TCNCYH 38 (5) - 2005 TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA BẠCH TRUẬT, CÂU KỶ TỬ VÀ CAM THẢO NAM TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Đào Văn Phan 1 , Nguyễn Khánh Hoà 1 Phạm Hữu Điển 2 1 Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội r 2 Bộ môn Hóa Hữu cơ - T ường Đại học Sư Phạm I Hà Nội Đái tháo đường là một bệnh rối loạn chuyển hoá đang gia tăng theo sự nâng cao mức sống. Mục tiêu: Thăm dò tác dụng gây hạ đường huyết của Bạch Truật, Câu kỳ tử và Cam thảo nam trên chuột nhắt. Phương pháp: Thuốc được sản xuất dưới dạng dịch chiết toàn phần bằng ethanol, cô thành cao mềm. Tiêm màng b ụng chuột với liều 500 mg/ kg. Đường huyết của chuột được xác định vào trước lúc tiêm và 1h, 2h, 3h, 4h sau khi tiêm thuốc, bằng one Touch glucose meter. Kết quả và kết luận: Chỉ có Câu kỳ tử gây được hạ đường huyết trên 30% so với trước khi dùng thuốc. Cam thảo nam lại gây tăng đường huyết mạnh (+62%) ở giờ đầu, sau đó ở gờ thứ 3, thứ 4 đường huyết mới hạ trên 30%. Bạch truật gây hạ đường huyết không có ý nghĩa. Từ khóa: Đái tháo đường thực nghiệm, Cam thảo nam, Câu kỷ tử, bạch truật. I. ĐẶT VẤN ĐỀ Đái tháo đường là một bệnh rối loạn chuyển hóa đang gia tăng theo sự nâng cao mức sống. Vì vậy WHO rất khuyến khích nghiên cứu các thuốc hạ đường huyết có nguồn gốc thực vật. Theo hướng đó, kể từ năm 2000 chúng tôi đã và đang tiến hành thí nghiệm sàng lọc tất cả các cây thuốc được dùng chữa tiểu đường trong dân gian và trong các sách y học cổ truyền để tìm ra một số cây thu ốc thực sự có tác dụng điều trị, sau đó xác định hoạt chất, cơ chế tác dụng nhằm tìm ra vài thuốc có giá trị đóng góp vào danh mục thuốc chống tiểu đường của thế giới. Trong những nghiên cứu trước [1], [6] chúng tôi đã tiến hành sàng lọc tác dụng hạ đường huyết của 8 cây thuốc trên chuột nhắt trắng. Nghiên cứu này tiếp tục với mục tiêu: Đánh giá tác dụng hạ đường huyết của 3 cây thuốc Bạch truật, Câu kỷ tử và Cam thảo nam trên chuột nhắt trắng. II. CHẤT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1. Chất liệu nghiên cứu Bạch truật (Atractylodes Macrocephala Koidz - Compositae), Câu kỷ tử (Lycium Sinense Mill - Solanaceae), Cam thảo nam (Seoparia Dulcis L. - Scrophulariaceae) sau khi thu hái được phơi khô, thái nhỏ rồi chiết bằng ethanol trong soxhlet. Dịch chiết được cô cạn, cho bay hơi hết dung môi thành cao mềm để sử dụng cho nghiên cứu. 2. Đối tượng nghiên cứu Chuột nhắt trắng (Mus musculus chủng Swiss) trọng lượng 18 - 20g do Viện vệ sinh dịch tễ cung cấp được đưa về Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội nuôi trong điều kiện ổn định về nhiệt độ, ánh sáng, thức ăn và nước uống. Sau 5 ngày khi trọng lượng đạt 22 - 24g sẽ được sử dụng cho nghiên cứu. 3. Phương pháp nghiên cứu Đường huyết của chuột được định lượng bằng cách cắt bỏ 2mm đuôi, để máu chảy tự do, thấm bỏ giọt đầu tiên rồi nhỏ 1 giọt vào vị trí trên que thử dùng cho máy ONE - TOUCH (hãng Jonhson & Johnson - Mỹ). Đợi 45 giây sau, kết quả nồng độ đường huyết (mg/dl) sẽ hiện trên màn hình của máy. Đánh giá tác dụng hạ đường huyết theo đường tiêm màng bụng. Chuột được chia làm 4 lô, mỗi lô 5 con. Lô 1: Tiêm màng bụng NaCl 0,9% liều 0,2ml/kg. Lô 2: Tiêm màng bụng Câu kỷ tử với liều 500mg/kg cao mềm . Lô 3: Tiêm màng bụng Bạch truật với liều 500mg/kg cao mềm. Lô 4: Tiêm màng bụng Cam thảo nam với liều 500mg/kg cao mềm. 1 TCNCYH 38 (5) - 2005 Đường huyết được định lượng ở các thời điểm: ngay trước lúc tiêm thuốc (0h) và 1h, 2h, 3h, 4h sau khi tiêm thuốc [1], [6], [8]. Vì là thí nghiệm sàng lọc nên mỗi lô chỉ là 5 chuột. Nếu thuốc nào gây hạ đường huyết ≥ 20% so với nhóm chứng hay với trước khi dùng thuốc sẽ được giữ lại cho những nghiên cứu tiếp theo. Thuốc nào không đạt được mức này, coi như không có tác dụng và kinh nghiệm dân gian là không đúng. 4. Xử lý kết quả nghiên cứu Nồng độ đường huyết trong máu của chuột được so sánh giữa các lô dùng thuốc nghiên cứu và các lô chứng ở cùng thời điểm. Mức độ hạ đường huyết được đánh giá bắng cách lấy kết quả đường huyết trong máu ở thời điểm cần đánh giá trừ đi nồng độ đường huyết của cùng chuột đó ở thời đi ểm 0h rồi tính ra tỷ lệ % hạ đường huyết theo công thức dưới đây. Tỷ lệ % hạ đường huyết 100 x A A B X% − = Trong đó: X: tỷ lệ hạ đường huyết (%). B: Nồng độ đường huyết tại thời điểm cần đánh giá. A: Nồng độ đường huyết tại thời điểm ban đầu (0h). Sự khác biệt được kiểm định bằng thuật toán 2t - test student. II. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 1. Tác dụng hạ đường huyết của Câu kỷ tử theo đường tiêm màng bụng Bảng 1. Mức hạ đường huyết của Câu kỷ tử dùng theo đường tiêm màng bụng so với trước khi dùng thuốc (0h) Stt Nhóm dùng 1h 2h 3h 4h 1 NaCl 0,9% 14% ± 3% -2% ± 2% -18% ± 3% -28% ± 3% 2 Câu kỷ tử 500mg/kg 4% ± 6% -11% ± 6% -35% ± 6%* -53% ± 9%*** *p < 0,05 so với nhóm chứng ở cùng điều kiện. ***p < 0,001 so với chính nhóm đó ở thời điểm chưa dùng thuốc. Nhận xét: Với liều 500 mg/kg dùng theo đường tiêm màng bụng, Câu kỷ tử gây hạ đường huyết khá mạnh trên chuột nhắt trắng. Tác dụng bắt đầu từ giờ thứ 2 sau khi tiêm thuốc kéo dài tới trên 4h sau tiêm. Tác dụng mạnh nhất là hạ tới 53% so với đường huyết lúc ban đầu (bảng 1). 2. Tác dụng hạ đường huyết của Bạch truật và Cam thảo nam Bảng 2. Mức hạ đường huyết của Bạch truật và Cam thảo nam dùng theo đường tiêm màng bụng so với trước khi dùng thuốc (0h) Stt Nhóm dùng 1h 2h 3h 4h 1 NaCl 0.9% 14% - 3% -2% - 2% -19% - 7% - 21% - 6% 2 Cam thảo nam 500mg/kg 62% - 12% 34% -13% - 46% - 19%** - 52% - 9%*** 3 Bạch truật 500mg/kg 2% - 4% -5% -13% - 9% - 6% -12% - 7% **p< 0,01 so với nhóm chứng ở cùng điều kiện. , ***p< 0,001 so với chính nhóm đó ở thời điểm chưa dùng thuốc Nhận xét: Cam thảo nam 500 mg/kg dùng theo đường tiêm màng bụng gây tăng đường huyết mạnh ở giờ thứ nhất. Sau đó đường huyết đột ngột giảm mạnh ở giờ thứ 2, 3 và 4 sau tiêm. Đi kèm với tăng đường huyết là các cơn đau phúc mạc biểu hiện bằng việc chuột thót bụng và duỗi dài người ra từng cơn. Sau 2h chuột bắt đầu ít hoạt động, lông xù lên, đuôi lạnh hơn. Bạch tru ật 500mg/kg không gây hạ cũng như không gây tăng đường huyết sau tiêm màng bụng. 2 TCNCYH 38 (5) - 2005 IV. BÀN LUẬN Câu kỷ tử là một vị thuốc từ lâu đã được dùng trong y học cổ truyền để trị các chứng bệnh như ho lao, viêm phổi, mệt nhọc, bổ tinh khí [4]… Tác dụng hạ đường huyết cũng đã được chứng minh và nhắc đến [4]. Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy với liều 500mg/kg dùng theo đường tiêm màng bụng, tác dụng gây hạ đường huyết của câu kỷ tử là rõ rệt, mức hạ đường huyết là tới 53% so với ban đầu và 25% so với đường huyết của nhóm chứng ở cùng thời điểm. Như vậy tác dụng hạ đường huyết của Câu kỷ tử cần được tiếp tục nghiên cứu. Cam thảo nam gây tăng đường huyết sau tiêm màng bụng có thể do 2 nguyên nhân. Thứ nhất có thể trong cao chiết của Cam thảo nam có chứa một lượng lớn glucose, nên khi tiêm vào màng bụng sẽ gây ra hi ện tượng tăng đường huyết ngoại lai. Sau đó chính cam thảo nam có chứa hoạt chất có tác dụng hạ đường huyết, đường huyết của chuột nhanh chóng hạ xuống bình thường rồi trở về dưới mức bình thường. Tuy nhiên không có chuột nào chết sau nghiên cứu. Trong y văn có một số tác giả phát hiện tác dụng hạ đường huyết của Cam thảo nam nhưng một số tác giả còn chưa công nhận kết quả này [3]. Bạch truật cũng là một vị thuốc thường được sử dụng trong các bài thuốc y học cổ truyền để điều trị bệnh đái tháo đường [2], [7]. Tuy nhiên trong nghiên cứu này của chúng tôi, cao chiết ethanol toàn phần của Bạch truật 500mg.kg dùng đường tiêm màng bụng chưa thấy tác dụng hạ đường huyết. V. KẾT LUẬN Cao mềm Câu kỷ tử 500mg/kg tiêm màng bụng có tác dụng hạ đường huyết rõ rệt trên chuột nhắt trắng. Tác dụng hạ đường huyết của cao mềm Cam thảo nam 500mg/kg trên chuột nhắt trắng còn chưa rõ ràng. Cao mềm Bạch truật 500mg/kg tiêm màng bụng không có tác dụng gây hạ đường huyết trên chuột nhắt trắng. Cây Câu kỷ tử sẽ được đưa vào nhóm nghiên cứu tiếp theo. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Đỗ Tất Lợi (1999). Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam. Nhà xuất bản Y học, 391 – 392. 2. Đỗ Tất Lợi (1999). Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam. Nhà xuất bản Y học, 870 - 871. 3. Đỗ Tất Lợi (1999). Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam. Nhà xuất bản Y học, 850 - 851. 4. Đoàn Thị Nhu, Lê Minh Phương và cộng sự (1993). Một số kết quả nghiên cứu tác dụng c ủa mướp đắng và bạch truật trên đái tháo đường thực nghiệm: Tạp chí Dược học - Bộ Y tế, 217, 12 - 14. 5. Đào Văn Phan, Nguyễn Khánh Hòa, Nguyễn Duy Thuần (2003). Nghiên cứu sàng lọc tác dụng hạ đường huyết của Sinh địa, Móng trâu, thất diệp đởm và Tri mẫu. Tạp chí Nghiên cứu y học - Bộ Y tế, trường Đại học Y Hà Nội. 21, 1 – 6. 6. Nguyễn Khánh Hòa, Đào Văn Phan, Nguyễn Duy Thuần (2002). Nghiên cứu sàng lọc tác dụng hạ đường huyết của Chè Nhật Bản, Đỗ trọng, Huyền sâm và Nhàu. Tạp chí Nghiên cứu y học – Bộ Y tế, Trường Đại học Y Hà Nội. 20, 33 - 37. 7. Nguyễn Ngọc Xuân, Đào Văn Phan, Nguyễn Duy Thuần(2000). Bước đầu nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết của thổ phục linh (Smilax glabra Roxb) trên chuột nhát. Tạp chí Dược học - Bộ Y tế, 288, 12 - 13. 8. Trần Thúy và cộng s ự (1996). Chuyên đề nội khoa y học cổ truyền. Nhà xuất bản Y học, 342 - 343. Summary THE HYPOGLYCEMIC EFFECT OF ATRACTYLODES MACROCEPHALA, LYCIUM SINENSE AND SEOPARIA DULCIS ON MICE Objectives: To evaluate the hypoglycemic effect of these herbal medicines on normal mice. Methods: the ethanol extracts of these plants have been introduced intraperitoneally to mice with the dose of 500 mg/ kg of body weight. The blood glucose levels were determined by one - touch glucose meter at just (0h) before and at 1h, 2h, 3h, 4h and conclusion after drug administration. Results: Lycium sinense Mill lowered the glycemia with > 30% in comparison to that of initial level. Separia dulcis however caused hyperglycemia (+ 62%) at the first hour then at the 3rd and 4th hour the blood glucose was diminished with > 30%. Atractylodes macrocephala did not lower the glycemia. Keywords: Anti diabetic drug. Atractylodes macrocephala. Lycium sinense. Seoparia dulcis. 3 . (5) - 2005 TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA BẠCH TRUẬT, CÂU KỶ TỬ VÀ CAM THẢO NAM TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Đào Văn Phan 1 , Nguyễn Khánh Hoà 1 Phạm Hữu Điển. bụng có tác dụng hạ đường huyết rõ rệt trên chuột nhắt trắng. Tác dụng hạ đường huyết của cao mềm Cam thảo nam 500mg/kg trên chuột nhắt trắng còn chưa