... ĐƯợC4.1.Kế hoạch:01/2010,viết đề cương và bảo vệ đề cươngGieo mạ:06/01/2010Cấy: 10/02/2010 Từ 21/02/2010 khảo sát các đặc điểm nông sinh học,tiến hành phản ứng PCR và viết báo cáo tốt nghiệp. 4.2.Kết quả:Phát hiện được tổ hợp chứa gen tms2Tìm được markerPCR liên quan đến tính trạng nghiên cứu 3.2. Nội dung và phương pháp nghiên cứu * Nội dung nghiên cứu +) Theo dõi đặc điểm nông sinh học : Các chỉ tiêu nông sinh học :+ Thời gian từ cấy đến bắt đầu trổ(10% số bông thoát khỏi lá đòng).+ Thời gian trổ từ khi bắt đầu trỗ(10% số bông thoát khỏi lá đòng) đến khi kết thúc trổ (85% thoát khỏi lá đòng) .+ Thời gian tự cấy đến chín(85% số hạt chắc màu vàng)+ Tổng thời gian sinh trưởng từ gieo đến khi thu hoạch .+ Chiều cao cây (cm) cuối cùng : đo từ mặt đất đến mút đầu bông dài nhất không kể râu .+ Chiều dài lá đòng : đo từ gối lá đến đầu mút lá , đo vào giai đoạn chín sáp. + Chiều rộng lá đòng. + Góc độ lá đòng .+ Chiều dài bông : đo từ cổ bông đến hết bông vào thời kì chín chắc . Các giống lúa lai hiện nay cho có thể cho năng suất cao hơn 2030% so với các giống lúa thường.Hiện nay,chúng ta đang sử dụng hai hệ thống:hệ thống lúa lai hai dòng và hệ thống lúa lai ba dòng.Nhưng lúa lai hai dòng vượt trội hơn hẳn như:cơ hội chọn tạo các dòng bố lớn thuận lợi cho việc cải tạo chất lượng gạo,không có hiệu ứng đồng tế bào chất nên ít bị sâu hại hơn,năng suất cao hơn lúa lai ba dòng từ 510%,chỉ cần hai dòng khác nhau về bản chất di truyền(một là dòng TGMS hoặc PGMS,hai là dòng cho phấn) nên giá thành giảm,tính trạng bất dục đực mẫn cảm với điều kiện môi trường(EGMS) chủ yếu do một cặp gen lặn điều khiển thuận lợi cho việc tạo giống mới.Chỉ tiêu các yếu tổ cấu thành năng suất:+ Tổng số nhánh(số nhánh max)+ Số nhánh hữu hiệu /khóm : đến toàn bộ số nhánh trổ thành bông .+ Tổng số hạt/bông. + Số hạt chắc/bông+ Khối lượng 1000 hạt .+ Số bông hữu hiệu/khóm: đến toàn bộ số bông có từ 10 hạt chắc trở lên + Năng suất lý thuyết được tính theo công thức :NSLT = A x B x C x mật độ/đơn vị diện tích(g) Trong đó: A: số bông hữu hiệu/khóm B: số hạt chắc/bông C: khối lượng 1000 hạtPHầN ... ĐƯợC4.1.Kế hoạch:01/2010,viết đề cương và bảo vệ đề cươngGieo mạ:06/01/2010Cấy: 10/02/2010 Từ 21/02/2010 khảo sát các đặc điểm nông sinh học,tiến hành phản ứng PCR và viết báo cáo tốt nghiệp. 4.2.Kết quả:Phát hiện được tổ hợp chứa gen tms2Tìm được markerPCR liên quan đến tính trạng nghiên cứu 3.2. Nội dung và phương pháp nghiên cứu * Nội dung nghiên cứu +) Theo dõi đặc điểm nông sinh học : Các chỉ tiêu nông sinh học :+ Thời gian từ cấy đến bắt đầu trổ(10% số bông thoát khỏi lá đòng).+ Thời gian trổ từ khi bắt đầu trỗ(10% số bông thoát khỏi lá đòng) đến khi kết thúc trổ (85% thoát khỏi lá đòng) .+ Thời gian tự cấy đến chín(85% số hạt chắc màu vàng)+ Tổng thời gian sinh trưởng từ gieo đến khi thu hoạch .+ Chiều cao cây (cm) cuối cùng : đo từ mặt đất đến mút đầu bông dài nhất không kể râu .+ Chiều dài lá đòng : đo từ gối lá đến đầu mút lá , đo vào giai đoạn chín sáp. + Chiều rộng lá đòng. + Góc độ lá đòng .+ Chiều dài bông : đo từ cổ bông đến hết bông vào thời kì chín chắc . Các giống lúa lai hiện nay cho có thể cho năng suất cao hơn 2030% so với các giống lúa thường.Hiện nay,chúng ta đang sử dụng hai hệ thống:hệ thống lúa lai hai dòng và hệ thống lúa lai ba dòng.Nhưng lúa lai hai dòng vượt trội hơn hẳn như:cơ hội chọn tạo các dòng bố lớn thuận lợi cho việc cải tạo chất lượng gạo,không có hiệu ứng đồng tế bào chất nên ít bị sâu hại hơn,năng suất cao hơn lúa lai ba dòng từ 510%,chỉ cần hai dòng khác nhau về bản chất di truyền(một là dòng TGMS hoặc PGMS,hai là dòng cho phấn) nên giá thành giảm,tính trạng bất dục đực mẫn cảm với điều kiện môi trường(EGMS) chủ yếu do một cặp gen lặn điều khiển thuận lợi cho việc tạo giống mới.Chỉ tiêu các yếu tổ cấu thành năng suất:+ Tổng số nhánh(số nhánh max)+ Số nhánh hữu hiệu /khóm : đến toàn bộ số nhánh trổ thành bông .+ Tổng số hạt/bông. + Số hạt chắc/bông+ Khối lượng 1000 hạt .+ Số bông hữu hiệu/khóm: đến toàn bộ số bông có từ 10 hạt chắc trở lên + Năng suất lý thuyết được tính theo công thức :NSLT = A x B x C x mật độ/đơn vị diện tích(g) Trong đó: A: số bông hữu hiệu/khóm B: số hạt chắc/bông C: khối lượng 1000 hạtPHầN III : VậT LIệU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CứU 3.1. Đối tượng , vật liệu , địa điểm và thời gian nghiên cứu 3.1.1. Đối tượng nghiên cứu Gồm một số tổ hợp lai F1 , quần thể F2 3.1.2. Vật liệu nghiên cứu * Thí nghiệm trong phòng:Thiết bị :+ Máy PCR , máy chạy điện di , máy chụp ảnh điện di , máy li tâm , máy votex , tủ lạnh , lò vi sóng . + Các loại ống effendof , các loại pipet và đầu tiếp đi kèm . Thành phần cho phản ứng PCR + Cặp mồi phát hiện gen bất dục đực tms2 theo M.T.Lopez và cộng sự (2003)có trình tự là : RM11_F:5’TCTCCTCTTCCCCCGATC3’ RM11_R:5’ATAGCGGGCGAGCTTAG3’Hóa chất chạy PCR : dNTD , MgCl2 , Taq ADN polymerase , PCR mastermix , nước cất Hóa chất dùng để chiết tách ADN hệ gen :Ưu thế lai của các tổ hợp lai so với bố mẹ : Ưu thế lai trung bình H(MP%) = MP (mit parent) là giá trị trung bình của hai bố mẹ . ƯTL trung bình là sự biểu hiện hơn hẳn ở một tính trạng nào đó ở con lai F1 so với giá trị trung bình dó ở hai bố mẹ. Ưu thế lai thực H(BP%) = BP(best parent) là bố hoặc mẹ tốt nhất .Ưu thế lại thực là biểu hiện sự hơn hẳnn ở một tính trạng nào đó của con lai F1 so với giá trị đó của bố hoặc mẹ tốt nhất. Nghiên cứu chỉ thị phân tử nhằm xác định được gen tms2 có trong các dòng TGMS , các tổ hợp F2. %1001×−MPMPF%1001×−BPBPFThành phần ... PCR Để chọn tạo lúa lai hai dòng thành công thì dòng TGMS phải nhiều và phong phú ,từ đó mới tạo ra được tổ hợp cho ưu thế lai cao.Hiện nay các dòng TGMS đang được sử dụng như:103S,T1S96,64S,287S,36S2 ,Kim 76S,Pair 64S và 25S. Các nhà khoa học đã tìm được 6 gen TGMS(tms1, tms2, tms3, tms4, tms5, tms6).Mỗi gen này có ngưỡng chuyển hóa hữu dục và bất dục khác nhau ,trong đó,gen tms2 có ngưỡng chuyển hóa hữu dục ổn định.Nhà chọn tạo giống đã sử dụng các gen TGMS này lai chuyển vào các dòng,giống lúa triển vọng để tạo dòng TGMS tốt,có khả năng phối hợp cao,tạo ra nhiều tổ hợp lai mới cho ưu thế lai cao như TH33,Việt Lai 20,TH34,… Bằng việc sử dụng ADN marker(chỉ thị phân tử) thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút ngắn .Các chỉ thị liên kết chặt với các tính trạng kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn vật liệu nghiên cứu. Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi tiến hành đề tài: Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các dòng TGMS mới”.1.2.Mục đích và yêu cầu:1.2.1.Mục đích:Xác định gen tms2 trong tập đoàn các dòng TGMS bằng chỉ thị phân tử. Nghiên cứu di truyền gen tms2. 1.2.2 Yêu cầu : Khảo sát một số đặc điểm nông sinh học của các tổ hợp lai F1Chiết tách AND để tiến hành phản ứng PCRĐánh giá được khả năng hữu – bất dục bằng phương pháp truyền thống của các tổ hợp lai F2.Phát hiện gen tms2 ở các dòng TGMS và thế hệ F2 ....