ĐIỆN DI HEMOGLOBIN ĐIỆN DI HEMOGLOBIN MỤC TIÊU MỤC TIÊU       !"#$% & '() *#$%  +, /0 Sự thành lập hemoglobin 1 2  '3  4567Hem 8 Globin 9:;<53=  ;>?3@>A [...]... Thalassemia Hemoglobin bất thường (bệnh Hb) > 700 loại Hb bất thường Hemoglobin S ­ Thường gặp ở Châu Phi, gây bệnh HC hình liềm Hemoglobin E ­ Đông Nam châu Á ­ HbE α2β226glu→lys ­ HbAE, HbEE ­ HbE/β-thal … 13 ĐIỆN DI HEMOGLOBIN • Định nghĩa – Điện di là sự di chuyển của các phân tử tích điện trong một môi trường điện • Các yếu tố ảnh hưởng – Tốc độ di chuyển của các phân tử này phụ thuộc vào điện tích,... tử, pH của dung dich đệm, đặc điểm của môi trường hỗ trợ, khung thời gian cho phương pháp tiến hành và nhiệt độ của hệ thống hoạt động • Ứng dụng: điện di hemoglobin, điện di protein huyết thanh NGUYÊN LÝ • Phương pháp điện di – phương pháp lý hóa – dùng dòng điện một chiều làm di chuyển các phân tử mang điện • Mục đích của phương pháp – dựa trên sự tích điện của các phân tử, và tốc độ di chuyển khác... • Nguồn điện Cathod e e Ano d • Bể chứa (môi trường đệm, môi trường hỗ trợ) Electrophoresis tank • Thiết bị bị phát hiện và định lượng Paper support medium Trong một hệ thống điện di, các phân tử tích điện di chuyển qua một môi trường hỗ trợ nhờ vào các lực được phát ra từ môi trường điện 16 Nguyên lý phân tách • Theo điện tích • Theo kích thước (1) Theo điện tích • Khi những phân tử tích điện được... trong các hemoglobin bất thường thay đổi điện tích thật sự của chúng và cũng di chuyển Ở pH kiềm HbC, E, A2 và O di chuyển cùng nhau để hình thành 1 băng đơn giản, HbS, D và G cũng cùng di Các kỹ thuật điện di Hemoglobin Acid (Citrate agar) ở pH 6,2  Các phân tử Hb tách ra dựa trên sự khác biệt về điện tích và khả năng gắn kết với agar  Thường được sử dụng để phân biệt các Hb bất thường cùng di chuyển... được đặt trong môi trường điện, chúng di chuyển về hai phía cả cực dương và cực âm theo điện tích của chúng 18 (2) Theo kích thước phân tử 19 (1) Normal (2) New born (3) Hb C trait [A-C] (4) Hb SC disease [S-C] (5) Sickle cell disease [S-S], (6) Sickle cell trait [A – S] (7) New born (8) Normal Citrate Agar Electrophoresis ( acid pH) Reading of results Các kỹ thuật điện di Hemoglobin Alkaline (Cellulose... (Cellulose Acetate) ở pH 8,6 Acid (Citrate agar) ở pH 6,2 Các kỹ thuật điện di Hemoglobin Alkaline (Cellulose Acetate) ở pH 8,6      Điện di Hb với gel cellulose acetate ở pH kiềm: pp sàng lọc đầu tiên được sử dụng để phát hiện các Hb bất thường Tất cả các phân tử Hb tích di n âm và di chuyển về phía cực dương tỷ lệ với điện tích âm của chúng Những chuỗi globin bất thường sẽ khác nhau về số... HC kiềm, đa sắc ) • Tiền sử gia đình có bệnh lý hemoglobin • Kết quả sàng lọc trước sinh dương tính • Kết quả một số test sàng lọc HC liềm, bệnh HbH, HbE dương tính Lợi ích của Kỹ thuật điện di Hb ►Phương pháp kinh tế, được sử dụng rộng rãi trong nhiều năm ►Đánh giá nồng độ HbA2 ►Xác định một số Hb bất thường đã được biết rõ Bất lợi của kỹ thuật điện di • Tốn công • Không chính xác trong – định lượng... (HbA2) – phát hiện các Hb bất thường di chuyển nhanh (HbH, Hb Barts) • Tính chính xác đối với HbA2 kém hơn so với HPLC (Kỹ thuật sắc kỹ lỏng cao áp) và một số kỹ thuật khác MỘT SỐ KỸ THUẬT PHÂN TÁCH HEMOGLOBIN • IEF ­ Isoelectric Focusing: tập trung đẳng điện • HPLC – High Performance Liquid Chromatography: Sắc ký lỏng cao áp • Capillary electrophoresis (CE) ­ Điện di mao quản ƯU ĐIỂM CỦA CE • Hoàn toàn... electrophoresis (CE) ­ Điện di mao quản ƯU ĐIỂM CỦA CE • Hoàn toàn tự động hóa từ khâu chuẩn bị hemolysate để định lượng tương đối và xác định tỷ lệ hemoglobin • Thể tích mẫu tối thiểu là bản chất của kỹ thuật điện di mao quản • Dễ dàng giải thích vì đường biểu di n kết quả không bị ảnh hưởng bởi các đỉnh ngoại lai • Định lượng chính xác HbA2, HbF và HbS • Tách HbE khỏi tỷ lệ HbA2 để dễ dàng xác định và... giảm, HbA2 tăng, HbF tăng – Xuất hiện các Hb bất thường: HbH, HbBarts, HbE, HbS, HbC, HbD • Kết luận: – Bệnh lý thalassemia: alpha, beta – Bệnh lý hemoglobin: HbE, HbC, HbD, HbS – Bệnh lý kết hợp: thalassemia + bệnh hemogobin CÁC BƯỚC ĐỌC KẾT QUẢ ĐIỆN DI Hb 1 Tỷ lệ HbA? 2 HbA được thay thế bằng thành phần nào? 1 HbA nằm trong giới hạn bình thường: kết quả gần như bình thường 2 HbA giảm 1 Được thay . gt5 fE('Y( 2Eh y zLii[ 2? g  p Hemoglobin bất thường (bệnh Hb) ĐIỆN DI HEMOGLOBIN ĐIỆN DI HEMOGLOBIN 1 n{> n{> X n9wu>5(|) 3}=3. ĐIỆN DI HEMOGLOBIN ĐIỆN DI HEMOGLOBIN MỤC TIÊU MỤC TIÊU     . tách 1 Theo điện tích 1 Theo kích thước „ (1) Theo đi n tích ệ • Khi những phân tử tích điện được đặt trong môi trường điện, chúng di chuyển về hai phía cả cực dương và cực âm theo điện tích