ẢNH HƯỞNG CỦA CÔNG NGHỆ SAU THU HOẠCH TỚI SỰ PHÁT TRIỂN CỦA NẤM A. flavus VÀ KHẢ NĂNG SINH ĐỘC TỐ AFLATOXIN Ở LẠC guyễn Văn Thắng 1, Phan Quốc Gia 1 , guyễn Thị Yến 2 , guyễn Thị Chinh 1 , guyễn Xuân Thu 1 SUMMARY Effects of Post-harvest Activities on Aspergillus Invasion and Aflatoxin Contamination in Groundnut Aflatoxin is produced by Aspergillus flavus fungi and can cause liver and other cancers in humans. Groundnut is one of the hosts of fungi. Two factorial experiments were implemented at LRDC during 2008-2009 that are: (i) Effection of manners of pods drying (sun and temperature) and seed moisture content (10; 12, 14; 16%) to seed infection and aflatoxin contamination and (ii) Effection of storages (normal/open store and cold store = 18-22 0 C) and pod containers (two layers PE bag, one layer PE bag and bamboo made container); seed moisture 12% to seed infection and aflatoxin contamination; The effort illustrated that sun drying made less infection comparing to temperature drying. Seed moisture content as less as of 10, 12, 14 & 16% made longer time storage with less A. flavus infection and lower aflatoxin contamination in both normal store and cold store (18-22 o C). To meet national standard requirement (aflatoxin B1content below 5 ppb), it is suggested that drying pod to as lower as of 12% seed moisture content, using one layer PE bag. Time of storage less than 10 months if drying by sun and less than 6 months if drying by temperature in the condition of store is normal. Time of store more than 10 months if store in cold condition (8-22 0 C). Keywords: Groundnut, Effects, Aflatoxin Contamination. I. §ÆT VÊN §Ò Cây lc (Arachis hypogaea L.) là mt trong s cây ký ch mn cm vi nm Aspergillus flavus sn sinh c t aflatoxin. S dng sn phNm cha aflatoxin có th gây ung thư cho ngưi và ng vt và vì vy aflatoxin làm nh hưng n cht lưng sn phNm và giá tr thương mi ca nó. N m Aspergillus flavus có  trong t, trong không khí. N ó có th tn công vào tt c các b phn ca cây, vào các giai on ca quá trình sn xut, thu hoch và bo qun. N m có th tn ti  nhit  10-50 o C và  Nm ht 12-40%. iu kin khí hu  các nưc nhit i rt 1 Trung tâm N ghiên cu và Phát trin u  - Vin Cây lương thc và Cây thc phNm. 2 Vin Môi trưng N ông nghip. Tạp chí khoa học và công nghệ nông nghiệp Việt Nam thun li cho nm lõy nhim, phỏt trin v sn sinh aflatoxin (Waliyar & ctv., 2003). Vit N am, nm tn ti v tn cụng lc, ngụ, h tiờu. Thit hi do nm cha cú bỏo cỏo c th song kt qu iu tra cho thy nm tn cụng nhiu trờn lc v lm nh hng n cht lng thng phNm v kh nng xut khNu lc ht. Vỡ vy vic nghiờn cu nhm hn ch s tn cụng ca nm v gim thiu hm lng aflatoxin trong ht lc l cn thit. Bỏo cỏo ny tp hp cỏc kt qu nghiờn cu v nh hng ca phng thc lm khụ qu lc, Nm ht a vo bo qun, loi kho v loi bao bỡ dựng bo qun n kh nng xõm nhim v kh nng sinh c t aflatoxin ca nm Aspergillus flavus lờn ht lc t ú khuyn cỏo bin phỏp gim thiu aflatoxin ti u. II. VậT LIệU V PHƯƠN G PHáP N GHIÊN CứU 1. Vt liu nghiờn cu S dng lc qu (ging L14) thu hoch v xuõn 2008. Hai loi kho bo qun l kho thng (khụ thoỏng, nhit khụng khớ) v kho mỏt (nhit iu hũa 18-22 0 C). 2. Phng phỏp nghiờn cu - B trớ thớ nghim: Nghiờn cu nh hng ca phng thc lm khụ qu v Nm ht a vo bo qun n mc nhim ca nm Aspergillus flavus v kh nng sinh c t aflatoxin c thc hin vi 2 phng thc lm khụ l phi nng (P) v sy (S); Mi phng thc lm khụ cú 4 mc Nm ht a vo bo qun khỏc nhau l 10%, 12%, 14%, 16%; Bo qun trong kho thng v c b trớ theo phng phỏp hon ton ngu nhiờn (RCD) vi 3 ln nhc li. N ghiờn cu nh hng ca loi kho dựng bo qun v loi bao bỡ n mc nhim ca nm Aspergillus flavus v kh nng sinh c t aflatoxin c thc hin vi 2 loi kho (kho thng v kho mỏt) vi 3 loi bao bỡ (cút, bao PE mt lp; bao PE hai lp), Nm ht a vo bo qun 12% v c b trớ theo phng phỏp hon ton ngu nhiờn (RCD) vi 3 ln nhc. - Xỏc nh t l bnh: Theo ti liu ICRISAT, kim tra nm bnh trờn ht bng phng phỏp a giy thm: T l bnh (%) = Tng s ht b bnh x 100% Tng s ht kim tra - Xỏc nh hm lng Aflatoxin: Phng phỏp xột nghim Enzym ni hp th min dch (ELISA). - Xỏc nh m ht: Dựng mỏy o Nm ht sn xut ti Nht: Kett-Grainer II/PM-300. III. KếT QUả V THảO LUậN 1. S thay i m ht trong thi gian bo qun c hai phng thc lm khụ (phi nng v sy), sau 1 thỏng bo qun Nm ht a vo bo qun cỏc cụng thc 10- 12-14-16% u gim v giỏ tr gn nh nhau. Cỏc thỏng tip theo Nm ht tng gim theo Nm khụng khớ v chờnh lch khụng ỏng k. Sau 10 thỏng bo qun trong kho thng Nm ht dao ng trong khong 5,7-6,1% ( th 1&2). T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam  th 1. S thay i Nm  ht trong quá trình bo qun ca phương thc phơi nng  th 2. S thay i Nm  ht trong quá trình bo qun ca phương thc sy * m  ht  các loi kho và loi bao bì dùng bo qun: Vi Nm  ht ưa vào bo qun là 12%, trong kho thưng, Nm  ht lc cha trong bao hai lp thay i không nhiu dao ng t 11,5-12%. Hai loi bao (mt lp và cót) Nm  ht gim rt nhanh sau mt tháng bo qun (t 12% xung 8,8%), sau ó gim dn và luôn duy trì thp hơn bao hai lp ( th 3). Phương pháp bo qun mát,  Nm ht lc ng trong bao hai lp gim t 12% xung dưi 10% sau tháng bo qun u tiên, các tháng tip theo không thay i nhiu. Hai loi bao (mt lp và cót) Nm  ht gim rt nhanh sau 2 tháng u bo qun (t 12% xung 5,1 và 5,2%), sau ó dao ng xung quanh 6% và luôn duy trì thp hơn so vi bao hai lp ( th 4). Như vy lc ng trong bao hai lp luôn duy trì Nm  cao  c hai loi kho bo qun thưng và mát. Bo qun trong kho mát làm gim Nm  ht nhanh hơn và thp hơn so vi bo qun  kho thưng. 0 2 4 6 8 10 12 14 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Th¸ng b¶o qu¶n Èm ® é h ¹t Cãt Bao 1 líp Bao tr¸ng PE 0 2 4 6 8 10 12 14 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Th¸ng b¶o qu¶n Èm ®é h¹t Cãt Bao 1 líp Bao tr¸ng PE  th 3. S thay i Nm  ht trong quá trình  th 4. S thay i Nm  ht trong quá trình bo qun i vi loi bao bì trong kho mát m  ht m  ht m  ht m  ht T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam bo qun i vi loi bao bì trong kho thưng 2. Tình hình nhiễm nấm bệnh trên hạt 2.1. Thành phần nấm bệnh hại hạt lạc ở các phương pháp bảo quản Kt qu kim tra, giám nh các mu ht lc sau bo qun 12 tháng  kho thưng và kho mát ã xác nh ưc 7 loi nm bnh hi là Asperglilus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus parasiticus, Fusarium solani, Penicilium spp., Rhizoctonia solani và Sclerotium rolfsii (bng 1). T l nhim nm Asperglilus flavus cao nht (trên 15%). Kt qu này phù hp vi kt qu ca Kulwant Singh (Kulwant Singh và ctv., 1991). Bảng 1. Thành phần nấm hại có mặt trên hạt lạc TT Tên nấm bệnh Họ Bộ Tỷ lệ hạt nhiễm (%) 1 Aspergillus flavus Moniliaceae Moniliales > 15 2 Aspergillus niger Moniliaceae Moniliales > 15 3 Aspergillus parasiticus Moniliaceae Moniliales < 5 4 Fusarium solani Tuberculeriacea Moniliales < 5 5 Penicilium spp. Moniliaceae Moniliales 5-15 6 Rhizoctonia solani Rhizoctoniacea Mycelia sterilia < 5 7 Sclerotium rolfsii Rhizoctoniacea Mycelia sterilia < 5 2.2. Tỷ lệ nhiễm nấm Aspergillus flavus trên hạt của các công thức bảo quản * T l nhim nm  hai phương thc làm khô và 4 mc  Nm ht: Sau thi gian bo qun 3 tháng mi bt u thy xut hin nhim nm  mt s công thc và cao nht (12%)  công thc Nm  ht 16% i vi phương thc phơi và 15%  phương thc sy. Các công thc khác ca phương thc phơi vn chưa b nhim nm, phương thc sy nhim t l thp dưi 5% (bng 2). T l nhim nm tăng dn theo thi gian bo qun. Lc phơi nng Nm  u vào t l thun vi t l nhim nm Asapergillus flavus và sau 10 tháng bo qun t l nhim cao nht  Nm  16% (nhim 39%) thp nht  Nm  10% (nhim 4%). Lc sy không thy t l thun rõ, tuy nhiên công thc Nm  10% vn có t l nhim thp nht và sau 10 tháng bo qun ch nhim 11% trong khi ó công thc Nm  12% b nhim cao nht n 60%. Như vy sau mt tháng bo qun Nm  ht  các công thc u gim v gn bng nhau nhưng công thc Nm  trưc bo qun cao (12%, 14% và 16%) t l nhim nm cao hơn khi bo qun dài. T l nhim nm trung bình ca phương thc phơi thp hơn so vi phương thc sy. Bảng 2. Tỷ lệ nhiễm A. flavus trên hạt lạc ở các m độ đầu vào ở lạc phơi và sấy Công thức ẩm độ (%) Trước khi BQ Số tháng bảo quản 1 2 3 4 6 8 10 Phương thức phơi 10 0 0 0 0 1 3 4 4 12 0 0 0 0 3 6 7 9 T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam 14 0 0 0 0 10 15 17 19 16 0 0 0 12 17 28 29 30 CV% 8,8 5,8 6,4 6,7 LSD 0,05 1,3 1,4 1,7 2,0 Phương thức sấy 10 0 0 0 0 5 7 8 11 12 0 0 0 4 10 20 44 60 14 0 0 0 5 11 18 26 28 16 0 0 0 15 18 25 30 45 CV% 6,5 5,9 3,9 5,9 5,1 LSD 0,05 0,7 1,2 1,3 3,0 3,4 * T l nhim nm  các loi kho và loi bao bì dùng bo qun: Khi bo qun ưc 3 tháng bt u phát hin s nhim nm và cao nht vn là các công thc bao hai lp, ln lưt là 20%  kho thưng và 26%  kho mát (bng 3). Bo qun bng bao 1 lp có t l nhim nm thp và tc  chm nht. Sau 4 tháng (bo qun kho thưng) và 6 tháng (bo qun kho mát) vn chưa thy lc nhim nm Asapergillus flavus. Tuy nhiên t l nhim gia công thc bao 1 lp và cót khác nhau không ln. T l nhim tăng dn theo thi gian bo qun. Sau 10 tháng t l nhim cao nht  bao hai lp, thp nht  bao 1 lp (nhim 10%  kho thưng và 6%  kho mát). Bảng 3. Tỷ lệ nhiễm A. flavus trên hạt lạc ở các bao chứa bảo quản thường và mát (%) Loại bao chứa Trước khi BQ Số tháng bảo quản 1 2 3 4 6 8 10 Bảo quản kho thường Cót 0 0 0 4 7 10 11 16 Bao dứa 0 0 0 0 0 2 4 10 Bao hai lớp 0 0 0 20 27 40 56 100 CV% 3,5 2,7 7,3 3,6 2,5 LSD 0,05 0,6 0,6 2,5 1,7 2,1 Bảo quản kho mát (điều hoà 18-22 0 C) Cót 0 0 0 2 4 4 6 9 Bao dứa 0 0 0 0 0 0 1 6 Bao hai lớp 0 0 0 26 35 42 50 100 CV% 4,9 5,1 5,6 5,1 2,1 LSD 0,05 0,9 1,3 1,7 1,9 1,6 3. Hàm lượng độc tố aflatoxin trong hạt của các công thức bảo quản * Hàm lưng c t  các phương thc làm khô và  Nm ht khi bo qun: Không phát hin ưc hàm lưng aflatoxin B1 (AfB1) trong ht lc trưc khi bo qun và sau khi bo qun ưc 2 tháng. Sau 3 tháng bo qun ch phát hin thy AfB1  công thc Nm  ht 16% ca phương thc phơi (0.7 µg/kg) (bng 4). Hàm lưng c t AfB1 trong ht tăng dn theo thi gian bo qun.  phương thc phơi, sau 10 tháng bo qun, hàm lưng AfB1 cao nht (9,3 và 8,8µg/kg)  2 mc T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam Nm  ht 14% và 16%. i vi phương thc sy, sau 10 tháng bo qun, hàm lưng AfB1  các mc Nm  ht khác nhau không nhiu, dao ng t 6,1 n 8,2µg/kg. Theo Quyt nh s 46/2007/Q-BYT v vic quy nh gii hn ti a ô nhim sinh hc và hoá hc trong thc phNm thì hàm lưng aflatoxin B1 không vưt quá 5 µg/kg. Như vy,  bo qun an toàn lc thì thi gian bo qun không quá 10 tháng vi Nm  ht 12% tr xung và không quá 6 tháng khi  Nm ht trên 14% nu ht làm khô bng phơi nng. Thi gian bo qun không quá 6 tháng i vi lc làm khô bng phương thc sy  khong  Nm ht ưa vào bo qun t 10 n 16%. Bảng 4. Hàm lượng AfB1 trong hạt các công thức m độ ở lạc phơi và sấy ( µ g/kg) Ẩm độ hạt(%) Trước khi BQ Số tháng bảo quản 1 2 3 4 6 8 10 Phương thức phơi 10 0 0 0 0 0 1,8 2,6 2,8 12 0 0 0 0 0 3,2 3,7 4,2 14 0 0 0 0 1,4 4,6 6,3 9,3 16 0 0 0 0,7 2,8 4,9 6,2 8,8 CV% 8,0 4,9 8,1 LSD 0,05 0,6 0,4 1,0 Phương thức sấy 10 0 0 0 0 1,1 4,5 6,6 6,7 12 0 0 0 0 0 4,7 7,7 7,8 14 0 0 0 0 1,7 1,8 5,1 8,2 16 0 0 0 0 1,9 4 5,9 6,1 CV% 7,4 7,4 5,1 3,3 LSD 0,05 0,2 0,5 0,6 0,4 * Hàm l ưng AfB1trong ht lc  2 loi kho và 3 loi bao bì dùng bo qun: Bảng 5. Hàm lượng AfB1 trong hạt lac các bao chứa bảo quản thường và mát ( µ g/kg) Loại bao bì Trước khi BQ Số tháng bảo quản 1 2 3 4 6 8 10 Bảo quản thường Cót 0 0 0 0 0 5,4 6,1 6,6 Bao dứa 0 0 0 0 0 7,8 8,7 9,2 Bao hai lớp 0 0 0 0 0 28,8 29,0 30,6 CV% 3,1 5,1 4,6 LSD 0,05 0,9 1,5 1,4 Bảo quản mát (điều hoà 18-22 0 C) Cót 0 0 0 0 0 1,3 2,2 2,4 Bao dứa 0 0 0 0 0 1,4 2,8 3,1 Bao hai lớp 0 0 0 0 0 21,6 21,8 22,3 CV% 6,4 6,7 4,4 LSD 0,05 1,0 1,2 0,8 T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam 7 Không phát hin thy AfB1 trong tt c các mu lc sau 4 tháng bo qun. Sau 6 tháng bo qun phát hin thy c t AfB1  tt c các công thc (bng 5). Hàm lưng c t AfB1 tăng dn theo thi gian bo qun. Sau 10 tháng, bo qun bng bao hai lp  c 2 loi kho u có hàm lưng AfB1 cao nht ln lưt là 30,6µg/kg (kho thưng) và 22,3µg/kg (kho mát). Bo qun bng cót và bao 1 lp có hàm lưng thp hơn và khác nhau không nhiu. Tuy nhiên, bo qun  kho thưng vi 3 loi bao cha khác nhau ch ưc 4 tháng còn bo qun mát i vi cót và bao da 1 lp ưc trên 10 tháng (vi Nm  ht bo qun 12%). Như vy, phương pháp bo qun mát hn ch sn sinh c t aflatoxin tt hơn phương bo qun thưng. Dùng bao hai lp,  Nm  ht 12% sau 10 tháng bo qun hàm lưng c t AfB1 trong ht cao hơn bao da 1 lp và dùng cót. IV. KÕT LUËN m  ht ưa vào bo qun càng cao (12, 14 và 16%) d b nhim nm Asapergillus flavus khi bo qun dài. Làm khô lc bng cách phơi nng nhim nm thp hơn so vi làm khô bng sy. Lc ng trong bao hai lp nhim nm cao hơn ng trong cót và bao da 1 lp  c kho thưng và mát.  t tiêu chuNn B Y t (AfB1 dưi 5µg/kg), lc làm khô bng phơi nng có th bo qun n 10 tháng vi Nm  ht 12% tr xung, ch bo qun n 6 tháng nu  Nm ht 14-16%, lc làm khô bng sy ch bo qun ưc 6 tháng k c  Nm ht ưa vào bo qun  mc 10%. Kho mát hn ch kh năng sinh c t aflatoxin tt hơn kho thưng. Bao hai lp, vi Nm  ht 12% sau 10 tháng bo qun hàm lưng c t aflatoxin b nhim trong ht cao hơn bao da 1 lp và dùng cót.  gim thiu s xâm nhim, phát trin ca nm Aspergillus flavus và kh năng sinh c t aflatoxin trên lc sau thu hoch, khuyn ngh áp dng các bưc sau: Lc nên ưc phơi hoc sy ngay sau khi thu hoch n Nm  ht dưi 12%, ng trong bao ti 1 lp kê trên giá, bo qun không quá 10 tháng nu lc làm khô bng phơi nng, không quá 6 tháng nu lc làm khô bng sy nu bo qun trong kho thưng. Bo qun trong kho mát chy iu hoà nhit  (18-22 0 C) gi ưc sn phNm trên 10 tháng. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. guyễn Thị Hà, 2005. Tìm hiu nh hưng ca mt s phương thc bo qun n cht lưng ca lc trong quá trình bo qun. Lun văn tt nghip i hc. Hà Ni. 2. guyễn Thị Ly, 1996. iu tra xác nh thành phn bnh héo lc và nghiên cu bưc u v nm Aspergillus flavus sn sinh c t aflatoxin trên lc  min Bc Vit Nam. Lun văn Thc s khoa hc nông nghip, Hà Ni. 3. Kulwant Singh, Jens C. Frisvad, Ulf Thrane and S. B. Mathur, 1991. An Illustrated manual on Indentification of some seed-borne Asspergilli, Fusaria, Penicillia and Mycotoxin. DGISP for developing countries, ISBN 87-7026-3175, 133p. 4. V. K. Mehan, guyen Trung Phong, Phan Lieu, go Thi Lam Giang, 1996. Assessment of Aspergillus flavus infection and aflatoxin contamination in groundnut in southern Vietnam, ICRISAT-OPI. T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ n«ng nghiÖp ViÖt Nam 8 5. F. Waliyar, P. Lava Kumar, S. . igam, K. K. Sharma, R. Aruna, D. Hoisington and C. L. L. Gowda. Strategies for the management of aflatoxin contamination in groundnut. Groundnut aflatoxin management and genomics. International conference. 5-9 November 2006, Guangzhou, Guangdong, China. Pp 32. gười phản biện: PGS. TS. Nguyn Văn Vit . ẢNH HƯỞNG C A CÔNG NGHỆ SAU THU HOẠCH TỚI SỰ PHÁT TRIỂN C A NẤM A. flavus VÀ KHẢ NĂNG SINH ĐỘC TỐ AFLATOXIN Ở LẠC guyễn Văn Thắng 1, Phan Quốc Gia 1 ,. ViÖt Nam 8 5. F. Waliyar, P. Lava Kumar, S. . igam, K. K. Sharma, R. Aruna, D. Hoisington and C. L. L. Gowda. Strategies for the management of aflatoxin