TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUN THIÊN NHIÊN NHĨM SEMINAR ỨNG DỤNG CƠNG NGHỆ VI SINH TRONG SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC An Giang, tháng 09 2012 TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NƠNG NGHIỆP & TÀI NGUN THIÊN NHIÊN NHĨM SEMINAR ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ VI SINH TRONG SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Bằng Hồng Lam Danh sách nhóm Nguyễn Hồng Nhựt Lynh Bung San Ny Thanh Hồng Anh Hoàng Nguyễn Trung Nghĩa Nguyễn Hoàng An Trương Thị Ngọc Hân Lê Thị Đẹp Nguyễn Ngọc Hồ An Giang, tháng 09 2012 Mục lục Nội dung Trang Mục lục i Danh sách hình ii Danh sách bảng ii Chương 1: Mở đầu Chương 2: Tổng quan thuốc trừ sâu sinh học 2.1 Thuốc trừ sâu sinh học gì? 2.2 Ưu điểm 2.3 Nhược điểm Chương 3: Một số chế phẩm sinh học trừ sâu hại nông nghiệp 3.1 Thuốc trừ sâu vi khuẩn Bacillus thuringensis (Bt) 3.1.1 Giới thiệu chung Bt 3.1.2 Quy trình sản xuất Bt 3.1.2.1 Phương pháp lên men bề mặt 3.1.2.2 Phương pháp lên men chìm 3.1.2.3 Quy trình sản xuất Bt Việt Nam 3.2 Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu virus 3.2.1 Giới thiệu chung 3.2.2 Công nghệ sản xuất 3.3 Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm côn trùng 10 3.3.1 Giới thiệu chung 10 3.3.1.1 Một số đặc tính nấm Beauveria bassiana 10 3.3.1.2 Một số đặc tính chi nấm Metarhizium (nấm lục cương) 11 3.3.2 Quy trình sản xuất 12 3.3.2.1 Phương pháp nuôi cấy chìm 12 3.3.2.2 Phương pháp nuôi cấy môi trường lỏng không khử trùng, không khuấy trộn thổi khí 12 i 3.3.2.3 Phương pháp có khử trùng 12 3.3.2.4 Phương pháp lên men kết hợp 13 Chương 4: Kết luận kiến nghị 14 4.1 Kết luận 14 4.2 Kiến nghị 14 Tài liệu tham khảo 15 Danh sách hình Nội dung Trang Hình 1: Một số chế phẩm thuốc trừ sâu sinh học Hình 2: Khuẩn lạc Bacillus thuringiensis Hình 3: Quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm Bt Hình 4: Sơ đồ nuôi cấy VSV theo phương pháp bề mặt khay Hình 5: Sơ đồ ni cấy VSV theo phương pháp chìm Hình 6: Quy trình sản xuất Bt việt Nam Hình 7: Nấm Beauveria bassiana 10 Hình 8: Sợi nấm mọc thể trùng 11 Hình 9: Nấm Metarhizium anisopliae 11 Hình 10: Côn trùng nhiễm Metarhizium anisopliae 12 Hình 11: Quy trình sản xuất nấm phương pháp lên men chìmError! Bookmark not defined Hình 12: Quy trình sản xuất nấm M anisopliae theo phương pháp lên men bề mặt (xốp) Error! Bookmark not defined Danh sách bảng Nội dung Trang Bảng 1: Thành phần môi trường nuôi sâu keo da láng agar 10 ii iii Chương 1: Mở đầu Từ năm 50 kỷ trước, loại thuốc hóa học trừ sâu bệnh cho trồng dùng phổ biến rộng rãi Các loại thuốc hợp chất clo phospho hữu có tác dụng tiêu diệt sâu bệnh, tiêu diệt muỗi hữu hiệu Ban đầu người ta đặt niềm tin vào chúng nhiều hy vọng chúng cứu cánh cho ngành Trồng trọt Trồng rừng khắp Trái Đất Song, với thời gian, thuốc trừ sâu hóa học lộ nhược điểm khắc phục được, làm cho sâu hại quen dần “nhờn thuốc”, sâu bị giảm lại có chiều hướng gia tăng, thuốc tồn dư ngấm vào đất gây ô nhiễm mội trường đất nước (đặc biệt nước ngầm), tồn dư sản phẩm lương thực – thực phẩm làm ảnh hưởng tới sức khỏe người vật ni Ngày nay, song song với biện pháp hóa học xuất biện pháp sinh học dựa sở đấu tranh sinh học với sâu hại, chuột vi sinh vật gây bệnh cho trồng Biện pháp sinh học đa dạng, gồm có chế phẩm vi sinh vật diệt sâu hại, chế phẩm từ tuyến trùng, loại thiên địch ăn thịt (ong mắt đỏ, mắt vàng,…) diệt lồi trùng phá hoại mùa màng Các chế phẩm vi sinh chế phẩm sinh học (với bao gồm ý nghĩa rộng hơn) có tác dụng diệt gây bệnh cho sâu hại trồng Bệnh trùng có tới 80 – 90% số bệnh vi sinh vật gây Những bệnh thường thể côn trùng chết hàng loạt, chấm dứt sinh sản, làm hạn chế lây lan lồi sâu hại Chính nguyên nhân trên, việc nghiên cứu phát triển chế phẩm vi sinh diệt trừ sâu hại trồng việc làm cần thiết mang lại hiệu cho nông nghiệp sống người Chương 2: Tổng quan thuốc trừ sâu sinh học 2.1 Thuốc trừ sâu sinh học gì? Thuốc trừ sâu sinh học bao gồm loại chế phẩm có nguồn gốc sinh học Chúng ni cấy môi trường dinh dưỡng khác theo phương pháp thủ công, bán thủ công phương pháp lên men công nghiệp để tạo chế phẩm có chất lượng cao, có khả phịng trừ loại sâu, bọ gây hại trồng nông, lâm nghiệp Thành phần giết sâu có thuốc sinh học vi sinh vật (nấm, vi khuẩn, virus) chất vi sinh vật tiết (thường chất kháng sinh), chất có cỏ (là chất độc dầu thực vật) Với thành phần trên, thuốc trừ sâu sinh học chia thành hai nhóm là:  Nhóm thuốc vi sinh: Thành phần giết sâu vi sinh vật nấm, vi khuẩn, virus  Nhóm thuốc thảo mộc: Thành phần giết sâu chất độc có dầu thực vật Hình 1: Một số chế phẩm thuốc trừ sâu sinh học 2.2 Ưu điểm Ưu điểm bật thuốc trừ sâu sinh học độc với người môi trường Các chế phẩm vi sinh vật dùng trừ sâu không độc với người sinh vật có ích Do độc với loài thiên địch nên thuốc sinh học bảo vệ cân sinh học tự nhiên (cân thiên địch sâu hại), gây tình trạng bùng phát sâu hại Do độc với người mau phân hủy tự nhiên, thuốc sinh học để lại dư lượng độc nơng sản có thời gian cách ly ngắn nên thích hợp sử dụng cho nơng sản u cầu có độ cao loại rau, chè… Muốn có nơng sản an tồn, biện pháp quan trọng sử dụng thuốc sinh học trừ sâu Ngoài ra, yếu tố sinh học trừ sâu vi sinh vật thực vật thường có sẵn phổ biến nơi, lúc, nguồn khai thác dễ dàng vô tận Đồng thời với chế phẩm sản xuất theo quy mô công nghiệp, người ta dùng phương pháp chế biến thơ sơ để sử dụng Có thể đồng thu thập sâu bị chết nấm bệnh, nghiền nát nước phun lên để trừ sâu Các thuốc lá, thuốc lào, hạt xoan, rễ dây thuốc cá… băm nhỏ đập nát ngâm lọc nước để phun có hiệu 2.3 Nhược điểm Tuy vậy, số thuốc sinh học, thuốc vi sinh thường thể hiệu diệt sâu tương đối chậm so với thuốc hóa học Sự bảo quản khả hỗn hợp thuốc sinh học thường yêu cầu điều kiện chặt chẽ Bên cạnh đó, so với loại thuốc trừ sâu hóa học, chế phẩm sinh học cịn có số yếu điểm như: giá thành cao, thời gian tác dụng lâu hơn, hiệu lực không nhanh thuốc hóa học nên người dân khơng nhìn thấy chậm đưa vào sản xuất diện rộng Nhưng so với ưu điểm to lớn nhược điểm thuốc sinh học nhỏ hồn tồn khắc phục Vì vậy, thuốc trừ sâu sinh học ngày khai thác sử dụng nhiều Ở nước ta, chế phẩm Bt biết đến tương đối lâu, có nhiều chế phẩm đăng ký sử dụng u cầu ngày có nhiều nơng sản thực phẩm an toàn phục vụ đời sống điều kiện quan trọng thúc đẩy phát triển thuốc sinh học Chương 3: Một số chế phẩm sinh học trừ sâu hại nông nghiệp 3.1 Thuốc trừ sâu vi khuẩn Bacillus thuringensis (Bt) 3.1.1 Giới thiệu chung Bt Bt trực khuẩn sinh bào tử, hiếu khí hiếu khí khơng bắt buộc, nhuộm Gram dương Tế bào đứng riêng rẽ xếp thành chuỗi, chứa tinh thể độc có chất protein hình trám, kích thước khoảng 0,6 m Bào tử hình trứng dài 1,6 – m, nảy mầm thành tế bào sinh dưỡng Mỗi tế bào có kích thước dài từ – m, có phủ tiêm mao khơng dày, chuyển động Hình 2: Khuẩn lạc Bacillus thuringiensis Bt có chứa loại độc tố:  Ngoại độc tố α exotoxin (phospholibara C)  Ngoại độc tố β exotoxin (ngoại độc tố bền nhiệt)  Nội độc tố γ exotoxin (độc tố tan nước)  Ngoại độc tố δ exotoxin (tinh thể độc) Vai trò tinh thể: Là loại tiền độc tố gây phản ứng với protein gây chết côn trùng Cơ chế tác động tinh thể độc: Côn trùng ăn phải tinh thể độc vòng từ – 7h, pH máu – bạch huyết tăng lên làm tê liệt đường ruột, khoang miệng có tồn thân, làm thay đổi tính thấm thành ruột, gây tổn thương hệ thống điều hòa trao đổi chất cuối dẫn đến chết Có yếu tố thúc đẩy tinh thể độc gây độc:  pH: Tinh thể độc bị phân giải đường ruột côn trùng pH tăng lên 8,9 bị phân giải thể tính độc  Khả sản sinh enzym phân giải protein: Bt có khả sản sinh enzym proteaza đường ruột trùng, chuyển hóa tiền độc tố thành dạng độc tố thể côn trùng Triệu chứng côn trùng nhiễm độc: Sâu bị nhiễm Bt lúc đầu tê liệt toàn thân, sau sâu ngừng ăn biến đổi màu sắc từ màu xanh đến màu vàng Khi chuyển sang màu nâu, nghĩa sâu chết, cuối sâu có màu đen, tồn thân sâu cứng khơ 3.1.2 Quy trình sản xuất Bt Các chất dinh dưỡng Nguyên liệu Xử lý nguyên liệu Chuẩn bị môi trường Giống VK chủng Nuôi mở rộng Nhân giống B thuringiensis Thanh trùng (lên men) Phụ gia Thành phẩm Tách lọc, cô, sấy Bán thành phẩm Hình 3: Quy trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm Bt 3.1.2.1 Phương pháp lên men bề mặt Dùng hạt chất rắn, hạt có khơng có khả hấp thụ chất dinh dưỡng Các hạt chất đóng vai trị làm nguồn chất dinh dưỡng, ví dụ cám lúa mì, bột ngơ, bánh hạt bơng loại dầu… đơn giản đóng vai trị chất mang vô Ở phương pháp này, vi khuẩn mọc bề mặt chất tiếp nhận oxy khơng khí để sinh trưởng Để chuẩn bị mơi trường ni cấy vi khuẩn có độ thơng thống tốt, loại nguyên liệu không nên xay nghiền nhỏ mà nên xay vỡ thành mảnh – mm, trộn thêm cám trấu hay mùn cưa, bả mía… trãi mỏng khay Nước làm ẩm môi trường có pH 6.5 – 7.5 , hấp vơ khuẩn 1210C khoảng 1h Khay phun dịch nhân giống vào mơi trường đặt phịng ni có quạt hút, điều chỉnh nhiệt độ ban đầu 28 – 350C Nên lật khối môi trường để vi khuẩn phát triển khắp Sau kết thúc nuôi cấy, thu gom môi trường khay sấy khơng khí nóng 40 – 450C độ ẩm 10% tạo thành phẩm Hình 4: Sơ đồ ni cấy VSV theo phương pháp bề mặt khay 3.1.2.2 Phương pháp lên men chìm Vi khuẩn ni cấy nồi lên men tích đến vài chục mét khối Được thổi khí qua máy nén điều kiện vô trùng Thiết bị trang bị hệ điều khiển tự động hóa việc cung cấp khí, nhiệt độ, điều chỉnh pH Thời gian nuôi cấy khoảng – ngày mật độ tế bào lên đến hàng tỷ ml dịch nuôi cấy Dịch ni cấy đóng chai dùng trực tiếp dạng lỏng hay qua ly tâm để sinh khối thêm phụ gia, sấy… hoàn thành dạng bột Hình 5: Sơ đồ ni cấy VSV theo phương pháp chìm 3.1.2.3 Quy trình sản xuất Bt Việt Nam Chủng Bt chuẩn Nhân giống cấp nồi men nhỏ 10 – 50 lít 3% giống Nhân giống cấp nồi men lớn 500 – 5000 lít T = 300C, 48h Kích thích len men Lọc ly tâm Thu sinh khối Chất phụ gia Sấy phun + chất phụ gia Đóng chai bảo quản Đóng gói bảo quản Hình 6: Quy trình sản xuất Bt việt Nam Những năm 1989 – 1996, Viện Công nghiệp thực phẩm phối hợp với Viện Bảo vệ thực vật sản xuất thuốc trừ sâu Bt từ chủng Kurstaki 3a3b Úc ứng dụng số xã thuộc huyện Hoài Đức (Hà Tây cũ), xã Mai Dịch, Tây Tựu, huyện Từ Liêm (Hà Nội) đạt hiệu cao Sau việc sản xuất bị chững lại từ cuối 1996 – 2000 Vài năm gần đây, thuốc trừ sâu vi sinh Bt sản xuất trở lại quy mô nhỏ lẻ Viện Công nghiệp thực phẩm, Viện Công nghệ sinh học,… Tuy nhiên, thuốc Bt sản xuất chất lượng chưa ổn định số lượng chưa đủ để đáp ứng yêu cầu riêng rau vùng chuyên canh số thành phố lớn 3.2 Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu virus 3.2.1 Giới thiệu chung Một số nhóm virus có khả gây bệnh cho trùng:  Nhóm Baculovirus, họ Baculoviridae  Nhóm Cytoplasmis Polyhedrosis virus (CPV), họ rioviridae  Nhóm entomopox virus (EV), họ Poxviridae  Nhóm Irido virus (IV), họ Iridoviridae  Nhóm Denso virus (DV), họ Parvoviridae  Nhóm Virus ARN, họ Picornaviridae  Nhóm Sigma virus, họ Rhabdoviridae Mỗi nhóm virus có hình dạng, kích thước đặc tính khác nhau, đặc điểm quan trọng virus tác nhân gây bệnh mang tính chuyên tính, loại virus có phổ kí chủ riêng Độc tố virus côn trùng thể vùi tuỳ loại sâu mà thể vùi có khác nhau, cụ thể với sâu có virus đa diện nhân (NPV- Nuclear Polyhedrosis Virus) thể vùi PIB Cơ chế gây bệnh: Virus lẫn thức ăn, đường tiêu hố virus xâm nhiễm vào thể trùng thực q trình phá huỷ tồn chức dịch ruột sâu với chế sau: Virus  Đi vào ruột  Thể vùi giải phóng virion  Xâm nhập vào huyết tương  Tiếp xúc với tế bào máu  Xâm nhập vào thể  Gây bệnh côn trùng 3.2.2 Công nghệ sản xuất Việc sản xuất chế phẩm thuốc trừ sâu có liên quan mật thiết đến việc ni sâu làm vật chủ nhân virus Đây nguyên tắc cho việc sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh  Nuôi sâu thức ăn tự nhiên: Sử dụng dụng cụ xô, chậu, vải màn… để đựng loại thức ăn tự nhiên Sau thu thập sâu hại mang thả vào dung cụ ni để nhà thống mát, kê cáo tránh kiến, gián, chuột… Hằng ngày thay thức ăn tươi Khi sâu đạt tuổi – sử dụng nguồn virus tinh để nhiễm Sau – ngày thu lại nguồn sâu bị chết virus cho vào lọ thủy tinh, đem ủ – ngày Sau nghiền, lọc phun đồng ruộng  Nuôi sâu thức ăn nhân tạo: Trên sở nghiên cứu mơi trường thức ăn nhân tạo có thành phần giống thức ăn tự nhiên, đảm bảo cho sâu khỏe, phát triển tốt, trình sản xuất cho tỷ suất nhân cao, tỷ lệ còi cọc thấp, trứng nở cao, lượng trứng nở lớn,… Mục đích thu lượng sâu lớn làm nguồn sản xuất virus Bảng 1: Thành phần môi trường nuôi sâu keo da láng khơng có agar TT Thành phần Khối lượng (g) TT Thành phần Khối lượng (g) Bột ngô 100 Axit accorbic 10 Bột đậu xanh 150 Axit benzoic Bột đậu tương 30 Formalin ml Bã đậu 30 Nước 1000 ml Men bia 30 Phương pháp: Đun sôi nước cho nguyên liệu theo thứ tự từ đến khuấy đều, để nguội cho sâu keo da láng ăn 3.3 Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm côn trùng 3.3.1 Giới thiệu chung Có nhiều lồi nấm có khả gây bệnh cho côn trùng giới nước ta, nhà khoa học tập trung nghiên cứu chi Beauveria Metarhizium 3.3.1.1 Một số đặc tính nấm Beauveria bassiana Chi Beauverra có loại có khả diệt trùng là: Beauveria bassiana (Bb), Beauveria tenella, Beauveria brongniartii Trong tỉ lệ kí sinh trùng nhiều lồi Beauveria bassiana (80% - 90%) Đặc điểm hình thái nấm Beauveria bassiana: Sinh bào tử trần đơn bào có đường kính từ – m , khơng màu, hình trứng, sợi nấm dài từ – m, bào tử trần phân nhánh, bào tử có hình hẹp zích zắc khơng Hình 7: Nấm Beauveria bassiana 10 Độc tố nấm Beauveria: Boverixin, vịng Depxipeptit có điểm sơi 93 – 940C Cơ chế gây bệnh: Sau 12 – 24 bào tử nảy mầm đâm xuyên qua lớp kitin thể phát triển bên Tiết độc tố Boverixin phá huỷ tế bào bạch huyết làm sâu chết sau tạo lớp bào tử phủ thể sâu Hình 8: Sợi nấm mọc thể trùng 3.3.1.2 Một số đặc tính chi nấm Metarhizium (nấm lục cương) Có lồi gây bệnh là: Metarhizium anisopliae Metarhizium flavoviride Đặc điểm, hình thái: bào tử trần màu trắng dần chuyển sang xanh, hình oval hay hình trứng (Metarhizium flavoviride), hình cổ chai hay hình trụ (Metarhizium anisopliae) Kích thước 3,5 – 6,4 m, bào tử đứng riêng rẽ xếp thành chuỗi Hình 9: Nấm Metarhizium anisopliae Độc tố nấm Metarhizium: ngoại độc tố sản phẩm thứ cấp, vòng peptit: Destruxin A, B, C hay D Cơ chế gây bệnh: Sau bám côn trùng 24 bào tử nảy mầm xuyên qua vỏ côn trùng, tiếp tục phân nhánh bên thể tiết độc tố Destruxin A, B gây chết côn trùng 11 Hình 10: Cơn trùng nhiễm Metarhizium anisopliae 3.3.2 Quy trình sản xuất 3.3.2.1 Phương pháp ni cấy chìm Chuẩn bị giống: Giống vi nấm nuôi cấy môi trường thạch mạc nha – men bia Sau – ngày lấy ra, làm khô lạnh để sử dụng dần Nhân giống: Ta cấy giống chuẩn bị vào bình nón, ni lắc 25 – 28h 25 – 280C Lên men: Thành phần môi trường lên men: 2% nấm men chăn nuôi, 1% tinh bột, 0.2 % NaCl, 0.01% MnCl2, 0.05% KCl Cấy – 10% giống vào nồi men, pH khoảng – 5.6, nuôi 25 – 280C – ngày, lượng khí thổi – 2.5 lít khơng khí/ lít môi trường/ phút Tách, ly tâm, thu sinh khối: Cho dịch nuối qua máy ly tâm để tách nước, thu bào tử dạng sệt có độ ẩm 70 – 80% lượng bào tử –  109/g, sau đưa phun sấy để làm dạng khơ 3.3.2.2 Phương pháp nuôi cấy môi trường lỏng không khử trùng, khơng khuấy trộn thổi khí Đun sơi môi trường tự chế từ nguyên liệu tự nhiên cháo hạt ngũ cốc, nước chiết khoai tây, cà rốt, giá đỗ, bí đỏ… Để nguội xuống 35 – 400C cấy bào tử nấm Đậy nilon để tránh bụi tránh nhiễm Nuôi nhiệt độ 25 – 280C Sau – 10 ngày, từ màng nấm xuất bào tử Đến ngày 18 – 25 vớt nấm đặt lên miếng kính, dựng nghiêng cho róc nước Làm khô bào tử nhiệt độ thấp (30 – 320C), nghiền, rây, trộn với bột than bùn 3.3.2.3 Phương pháp có khử trùng Mơi trường đặc chế từ nguyên liệu tự nhiên khoai tây, cà rốt, vỏ dưa, ngô mảng, hạt ngũ cốc, đựng túi nilon khử trùng nồi hấp 1210C 40 phút 12 Đợi nguội cấy bào tử vào Ni nhiệt độ 25 – 280C Bào tử hình thành sau 12 – 15 ngày Lấy ra, hong khô, nghiền, rây trộn với bột than bùn 3.3.2.4 Phương pháp lên men kết hợp Nuôi nấm làm giống cấy hạt ngũ cốc bình nón Nhân giống vào bình nón đựng môi trường dịch thể, nuôi 12 – 17h Cấy – 4% giống vào nồi lên men đựng môi trường (gồm 6% rỉ đường, 1% cao ngô, 0.05% MgSO4, 0.2% KH2PO4 Nuôi 25 – 280C 1,5 ngày có thổi khí khuấy Dịch lên men đạt 50 – 100 triệu tế bào/ml Đổ dịch khay để nuôi tĩnh, đặt lên giá Sau ngày bắt đầu xuất màng nấm Sau – ngày thấy hình thành bào tử Bào tử hình thành ạt ngày thứ Vớt màng, đặt vào khay khô, đậy khay để tiếp – ngày cho bào tử chín Lấy làm khơ nhẹ (30 – 320C), giữ túi nilon Xay nhiệt độ thấp, rây qua rây Xác định số lượng bào tử Trộn với caolin đạt 109 bào tử/g chế phẩm 13 Chương 4: Kết luận kiến nghị 4.1 Kết luận Các sản phẩm trừ sâu từ công nghệ sinh học nói chung cơng nghệ sinh học vi sinh nói riêng mang lại nhiều kết khả quan Ngoài việc diệt trừ sâu hại gây bệnh cho trồng, phá hoại mùa màng, sản phẩm thuốc trừ sâu sinh học cịn an tồn thân thiện với môi trường Các sản phẩm thuốc trừ sâu sinh học nói riêng góp phần khơng nhỏ vào việc xây dựng nông nghiệp tiên tiến bền vững, phát triển với khoa học kĩ thuật an toàn với môi trường 4.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu thêm các giống vi sinh vật, giống nấm, virus… có khả tiêu diệt sâu hại trồng Nghiên cứu cải tiến công nghệ sản xuất chế phẩm thuốc trừ sâu vi sinh cho sản phẩm có chất lượng tốt, giá phải đáp ứng nhu cầu thị trường Đầu tư mở rộng quy mô sản xuất chế phẩm thuốc trừ sâu vi sinh Tuyên truyền nâng cao nhận thức nhà nơng hiệu lợi ích chế phẩm thuốc trừ sâu vi sinh 14 Tài liệu tham khảo Phạm Thị Thùy 2010 Giáo trình Cơng nghệ sinh học bảo vệ thực vật Thành phố Hà Nội: Nhà xuất Giáo dục Việt Nam Lương Đức Phẩm 2011 Sản xuất sử dụng chế phẩm sinh học nông nghiệp Thành phố Hà Nội: Nhà xuất Giáo dục Việt Nam Phạm Thành Hổ 2008 Nhập mơn Cơng nghệ sinh học Thành phố Hồ Chí Minh: Nhà xuất Giáo dục 15 ... sản xuất Bt Vi? ??t Nam 3.2 Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu virus 3.2.1 Giới thiệu chung 3.2.2 Công nghệ sản xuất 3.3 Công nghệ sản xuất thuốc trừ. .. quan thuốc trừ sâu sinh học 2.1 Thuốc trừ sâu sinh học gì? Thuốc trừ sâu sinh học bao gồm loại chế phẩm có nguồn gốc sinh học Chúng nuôi cấy môi trường dinh dưỡng khác theo phương pháp thủ công, ... đây, thuốc trừ sâu vi sinh Bt sản xuất trở lại quy mô nhỏ lẻ Vi? ??n Công nghiệp thực phẩm, Vi? ??n Công nghệ sinh học, … Tuy nhiên, thuốc Bt sản xuất chất lượng chưa ổn định số lượng chưa đủ để đáp ứng