Virut gamma-herpes gây ung th (Gamma Herpes is the cause of cancer) M. A. Epstein (Biên dịch theo bài giảng mở đầu hội thảo quốc tế về bệnh ung th vòm mũi họng, tổ chức tại Hồng Kông tháng 2/2003). Phan Thị Phi Phi Giới thiệu về GS M. A Epstein: Giáo s Anthony Epstein giảng dạy Y học ở Trờng Đại học Y Cambridge và Trờng Đại học Y của Bệnh viện Middlesex ở Luân đôn. Sau nghĩa vụ quân sự, Ông về lại Bệnh viện Middlesexx và đợc đào tạo về mô bệnh học tại Viện Bland Sutton. ở đây Ông trở thành ngời đi đầu xây dựng chuyên ngành của mình thành một khoa học thực nghiệm. Một thời gian đợc làm việc bên cạnh GS George Palade ở Viện Rockefeller tại New York về kỹ thuật kính hiển vi điện tử là kỹ thuật chủ chốt đã giúp Ông thực hiện nghề nghiệp nghiên cứu y học của mình. Vào năm 1961 Anthony Epstein gặp Denis Burkitt và bắt đầu một loạt các nghiên cứu về u limphô Burkitt và 3 năm sau đó đã có các thành tựu tột đỉnh về tế bào dòng do EBV tạo ra, phát hiện nhờ vào kính hiển vi điện tử. Phát hiện đầu tiên này đã mở ra một lĩnh vực nghiên cứu về virut học và ung th ở ngời. Bắt đầu làm việc ở Bệnh viện Middlesexx và từ 1968-1985 ở trờng Đại học Tổng hợp Bristol với cơng vị Chủ nhiệm Bộ môn Mô bệnh học. Anthony Epstein đã dẫn đầu trong việc phát triển lĩnh vực nghiên cứu này thông qua các công trình của cá nhân mình và qua các công trình hợp tác nghiên cứu với Werner và Gertrude Henle ở Philadelphia và George và Eva Klein ở Stockholm. Các cố gắng của các tác giả này trong vài thập kỷ đ xác nhận vai trò gây ung th ở ngời của EBV, có vai trò gắn với nguyên nhân gây ra nhiều bệnh lý ác tính, trong đó ung th vòm mũi họng đợc xem là quan trọng nhất đối với sức khoẻ con ngời. Anthony Epstein đã đợc nhiều giải thởng y hoc: Giải Quốc tế Gairdner (Canada, 1988), giải Paul Ehrlich và Ludwig Darmstaedter (Đức, 1973), Giải thởng của Bristol Myers trong nghiên cứu ung th (USA, 1982), giải Grifuel (Pháp, 1980) Mề đay Royal (Hội Royal ở Luân Đôn, 1992) và đợc ban Tớc Hiệp sĩ của Hoàng hậu Anh năm 1991. Nhập đề: Nhận thức và sự chấp nhận về vai trò gây ung th của một vài gia đình virut khác nhau đã phát triển rất nhiều trong 40 năm qua và ít nhất là trong vòng các thập kỷ vừa qua. Đáng ngạc nhên là vai trò gây ung th của nhóm virut -herpes. Mặc dù đa số các chứng cứ đều liên quan đến virut herpes gây ung th ở súc vật nhng cũng đã cho ta các hiểu biết quan trọng về các mối tơng tác của virut -herpes với ung th của ngời. Tất cả các thành viên của gia đình virut - herpes lan truyền ngang và gây nhiễm túc chủ ở tuổi rất bé và thờng là không triệu chứng. Do vậy về sau chúng gây nhiễm tiềm ẩn kéo dài cả đời ngời trong tế bào limphô và trong một số trờng hợp cả các tế bào khác nữa, có khả năng gây tăng sinh các tế bào nhiễm virut tiềm tàng trong điều kiện in vivo, tạo ra các nguy cơ gây ung th qua các virut oncogen hay qua các cơ chế khác. EBV là virut đầu tiên và đôi khi là virut độc nhất đã biết đại diện cho gia đình virut này trớc khi nó liên kết với nhóm virut herpes hớng tế bào limphô B của loài khỉ của thế giới cũ (Old world monkeys- khỉ ở các châu á, Âu, Phi) và của loài linh trởng (apes) và với các virut herpes có liên quan ít với tế bào limphô T của loài khỉ thế giới Mới (New world monkeys- khỉ ở châu Mỹ, có đuôi dài). Về sau này nhiều tác giả đã chứng minh rằng các virut herpes ở chuột nhắt giống với EBV về di truyền, có thể gây ung th và chỉ sau đó ít năm đã chứng 103 minh đó là virut herpes gây bệnh Kaposi sarcoma ở ngời (KSHV hay đôi khi đợc gọi là HHV-8) và đã bổ sung thêm virut gây ung th ở ngời mới đợc biết đó vào gia đình này. Gần đây nhất một virut -herpes hớng tế bào limphô B đã thấy trong bệnh u limphô ở khỉ thế giới mới, đợc xem nh sự đồng tiến hoá (co- evolution) của một vài virut -herpes gây ung th ở túc chủ. Sự xem xét các virut herpes gây ung th ở Hội nghị quốc tế mà dành hết cho ung th vòm mũi họng (NPC) là phù hợp vì hai lý do. Lý do thứ nhất là vì NPC là một ung th của ngời đầu tiên có kết hợp với một nguyên nhân có thể là virut. Lý do thứ hai, đặc biệt hơn là EBV bị buộc cho tội là có bộ gen trong tất cả các tế bào ung th vòm mũi họng thể không biệt hoá trong đợt bệnh toàn phát và là hiện tợng xẩy ra ở khắp thế giới. Mặc dù các cơ chế chính xác của virut - herpes gây ung th còn cha đợc hiểu rõ, một số lớn thông tin trên cơ sở phân tử cho các cơ chế đó đã đợc tập hợp lại và có thể sẽ đợc nhanh chóng hiểu rõ hoàn toàn. Nếu hy vọng rằng trong hội nghị lần này tất cả các tiến bộ về phơng diện này sẽ đợc thông báo đầy đủ thì không hợp lý. Một chuyên đề rộng lớn nh vậy về viruts - herpes thì không thể nào trình bày tất cả mọi đặc điểm của các virut này dù khi tổ chức cả nhiều bài giảng trong một đợt hay nhằm làm một tổng quan đơn giản về các virut này cũng là thiếu suy nghĩ và không hợp lý. Để thay cho việc đó chúng ta sẽ tìm hiểu các ý nghĩa chung hơn là các đặc điểm đặc hiệu hẹp hơn trong các thành tựu nghiên cứu mới nhất Virut Epstein-Barr (EBV) Trong bối cảnh các virut và ung th ở ngời cần phải xem xét lại một cách tổng quát từ các phản ứng đến các phát hiện ra EBV cách đây gần 40 năm. Ngời ta đều biết rằng virut đã đợc tìm kiếm trong các mẫu sinh thiết của đợt toàn phát của bệnh u limphô Burkitt (BL) ở Đông Phi châu nhng tất cả các phơng pháp phát hiện virut đều không đa lại kết quả. Các hiện tợng, ý tởng và các nghiên cứu để cuối cùng đa đến sự phát hiện ra EBV đã đợc mô tả đầy đủ gần đây nhng cần phải nhớ rằng sự thành công là phụ thuộc vào việc nuôi cấy các tế bào limphoblast của bệnh BL ở thời điểm mà các tế bào tổ chức limphô của ngời không đợc cấy duy trì in vitro trớc đó và khi sự chứng minh các virut bằng kính hiển vi điện tử trong tế bào nuôi cấy không có hoạt tính sinh học. Việc sử dụng kính hiển vi điện tử để nghiên cứu các bệnh phẩm sinh học lúc bấy giờ còn cha có kinh nghiệm và cha hiểu biết đầy đủ. Lúc bấy giờ đó là các phơng pháp không chính thống đã gây ra nghi ngờ kéo dài trong nhiều năm, ở thời điểm mà bắt buộc phải đơng đầu với khái niệm rằng virut phải có mối liên kết với nguyên nhân các bệnh lý ác tính ở ngời. Một ví dụ về các nghiên cứu đơng thời là làm thế nào để giải thích các cơ chế phân tử có thể cắt nghĩa cho sự mơ hồ, bối rối kéo dài liên quan đến EBV và bệnh tăng bạch cầu đơn nhân nhiễm khuẩn giết chết ngời bệnh. Bệnh tăng sinh limphô liên kết nhiễm sắc thể giới tính (XLP-X link lymphoproliferative disease) lần đầu tiên đợc Barr và cs. (đôi khi bệnh này đợc gọi là hội chứng Duncan) phát hiện trong một gia đình và sau đó đợc Purtilo nghiên cứu tiếp tục. Trong một số ít gia đình, quãng 50% trẻ trai có liên quan chặt chẽ huyết thống bị chết do nhiễm EBV tiên phát gây suy đa hệ thống do tổ chức bị phá huỷ bởi phản ứng của tế bào Tc chống lại EBV mà cơ thể không kiểm soát đợc. Trong bệnh, hoạt tính độc tế bào lan rộng từ các tế bào đích chính thức (tế bào nhiễm EBV) sang cả các tế bào bình thờng của các cơ quan có chức năng sống còn. Mới đây, gen trong hội chứng bệnh tăng sinh limphô liên kết nhiễm sắc thể giới tính đã đợc tách dòng phân tử, nằm trên cánh dài nhiễm sắc thể X và tìm thấy rằng nó mã hoá một protein chịu trách nhiệm kiểm soát sự hoạt hoá các tế bào T. Do gen này bị biến dị trong bệnh nhân bị bệnh XLP nên sự kiểm soát này bị suy yếu và là cơ chế phân tử của bệnh phù hợp với 104 các đặc điểm gia đình và mô bệnh học của bệnh đã đựoc nhận biết trong quá khứ. Một đặc điểm mới khác trong các nghiên cứu về EBV nhng ở mức quần thể là khả năng có thể kiểm soát bệnh bằng tiêm chủng chống virut. Trong nhiều năm qua nhiều tác giả đã nghiên cứu các kháng nguyên màng (MA) biểu lộ trên bề mặt các tế bào nhiễm virut thấy các kháng thể chống lại các MA này trung hoà đợc virut. Các công trình nghiên cứu này cuối cùng đã chứng minh rằng các glycoprotein tinh khiết của các MA (gp 340) có thể cảm ứng sự sản xuất các kháng thể trung hoà virut và các đáp ứng Tc khi tiêm MA cho khỉ đầu bông (Saguinus oedipus oedipuss) và về sau này ngời ta đã biết rằng loài khỉ này là động vật duy nhất đợc dùng trong thực nghiệm để gây các tổn thơng do nhiễm EBV. Khi tiêm chủng vacxin sẽ bảo vệ đợc 100% vật bị tiêm liều virut gây ung th. Mới đây, gp340 tinh khiết chiết từ các dịch nuôi cấy tế bào động vật có vú có biểu lộ kháng nguyên MA đã đợc sử dụng có kết quả cho ngời tình nguyện ở pha thử nghiệm 1. Pha thử nghiệm 2 đợc tiến hành tiếp trong một nhóm thanh niên trởng thành với số đối tợng lớn hơn cũng đã cho các kết quả sơ bộ đáng khích lệ. Hiện nay pha thử nghiệm thứ 2 có kiểm chứng placebo đang đợc tiến hành. Nếu tất cả đều trôi chảy nh mong muốn, vacxin này có thể ngăn ngừa nhiễm EBV, loại bỏ đợc hậu quả kể cả các hậu quả lâu dài nh phát triển các loại ung th kết hợp. Virut -herpes ở con linh trởng: 1) Sau khi phát hiện EBV một thời gian ngắn, các kháng thể có phản ứng chéo với nó cũng tìm thấy trong huyết thanh của vợn, khỉ Rhesus. Các virut hớng tế bào limphô B liên quan với EBV cũng đã đợc chứng minh là gây đợc các nhiễm trùng tự nhiên tồn tại tiềm ẩn, im lặng trong nhiều loại khỉ thế giới cũ, khỉ hình ngời (không đuôi) và khỉ đầu chó. 2) Cùng thời gian này các virut - herpes mới đã phân lập đợc từ hai chủng khỉ của thế giới mới nhng chúng đều hớng tới tế bào T limphô và không liên quan nhiều đến EBV. Mặc dù cả hai virut này, HVS-herpesvirus saimiri và HVA-herpesvirrus ateles, đều không gây bệnh trong túc chủ của chúng nh ng đều có vai trò quan trọng vì chúng đều gây ung th mạnh và nhanh chóng khi tiêm cho các khỉ xa lạ (không cùng chủng) của thế giới mới. Hiện tợng này cho thấy có cơ sở phân tử của các virut HVS và HVA trong việc gây ung th cần phải đợc nghiên cứu thêm. Sự khám phá sớm các khác biệt đáng kể giữa virut -herpes của khỉ thế giới cũ và mới sớm dẫn đến ý kiến cho rằng EBV và các chủng liên quan trong các linh trởng thế giới cũ đã có trong cây tiến hoá tổ tiên linh trởng rất sớm sau khi tách đôi thành các nhánh khỉ thế giới cũ và mới (cách đây 35 đến 45 triệu năm-My) nhng trớc các nhánh khỉ khác nhau của thế giới cũ và khỉ đầu ngời tách rời khỏi chủng ngời chứng tỏ rằng các proto-EBV phải là các ký sinh vật rất cũ của các linh trởng đang phát triển. 3) Song quãng 18 tháng trớc đây một phát hiện quan trọng và bất ngờ là các virut kết hợp với u limphô, một virut liên quan với EBV, hớng tế bào B trong các khỉ đuôi sóc ở Nam Mỹ, chứng tỏ rằng virut này phải đã có mặt trong dòng tiến hoá của linh trởng một thời gian trớc khi tách đôi thành loài khỉ thế giới cũ và mới và do đó chúng còn là các nhiễm trùng cũ hơn so với proto-virus của ngời. Sự đồng tồn tại từ rất lâu của virut và túc chủ liên quan giải thích cho điều là tại sao EBV ngày nay, trong đại đa số trờng hợp là một yếu tố vô hại nh thế do có tơng tác tinh tế cân bằng với ngời. Virut Herpes 68 của chuột nhắt: Virut Herpes 68 ở chuột nhắt (MHV68) đã đợc tìm thấy ở loài gậm nhấm hoang dại cách đây 20 năm ở Slovakia trong khi đi tìm kho dự trữ các arbovirus ở súc vật. Nó thích nghi nhanh chóng với chuột nhắt của phòng thí nghiệm và đã đợc chứng minh ngay là gây ra một nhiễm trùng sinh sản cấp tính khi cho tiếp xúc nguyên phát và tiếp theo là một dạng tiềm ẩn kéo dài trong đời sống tế bào B và các tế bào khác với việc chậm gây ra tăng sinh 105 Các nhận xét kết luận limphô và/hay các biến chứng tăng sinh limphô ở 10% số súc vật thí nghiệm. Hơn nữa, MHV68 có liên quan với EBV về mặt di truyền và hiện nay đợc sử dụng nh một mô hình súc vật đặc biệt trong nghiên cứu bệnh sinh học và đáp ứng miễn dịch của vật chủ. Khi tìm dợc rằng EBV có kết hợp với 2 ung th ở ngời, đầu tiên là u limphoma Burkitt sau đến NPC thì lúc đầu các nhà khoa học cho rằng virut khó là nguyên nhân của ung th-ung th của ngời không có gì chung với virut. Thái độ của các nhà khoa học thay đổi đối với virut gây ung th ở ngời từ năm 1964 khi tìm ra EBV và năm 1994 khi tìm ra KSHV. Cả hai đều đã đợc chứng minh dờng nh bằng các phơng pháp không chính thống ở thời điểm phát hiện EBV bằng kính hiển vi điện tử, KSHV bằng RDA là phơng pháp mới đợc mô tả một năm trớc đây, còn với EBV thì đã đợc nhận biết từ 15 năm trớc đây và cho rằng là có một phần vai trò trong gây ung th ở ngời trong lúc KSHV thì ngay tức khắc đợc xem là một virut gây ung th ở ngời. Herpesvirus trong bệnh sarcoma Kaposi (KS) Giống nh các EBV, KSHV đã đợc tìm thấy bằng các phơng pháp không chính thống. Mặc dù bệnh KS là bệnh cổ điển tơng đối hiếm đã đợc nhận biết từ hơn một thế kỷ nay, nhng từ năm 1980 có sự tăng đột ngột các khối u KS ở đàn ông trẻ tuổi kèm theo sự bắt đầu dịch bệnh AIDS. Các nghiên cứu dịch tể cẩn thận đã chứng minh rằng sự tăng cao bệnh KS đi theo bệnh lây truyền bằng đờng tình dục (STD) do một yếu tố khác đã thêm vào với virut gây suy giảm miễn dịch ở ngời (HIV). Để có thể nhận dạng yếu tố này ngời ta đã sử dụng một kỹ thuật phân tử mới hoàn toàn là kỹ thuật phân tích sự khác biệt đại diện (RDA- representational differrence analysis), hoàn toàn khác với bất cứ phơng pháp chuẩn nào để phát hiện các virut. Kỹ thuật RDA cho phép mẫu bệnh phẩm của bệnh KS tìm đợc các trình tự đơn độc DNA của linh trởng (không phải là ngời) tồn tại đặc hiệu trong các thơng tổn và thu đợc kết quả chắc chắn là có herpesvirus, ngày nay đợc biết đó là các KSHV. Các cá thể bị nhiễm KSHV không có triệu chứng mang virut trong tế bào B và nó cũng gây nhiễm các tế bào KS đợc xem nh các tế bào xuất phát từ các tế bào tiền thân của nội mạc. KS không tìm đợc trong các ngời mang virut khoẻ mạnh, nhng lại xẩy ra ở những ngời có suy giảm miễn dịch một mức độ nào đó. Ngày nay đa số các chuyên gia đều cho rằng có đến 20-25% số ung th của ngời là do virut. Virut bằng con đờng nào đó đã đợc xem xét đến tác dụng gây ung th: EBV trong bệnh BL, NPC, một số u limphoma Hodgkin, u limphoma do ức chế miễn dịch và có thể cả carcinoma dạ dày; HBV, HCV trong ung th tế bào gan, nhiều kiểu gen của HPV trong ung th đờng sinh dục và các ung th liên bào khác, HTLV trong một thể đặc biệt của leukemia và mới đây KSHV trong sarcoma Kaposi, u limphoma nguyên phát và có thể bệnh Castleman (angioimmunoblastic lymphoproliferative disease). Ngoài ra, hiện tại ở Đài Loan chúng ta vừa có các kết quả đầu tiên về việc kiểm soát một ung th khu trú quan trọng ở ngời, bệnh ung th tế bào gan bằng chơng trình tiêm chủng cho cộng đồng để ngăn ngừa nhiễm HBV. Và hiện nay đang khích lệ các thử nghiệm ở ngời để tiêm chủng văcxin chống HPV để ngăn ngừa nhiễm trùng và về lâu dài giảm ung th cổ tử cung. Các nghiên cứ phân tử và dịch tễ nhanh chóng chứng tỏ rằng KSHV là một -herpes giống với HVS về di truyền và về nguyên nhân liên quan với KS và u limphoma liên quan, đó là virut gây bệnh ung th ở ngời mới đợc phát hiện cuối cùng. Đối với EBV của chúng ta nói đến ở đây và tin rằng chúng có vai trò là các virut gây ung th và khả năng có thể kiểm soát chúng bằng văcxin, thì các sự thay đổi về nhận thức và dấu hiệu thực hành là cần phải đợc hoan nghênh. 106 . Virut gamma -herpes gây ung th (Gamma Herpes is the cause of cancer) M. A. Epstein (Biên dịch theo bài giảng mở đầu hội thảo quốc tế về bệnh ung. (co- evolution) của một vài virut -herpes gây ung th ở túc chủ. Sự xem xét các virut herpes gây ung th ở Hội nghị quốc tế mà dành hết cho ung th vòm mũi họng