ;C%)RI')1F1^^ d9CN!IEQ;;O\C !*I'-[ ,!lIA*IF,!,1H^N'31*OYC!9 e1DFlA!I*4@!1!n:Q *cC6X @!*!!MC)opqQ'C)J9e1D#"F E2:oI#e1#9O1p !;  C  rIlA!4  C  R    k  O  Q  4S  '  -  [    ,! lIA*IopO1!lA!I*4@!1! @!*!!oII4IpI)IN BICBA'CC)e1D?FsNI*tA*AA*Q\ 1*MC1^;*!A e1D""Fi*A4A*NIA*n! ,!AQ+1*IuI-I1HI /C)Q!;U;9CN!IE !*I1^AAF4S  !*IHN`':4*)WN,e*I..^ N'I! ,-MNv>4*)kO 6)wAAA oj!I<xpC,;`1C)I*Ic*C!e1D?@*!c3F%) dCkkO9CO\\456EC!4;`1 C6 4 MỘT SỐ VI SINH VẬT TRONG ĐỜI SỐNG 1. KHÁI QUÁT: 1.1 Sơ lược về bệnh tiểu đường: n@C1^4 4!*! )WII*!)4*IAN !*1!AHI)'5)c'I),19^*!F X1\196I! nBW]a! 4!5)N6' *IF! 4!',1CN9 nBaI! 1.;9FFC! IO1CNy1A!\N61FN9. n)O%;9a4!'*I'!0N6HC'C!W ]1m,1.,1;F4m.Z*! =9*+*I!:F .FU!C,1*! 1.2 Sơ lược về Insulin: 1.2.1 Nguồn gốc: nC1^!*1!=I*EFV;;!An1^ *!RC;k];e!! nHIa @[^> • @[5)HIGI)C)I)F'M ;;9;PN]^N'WI*I! •  n/,-[^>=I9;;9;a B9:;[ @9:;AaC! *]C;kF, -MNv>9:;87F34511AC1 , '^N'WICI!FW *VZOHIF4!>)] !N9 CI945P 5 1.2.2 Cấu tạo: nlC1^;*!A1"II !Cu;!);A;4zk'9 !CFu71IIFuB1#JIIIMkn o4{Ip n@*E;%3N!,a"?JJn&JJJ8I! *VHI;%3 Hình 1. Cấu trúc của phân tử insulin r04S*+Z9II-I1N9IRI9!C1^! cHI ;%3W],!I!F9! WW\I#k4{IF,IkHI u7C99OHIkssjHIuBZ*!+Z I-I14m'*V#HIX9!CN9I*I '*V[^>W! ]EI!9!CN9 6 CẤU TRÚC KHÔNG GIAN CỦA INSULIN 1.2.3 Phân loại: nW! a W94I 9459>1o*+p 945>1 ; 1.2.4 Cơ chế: n@I9H)#n";V nBc;9H) OWIXA|)1;*!AIA 4 4C) nj;MO1r\^;5^C!^Fc *]O1F^%HI1dO1F>^ nc)WI IF>F@*!W"J} I n/C!,=I> 2.QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT INSULIN: 2.1 Quy trình sản xuất Insulin trước đâya 2.1.1. Đặc điểm quy trình: INICN!IEII4Ioi*A4A*NwBICI*A jBAp;9*ICI*GHIV[]1R VWF[R>;ODJ!'Re1kHI>;O D?JF !*IM96>;[)'5)HI^> A!CG@)OFWZN9*!C;kI4 I1!.GoIc*]*!u7C1^c*]*!uBp CA!o1^c*]*!uBp8!W%)*IR945 N61!1o4c\pN345W[A! 7 I)G!C*IF=9*+,-C [^>G0; NWNeIWF9;;9;9:;[ A!CGQ;9*M9345;,\) ;A;4Ao*I;A;4I!p345*); 1HI,-4S*!%1CH)'W ^>oGCp@5)HI^>C)~4S 9'F+'k1^.5)1.W,-1^ TY,-*Z';[5)^> W*VN6!C!C.F! ^ \e*!NU1!.FN,e;5 NU1FW%)*IR;,\;5r0N9*!=9*+9 'FN6! T'R9%%)HI^>F =9*+9'C)GTN•>I!F;]PFN6,- .=16*^.F9CI! 2.1.2. Nhược điểm quy trình sản xuất Insulin chiết xuất từ động vật: n^>oGCpW*VN6!C!C*V X nj! ^\e*!NU1!.HI€ n<,e;5NU1 nW%)*I;,\1•4c*!o%)4c\p n@*!=9*+9'FN6! T'99%%)[ 6> n(9*+9'GTNv>I! n;]Po4!k.5),-p n<6,-.*O=)16. nw9CI! 2.2 . Quy trình sử dụng công nghệ AND tái tổ hợp để sản xuất Insulin: 2.2.1. Khái quát về công nghệ AND tái tổ hợpa n<v>789:;C>;;Nv> !*I1^A!0 ,A‚,'*VHIAFM1 !*I9A1.*) VC!*!'C!FHM115],-9,;`1 o;*!AFA|)1FbpF9'C!FW]* 1.A!1!1 8 nR'%P9 ;%3ECXN!IEHI Nv>AoNv>4*)p1CNXkCNv>789:; n<v>789:;19.,Ia @9' !*I78F7ƒA!1!1o;%>;Ap @ !A!*9:;o`cA!*94GFA|)1P.  CA|)1p )o' ;p789:;C!'C!HC%4GA CECA!4„Z! ^HIA)C!*!' C!HF !.! 78A!1!1345C! 15]N9I 2.2.1.1. Phân lập gen: …@9'78aS)A!I-AFWRN9 'N9Ia n/.N`F6N`N.F;9f1CF ! T;*!AMA|1FN'HIC 78MWIF 416F4c']; n/.16F'C!^Z>F)OP9'78 *O@)OVI*Z';)91m;`16F WFcF19F.EF16%F*•F9b …@9'7ƒa=)*+Z9'78F4c'I NC1 ;*!AF345A|1;%H)78FN'HI7ƒ …/c78F7ƒa,;`1IN9'kW^  CC1H!O\F4S;;9;!=I ;:-9c†;;5FSW99^ CC1 k'j!04S;;9;4*OA -9 ce78F7ƒF)*I^ CC1k' !O\ 2.2.1.2. Tạo vector tái tổ hợp: ‡Vector tách dòngaC;%378WN].TFWN,e P9Ak'FZ9,F *!'C!HC0;, 1I]>'*!'C!HQ1IA!*9:; n9! A!*94G4Sa 9  Plasmida;%3784 GF-!PNU;FW*!'C! HIN`  Phagơa;k.C;IlI14IFWA\Ic*]> !C9AN9IFV;9AC)4•4C-%1>; C!N`WN,eCWN,eI!U;I  Virut của tế bào nhân thực a*YJFI4A!*F*A*!*F *A*;Ab345*!94GC)AX' C!^>FZ> ‡Enzym cắt giới hạnaCA|)1WN,e>'1^! *+ Z*O;%378CP78XR10/P A[AC!WFPA!*94G!0A!*9:;F ! NP9! Ak' ‡Enzym nối LigasaaCRA|)1=I*E*!'C!FV -V9+C9ON';!;!4AA9! I-A .I nW#! A|)1=I*E*!64*)aA|)1ˆ! 789'[N`ˆ!FA|)1@   78CA|)1@   7ƒ 9'[;IA@  !C*IFC)I)IG3459!  ok4]nI4I;!*p!9A|)1kM74I;!*-V9 9! 784!9A|)1PkM[W !Ok!9 I4I;!*0**O!1u! A|)1 8SA|)1P '[I78N9IF=IN% *^m~ !*I,;`1789:; 2.2.1.3. Biến nạp AND tái tổ hợp vào tế bào chủ và nhân dòng gena n/I789:;C!'C!HA!Nv>' ;o)*Z ';789:;C!'C!Hp‰'C!HWCN`F'C! ^>F'C!Z>‚^19)4*)HI'C!H%, 789:;F !N. nR'C!H]4Sa  YN`ˆ!a4•I!9F]NU1F,IF ! 4G789:;I 10 [...]... nếu: •Insulin màu trong chuyển sang đục •Quá hạn sử dụng •Insulin đã đông cứng hoặc tiếp xúc với nhiệt độ cao •Có đóng cục hay lợn cợn trong insulin •Thấy có cặn insulin bên trong lọ và không tan ra được khi lắc (tròn) nhẹ lọ •Lọ đã mở quá 1 tháng KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ: 20 KẾT LUẬN: Khả năng ứng dụng của vi sinh vật trong y tế là vô cùng vô tận.những khám phá của con người về vi sinh vật đã mang lại... hiện trong tế bào E.coli Bằng cách này, hiệu suất của quá trình biểu hiện protein và hiệu quả của quá trình hình thành các cầu nốii Sau đó, proinsulin được chuyển thành insulin nhờ xử lý với trypsin và carboxypeptidase B • Các nhà khoa học Anh và Mỹ cho biết họ có thể sử dụng tế bào gốc lấy từ máu trong dây rốn của trẻ sơ sinh để giúp bệnh nhân tiểu đường loại 1 khôi phục khả năng sản xuất insulin trong. .. là cơ chế điều hòa biểu biểu hiện của gen Các vector này gọi là vector biểu hiện 2.2.2 Ý nghĩa của sử dụng công nghệ AND tái tổ hợp để sản xuất insulin: Sản xuất Insulin bằng công nghệ tái tổ hợp là một bước nhảy vọt trong vi c chữa trị bệnh tiểu đường Ngoài ra một ý nghĩa khá quan trong khi sử dụng công nghệ này để sản xuất Insulin, đó là hiệu quả kinh tế, khi sử dụng công nghệ này, giá thành sản... có thể sử dụng 5.Tăng cường hợp tác với các cơ quan nước ngoài để áp dụng và chuyển giao nhanh công nghệ cũng như kết quả nghên cứu 21 TÀI LIỆU THAM KHẢO: 1-http://d.violet.vn/uploads/resources/562/1075370/preview.swf 2-http://www.sinhhocvietnam.com/vn/modules.php? file=article&name=News&sid=1149 3-http://baigiang.violet.vn/present/show?entry_id=487936 4-http://thuviensinhhoc.com/chuyen-de -sinh- hoc/cong-nghe -sinh- hoc/2659-insulinva-cong-nghe-san-xuat-insulin-tren-the-gioi... nhất dùng trong cấp cứu do tác dụng hạ đường huyết nhanh chóng - Có thể trộn lẫn với insulin chậm tùy theo mục đích và nhu cầu điều trị - Có thời gian tác dụng ngắn và mạnh để làm giảm đường huyết sau khi ăn 18 Nhược điểm : Thời gian tác dụng ngắn nên phải tiêm nhiều lần trong ngày (4 mũi tiêm dưới da, thực tế không dùng riêng insulin tác dụng nhanh để điều trị mà phải kết hợp thêm insulin tác dụng bán... Insulin tác dụng bán chậm (dịch tiêm đục như sữa) Để làm giảm bớt số lần tiêm trong ngày, người ta đã sản xuất ra loại insulin có tác dụng dài hơn gồm 2 loại insulin là NPH (Neutral Protamine Hagedorn) hay IZS (Insulin Zinc Suspension) hay lent để sử dụng trong chế độ điều trị với 2 hay 3 mũi tiêm trong ngày Ưu điểm: của các loại insulin tác dụng trung bình là có nhiều loại với thời gian tác dụng khác... Bước 1: Bằng kỹ thuật tách gen sử dụng trong sinh học phân tử tách được gen mã hoá proinsulin người trên nhiễm sắc thể số 11 Tách mARN của gen tổng hợp proinsulin từ mẫu nghiền tuỵ của người Dùng phản ứng RT-PCR với mồi đặc hiệu để khuếch đại gen, loại bỏ protein Do hầu hết các mARN của người đều có đuôi polyA nên sử dụng chuỗi polyT để bắt cặp với đuôi polyA đó Sử dụng sắc kí ái lực với polyT giữ lại... con người.Từ đó cho thấy nhu cầu sản xuất Insulin bằng vi sinh vật ngày càng tăng,nó thay thế cho các cách tổng hợp Insullin truyền thống là lấy từ tế bào động vật. Biện pháp này làm giảm chi phí rất nhiều so với phương pháp cũ, đồng thời lại thân thiện với môi trường KIẾN NGHỊ: Khuyến khích ứng dụng, phát triển công nghệ sản xuất insulin bằng vi sinh vật: 1.Nhà nước nên đầu tư hợp lý các chi phí cho các... gen tế bào chủ  Kỹ thuật vi tiêm: tiêm lượng nhỏ AND vào tế bào chủ hoặc tế bào trứng đã thụ tinh ở giai đoạn phôi 4-8 tế bào  Kỹ thuật bắn gen: dùng thiết bị bắn vi đạn mang gen cần chuyển ( súng bắn gen) vào hệ gen của tế bào chủ Vi đạn là các hạt Volfram hoặc vàng trộn với gen cần chuyển và phụ gia, vi đạn được bắn vào vi n đạn lớn hơn, khi bắn, vi n đạn lớn được giữ lại, vi đạn bắn vào tế bào nhận... một mũi tiêm có tác dụng trong cả 24 giờ trong ngày Có thể dùng trong kỹ thuật 4 mũi tiêm/ ngày, 3 mũi nhanh vào trước các bữa ăn và một mũi vào lúc đi ngủ (22 giờ) 19 Nhược điểm: Tại chỗ: đỏ, đau nơi tiêm Hạ đường huyết không lường trước do tác dụng kéo dài chồng chéo với các mũi tiêm khác Thường không làm giảm được đường máu sau ăn do thời gian hấp thu vào máu chậm 4.NGUYÊN TẮC SỬ DỤNG VÀ BẢO QUẢN INSULIN: . 6)wAAA oj!I<xpC,;`1C)I*Ic*C!e1D?@*!c3F%) dCkkO9CO456EC!4;`1 C6 4 MỘT SỐ VI SINH VẬT TRONG ĐỜI SỐNG 1. KHÁI QUÁT: 1.1 Sơ lược về bệnh tiểu đường: n@C1^4 4!*! )WII*!)4*IAN !*1!AHI)'5)c'I),19^*!F X1196I! nBW]a!. !4GCHIAJ KLI3456789:;,- #()*+,-M678 #$;9; #$;9; 9;;9;,-MN9" 3. Ưu và nhược điểm của Insulin2 4. Nguyên tắc dử dụng và bảo quản InsulinD )OP345D B,!=,D 5.Kết. Phagơa;k.C;IlI14IFWAIc*]> !C9AN9IFV;9AC)4•4C-%1>; C!N`WN,eCWN,eI!U;I  Virut của tế bào nhân thực a*YJFI4A!*F*A*!*F *A*;Ab345*!94GC)AX' C!^>FZ> ‡Enzym